柱前衍生化HPLC法测定肝脑清氨基酸注射液的含量

柱前衍生化ＨＰＬＣ法测定肝脑清氨基酸注射液的含量河南省药品检验所４５０００３仲平，修佳肝脑清氨基酸注射液属于氨基酸类药物［１］，处方中含有Ｌ－亮氨酸（Ｌｅｕ）、Ｌ－异亮氨酸（Ｉｌｅ）和Ｌ－缬氨酸（Ｖａｌ）３种支链氨基酸。目前常用氨基酸分析仪的方法测定...     

不同产地蒺藜黄酮成分比较

摘 要 目的： 采用HPLC法以芦丁、木樨草素、槲皮素、山柰酚、异鼠李素、白杨素为指标对蒺藜进行含量测定方法研究,并对比不同产地6种黄酮类成分的区别。方法: 采用HPLC法,色谱柱为Welch Ultimate LP-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为0.05%磷酸水-乙腈梯度洗脱,检测波长为360 nm,流速为1.0 ml·min^-1,对蒺藜6种黄酮成分进行含量测定。结果: 对照品芦丁、木樨草素、槲皮素、山柰酚、异鼠李素、白杨素的标准曲线呈良好的线性关系（r≥0.999 4）,平均回收率为97.5%～99.7%,RSD≤1.24%(n=6),符合方法学的相关要求。各产地6种成分的含量各有不同,但从总量上来看,以湖南产的黄酮总量最高为15.59 mg·g^-1,以贵州产的黄酮总量最低为7.89 mg·g^-1。结论:所建立的HLPC法,简便易行,精密度、回收率、重复性等均符合要求,可用于蒺藜的含量测定,6种蒺藜黄酮成分在不同产地蒺藜药材普遍存在,以此为目标进行相关研究具有意义。     

不同产地泽泻氨基酸成分测定与对比

目的 分析不同产地泽泻中氨基酸含量及其特征性。方法 采集5个不同产地的6种泽泻样品．采用日立835-50型高速氨基酸分析仪洲定。结果 泽泻含有17种以上的氨基酸,其中谷氨酸、天门冬氨酸、精氨酸等含量最高,且排列次序不随产地不同而变化,而游离氨基酸刖是精氨酸含量最高。结论 不同产地的泽泻氨基酸含量有一定的差异,但谷氨酸、天门冬氨酸、精氨酸的含量及排序在泽泻上具有其特征性,泽泻中的高含量精氨酸可能是发挥其药理效应的重要化学成分之一。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定复方氨基酸制剂的应用研究

研究了以２，４－二硝基氯茉（ＤＮＣＢ）作生化度剂在ＰＨ９．１的硼砂缓冲液中沸水浴加热１ｈ，制得１７种ＤＮＰ－氨基酸，用于反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定复方氨基酸的方法。采用Ｃ８柱，以腈－醋酸盐缓冲系统梯度洗脱，２２ｍｉｎ内１７种氨基酸的ＤＮＰ衍生物及衍生剂水解峰可较邹分离；衍生化产物稳定，３６０ｎｍ处紫外检测，最低检出限为０．１μｇ。本法简便，重现性好，结果较为满意。     

蒺藜药材HPLC指纹图谱研究

目的采用高效液相法建立蒺藜药材的指纹图谱,以控制其质量。方法用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-ELSD法测定蒺藜的指纹图谱,并根据向量夹角法计算相似度,进行比较分析。结果初步建立了蒺藜药材的指纹图谱。结论HPLC指纹图谱法重现性好,可作为控制蒺藜药材内在质量的标准。     

18个不同产地蒺藜药材中蒺藜皂苷元的HPLC含量测定

目的采用HPLC法测定蒺藜中蒺藜皂苷元(25R-Spirostan-4-ene-3,12-dione)的含量。方法采用色谱柱Welch Ultimate LP-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(80∶20);检测波长:203 nm;柱温:30℃;流速:1.0 m L/min;进样量:20μL。结果蒺藜皂苷元对照品在0.82~7.38μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均回收率为99.3%,RSD=1.67%(n=6)。结论所建立的方法灵敏、准确、重复性好,可用于蒺藜药材的含量测定。18个产地的蒺藜样品中以内蒙产的蒺藜皂苷元含量最高。     

15种氨基酸注射液HPLC DABS柱前衍生法测定

采用ＤＡＢＳ柱前衍生化，对１５种氨基酸进行ＨＰＬＣ含量测定，方法简便，衍生产物ＤＡＢＳ－氨基酸稳定，过量的ＤＡＢＳ水解产物对氨基酸定量测定无干扰，分析周期短，１５种氨基酸的回收率在９８．８７％～１００．７９％，ＲＳＤ为０．２９％～０．８３％。     

RP-HPLC法测定正常人血浆中14种氨基酸

用ＲＰ－ＨＰＬＣ测定了正常人血浆中１４种氨基酸,ＯＤＳ柱,梯度洗脱,柱前衍生化试剂为邻苯二甲醛和２－巯基乙醇,内标为４－氨基丁酸,使用荧光检测器（λｅｘ＝３３０ｎｍ,λｅｍ＝４５０ｎｍ）。线性范围为０．２５～２．０ｍｍｏｌ／Ｌ,平均回收率在（８８．８±６．６）％与（１１５．６±４．９）％之间,日间和日内变异系数在分别在９．１％和９．５％以下。该法简便、稳定,并且分离效果好,可用于人血浆中氨基酸浓度的检测。     

不同产地蒺藜核糖体DNA内转录间隔区序列分析

目的通过测定核糖体DNA内转录间隔区(Ribosomal DNA internal transcribed spacer,rDNA-ITS)基因序列,确定不同产地的蒺藜在种质遗传上是否存在差异。方法利用PCR产物直接测序,测定不同产地蒺藜的rDNA-ITS基因序列。结果测得ITS碱基序列742 bp,其中ITS1全部序列267 bp,5.8 S全部序列167bp,ITS2全部序列209 bp。6个产地的蒺藜样品的ITS的碱基序列完全相同。结论不同地区的蒺藜在种质上没有发生变异。     

不同产地北沙参药材的挥发油成分比较分析

目的:比较山东莱阳、河北安国、内蒙古赤峰3个产地北沙参挥发油成分的差异。方法:采用水蒸气蒸馏法提取不同产地北沙参挥发油并计算提取率。利用气质联用(GC-MS)技术分析挥发油成分,采用Xcalibur工作站对数据进行校正,采用NIST11.0质谱数据库进行化合物检索(匹配度>800),以峰面积归一化法求得各化学成分的相对质量分数。结果:莱阳北沙参的挥发油提取率为0.013%,远低于安国北沙参(0.099%)和赤峰北沙参(0.105%)。分别从3个产地北沙参挥发油中鉴定出了15、18、27个化合物,相对质量分数分别为89.29%、96.76%、94.53%;镰叶芹醇是不同产地北沙参挥发油中相对质量分数最高的共有化合物,相对质量分数分别为69.79%、90.89%、71.04%;莱阳产北沙参富含脂肪酸类成分,安国和赤峰产北沙参富含C15H24型倍半萜类成分。结论:不同产地北沙参的挥发油成分有较大差异,提示应将其作为区分不同产地北沙参的化学标志物。     

HPLC法测明目蒺藜丸中绿原酸和木犀草苷总含量

目的 建立测定明目蒺藜丸中绿原酸和木犀草苷总含量的高效液相色谱法。方法 采用SHISEIDO CAPCELL PAK C18 SIZE4.6mmI.D.×250mm色谱柱,流动相以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)进行梯度洗脱,流速：1.0ml.min_-1,柱温：25℃,检测器为二极管阵列检测器,检测波长为348nm,进样体积为10μl。结果 绿原酸和木犀草苷的线性范围分别为0.01143～0.03429mg.ml_-1(r=0.9997)、0.008716～0.02615mg.ml_-1(r=0.9995)。平均回收率分别为99.3%(RSD=1.1% n=9)、98.8%(RSD=1.0% n=9)结论 本方法简便,快速,准确,重现性好,适用于明目蒺藜丸的质量控制。建议对成分复杂的中成药建立目标成分总量分析的检验方法。     

蒺藜总皂苷含量测定方法研究

目的建立蒺藜总皂苷的含量测定方法。方法采用分光光度法,选用菝葜皂苷元(Sarsasa- pogenin)为对照品,通过高氯酸显色,计算蒺藜药材中总皂苷的含量。结果菝葜皂苷元在0．230 4-0．720 0 mg 范围内具有良好的线性关系(γ=0．999 3),平均回收率为98．54％,RSD为1．57％。结论该方法简便、准确、灵敏,重现性良好,适用于蒺藜总皂苷的含量测定。     

蒺藜果实化学成分研究

目的 对蒺藜果实化学成分进行研究。方法 聚酰胺柱及硅胶柱色谱分离，光谱分析鉴定结构。结果 分离得到了5个化合物，鉴定为支脱皂苷元（Ⅰ）、海柯皂苷元（Ⅱ）、25R-螺甾-4-烯-3，12-二酮（Ⅲ）、酵母甾醇（Ⅳ）、7α-羟基谷甾醇-3-O-β-D葡萄糖苷（Ⅴ）。结论 化合物Ⅳ、Ⅴ在本植物中首次分离获得。     

高效液相色谱法-蒸发光散射检测器测定蒺藜中蒺藜新苷的含量

目的:建立蒺藜中蒺藜新苷的含量测定方法。方法:应用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器,Supelco C18色谱柱(250mm×4.6mm,10μm),乙腈-甲醇-水(30:10:60)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,Sedex蒸发光散射检测器参数:漂移管温度41℃,压力2.2×105 Pa。测定了蒺藜中蒺藜新苷的含量。结果:蒺藜新苷在3.988-13.96μg范围内有良好线性关系,r=0.9995(n=6)。蒺藜新苷的平均回收率为97.5％(n=6)。结论:该方法快速简便,灵敏、准确,可用于蒺藜药材中蒺藜新苷的含量测定。     

蒺藜挥发性成分的GC-MS分析

目的:为蒺藜的开发利用提供试验依据。方法:利用水蒸气蒸馏法提取蒺藜的挥发性成分,采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对挥发性成分进行分析,用峰面积归一化法测定各化学成分的质量分数。结果:共分离出64个化学成分,鉴别出其中54个,占挥发油总量的96.920%。主要成分有(E,E)-2,4-癸二烯醛(9.156%)、香芹烯(7.951%)、反式-茴香烯(7.625%)、肉桂酸乙酯(6.687%)、己醛(5.846%)、α-松油醇(4.457%)、科绕魏素(4.050%)、2-戊烷基-呋喃(3.529%)、(E)-2-庚烯醛(3.507%)、芳樟醇(3.312%)、2,4-癸二烯醛(3.058%)。结论:该试验可为蒺藜的综合利用提供科学依据。     

HPLC法测定蒺藜中总黄酮的含量

目的建立测定蒺藜中总黄酮含量的高效液相色谱法。方法以槲皮素、山柰素、异鼠李素为对照品,色谱条件:ODS柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇:0.4磷酸(v/v)45∶55,检测波长为360 nm。结果槲皮素、山柰素、异鼠李素回收率试验的RSD分别为1.59%、0.98%、1.42%。结论本方法简便易行,适用于蒺藜总黄酮的含量测定。     

DNFB柱前衍生化RP-HPLC法测定氨肽素的氨基酸含量

目的用二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化RP HPLC法测定氨肽素中氨基酸的含量。方法采用二硝基氟苯为衍生试剂进行衍生 ,ODS(KromasilC18,4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm)色谱柱分离 ,以乙腈 0 0 5mol·L-1乙酸钠水溶液为流动相 ,梯度洗脱 ,3 60nm检测 ,在 3 0min内 ,测定氨肽素的氨基酸组成与含量。结果线性范围 (总氨基酸 1 4种 )为 0 1 5～ 0 75 g·L-1;回收率为 94 8%～ 1 0 3 5 % ;RSD为0 2 6%～ 1 47% (n =5 )。结论DNFB柱前衍生化RP HPLC法可有效控制产品质量     

HPLC法测定阿胶中6种氨基酸的含量

目的：通过柱前衍生化,高效液相色谱（HPLC）法测定阿胶中6种氨基酸的含量。方法色谱柱为Hypersil C18（4.6 mm＆#215;250 mm,5μm）;流动相A：乙腈-0.1mol/L乙酸钠（7：93）,用乙酸调节pH为6.5,流动相B：乙腈-水（4：1）,梯度洗脱;柱温为42℃;流速为1.0 ml/min;检测波长254 nm;异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生化。结果30 min内6种氨基酸分离完全,峰面积与浓度的线性关系良好, r=0.999。加样回收率97.33%~100.17%, RSD〈3。结论 HPLC法测定阿胶中6种氨基酸的含量方法操作流程简单、快速、准确,可用于该制剂的质量控制和检验。