肺癌、正常肺、胎儿肺组织内血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学研究

应用Ⅷ因子相关抗原(vWF:Ag)对25例肺癌及其周围正常肺组织、8例胎儿肺组织内的血管内皮细胞进行了免疫组织化学研究。结果表明:肺癌组织内毛细血管vWF:Ag为强阳性,肺组织毛细血管大多阴性,胎儿肺组织毛细血管全部阴性。从而初步证明:肺癌间质血管内皮细胞的生物学行为既不同于正常肺组织毛细血管,也不同于胎儿幼稚血管内皮。并认为,肿瘤间质血管内皮细胞vWF:Ag含量增多与恶性肿癌患者的血栓并发症、肿瘤的坏死和转移有密切关系。     

银染端粒重复序列扩增法检测肺癌端粒酶活性

目的 评价端粒酶能否作为肺癌诊断的一具肿瘤标志物。方法 采用改良的银染端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）检测３４例人肺癌手术标本（包括癌组织、相应癌旁组织与正常组织标本各３４份,２８个相应淋巴结）的端粒酶活性。另有肺囊肿、肺炎性假瘤各３例作为对照。结果 ８８．３％（３０／３４）的肺癌癌组织端粒酶阳性,正常组织全部阴性。结论 端粒酶可以作为肺癌诊断的一人肿瘤标志物,改良的银染ＴＲＡＰ法成本低,污染少,有     

多种肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的实用价值

目的:联合检测CEA、NSE、CYFRA21-1、SCCAg、TPS等5种血清肿瘤标志物水平,以寻找具有组织学特异性的肺癌肿瘤标志物,指导肺癌诊断、肺癌病理学分析,选择合理的治疗方案。方法:应用免疫放射法及酶联免疫法分别检测试验组(108例肺癌患者)、对照组(34例肺良性病患者)及健康组(50例健康体检者)血清中CEA、NSE、CYFRA21-1、SCCAg、TPS等5种血清肿瘤标志物水平,并采用t检验对数据结果进行统计学分析。结果:实验组血清中的5项肿瘤标志物含量均高于其他两组;肿瘤标志物水平还与病理类型有关,CEA水平在肺腺癌中最高,NSE在肺小细胞癌中最高,CYFRA21-1、SCCAg、TPS在肺鳞癌中最高;血清肿瘤标志物联合检测上述3种肺癌的阳性率显著升高,分别达到79%、89.8%、88.4%。结论:5种肿瘤标志物对肺癌的诊断有临床价值,并便于确定病理类型,且联合检测可以提高肺癌诊断的敏感性,大大提高肺癌的检出率。     

联合检测5种血清肿瘤标志物在肺癌诊断中的作用分析

目的分析肺癌临床诊断中联合检测5种血清肿瘤标志物的价值。方法随机选取我院收治且在我院住院治疗的95例非小细胞性肺癌患者作为研究组,以我院同期收治的肺良性病变患者75例作为对照组,两组均进行血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌坯抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC)、糖类抗原125(CAI125)、神经元特异性烯醇化酶(NES)联合检测,分析上述5种血清肿瘤标志物在非小细胞性肺癌和肺部良性病变患者血清中的表达。结果研究组5种血清肿瘤标志物中位表达水平均高于对照组(P0.05);研究组95例患者中TNM分期Ⅰ+Ⅱ期5种血清肿瘤标志物中位表达水平明显低于Ⅲ+Ⅳ期。结论联合检测5种血清肿瘤标志物在肺癌诊断和TNM分期中具有重要意义,值得推广应用。     

比较5种血清肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断和治疗的临床效果

目的:探讨分析5种血清肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断和治疗的临床效果。方法:通过酶联免疫法对50例肺癌患者和50例肺良性疾病患者的血清肿瘤标志物进行检测,主要检测的项目为血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(Cy-fra21-1)、糖类癌抗原199(CA199)、糖类抗原125(CAl25)和癌胚抗原(CEA),进而探讨分析5种血清肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断和治疗的临床效果。结果:肺癌患者5种血清肿瘤标志物的水平均明显高于肺良性疾病患者的检测水平,比较差异均有统计学意义(P0.05)。其中NSE在小细胞肺癌中高表达,CAl25在腺癌中高表达,不同肺癌类型患者的CA199、CAl25、NSE三种血清肿瘤标志物的阳性率比较差异均有统计学意义(P0.05),而CEA和Cy-fra21-1两种血清肿瘤标志物的阳性率比较差异无统计学意义(P0.05),不同病理类型的肺癌患者的CA123和Cy-fra21-1两种检测水平比较差异均有统计学意义(P0.05),而其余三种肿瘤标志物检测水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。而5种肿瘤标志物联合检测的灵敏度、准确度和特异度分别为92.0%、89.0%、88.0%,均明显优于单个肿瘤标志物的检测,比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:血清肿瘤标志物的联合检测可显著提高肺癌患者的灵敏度和准确度,对肺癌患者的诊断和治疗有显著的临床意义。     

肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及E-cadherin、Vimentin和TGF-β表达的影响

目的 研究肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及癌、癌旁组织中上皮-间质转化(EMT)相关因子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响.方法 40只小鼠随机分为肺复康组(17.2 g生药/kg)、5-Fu组(25 mg/kg)、Lewis肺癌模型组、正常组.检测肿瘤体积、肿瘤质量以及癌、癌旁组织中E-cadherin、Vimentin和TGF-β的蛋白表达情况.结果 与模型组相比,肺复康组肿瘤体积减小(P＜0.01),肿瘤质量降低(P＜0.01);肺复康组抑瘤率为36％.与正常组比较,模型组癌及癌旁组织E-cadherin表达降低(P＜0.01),Vimentin、TGF-β表达升高(P＜0.01);与模型组癌及癌旁组织相比,肺复康组癌及癌旁组织E-cadherin表达升高(P＜0.01),而Vimentin、TGF-β无显著性差异(P＞0.05).结论 肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长具有一定的抑制作用;并能上调E-cadherin的表达,从而促进肿瘤细胞间的同质粘附而抑制肿瘤的侵袭、转移.     

肺癌的组织非特异性碱性磷酸酶同工酶活性

将15例外科手术切下肺癌组织和同源正常肺组织碱性磷酸酶(ALP)进行比较。在11例癌组织中，ALP酶活性显著低于同源正常肺组织。其余4倒，两者酶活性无差异。癌组织与同源肺组织ALP的热稳定性，电泳行为以及对L—Phe和尿素抑制的敏惑性，均束发现不同，但不同于胎盘ALP。显示两者均属于组织非特异性ALP同工酶。实验提示，肺癌中，组织非特异性ALP活性降低。这可能系肿瘤中存在该酶的抑制剂或在基因转录水平异常所致。     

PBK/TOPK在人乳腺及乳腺癌组织的表达及意义

目的:观察PBK/TOPK在人正常乳腺及乳腺癌组织的分布和表达,探讨作为肿瘤标志物的可能性.方法:应用免疫组织化学EnVision法,在含有人体20种正常组织及14种癌组织的组织芯片上进行PBK/TOPK 染色,检测PBK/TOPK 蛋白的表达.结果:在20种正常组织中,只有头皮的汗腺、睾丸的精原细胞、肝脏的胆管上皮、食管粘膜下腺体、胰腺外分泌部的导管上皮和肾脏的远曲小管7种组织有不同数量细胞明确阳性表达.在14种癌组织中,只有乳腺癌、肺癌、甲状腺癌3种癌组织中存在PBK/TOPK 的大量强阳性表达,而在正常乳腺组织不表达PBK/TOPK.结论:PBK/TOPK在正常组织的阴性表达及其相应恶性肿瘤的强阳性表达,为其成为研究肿瘤起源与发生的标志物提供了一定依据.     

宣威肺癌患者肺组织中金属元素的含量及意义

目的探讨金属元素在宣威地区肺癌患者肺癌组织、癌旁组织及正常组织中的浓度及其变化规律。方法收集2014年1月至2016年12月120例宣威地区肺癌患者的组织,利用原子吸收光谱法检测肺癌组织、癌旁组织和正常组织中的铁(Fe)、镁(Mg)、铅(Pb)、铜(Cu)、锌(Zn)、锰(Mn)、铬(Cr)的含量。结果金属元素Fe、Mg、Cu、Zn在肺癌组织、癌旁肺组织、正常肺组织中含量有差异。肺癌组织中的Fe含量最低,正常肺组织中及癌旁肺组织较前者稍高,差异有统计学意义(P <0.05);Mg在肺癌组织中含量最多,差异有统计学意义(P <0.05);Cu、Zn两种金属元素在正常肺组织中最少,差异有统计学意义(P <0.05)。结论金属元素Fe、Cu、Zn可能与肺癌发生、发展有关系。     

转录组数据分析肺腺癌和肺鳞状细胞癌中基因的差异表达

目的对非小细胞肺癌两种亚型肺腺癌和肺鳞状细胞癌的基因差异表达进行生物信息学分析,寻找非小细胞肺癌潜在的 生物学标志物运用于临床诊断,进而提高患者生存率。方法获取肺腺癌和肺鳞状细胞癌的基因表达谱分析数据集,使用R语 言处理,t检验分析鉴定肺腺癌和肺鳞状细胞癌之间的转录组差异,并通过维恩图显示所鉴定的基因差异表达。从GEO获得差 异表达的基因,用DAVID及IPA进行分析,进一步确定潜在可用于鉴别肺腺癌和肺鳞状细胞癌的几种信号通路和生物标记。利 用TCGA数据和临床肺癌样本中的生物标记表达,验证Osteoarthritis pathway和LXR/RXR分别在肺腺癌和肺鳞状细胞癌的基 因差异表达;挑选miR-181b-5p及其靶基因WNT5A和MBD2进行验证,收集23例肺鳞癌患者的肺肿瘤组织（23例肿瘤组织,实 验组）及其邻近肺组织（23例癌旁肺组织,对照组）,检测miR-181b-5p和其靶基因WNT5A和MBD2的表达差异用于鉴别肺腺 癌和肺鳞状细胞癌。结果GEO数据分析结果揭示肺腺癌和肺鳞状细胞癌的差异表达基因：肺腺癌中有851个DEGs（276个上 调,575个下调）,而肺鳞状细胞癌中有885个DEGs（406个上调,479个下调）。DAVID和IPA分析差异表达基因结果显示,白细 胞迁移和炎症反应在肺腺癌中比肺鳞状细胞癌富集程度更高,Osteoarthritis pathway在肺腺癌中是抑制状态,而在肺鳞状细胞 癌中显示是激活状态。IPA对重要转录因子、细胞因子和miRNA的分析结果显示肺腺癌和肺鳞状细胞癌之间的区别主要是：转 录因子（GATA4,RELA,YBX1,TP63 和MBD2）;细胞因子（WNT5A和IL-1A）和microRNA（miR-34a,miR-181b 和miR-15a）。 其中miR-34a 和IL-1A、miR-15a 和YBX1、miR-181b 和WNT5A和MBD2 可作为鉴别非小细胞肺癌亚型的成对microRNA和 mRNA靶点。临床样本实验结果支持miR-181b-5p 的表达上升和WNT5A的表达下调可视为诊断肺鳞状细胞癌的分子标记 物。结论通过对转录组数据分析,发现了肺腺癌和肺鳞状细胞癌的候选基因、成对的microRNA鉴别肺腺癌和肺鳞状细胞癌, 为其鉴别诊断和治疗提供了新的思路。     

肺癌与胚胎肺组织性激素受体的表达及意义

探讨原发性肺癌和肺组织雌激素受体和孕激素受体的表达和意义。方法 应用荧光组织化学法测定两种受体。结果 肺癌ＥＲ阳性２３．８％。ＰＲ阳性２８．６；胚胎肺ＥＲ，ＰＲ阳性男胚均为３０％，女胚均为４０％；非肿瘤肺ＥＲ，ＰＲ全部阴性。肺癌组中，ＥＲ，ＰＲ阳性肿瘤以鳞癌为主，组织分化好其ＥＲ受体有阳性表达倾向，低分化癌及小细胞癌表达倾向阴发现 。     

Wnt5a在肺鳞癌和腺癌中的表达及意义

目的 探讨Wnt5a基因及蛋白在肺鳞癌和腺癌中的表达水平及其临床意义.方法 用Northern blot及Western blot分析对43例肺鳞癌和腺癌癌组织及10例非肺癌正常肺组织的Wnt5a基因及蛋白的表达进行检测.结果 Wnt5a在肺癌组织中的表达高于正常肺组织,有淋巴结转移的肺癌组织Wnt5a表达高于无转移的肺癌组织.结论 Wnt5a与肺鳞癌和腺癌的转移与恶化密切相关.     

GPRC5A基因在肺腺癌中的表达及临床意义

目的了解G蛋白偶联受体C型家族5A（GPRC5A）基因在肺腺癌组织及癌旁正常组织中的表达,并探讨其临床意义。方法分别采用Real-timePCR和Westernblot法检测25例肺腺癌组织及癌旁正常组织GPRC5AmRNA和蛋白表达水平。应用免疫组化法检测93例肺腺癌组织及癌旁正常组织GPRC5A蛋白的表达情况,并分析GPRC5A蛋白的表达与临床病理特征及预后的关系。结果25例肺腺癌组织中GPRC5AmRNA和蛋白表达水平均明显低于癌旁正常组织（均P＜0.05）。93例肺腺癌中GPRC5A蛋白低表达率为55.9％,均表达在胞质和胞膜中。GPRC5A蛋白的表达与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移均有关（均P＜0.05）,而与性别、年龄、肿瘤大小均无关（均P＞0.05）。Kaplan-Meier生存曲线显示,GPRC5A高表达的患者3年生存率为73.7%,高于低表达患者的39.4%,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论GPRC5A在肺腺癌组织中低表达,其低表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及预后密切相关,可作为估计生存率的独立指标。     

一条新肺腺癌多药耐药相关基因cDNA片段在肺癌组织中表达的研究

目的　检测所获得的一条新肺腺癌多药耐药相关基因 c DNA片段在多种肺癌组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况。方法　 (1)用地高辛和32 P分别将回收的目的基因片段标记为探针 ;(2 )运用原位杂交技术和 Northernblot方法分别确定这条 c DNA片段在细胞中的定位及表达情况。结果　 (1)组织原位杂交结果显示 :在检测的 12例肺腺癌标本中 10例表达阳性 ,阳性率 83.3% (5 1.6 %～ 97.9% ) ,癌旁正常组织中无表达 ,在其他检测的肺癌组织及其癌旁正常组织中无表达。 (2 ) Northern blot检测结果显示 :在检测的 12例肺腺癌标本中 8例表达阳性 ,阳性率 6 6 .6 7% (34.9%～ 90 .1% ) ,癌旁正常组织中无表达 ,在其他检测的肺癌组织及其癌旁正常组织中无表达。结论　目的基因片段在部分肺腺癌组织中有表达 ,这可能与部分肺腺癌的化疗效果较差有关 ,值得作进一步的实验和临床研究     

肺癌的组织非特异性碱性磷酸酶同工酶活性

将１５例外科手术切下肺癌组织和同源正常肺组织碱性磷酸酶（ＡＬＰ）进行比较。在１１例癌组织中，ＡＬＰ酶活性显著低于同源正常肺组织。其余４例，两者酶活性无差异。癌组织与同源肺组织ＡＬＰ的热稳定性，电泳行为以及对Ｌ－Ｐｈｅ和尿素抑制的敏感性，均未发现不同，但不同于胎盘ＡＬＰ。显示两者均属于组织非特异性ＡＬＰ同工酶。实验提示，肺癌中，组织非特异性ＡＬＰ活性降低。这可能系肿瘤中存在该酶的抑制剂或在基因转录水平异常所致。     

组织芯片检测甲状腺转录因子-1蛋白在肺癌细胞核中表达的定量研究

目的 揭示甲状腺转录因子-1（TTF-1）蛋白在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、人胚胎肺泡上皮细胞、肺癌原发灶及淋巴结转移灶中的表达特点及规律。方法 用组织微阵列技术构建包含20例正常成人肺组织、15例胚胎肺组织、100例肺癌原发灶及其相应的55例淋巴结转移灶的765点阵的石蜡组织芯片。用免疫组化SP法检测该芯片中TTF-1蛋白的表达。用Leica Q500MC图像分析系统定量测试组织芯片上TTF-1蛋白的表达强度。结果 胚胎肺泡上皮细胞核TTF-1阳性单位（PU）值小于正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）;不同类型肺癌癌细胞核TTF-1的PU值均小于胚胎肺泡上皮细胞和正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）;肺腺癌和肺小细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值均大于肺鳞癌和肺大细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0、001）;肺鳞癌癌细胞核TTF-1的PU值大于肺大细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）。肺的腺癌、鳞癌和大细胞癌淋巴结转移灶中癌细胞核TTF-1的PU值均大于其癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001,P〈0．001,P〈0．05）;肺小细胞癌淋巴结转移灶癌细胞核TTF-1的PU值与其原发灶癌细胞核TTF-1的PU值基本相同（P〉0．05）。有淋巴结转移的肺癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值大于无淋巴结转移的肺癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）;癌细胞胞核TTF-1的PU值与肺癌大体类型、分化程度和患者性别无关（P〉0．05）;TNMⅡ-Ⅳ期癌细胞胞核TTF-1的PU值大于Ⅰ期（P〈0．001）。结论 TTF-1的表达量在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、胚胎肺泡上皮细胞和肺癌细胞核中的表达具有差异性并依次减少;肺癌细胞核TTF-1的表达具有癌组织类型差异性,腺癌和小细胞癌相对较高,鳞癌和大细胞癌极少;TTF-1胞核高表达的肺癌易发生转移,TTF-1胞核高表达的肺的腺癌、鳞癌和大细胞癌癌细胞为具有明显转移能力的肺癌细胞的重要标志之一。     

肺癌组织及淋巴结转移灶中P-糖蛋白的表达

目的 :探讨P 糖蛋白 (P gp)在非癌肺组织、肺癌原发灶及肺癌淋巴结转移灶中的表达及相互关系。方法 :用免疫组织化学方法检测 4 0例术前未进行化疗的肺癌原发灶、肺癌淋巴结转移灶及 10例非癌肺组织P 糖蛋白的表达。结果 :4 0例肺癌原发灶P 糖蛋白阳性表达 2 3例 ,其淋巴结转移灶P 糖蛋白阳性表达 18例 ,阴性表达 5例 ;肺癌原发灶P 糖蛋白阴性表达 17例 ,其淋巴结转移灶均无阳性表达。 10例正常肺组织P 糖蛋白的表达均阴性。肺癌原发灶P 糖蛋白的表达与淋巴结转移灶P 糖蛋白表达有关 (P <0 0 1) ,与肺癌组织学分型无关(P >0 0 5 )。结论 :肺癌原发灶与肺癌淋巴结转移灶中P 糖蛋白的表达有关。非癌肺组织中P 糖蛋白的表达阴性。     

ZEB1的表达与肺鳞状细胞癌侵袭及转移的关系

目的：探讨锌指E-盒结合同源异形盒-1 (ZEB1)在肺鳞状细胞癌组织中的表达,分析ZEB1 mRNA和蛋白的表达水平与肺鳞状细胞癌侵袭及转移的关系。方法：选择45例肺鳞状细胞癌行外科手术切除的患者,根据所取组织与肿瘤的距离不同分为肺鳞状细胞癌组织和癌旁正常肺组织,采用RT-PCR和Western blotting方法检测肺鳞状细胞癌组织和癌旁正常肺组织中ZEB1 mRNA和蛋白的表达情况,并分析肺鳞状细胞癌不同临床病理特征ZEB1 mRNA和蛋白的表达差异;构建ZEB1特异性siRNA载体,感染肺癌NCI-H2170细胞,设未转染对照组、转染照组和ZEB1 siRNA转染组,应用Western blotting方法从蛋白质水平检测各组干扰质粒对ZEB1基因的干扰效果,通过Transwell侵袭小室观察各组NCI-H2170细胞侵袭能力的变化。结果： ZEB1 mRNA在肺鳞状细胞癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁正常肺组织（P＜0.05）;在淋巴结转移、远处转移阳性者肺癌组织中的阳性表达率显著高于其在淋巴结转移、远处转
移阴性者肺癌组织中的表达（P<0.05）;但ZEB1 mRNA的表达与肺鳞状细胞癌患者的性别、年龄及肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05)。肺鳞状细胞癌组织中ZEB1蛋白的表达与ZEB1 mRNA的表达结果类似,ZEB1蛋白在肺鳞状细胞癌组织中的表达量显著高于癌旁正常肺组织（P<0.05）;在淋巴结转移和远处转移阳性者癌组织中的表达显著高于其在淋巴结转移和远处转移阴性者癌组织中的表达（P<0.05）。下调NCI-H2170细胞中ZEB1蛋白的表达后,NCI-H2
170细胞的侵袭及转移能力明显降低（P<0.05）。结论：ZEB1在肺鳞状细胞癌组织中高表达,表达变化与肺鳞状细胞癌的病理特征密切相关;运用RNA干扰技术有效沉默NCI-H2170细胞的ZEB1基因后,可显著降低NCI-H2170细胞的侵袭及转移能力,提示ZEB1在肺癌的发生发展中起重要作用,抑制ZEB1的表达可能成为一种治疗肺癌的方法。
     

肺癌与胚胎肺组织性激素受体的表达及意义

探讨原发性肺癌和肺组织雌激素受体（ＥＲ）和孕激素受体（ＰＲ）的表达和意义。方法应用荧光组织化学法测定两种受体。结果肺癌ＥＲ阳性２３．８％（１０／４２），ＰＲ阳性２８．６（１２／４２）；胚胎肺ＥＲ、ＰＲ阳性率男胚均为３０％，女胚均为４０％；非肿瘤肺ＥＲ、ＰＲ全部阴性。肺癌组中，ＥＲ、ＰＲ阳性肿瘤以鳞癌为主；组织分化好其ＥＲ受体有阳性表达倾向，低分化癌及小细胞癌表达倾向阴性。结论与乳癌相似，肺癌中ＰＲ是雌激素诱导合成的蛋白质和反映功能性ＥＲ的标记物；ＥＲ、ＰＲ表达在一定程度上反映癌的分化程度，分化好的癌ＥＲ和ＰＲ阳性率高；ＥＲ和ＰＲ阳性的肺癌为激素依赖性肿瘤，与雌激素靶器官的恶性肿瘤一致，可试用内分泌治疗