栀子抑制小鼠S180和肝癌及促进小鼠肝癌细胞凋亡作用

目的 探讨栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2表达以及细胞凋亡的作用.方法 分别采用荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌模型,灌胃栀子提取物10g·(kg·d)-1,qd×10d;观察瘤重和肿瘤抑瘤率,以及用酶联免疫分析法检测肝癌小鼠血清肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2含量及用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 栀子提取物能抑制荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的增重(P＜0.01),抑瘤率分别为44.8%和61.0%;下调荷瘤小鼠肝癌模型血清肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达(P＜0.01),小鼠肝癌细胞凋亡率为52.6%.结论 栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌有抑制作用,抑瘤作用机制是下调肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达,从而诱导小鼠肝癌细胞凋亡.     

子宫肌瘤中抑癌基因p53和Rb的表达

目的：探讨抑癌基因p53和Rb在子宫肌瘤发生发展中的作用。方法：用NorthernBlot方法检测14例子宫肌瘤和3例子宫平滑肌肉瘤中p53和Rb基因的mRNA表达。结果：p53和Rb基因在分泌期子宫肌肉中的表达水平明显高于增殖期，在子宫肌瘤中的表达水平明显低于分泌期子宫肌肉组织，在子宫肉瘤中的表达水平低于子宫肌瘤。结论：在子宫肌肉组织中，性激素对p53和Rb基因的表达可能有调节作用。推测性激素促使子宫平滑肌细胞增生的作用途径之一是影响p53和Rb基因的表达。     

环磷酰胺在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制的研究

目的探讨环磷酰胺（CTX）在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制。方法建立小鼠实体瘤模型和腹水瘤模型：分别在昆明系小鼠皮下接种S180肉瘤细胞、腹腔接种鼠源性H22肝癌细胞,同时给予环磷酰胺处理小鼠,其后观察各组肿瘤生长大小,小鼠存活率的变化;应用Western blot技术检测凋亡抑制基因（Bcl-2）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）含量、抑癌基因P53及P21的蛋白表达。结果环磷酰胺组肿瘤重量明显低于模型组（P〈0.05）,其抑瘤率为88.55%;小鼠存活天数均较模型组长,其生命延长率为57.73%;环磷酰胺可明显诱导P53的表达,抑制BCL-2的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡,但对P21没有作用;对瘤体组织中VEGF蛋白表达水平亦有抑制作用。结论环磷酰胺可通过激活抑癌基因P53,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促血管生成因子VEGF等多种途径,发挥抗肿瘤活性,为抗肿瘤动物模型尤其为调节抗肿瘤相关基因表达方面的阳性药物对照提供重要的实验依据。     

骨髓间充质干细胞对小鼠肉瘤细胞S180生长的影响

目的: 研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)对小鼠肉瘤细胞S180生长的影响,并探讨其可能的机制.方法:采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离、纯化、扩增小鼠BMSCs,流式细胞术检测其细胞表面分子的表达.收集小鼠BMSCs上清液,采用MTT法检测其对小鼠S180细胞的生长抑制效应;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测p53、bcl-2 mRNA的表达情况.结果:密度梯度离心法结合贴壁培养法能有效分离、纯化小鼠BMSCs,流式细胞术分析结果显示培养的小鼠BMSCs阳性表达CD44(86.53%)、CD29(95.27%),阴性表达CD34(3.57%).MTT法结果显示,小鼠BMSCs上清液可明显抑制S180细胞的生长,呈时间-剂量依赖性;经40%、80%上清液作用48 h后的凋亡率分别为14.17%、29.77%,明显高于对照组的4.23%(均P<0.01);p53及bcl-2 mRNA均表达,小鼠BMSCs上清液可上调p53 mRNA表达,下调bcl-2 mRNA表达.结论:小鼠BMSCs上清液可抑制小鼠S180细胞的生长并诱导细胞凋亡,其机制可能与上调p53、下调bcl-2基因表达有关.     

筋骨草对小鼠S180肉瘤的抑瘤试验

为观察筋骨草的抑瘤作用,试验采用肿瘤移植的动物模型,进行筋骨草水提液对小鼠S180肉瘤的抑瘤试验.通过重复试验,2次试验的抑瘤率分别为81%和73%,与对照组比,P＜0.01.结果提示:筋骨草水提液对小鼠S180肉瘤有明显的抑制作用.     

栀子抑制小鼠S_(180)和肝癌及促进小鼠肝癌细胞凋亡作用

目的探讨栀子提取物对荷瘤小鼠S_(180)肉瘤和肝癌的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2表达以及细胞凋亡的作用。方法分别采用荷瘤小鼠S_(180)肉瘤和肝癌模型,灌胃栀子提取物10g·(kg·d)~(-1),qd×10d;观察瘤重和肿瘤抑瘤率,以及用酶联免疫分析法检测肝癌小鼠血清肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2含量及用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况。结果栀子提取物能抑制荷瘤小鼠S_(180)肉瘤和肝癌的增重(P＜0．01),抑瘤率分别为44．8%和61．0%;下调荷瘤小鼠肝癌模型血清肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达(P＜0．01),小鼠肝癌细胞凋亡率为52．6%。结论栀子提取物对荷瘤小鼠S_(180)肉瘤和肝癌有抑制作用,抑瘤作用机制是下调肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达,从而诱导小鼠肝癌细胞凋亡。     

甲状腺乳头状癌Survivin、p53表达与临床病理特征

目的 探讨新的凋亡抑制基因survlvin和抑癌基因p53在甲状腺乳头状癌组织中的表达与甲状腺乳头状癌发生发展、临床病理特征之间的关系.方法 应用免疫组织化学(SP法),检测survivin、p53在102例甲状腺乳头状癌组织及10例结节性甲状腺肿组织中的表达.结果 102例甲状腺乳头状癌组织中survivin、突变型p53(mt-p53)基因的阳性表达率分别为66.7%和81.4%.与良性病变组survivin、p53的阳性表达率30%、0%相比较二者差异有显著的统计学意义(P<0.05).甲状腺乳头状癌组织中突变型p53及surivivin阳性表达率在不同性别、不同年龄、肿瘤大小,WHO大体分类及组织学分级间差异无显著性(P>0.05).伴有淋巴结转移的甲状腺乳头癌组织中surivivin的阳性表达率为79.5%,不伴有淋巴结转移者,survivin的阳性率为57.1%,二者差别有显著性(P<0.05).突变型p53在甲状腺乳头状癌组织中表达的阳性率与淋巴结转移无关(P>0.05).结论 Survivin与mt-p53在甲状腺乳头状癌组织中表达上调.Survivin表达与淋巴结转移有关.突变型p53表达与淋巴结转移无关.     

抑癌基因p16、Rb的表达与胆囊癌预后的关系

目的 研究抑癌基因p16及Rb的表达与胆囊癌预后的关系。方法 用SP免疫组化法同步检测41例胆囊癌患者抑癌基因p16及Rb的蛋白表达。结果 p16与Rb蛋白表达阳性组生存率明显优于阴性组。结论 p16及Rb在胆囊癌的预后判定中具有重要价值，同步检测两者的预后价值优于单一检测。     

壳寡糖对S180肉瘤细胞凋亡、细胞周期以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

目的探讨壳寡糖对S180肉瘤细胞的生物学效应，为其治疗肿瘤提供新的理论基础。方法体外实验：用流式细胞仪测壳寡糖作用下S180肉瘤细胞周期、细胞凋亡情况。体内实验：建立S180肉瘤小鼠皮下移植瘤模型，给予壳寡糖后，测瘤体积，并用免疫组化法测瘤组织Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果体外实验：高浓度壳寡糖作用后S180肉瘤细胞阻滞于G0/G1期，同时S180肉瘤细胞凋亡增加。体内实验：壳寡糖对小鼠S180肉瘤有明显的抑制作用并能提高促凋亡基因Bax的表达，降低抑凋亡基因Bcl-2的表达。结论壳寡糖可抑制S180肉瘤细胞的生长，使S180细胞阻滞于G0／G1期并诱导其发生凋亡，其机制可能与Bcl-2蛋白下调而Bax蛋白上调有关。     

戴氏绿僵菌提取物对小鼠肿瘤S180抑瘤活性研究

目的: 研究戴氏绿僵菌无性型戴氏绿僵菌培养液上清液中生物活性物质对小鼠肿瘤S180的抗肿瘤活性.方法: 体外传代肿瘤细胞株杀伤试验采用MTT法,小鼠体内肿瘤细胞生长检测采用实体瘤称重法,IL-2检测采用酶联免疫吸附测定法(双抗夹心法).结果: 戴氏绿僵菌培养液提取物在高浓度时对体外传代肿瘤细胞株S180有显著的抑制作用,抑瘤率分别为28.06%、23.92%、35.55%、30.92%;对小鼠体内S180实体瘤的生长有显著的抑制作用,抑瘤率分别为22.09%、39.11%、41.67%;能提高荷瘤小鼠血清中IL-2水平,IL-2水平分别为84.627、106.915、136.911 ng/L.结论: 戴氏绿僵菌提取物在体内和体外均具有抑瘤作用,其抑瘤机理可能与提高机体免疫抑瘤能力有关.     

Rb2/p130基因编码蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：联合检测Bb2/p130、p53和p21基因编码蛋白在非小细胞肺癌中的表达，分析其与预后的关系。方法：采用免疫组织化学方法，检测87例非小细胞肺癌病人的手术标本Rb2／p130、p53和p21基因编码蛋白的表达，并与病理组织学、临床分期、生存时间进行统计学分析。结果：Rb2／p130和p21蛋白表达阴性者分别为34例（39．1％）和42例（48．3％）。p53蛋白阳性表达者为45例（51．7％）。Rb2／p130表达缺失与肿瘤分化程度、临床分期均呈负相关（P〈0．05）。p53表达阳性率与肿瘤分化程度相关（P〈0．05），与临床分期无关。p53表达和Rb2／p130表达负相关，同时p53表达阳性和Rb2／p130表达缺失者预后差，本后生存期短（P〈0，05）。结论：在非小细胞肺癌中，Rb2／p130表达缺失和p53表达阳性提示恶性程度高，同时检测p53和Rb2／p130的表达对判断非小细胞肺癌的预后可能具有一定的临床意义。     

阿司匹林对小鼠S180肉瘤生长及血管和淋巴管生成的影响

目的   观察阿司匹林对小鼠S180肉瘤生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法   昆明种小鼠40只,接种S180肉瘤细胞,随机分为荷瘤对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、阿司匹林高(250mg/kg)、低剂量(50mg/kg)组,描绘肿瘤体积生长曲线并计算抑瘤率;HE染色观察各组肿瘤组织病理变化;免疫组化检测各组肿瘤组织微血管密度(MVD)、淋巴管密度(LVD)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的变化;Western blot检测各组肿瘤组织VEGF-A、VEGF-C的表达。结果   阿司匹林高、低剂量组抑瘤率分别为45.4%和22.2%(P<0.05),与荷瘤对照组相比,5-FU组与阿司匹林高、低剂量组VEGF-A和VEGF-C的表达明显下调,LVD、MVD降低(P<0.05),阿司匹林的作用呈剂量依赖性。结论   阿司匹林能抑制小鼠S180肉瘤的生长,其作用机制可能与减少VEGF-A和VEGF-C产生从而抑制肿瘤血管和淋巴管生成有关。     

人成骨肉瘤及骨纤维结构不良组织p53,p16及Rb表达的意义

目的：探讨人成骨肉瘤组织、成骨肉瘤细胞系（ＯＳ－９９０１）及骨纤维结构不良组织中突变型ｐ５３,ｐ１６及Ｒb基因的表达及意义。方法：采用免疫组织化学ＡＢＣ方法对６ ０例成骨肉瘤标本、一株成骨肉瘤细胞系及１４例骨纤维结构不良组织中ｐ５３,ｐ１６及Ｒb基因的表达进行检测。结果：ｐ５３,ｐ１６及Ｒｂ基因的表达进行检测。结果：ｐ５ ３,ｐ１６及Ｐb基因在上述两各组织中均一阳性率各异。在６０例骨肉瘤标本中的阳性表     

Rb94联合放疗对裸鼠肺腺癌皮下移植瘤的抑制作用

目的  观察人视网膜母细胞瘤基因（Rb94）对裸鼠肺腺癌皮下移植瘤的放射增敏作用及其机制。方法  将40只裸鼠分别皮下接种5×106个A549细胞,当肿瘤长至180mm3时随机分为8组,每组5只,即空白对照组、空白对照+射线组、脂质体组、脂质体+射线组、空载体组、空载体+射线组,每两组分别于肿瘤内注射PBS、脂质体、pIRES。另有转染Rb94基因组、转染Rb94基因+射线组,分别注射pIRES-Rb94。空白对照+射线组、脂质体+射线组、空载体+射线组、转染Rb94基因+射线组裸鼠瘤体内注射后加照一定剂量X线。观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率,采用实时RT-PCR和Western bolt法检测瘤组织中Rb94基因的表达,Hoechst染色观察细胞凋亡情况,实时RT-PCR检测hTERT、Bcl-2mRNA的表达,免疫组织化学SP法检测细胞周期阻滞。结果  转染Rb94基因+射线组抑瘤率为95.84%,与转染Rb94基因组和空白对照+射线组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论  Rb94基因对裸鼠皮下移植瘤具有明显的抑制作用,联合射线抑瘤效果更好,其作用机制可能与Rb94基因引起细胞凋亡、G2/M期周期阻滞以及下调hTERT、Bcl 2 mRNA的表达有关。     

关龙胆乙醇提取物对小鼠S_(180)肉瘤的抑制增殖作用

[目的]探讨关龙胆乙醇提取物对小鼠S180肉瘤的抑制增殖作用.[方法]按照标准方法给小鼠接种S180肉瘤瘤株,随机分组,分别灌胃给予不同剂量的关龙胆乙醇提取物,10d后观察肉瘤、免疫器官及体重的变化.[结果]0.63,1.25,2.50g/kg关龙胆乙醇提取物对小鼠S180肉瘤的抑制率分别为28.27%,38.72%,42.02%,大剂量组小鼠免疫器官质量分数及体重明显低于肉瘤对照组.[结论]关龙胆乙醇提取物对小鼠S180肉瘤具有抑制增殖作用.     

抑癌基因联合转染对膀胱癌细胞的生长抑制作用研究

目的　探讨抑癌基因 p5 3和 Rb对膀胱癌细胞的生长抑制作用。方法　利用逆转录病毒和电穿孔法将 p5 3、Rb单独或联合导入膀胱癌细胞株 T2 4中 ,Northern杂交等证实外源目的基因的表达后 ,观测并比较不同转染后细胞的生长、增殖水平和成瘤性等。结果　获得 p5 3、Rb单独和联合转染的 T2 4细胞 ,Northern杂交等证实 T2 4细胞中 p5 3失活而 Rb正常 ,转入的外源野生型 p5 3基因和 Rb基因均被表达。与未转染的对照组 T2 4细胞相比 ,转入 p5 3的细胞其生长速率明显降低 ,细胞增殖受抑制 ,软琼脂克隆形成能力丧失 ;而只转染 Rb的细胞除软琼脂克隆形成能力有所降低外 ,细胞生长和增殖未受明显抑制。结论　外源野生型 p5 3能抑制 T2 4生长并降低其成瘤性 ,增加 Rb的表达对细胞生长无明显抑制作用。p5 3对 T2 4细胞的生长抑制作用与外源 Rb基因导入与否无明显关系 ,Rb表达水平正常的膀胱癌细胞其异常增殖可能与 Rb蛋白磷酸化状态的关系更为密切。     

5-氨基酮戊酸-光动力学疗法治疗荷瘤裸鼠宫颈癌的实验研究

目的 分析5-氨基酮戊酸-光动力学疗法(ALA-PDT)对宫颈癌裸鼠移植瘤的体内疗效,对不同给药途径的光动力学治疗(PDT)效果进行比较,以寻找光毒反应最小的给药方式.探讨ALA-PDT诱导宫颈癌细胞凋亡的作用途径.方法 选择人宫颈癌Me180细胞系建立裸鼠宫颈癌移植瘤模型,通过人宫颈癌裸鼠移植瘤体内抑瘤实验、常规染色、免疫组化法检测ALA-PDT对宫颈癌肿瘤组织凋亡抑制蛋白生存素(Survivin)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白表达的影响等方法,对局部给药和尾静脉给药两种给药方法 进行比较研究.相对实时荧光定量法检测ALA-PDT对宫颈癌肿瘤组织凋亡抑制基因Survivin和Bcl-2、促凋亡基因P53、Bax、Bad mRNA表达的影响.结果 局部给药PDT组的肿瘤体积[(0.09 ±0.02)cm3]与对照组[(0.67±0.06)cm3]相比明显减小,差异有统计学意义(P＜0.01),其中局部给药PDT组在7～14 d时体积最小,且体积减小最明显.HE常规染色可观察到PDT组肿瘤受激光照射的皮下细胞区域坏死明显.免疫组化检测结果 表明,ALA-PDT可显著地抑制宫颈移植瘤组织的Survivin和VEGF的蛋白表达.移植瘤组织mRNA的相对实时荧光定量结果 证明PDT治疗后凋亡抑制基因Survivin和Bcl-2的mRNA的表达明显降低(均P＜0.01),而促凋亡基因P53、Bax、Bad mRNA表达水平稍有增高,但差异无统计学意义.结论 ALA-PDT对宫颈癌治疗是有效的.临床用光动力治疗宫颈癌或癌前病变患者应尽量使用局部给药方式,以减少PDT光毒作用的危害和不便.     

垫状卷柏提取物诱导凋亡抗肿瘤作用研究

目的 研究垫状卷柏提取物抗肿瘤作用及相关机制。方法 采用皮下接种H22肝癌细胞株构建小鼠H22肝癌移植瘤模型,随机分为对照组（生理盐水）、5-FU组（30 mg/kg）、垫状卷柏提取物（SP）高、低剂量组（189、63 mg/kg）,连续灌胃15 d。观察小鼠肿瘤生长情况,计算抑瘤率及肝、脾、胸腺指数;TUNEL法观察肿瘤组织细胞凋亡,Western blot测定凋亡相关蛋白的表达,qPCR检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA。结果 与对照组比较,SP高、低剂量组小鼠体质量及肝、脾、胸腺指数均无显著差异;SP高、低剂量组小鼠的肿瘤质量均显著降低,呈现较高抑瘤率（P<0.01）,且高剂量组与5-FU组相近;经TUNEL染色法观察,可见明显凋亡形态改变。qPCR检测表明,SP显著上调Bax mRNA的表达,下调Bcl-2 mRNA的表达。Western blot结果显示SP处理后,Bax、cytochrome c及cleaved caspase-3,caspase-8和caspase-9的表达显著上调（P<0.01）,Bcl-2表达明显减弱,呈剂量依赖性。结论 SP有效抑制H22小鼠体内肿瘤生长,其机制与激活caspase诱导凋亡相关。      

骆驼蓬总碱软胶囊对S180肉瘤和H22肝癌细胞体内增殖生长的影响

目的 观察骆驼蓬总碱软胶囊对移植型鼠源S180内瘤和H22肝癌细胞在荷瘤动物体内生长增殖的影响.方法 通过对昆明种受试小鼠右腋皮下接种S180肉瘤和H22肝癌细胞,分别建立体内两种不同移植型肿瘤病理模型,观察骆驼蓬总碱软胶囊在浓度为60 mg/kg、30 mg/kg及15 mg/kg连续ig给药10 d,对荷瘤小鼠体内瘤细胞裂殖生长增重的抑瘤作用及对脾脏指数、胸腺指数的影响.结果 骆驼蓬总碱软胶囊对鼠源移植型S180肉瘤细胞在三批次荷瘤小鼠体内的增殖生长均具有明显的抑制作用,抑瘤率在25.44％～48.81％之间,剂量组30 mg/kg抑瘤作用相对较好;对移植型H22肝癌细胞在三批次荷瘤小鼠体内的抑瘤率在21.91％～28.23％之间,剂量组60mg/kg抗癌作用相对较好;且显示对两种不同荷瘤小鼠的脾脏指数、胸腺指数均未见有显著性异常影响.结论 骆驼蓬总碱软胶囊对鼠源S180内瘤细胞和H22肝癌细胞在荷瘤小鼠体内增殖生长均具有较好的抑瘤作用,且对荷瘤小鼠免疫器官亦未见有明显异常性毒性损伤的影响.