构建脑血管内皮细胞紧密连接模型对脑血管疾病发生发展机制研究的意义

目的：电镜下观察人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞间紧密连接的形成，并建立脑血管内皮细胞紧密连接的模型，以期发现该模型的建立对发现脑血管病变早期发生及发展的意义。方法：培养ECV304细胞，在细胞生长接触到融合状态后，在透射电镜下观察细胞间紧密连接的形成情况。结果：透射电镜下可见到ECN304细胞间能够形成典型的紧密连接结构，以及内皮细胞所特有的W-P小体，吞饮小泡等结构。结论：ECV304细胞之间能够形成典型的紧密连接；可以利用ECV304细胞系建立研究脑血管内皮细胞间紧密连接的模型。     

应用分离微血管段方法培养人脑微血管内皮细胞及对血管内皮细胞生长因子基因表达和细胞超微结构的观察(英文)

背景:观察缺氧状态下脑血管内皮细胞的血管内皮细胞生长因子表达及细胞超微结构变化,可为从细胞和分子水平认识血管生成及其相关的细胞因子参与缺血性脑血管疾病的病变过程。目的:构建分离微血管段体外培养人脑微血管内皮细胞的方法,并观察血管内皮细胞生长因子基因表达与细胞超微结构变化。设计:随机对照的技术方法研究。单位:一所军区总医院的神经外科,一所大学医院的神经外科。对象:2002年沈阳军区总医院神经外科脑动静脉畸形患者18例(SpetzlerⅡ～Ⅲ级),全部病例术前均经全脑血管造影证实。取材于手术中切除的完整脑动静脉畸形新鲜标本周围粘连的新鲜脑组织,采用匀浆、过滤和酶消化技术分离微血管内皮细胞。将在培养瓶内生长良好的细胞分成缺氧2,4,8h组和对照组4组,每4瓶为1组。方法:缺氧条件模拟:体积分数0.95N2,体积分数0.05CO2。免疫组化方法检测细胞中第八因子相关抗原(FⅧ-RA)表达。选用RT-PCR技术观察每组内皮细胞血管内皮细胞生长因子mRNA表达,同时以ELISA方法检测每组细胞上清液中血管内皮细胞生长因子蛋白含量,透射电镜观察细胞超微结构的变化。主要观察指标:对照组和各缺氧组血管内皮细胞中血管内皮细胞生长因子mRNA表达和细胞上清液中血管内皮细胞生长因子蛋白含量,以及细胞超微结构的变化。结果:相差显微镜下,培养的活细胞具有单层“卵石样”排列的典型特征,90%以上的细胞为FⅧ-RA阳性染色。缺氧4h细胞血管内皮细胞生长因子mRNA和蛋白表达为0.98±0.19,(180.77±20.15)ng/L,较对照组显著升高[0,(26.20±6.33)ng/L,P<0.01],8h后表达下调[0.35±0.07,(31.68±8.34)ng/L],并出现线粒体肿胀、内质网扩张及溶酶体多囊泡形成。结论:采用分离微血管段方法培养人脑血管内皮细胞,操作简便易行,细胞纯度可靠。缺血缺氧早期血管内皮细胞生长因子表达不足以维持细胞超微结构完整,随缺氧时间延长细胞可发生损伤性变化。     

应用分离微血管段方法培养人脑微血管内皮细胞及对血管内皮细胞生长因子基因表达细胞超微结构的观察

背景观察缺氧状态下脑血管内皮细胞的血管内皮细胞生长因子表达及细胞超微结构变化,可为从细胞和分子水平认识血管生成及其相关的细胞因子参与缺血性脑血管疾病的病变过程.目的构建分离微血管段体外培养人脑微血管内皮细胞的方法,并观察血管内皮细胞生长因子基因表达与细胞超微结构变化.设计随机对照的技术方法研究.单位一所军区总医院的神经外科,一所大学医院的神经外科.对象2002年沈阳军区总医院神经外科脑动静脉畸形患者18例(SpetzlerⅡ～Ⅲ级),全部病例术前均经全脑血管造影证实.取材于手术中切除的完整脑动静脉畸形新鲜标本周围粘连的新鲜脑组织,采用匀浆、过滤和酶消化技术分离微血管内皮细胞.将在培养瓶内生长良好的细胞分成缺氧2,4,8 h组和对照组4组,每4瓶为1组.方法缺氧条件模拟体积分数0.95 N2,体积分数0.05 CO2.免疫组化方法检测细胞中第八因子相关抗原(FⅧ-RA)表达.选用RT-PCR技术观察每组内皮细胞血管内皮细胞生长因子mRNA表达,同时以ELISA方法检测每组细胞上清液中血管内皮细胞生长因子蛋白含量,透射电镜观察细胞超微结构的变化.主要观察指标对照组和各缺氧组血管内皮细胞中血管内皮细胞生长因子mRNA表达和细胞上清液中血管内皮细胞生长因子蛋白含量,以及细胞超微结构的变化.结果相差显微镜下,培养的活细胞具有单层"卵石样"排列的典型特征,90%以上的细胞为FⅧ-RA阳性染色.缺氧4 h细胞血管内皮细胞生长因子mRNA和蛋白表达为0.98±0.19,(180.77±20.15)ng/L,较对照组显著升高[0,(26.20±6.33)ng/L,P＜0.01],8 h后表达下调[0.35±0.07,(31.68±8.34)ng/L],并出现线粒体肿胀、内质网扩张及溶酶体多囊泡形成.结论采用分离微血管段方法培养人脑血管内皮细胞,操作简便易行,细胞纯度可靠.缺血缺氧早期血管内皮细胞生长因子表达不足以维持细胞超微结构完整,随缺氧时间延长细胞可发生损伤性变化.     

机械压力对人脐静脉内皮细胞形态、结构的影响和意义

目的 研究压力对体外培养的人脐静脉内皮细胞ECV-304形态和结构的影响,探讨压力增高对血管内皮细胞形态和结构的影响及在门脉高压症血管内皮病变中的意义。方法 对静态培养及不同压力、不同时间条件下体外培养的人脐静脉内皮细胞ECV-304用倒置显微镜和透射电镜进行形态和结构观察,并用计算机图像分析系统进行形态参数的定量分析。结果施加生理范围和超生理范围的压力干预后,在倒置相差显微镜下可见内皮细胞的形态发生改变,表现为细胞形状梭形化或变为不规则形,部分细胞轮廓不清,胞核增大,大多数细胞胞浆有暗色颗粒,细胞排列紊乱,以40mm Hg 24h组最为明显。形态参数的定量分析结果显示在40mm Hg压力下培养24h后,血管内皮细胞的细胞面积、胞核面积和形状因子与正常组和生理压力组相比均有极显著性改变（P均＜0．01）。透射电镜观察则见加压组有空泡的细胞数明显多于正常组,胞质中空泡的数目也明显增多,且大小不一,细胞内的吞噬溶酶体也明显增多。结论血管内皮细胞对机械压力有一S定的耐受能力,但长时间超生理范围的压力对血管内皮细胞的形态和结构有显著影响。门静脉高压症的血管内皮病变的形成与其内皮细胞长期受高压刺激有关。     

尼莫地平对氧化低密度脂蛋白诱导人血管内皮细胞凋亡的影响

目的研究尼莫地平对不同浓度氧化低密度脂蛋白诱导的人血管内皮细胞凋亡的影响。方法在人脐静脉内皮细胞株ECV304培养基中加入不同浓度氧化低密度脂蛋白和尼莫地平（1.2μg/ml）,作用6-24 h。透射电镜观察内皮细胞ECV304的凋亡情况;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率;用激光共聚焦显微镜检测钙离子浓度。结果不同浓度氧化低密度脂蛋白能明显诱导培养的内皮细胞发生凋亡,尼莫地平可显著降低氧化低密度脂蛋白诱导的内皮细胞凋亡率（P〈0.01）。结论尼莫地平对氧化低密度脂蛋白诱导的人血管内皮细胞凋亡具有保护作用。     

重组腺病毒Ad-Endo对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究人内皮抑素(endostatin,Endo)对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响.方法:利用腺病毒载体系统AdEasy-1及AAV 293细胞构建并包装出携带Endo基因的重组腺病毒Ad.Endo,感染人脐静脉内皮细胞ECV 304,Western-blot检测Endo蛋白表达,流式细胞术及Hochest 33258染色检测ECV 304细胞凋亡情况,并绘制细胞生长曲线.结果:病毒感染48 h后检测到Endo蛋白表达,ECV 304细胞在Ad-Endo感染后细胞增殖受到抑制.流式细胞术及Hochest 33258染色均检测到细胞凋亡增加.结论:重组腺病毒Ad-Endo在体外可抑制ECV 304细胞的增殖并诱导细胞凋亡.这可能是Endo抑制血管生成的重要机制.     

SZ-102影响中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的初步研究

目的 观察单克隆抗体SZ-102对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响作用。方法 用流式细胞术检测中性粒细胞、人脐静脉内皮细胞、HL-60细胞及ECV304的结合反应性；用虎红染色法检测SZ—102对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响。结果 SZ—102与静息的人脐静脉内皮细胞、HL-60细胞及ECV304有结合反应，它能促进中性粒细胞与脂多糖活化的内皮细胞粘附。结论 SZ—102所识别的抗原在细胞粘附中具有重要作用。     

应用分离微血管段方法培养人脑微血管内皮细胞及对血管内皮细胞生长因子基因表达和细胞超微结构的观察

背景：观察缺氧状态下脑血管内皮细胞的血管内皮细胞生长因子表达及细胞超微结构变化，可为从细胞和分子水平认识血管生成及其相关的细胞因子参与缺血性脑血管疾病的病变过程。目的：构建分离微血管段体外培养人脑微血管内皮细胞的方法，并观察血管内皮细胞生长因子基因表达与细胞超微结构变化。设计：随机对照的技术方法研究。单位：一所军区总医院的神经外科，一所大学医院的神经外科。对象：2002年沈阳军区总医院神经外科脑动静脉畸形患者18例(spetzlerⅡ～Ⅲ级)，全部病例术前均经全脑血管造影证实。取材于手术中切除的完整脑动静脉畸形新鲜标本周围粘连的新鲜脑组织，采用匀浆、过滤和酶消化技术分离微血管内皮细胞。将在培养瓶内生长良好的细胞分成缺氧2，4，8h组和对照组4组，每4瓶为1组。方法：缺氧条件模拟：体积分数0．95N2，体积分数0．05 CO2。免疫组化方法检测细胞中第八因子相关抗原(FⅧ-RA)表达。选用RT-PCR技术观察每组内皮细胞血管内皮细胞生长因子mRNA表达，同时以ELISA方法检测每组细胞上清液中血管内皮细胞生长因子蛋白含量，透射电镜观察细胞超微结构的变化。主要观察指标：对照组和各缺氧组血管内皮细胞中血管内皮细胞生长因子mRNA表达和细胞上清液中血管内皮细胞生长因子蛋白含量，以及细胞超微结构的变化。结果：相差显微镜下，培养的活细胞具有单层“卵石样”排列的典型特征，90％以上的细胞为FⅧ-RA阳性染色。缺氧4h细胞血管内皮细胞生长因子mRNA和蛋白表达为0.98&;#177;0．19，(180、77&;#177;20．15)ng／L，较对照组显著升高[0，(26．20&;#177;6．33)ng／L，P&;lt;0．01]，8h后表达下调[0．35&;#177;0．07，(31．68&;#177;8．34)ng／L]，并出现线粒体肿胀、内质网扩张及溶酶体多囊泡形成。结论：采用分离微血管段方法培养人脑血管内皮细胞，操作简便易行，细胞纯度可靠。缺血缺氧早期血管内皮细胞生长因子表达不足以维持细胞超微结构完整，随缺氧时间延长细胞可发生损伤性变化。     

高原暴露下脑微血管损伤与脑内NO的关系及其在高原脑水肿中的作用

目的 探讨高原缺氧性脑微血管损伤与高原脑水肿之间的关系及其机制。方法 分别取高原不同海拔梯度暴露下大鼠脑标本观察其脑血管通透性与脑内NO含量改变，透射电镜观察其脑血管内皮细胞紧密连接状态，免疫组化观察其脑血管内皮细胞紧密连接蛋白表达情况。结果 高原暴露下脑湿重与脑含水量随海拔梯度增加而增加。组织学观察发现高原暴露下脑组织有明显水肿，脑细胞肿胀变圆、树突消失，胞浆内出现空泡变性，脑胶质细胞及微血管周围有明显空晕，脑内血管普通扩张，密度增加，间距缩小，微血管周围有     

姜黄素抑制多发性骨髓瘤细胞脑源性神经营养因子所诱导的血管新生作用

为了研究姜黄素对多发性骨髓瘤（MM）细胞脑源性神经营养因子（BDNF）、内皮细胞株TrkB的表达及内皮细胞血管新生的影响，以初步探讨姜黄素通过抑制血管新生治疗多发性骨髓瘤的可能性，采用RT—PCR法分别检测姜黄素处理前后多发性骨髓瘤细胞株KM3中BDNF的基因表达变化与内皮细胞株ECV304中TrkB的基因表达变化，应用内皮细胞迁移试验和内皮细胞小管形成试验评价姜黄素对内皮细胞血管新生的影响。结果显示：外源性BDNF能够有效地促进内皮细胞的迁移和小管形成，但这两个效应均能被姜黄素明显阻断；KM3细胞表达BDNFmRNA，ECV304细胞表达TrkBmRNA，姜黄素对两者的表达均具有抑制作用，并呈剂量-时间依赖性。结论：BDNF是一种具有促进血管增殖活性的细胞因子，姜黄素可以分别下调MM细胞BDNF与内皮细胞T她的表达，阻碍两者间的相互作用，继而抑制血管新生，这可能成为治疗MM潜在的作用靶点。     

临床护士心理压力源与工作满意度调查分析

目的了解临床护士面临的主要心理压力源,为护理管理者有效地帮助护士减轻和消除心理压力提供依据。方法采用自评式问卷调查的方法 ,对内江市2所三级乙等医院287名从事临床护理工作的护士进行问卷调查。结果临床护士的心理压力源依次来源于工作强度、职业需求、工作环境、人际关系、家庭经济收入等方面。其中来源于工作强度、人际关系及家庭方面的压力源,不同年龄组护理人员在其压力程度上差异有统计学意义(P0.05)。结论从事临床护理工作的护士存在着多种心理压力源,这些压力源是导致护士工作不满意的主要原因,也是护理的安全隐患之一,护理管理者应予以足够的重视,并定期针对不同的人群进行心理健康知识培训,建立有效的支持系统,及时帮助他们调整心理状态,减轻和消除压力,从而提高护士对本职工作的满意度和患者对护理服务的满意度。     

精神疾病患者家属教育的情况分析

目的：通过对精神疾病患者家属教育的调查，探讨家属教育的内容和教育方式。方法：采用自拟问卷对参加系列教育的家属进行调查分析。结果：患者和家属接受教育次数越多，对疾病知识了解越多；在患者的亲属中患者的父母参加教育比率较大。结论：家属教育对治疗疾病起着积极的作用，应更具有针对性，同时还应该注意教育方式。