小鼠骨髓细胞及骨髓基质细胞混合输注对骨髓移植后造血重建的影响

观察小鼠骨髓细胞及骨髓基质细胞混合输注对骨髓移植后造血重建的影响。给予受致死剂量照射的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠输注同基因骨髓细胞１×１０７ 个及经体外扩增的同基因原代骨髓基质细胞 ２×１０５ 个,与单纯骨髓移植组比较,移植后第１４ 天外周血白细胞、血小板回升较快,第１５ 天、第２０ 天ＢＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｓ明显高于后者,第２０ 天已达正常。　结论：原代骨髓基质细胞不仅是可以移植的,而且能够加快造血重建,提高移植效果。     

骨髓基质细胞移植治疗骨缺损的实验研究

目的 探讨以Ⅰ型胶原海绵为载体的自体骨髓基质细胞移植治疗骨缺损的效果。方法 32只成年新西兰白兔随机分成Ⅰ、Ⅱ两组，分别自股骨大转子及胫骨结节抽取骨髓基质细胞进行培养，扩增后种植于Ⅰ型胶原海绵上，继续培养2周后植入1．5cm长桡骨缺损。Ⅰ组一侧桡骨缺损植入Ⅰ型胶原 自体骨髓基质细胞复合物(A处理)，对侧桡骨不做任何植入(B处理)。Ⅱ组一侧桡骨缺损做A处理，对侧桡骨缺损植入Ⅰ型胶原海绵(C处理)，分别于术后8周和12周取材，观察骨缺损的修复情况。结果 术后12周，A处理组全部骨性愈合，B处理组由纤维组织填充，C处理组有少量骨痂形成。结论 以Ⅰ型胶原海绵为载体的自体骨髓基质细胞移植能有效修复骨缺损。     

小鼠骨髓基质细胞的扫描电镜观察

光镜见小鼠骨髓细胞体外液体培养后贴壁的基质细胞呈多种形态,并有消长过程。本文以扫描电镜进一步观察骨髓基质细胞形态。实验所见支持光镜所得结果。骨髓基质细胞有多种形态,分别具有巨噬细胞样、成纤维细胞样和网状细胞样细胞的某些特征。在体外液体培养的早期,巨噬样细胞较多;而培养两周后的贴壁基质细胞中,成纤维细胞样和网状细胞样的细胞比例增多,相互交错联结成层成同,形成体外造血微环境样结构。     

胎肝基质细胞强化骨髓移植治疗急性放射病

目的为进一步提高骨髓移植效果。方法以昆明种小鼠急性放射病为模型，进行了胎肝基质细胞强化同种异基因骨髓移植，观察了小鼠造血重建、急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）及小鼠存活率。结果胎肝基质细胞移植可强化骨髓移植效果，与单纯骨髓移植组比较，于照射后第１１天小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞计数，ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ、ＣＦＵ－Ｓ回升较快，ＣＦＵ－Ｆ已达正常，于照射后第１７天造血得以重建；ＧＶＨＤ较轻，存活率显著提高，达６０％。结论胎肝基质细胞改善了造血微环境，可能既改善了“龛位”，又增加了“龛位”使干细胞更多的植入，促进了造血重建，提高了骨髓移植效果，是一种“种子与土壤”并重的移植新方法。     

正常骨髓基质细胞促进残留耐药Jurkat细胞凋亡的研究

目的探讨正常骨髓基质细胞对残留耐药Jurkat细胞凋亡的促进作用及其可能机制。方法体外分离培养急性淋巴细胞白血病患者和健康供者骨髓基质细胞(BMSCs),分别模拟白血病和正常骨髓造血微环境,并与获得柔红霉素(DNR)耐药的Jurkat细胞(Jurkat/DNR细胞)共培养。绘制悬浮培养和与BMSCs共培养4d的Jurkat/DNR细胞的增殖曲线,并检测悬浮培养及共培养14、1、0d的Jurkat/DNR细胞的caspase3/7活性和bcl-2、bax、DAPK1 mRNA表达情况。结果与骨髓基质细胞共培养比较,悬浮培养的Jurkat/DNR细胞生长受到明显抑制。共培养41、0d后,Jurkat/DNR细胞caspase3/7活性升高,且共培养10d的活性高于共培养4d(P<0.05)。共培养4、10d后,Jurkat/DNR细胞bcl-2表达增加,共培养14、1、0d后,死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)表达增加(P<0.05)。而bax表达在各时间点间差异无统计学意义(P>0.05)。结论正常骨髓基质细胞能促进Jurkat/DNR凋亡,其机制可能与过表达的DAPK1诱导Jurkat/DNR细胞凋亡和bcl-2转录下调c、aspase3/7活性升高有关。     

骨髓基质细胞的超微结构研究及其辐射血液学意义

CFU-f（colony forming unit-fibrob-lastoid）或FCFC（fibroblast colony for-ming cell）是造血组织中具有相当增殖潜能,在维持细胞池自身恒定的同时,尚可不断分化生成各类基质细胞的原始阶段细胞。     

骨髓基质细胞及其辐射残留损伤

骨髓微环境特别是基质细胞对骨髓的造血起着重要的调控和支持作用。基质细胞与细胞外基质协同作用,并通过分泌众多细胞因子和表达多种粘附因子形成了一个调控造血细胞增殖和分化的网络体系。基质细胞以其较大的辐射抗性对造血系统辐射残留损伤的恢复发挥重要的作用。     

骨髓基质细胞及其辐射残留损伤

骨髓微环境特别是基质细胞对骨髓的造血起着重要的调控和支持作用。基质细胞与细胞外基质协同作用,并通过分泌众多细胞因子和表达多种粘附因子形成了一个调控造血细胞增殖和分化的网络体系。基质细胞以其较大的辐射抗性对造血系统辐射残留损伤的恢复发挥重要的作用。     

小鼠骨髓基质细胞某些特性的观察

骨髓基质细胞是骨髓造血微环境的重要组成成分。了解骨髓基质细胞的特性对进一步认识造血微环境调控造血的机理及其在病理条件下的变化具有重要意义。本文用单层液体培养方法培养小鼠骨髓基质细胞,并对其某些特性进行了初步观察。材料和方法动物:选用本院繁殖纯系LACA雄性小鼠,日龄60～70天。骨髓基质细胞培养体系:日本制R PMI1640双蒸水溶液8份,加1份经56℃灭活的小牛血清和1份马血清,外加青、链霉素各100微克/毫升,用碳酸氢钠溶液调整pH到7.2。     

白血病骨髓基质细胞黏附介导HL-60细胞耐药的实验研究

目的探索白血病骨髓基质细胞黏附对HL-60细胞的耐药效应及可能机制。方法分离、培养骨髓基质细胞,然后与HL-60细胞共培养,分为白血病基质组、正常骨髓基质组和HL-60细胞悬浮培养组,分别加入基质细胞条件培养液或用血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)抗体或纤维连接素(Fn)抗体预处理骨髓基质层,去甲氧基柔红霉素(IDA)作用24 h,MTT法检测HL-60细胞活力,流式细胞仪检测HL-60细胞周期。结果白血病骨髓基质组、正常骨髓基质组HL-60细胞活力明显高于悬浮培养组,白血病骨髓基质组高于正常骨髓基质组;与骨髓基质细胞共培养后,HL-60细胞G0/G1期比例增高,白血病骨髓基质组与正常骨髓基质组间无显著性差异;VCAM-1、Fn单抗处理骨髓基质层后,HL-60细胞活力下降,而基质细胞条件培养液却无影响。结论白血病骨髓基质细胞黏附能促进HL-60细胞耐药,直接的细胞接触可能是其启动条件,部分通过诱导HL-60细胞出现G0/G1期阻滞。     

来源于骨髓与脐带血的基质细胞基本特性比较研究

目的 比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性，为基质细胞的选择应用提供依据。方法 用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞，以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面抗原及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区、长期培养起始细胞为指标，比较两者的生长特性、成分及功能。结果 生长特性：出现贴壁细胞时间，骨髓细胞为培养3d，脐带血细胞为培养5-6d；细胞融合成片时间，骨髓细胞为培养10～14d，脐带血细胞为培养12—18d；第21天细胞增殖数，骨髓比脐带血细胞增殖少。细胞成分：21d培养后细胞成分，骨髓来源者以成纤维细胞为主，其次是巨噬细胞与内皮细胞，脂肪细胞最少；而脐带血细胞来源者，以巨噬细胞为主，其次是内皮细胞、成纤维细胞，偶见脂肪细胞；细胞化学与上述结果基本一致；细胞表面抗原检测，CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞。细胞功能：骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区和长期培养起始细胞明显多。结论 ①生长特性：形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短，骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短。②细胞成分特性：骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主，脐带血来源者以巨噬细胞为主。③细胞功能特性：骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于鹅卵石造血区、长期培养起始细胞生长。     

骨髓基质细胞移植治疗股骨头缺血性坏死的实验研究

目的:探讨骨髓基质细胞移植治疗股骨头坏死的疗效和治疗机制。方法:选用日本大耳白兔60只,随机分为A、B、C和D四组,各组制成激素性股骨头坏死模型。A组为对照组;B组为髓心减压组;C组为直接干细胞移植组;D组为倍增干细胞移植组。B组仅钻孔髓心减压;C组抽取骨髓分离后直接植入坏死的股骨头内;D组抽取骨髓分离、培养倍增后植入股骨头内。各组动物于治疗后8周处死,处死前后分别进行各种指标检测,包括钼靶X线摄影、CT扫描、MR扫描、骨密度测量、常规HE染色切片。结果:股骨头骨髓干细胞移植后8周,骨质密度X线改变不明显,CT和MR明显好转,骨密度增加。病理组织学表现空骨陷窝减少,成骨细胞增多,新骨形成。骨髓基质细胞移植治疗后显示股骨头修复效果明显,而倍增基质细胞移植效果更佳。结论:骨髓基质细胞移植治疗股骨头坏死能加速兔股骨头的修复进程,对股骨头坏死具有较高的治疗价值。     

骨髓基质细胞在造血调控中的作用

骨髓基质细胞是支持和调节造血细胞定居、增殖、分化和发育的内环境〔１〕。骨髓基质细胞通过与造血细胞密切接触和基质细胞的粘附结构共同调节造血干／祖细胞的骨髓定位。同时基质细胞产生多种细胞因子调控造血〔２〕。本文就骨髓基质细胞对造血调控的作用及其机制的研究...     

X线照射后骨髓基质的恢复

放射疗法损伤造血基质,使照射野的造血受抑制。有些研究者认为,基质细胞不参与辐射损伤的修复。为了测定基质对辐射的敏感性和该部位造血的恢复,作者以X线全身照射小鼠1000拉德以下,或用≥1000拉德X线进行局部照射(一侧后肢)。以照后l小时至1个月的有核红细胞计数和体外骨髓     

骨髓基质细胞的体外培养与临床应用

目的　验证骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells,BMSCs)向成骨细胞转化的能力及其临床应用价值。方法　取健康成年大白兔股骨大转子红骨髓 ,在DMEM标准培养液中原代培养骨髓基质细胞 ,传代细胞分别用DMEM标准培养液和加入地塞米松、β 甘油磷酸钠、L 抗坏血酸的条件培养液培养 ,倒置显微镜观察不同培养条件下细胞的形态学特征 ,进行酶学测定 ,计数传代细胞中成骨样细胞转化率 ,免疫组化法检测Ι型胶原表达。同样方法培养人BMSCs,与同种异体骨基质明胶充分混合 ,应用于临床修复创伤所致的骨缺损、骨不连或骨折延迟愈合。结果　体外培养条件下 ,原代细胞呈长梭形 ,具有成纤维细胞的生长特性 ,条件培养的传代BMSCs变为三角形或锥形 ,呈多层生长 ,无接触抑制现象 ,具有与成骨细胞相似的形态和生长特点。ALP染色阳性率可达 85 %以上 ,Ι型胶原免疫组化染色呈强阳性 ,具有与成骨细胞类似的功能性表现。临床应用 4 2例病人 ,随访 8～ 2 6个月 ,取得了满意疗效。结论　BMSCs能够向成骨细胞分化和增殖 ,是骨组织工程学种子细胞的理想来源 ,并有广阔的临床应用前景     

骨髓基质细胞异常对造血功能的影响

骨髓基质细胞是造血诱导微环境（ＨＩＥ）的重要组成成分。它通过与造血细胞密切接触、分泌细胞外基质（ＥＣＭ）和多种细胞因子调节造血，其结构和功能的完整性对于保持机体在生理状况尤其是应激状态时造血的稳定性具有十分重要的作用〔１〕。越来越多的事实表明，某些生...     

脐血清对小鼠骨髓基质细胞的影响

随着对脐血研究的日益深入,人们对其细胞成分及血清造血活性的认识有了进一步提高,但至今未见报道脐血清对骨髓ＣＦＵ－Ｆ的影响。本实验采用液体培养法和ＭＴＴ比色法观察了脐血清及成人血清对小鼠骨髓ＣＦＵ－Ｆ产率影响和上清中ＣＳＡ的变化。脐血清取自正常分娩的脐...     

急性白血病骨髓基质细胞体外培养的生长特性及细胞外基质的检测

目的探讨人急性白血病骨髓造血微环境与正常的差异。方法采用Dexter型骨髓培养体系，动态观察白血病骨艇基质细胞体外生长特性，瑞氏染色计数CFU-F集落，流式细胞仪检测融合层骨髓基质细胞的VCAM-1表达及ELISA法检测培养上清中IL-6、TNF-α含量。结果急性白血病骨髓基质细胞贴壁时间、小丛形成时间、集落形成时间和融合层形成时间均明显推迟；CFU-F计数显著减少；白血病骨髓基质细胞表达VCAM—1低于正常对熙组；白血病基质培养上清液中的TNF-α和IL-6含量明显高于正常对照组。结论急性白血病骨髓基质细胞的体外生长特性、粘附分子及细胞因子表选均存在异常。