p16基因产物在非小细胞肺癌表达及意义

目的　研究ｐ１６ 基因产物在ＮＳＣＬＣ癌组织的表达及其临床意义。　方法　用链霉抗生物素蛋白过氧化物酶连结法检测６４ 例ＮＳＣＬＣ患者肺癌组织及配对淋巴结标本ｐ１６ 蛋白表达。　结果　肺癌组织ｐ１６ 蛋白表达缺失率达４８８％ （３１／６４）,５１６ ％ 呈阳性表达（３３／６４） ,阳性表达中很可能存在突变蛋白。ｐ１６ 蛋白表达与ＮＳＣＬＣ的组织学类型、临床分期、细胞分化无相关性,与淋巴结转移关系密切。淋巴结转移组,肺癌组织ｐ１６ 蛋白表达高于淋巴结阴性组（ Ｐ＜ ００５） 。在转移淋巴结中,４２８６％ ｐ１６ 蛋白阳性。　结论　ｐ１６ 基因产物的异常表达与ＮＳＣＬＣ 的发生、发展关系密切,它在ＮＳＣＬＣ 中可能属于迟发事件。     

p16和Rb基因产物在非小细胞肺癌的表达

目的　研究非小细胞肺癌 (NSCLC)中p16、Rb蛋白表达及二者的关系。方法　应用免疫组织化学技术 (SP法 )检测 74例NSCLC和 10例正常肺组织中p16、Rb蛋白的表达情况。结果　p16蛋白在NSCLC的缺失率为 45 .95 % ,显著高于正常肺组织 (P <0 .0 1) ,并与淋巴结转移有密切关系 (P <0 .0 1)。Rb蛋白在NSCLC的缺失率为 2 8.3 8% ,与正常肺组织差异无显著性 (P >0 .0 5 )。p16蛋白与Rb蛋白表达呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论　p16缺失与可能NSCLC的发生、转移有密切关系。p16与Rb可能通过负反馈机制相互调节。     

抑癌基因p16在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的　探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)中抑癌基因p16的表达及其意义。方法　用免疫组化ABC法检测鼠抗人p16单克隆抗体在 5 9例原发性NSCLC中的表达。结果　p16在非小细胞肺癌中的阳性表达率为 47.5 % (2 8 5 9)。p16的阳性表达在NSCLC中不同的大体类型、肿块直径大小、病理组织学分类等方面均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。但p16在NSCLC的淋巴结转移组的阳性表达率为2 5 .0 % ,显著低于淋巴结无转移组的阳性表达率 67.7% (P <0 .0 5 )。结论　p16的缺失表达对非小细胞肺癌的淋巴结转移起重要作用 ,对分析NSCLC的生物学行为和判断预后有重要意义     

MTS1/p16基因产物在非小细胞肺癌中的表达及其意义

为了研究ｐ１６蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其与非小细胞肺癌发生发展的关系，应用免疫组化ＬＳＡＢ法对５２例非小细胞肺癌石蜡标本进行ｐ１６蛋白的检测。结果发现４４例（８４．６％）ｐ１６蛋白表达阳性，ｐ１６蛋白在良、恶性细胞中均有表达，肿瘤细胞中ｐ１６表达呈现异质性；各肿瘤类型中鳞癌和大细胞癌阳性率高于腺癌，但无显著差异，高分化腺癌阳性率高于低分化腺癌（Ｐ＜０．０１）；伴淋巴结转移者阳性率低于非转移者（Ｐ＜０．０１），且ｐ１６蛋白表达阳性率与肿瘤大小相关。表明ｐ１６基因表达缺失参予了非小细胞肺癌的发生发展过程，且与肿瘤分化、转移有关     

端粒酶与p53、p16基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的研究端粒酶与p53、p16基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其意义.方法应用SP法免疫组化技术和TRAP法分别检测40例肺癌组织中端粒酶和p53、p16基因的表达.结果端粒酶及p53、p16基因在NSCLC中的阳性率分别为92.5%、37.5%和66.7%;p53基因阳性表达率与NSCLC及病理分期显著相关(P＜0.05).p16基因阳性表达率与性别、年龄、病理分期、吸烟史、组织学类型和分化程度无显著相关(P＞0.05).端粒酶活性与年龄呈负相关,并与p53基因表达情况和病理分期有关(P＜0.05).结论端粒酶和p53基因的表达与NSCLC的病期进展有关.     

Ⅰ期非小细胞肺癌p53蛋白的表达及其临床意义

目的：研究４８例Ⅰ期非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）ｐ５３蛋白的表达，试图为早期肺癌找到灵敏、特异的指标，以指导术后治疗。方法：收集手术后原发灶的石腊标本及其临床、随访资料，以ｐ５３单抗为探针，采用免疫组化Ｓ－Ｐ（ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ－ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）法检测原灶ｐ５３蛋白的表达。结果：４８例Ⅰ期ＮＳＣＬＣ患者中２３例（４７．９％）阳性，ｐ５３（＋）组五年生存率为３０．４％（７／２３），ｐ５３（     

非小细胞肺癌p16基因突变的初步研究

为了解非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）ｐ１６基因突变的情况,本研究应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了２４例ＮＳＣＬＣ肿瘤组织中ｐ１６基因外显子２的突变情况,现将结果报告如下。１　材料与方法２４例ＮＳＣＬＣ肿瘤组织及同一病例非肿瘤肺组织均为住院病例手术切除标本,并经病理证实。按常规方法提取ＤＮＡ。ＰＣＲ反应在ＰＥ９６００热循环仪中进行,扩增ｐ１６基因第２外显子,引物序列：　　ＰＳ１：５′－ＡＣＡＡＧＣＴＴＣＣＣＴＴＣＣＧＴＣＡＴＧＣ－３′ＰＳ２：５′－ＴＣＴＧＡＧＣＴＴＴＧＧＡＡＧＣＴＣＴＣＡＧ－３′循…     

非小细胞肺癌中p16/MTS1基因失活及其意义

目的：研究抑癌基因ｐ１６ＭＴＳ１基因失活与肺癌发生发展的关系。方法：采用双重ＰＣＲ和免疫组化技术分析４８例原发性非小细胞肺癌中ｐ１６基因存在状态。结果：２５例ｐ１６蛋白表达阳性（５２．１％）,其中１４例ｐ１６基因第二外显子缺失。有淋巴结转移者和无淋巴结转移者的Ｐ１６蛋白表达阴性率有显著性差异。ｐ１６基因缺失率亦如此。肺鳞癌中ｐ１６蛋白表达阴性率显著高于腺癌。结论：ｐ１６基因存在状态与非小细胞肺癌的     

p16基因甲基化对非小细胞肺癌发病的影响

目的探讨p16基因甲基化对非小细胞肺癌发病的影响。方法原发性肺癌患者47例及同期无呼吸系统疾病又未患任何肿瘤同性别者94例作对照,采用甲基化特异性PCR等技术,检测p16基因甲基化。结果p16基因甲基化在肺癌组织和正常肺组织中检出率分别为44.7%(21/47)和17.0%(8/47),两者有显著差异(P<0.05)。37例非小细胞肺癌吸烟者中有21例肺癌组织发生p16基因甲基化,而10例非小细胞肺癌非吸烟者中无一例肺癌组织发生p16基因甲基化。p16基因甲基化与年龄、饮酒、肺癌病理分型及肺癌临床分期之间均无明显的相关性(P>0.05)。结论p16基因甲基化与非小细胞肺癌发生的关系非常密切,p16基因甲基化与吸烟有关。检测p16基因甲基化与否,可能有助于肺癌的诊断。     

原发性非小细胞肺癌的P^16基因变异

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术，对２７例原发性非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的癌组织标本进行了Ｐ＾１６基因外显子２的缺失和突变的检测，结果发现６例基因缺失和３例基因突变，且Ｐ＾１６基因的变异多发生在ＮＳＣＬＣ的晚期。结论Ｐ＾１６基因的变异在ＮＳＣＬＣ的形成和发展中起重要作用。     

非小细胞肺癌p16基因甲基化及缺失的研究

目的 研究p16基因在非小细胞肺癌组织中的甲基化和缺失情况，探讨其在肺癌诊断中的价值。方法 应用甲基化相关的PCR及双重PCR，检测50例肺癌组织和54例正常肺组织中p16基因第1外显子5′端启动子区域CpG岛甲基化及第2外显子缺失情况。结果 p16基因在非小细胞肺癌组织中甲基化率为32.0%(16/50)。缺失率为28.0%(14/50);54例正常肺组织甲基化率为3.7%(2/54)，缺失率为0，二组比较，甲基化率（Fisher's exact=0.000)及缺失率（Fisher's exact=0.000)均有显著性差异。结论 甲基化和缺失是非小细胞肺癌p16基因失活的主要形式，检测p16基因甲基化和缺失状态可能有助于肺癌的诊断。     

人非小细胞肺癌组织p16基因缺失及突变的研究

目的 探讨人类非小细胞肺癌组织中ｐ１６基因缺失及突变情况及其与临床病理的关系。方法 应用控制模板ＤＮＡ量的银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测４０例非小细胞肺癌手术切除标本中ｐ１６基因第２外显子。结果 ４０例中有１３例发生纯合缺失，３例发生突变，缺失及突变率为４０％，其缺失及突变率与肺癌的临床分期有密切关系（Ｐ〈０．０５）。结论ｐ１６基因的缺失及突变可能在非小细胞肺癌的发生、发展及转移中起重要作用。     

非小细胞肺癌病人血浆p16基因异常甲基化的检测

肺癌高死亡率的根本原因在于早期诊断的困难。现代分子肿瘤学的研究进展揭示了在肺支气管上皮癌变过程中发生的多种分子水平异常,使得我们有可能将外周血等容易取得的微创性样品中的分子病理学改变作为肺癌早期诊断的辅助指标。通过以往的研究我们发现,一条等位基因缺失而另一条等位基因异常高甲基化是肺癌组织中抑癌基因p16失活的重要机制之一。在这项研究中,我们利用从非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)病人外周血血浆中提取的DNA分析了P16基因的甲基化状态。采用改进的甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP)的方法,95例NSCLC病人的血浆DNA被检测,其中肺鳞癌59例,肺腺癌36例。作为对照,75例相应的肿瘤组织被同时分析。结果显示,p16基因启动子区高甲基化状态的检出率在血浆中为72．6％（69／95）,而在相应的肺癌组织中为74．7％（56／75）。值得注意的是,血浆DNAp16基因异常甲基化只是从那些肿瘤组织DNA表现p16基因高甲基化的病例中被检出－二者存在极好的符合率。我们还发现,在Ⅰ期病人中,血浆p16基因异常高甲基化在肺鳞癌（82．4％）,比在肺腺癌（33．3％）中要高得多（P＜0．005）。从而提示,血浆p16基因异常甲基化有可能成为一项早期发现非小细胞肺癌（尤其是鳞癌）的、非常重要的分子病理学指标。而血浆DNA的MSP则是检测这一指标的敏感、可靠并且便于操作的技术之一,成为一种可以应用于人群筛查的方法。     

原发性非小细胞肺癌p16基因的丢失研究

原发性非小细胞肺癌ｐ１６基因的丢失研究＊钟晓松１许凯黎１廖美琳２丁嘉安３关赛芳１周瑾目的近年文献报道在不同来源的肿瘤细胞中发现ｐ１６基因（系抑癌基因）出现高频率缺失，本文探讨非小细胞肺癌的发生与ｐ１６丢失的关系。方法收集上海地区６２例原发性非小细胞肺...     

非小细胞肺癌病人痰标本p16和MGMT基因的异常甲基化

痰脱落细胞学检查以其方例、无创的特点成为目前诊断肺癌的最基本手段之一,然而它的敏感性比较差。近年来分子肿瘤学的理论和技术进展为我们提供了利用分子病理学标志物发现早期肺癌的可能。研究表明,某些基因的异常甲基化是肺癌中常见的分子水平改变;其包括p16INK4a(p16)和O^6甲基鸟嘌呤－DNA甲基转移酶（O^6-methyl-guanine-DNA methyltransferase,MGMT)。在这项研究中,我们从肺癌病人的痰标本脱落细胞中分离制备DNA,检测了p16和MGMT这两个基因的启动子区的甲基化状态。采用甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP)的方法,我们对71例非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)病的痰标本进行了分析。所有被检NSCLC病人均有明确的组织病理学诊断,其中,肺鳞癌39例,肺腺癌25例,腺鳞癌7例。这71例病人的痰标本仅有31例（43．6％）被细胞学检查诊断为癌。我们的分析资料显示：在71例痰标本中p16基因的高甲基化检出率为83．1％（59／71）,MGMT的高甲基化检出率为59．2％（42／71）。在被测痰细胞DNA中,这两个基因（其中一个或两者）的启动子区异常甲基化的综合检出率高达90．1％（64／71）;而且与相应肿瘤组织中这两个基因的甲基化状态存在很好的符合率。这项研究结果表明,利用MSP技术检查痰脱落细胞DNA中p16和MGMT两基因的异常甲基化是一项敏感、无创、易行的方法。它将有助于非小细胞肺癌早期发现,以及肺癌高危人群的筛查。     

p53,p16基因蛋白在在非小细胞胞肺癌中的表达及意义

应用ＬＳＡＢ免疫组化方法检测了１１７例非小细胞肺癌组织中ｐ５３、ｐ１６基因蛋白的表达。结果显示：ｐ５３、ｐ１６蛋白在肺癌中的阳性表达率分别为４９．５％,４５．３％;在不同组织学类型中,２种蛋白阳性表达率均无显著性差异;ｐ５３蛋白表达与肺腺癌淋巴结转移有显著相关性。ｐ５３蛋白阳性表达的淋巴转移能力强（Ｐ〈０．０５）;ｐ５３、ｐ１６蛋白表达与患者预后有关;ｐ５３蛋白阳性表达及ｐ１６蛋白阴性表达者预后差     

非小细胞肺癌p16/CDKN2基因失活的研究

目的：分析中国人非小细胞肺癌中p16／CDKN2基因失活的情况,探讨该基因在肺癌发生中的作用。方法：选取与p16基因紧密连锁的D9S1748位点,对17例临床切除的原发性肺癌标本进行微卫星不稳定性分析,用甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP)检测p16基因启动子区CpG岛甲基化状况,用免疫组织化学法检测P16蛋白表达情况。结果：微卫星不稳定性分析结果表明,在13例D9S1748位点存在多态性的肿瘤DNA中有9例（69．2％）发生了杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH)。MSP的结果显示,有70．6％（12／17）的肿瘤组织存在p16启动子区的异常高基甲基。在本研究中,82．4％（14／17）的肿瘤组织可以检测出一种或两种p16基因的异常改变。对此17例肿瘤标本进行的免疫组织化学分析显示,有13例P16蛋白表达阴性,其中92．3％（12／13）存在一种或两种p16基因的异常改变。免疫组化结果与p16基因分子遗传学改变情况基本吻合。结论：作为一种抑癌基因,p16在多种肿瘤组织中都有异常改变。我们的研究表明,p16基因失表达是非小细胞肺癌中较常见的事件;在这里,杂合性缺失和异常甲基化引起的基因表达沉默为其主要失活机制。     

人非小细胞肺癌组织p16基因缺失及突变的研究

目的　探讨人类非小细胞肺癌组织中p1 6基因缺失及突变情况及其与临床病理的关系。方法　应用控制模板DNA量的银染PCR SSCP技术检测 40例非小细胞肺癌手术切除标本中p1 6基因第 2外显子。结果　 40例中有 1 3例发生纯合缺失 ,3例发生突变 ,缺失及突变率为 40 %。其缺失及突变率与肺癌的临床分期有密切关系 (P <0 .0 5)。结论　p1 6基因的缺失及突变可能在非小细胞肺癌的发生、发展及转移中起重要作用。如