肌瓣对自体及异体气管移植段血液循环建立的促进作用

目的: 探讨采用肌瓣包裹促进自体及异体气管移植段重建血运的方法. 方法: 将30只杂种犬随机等分为3组,均切取颈部5环气管段作为移植段.A组:无肌瓣包裹自体移植组;B组:采用自体双侧胸骨舌骨肌-胸骨甲状肌联合肌瓣包裹组;C组:采用异体双侧胸骨舌骨肌-胸骨甲状肌联合肌瓣包裹组. 于术后1,2,4和8 wk处死动物取材,观察和比较实验动物的存活情况、移植体气管标本的大体和组织学改变,以及新生微血管密度(MVD)等指标. 结果: 无肌瓣包裹自体移植组不能维持管腔结构;自体肌瓣包裹组移植段血供良好,管腔通畅,狭窄程度轻,存在炎症反应. 异体肌瓣包裹组移植体血供尚可,炎症反应重,管腔狭窄,但仍可维持通畅. 结论: 移植体的狭窄现象与血供关系密切. 肌瓣包裹气管自体移植段能够诱导出新生血管,维持气管形态,移植的气管可以存活8 wk以上. 自体较异体移植段血供好,虽可维持气管通畅,但存在狭窄.     

骨形态发生蛋白诱导犬的自体及异体气管移植段软骨再生的比较

目的：将重组人骨形态发生蛋白—2(rhBMP—2)植入犬的自体及异体气管移植段内，促进新生软骨形成，比较rh—BMP—2在自体及异体气管移植段内诱导软骨再生的作用．方法：16只杂种犬随机等分为4组，颈部切去5环气管埋入腹腔大网膜中作为移植段．A．B组为自体移植．C．D组为异体移植，其中A，C组移植段植入rhBMP—2，B和D组移植段不植入任何物质作为对照。术后4wk处死动物，标本行大体及组织学观察．结果：4组移植段软骨环均有不同程度的软骨再生，且以A，C组再生更明显．结论：rhBMP—2可刺激气管移植段软骨再生，但在自体及异体移植段内的作用效果不同.     

不同时间段内骨形态发生蛋白诱导移植气管软骨再生

目的:研究不同时间段内骨形态发生蛋白诱导犬自体移植气管软骨再生的作用.方法:36只杂种犬,随机分为A,B两组,颈部切去5个气管环,A组气管环间植入重组人骨形态发生蛋白2/胶原复合物,B组为空白对照组,然后植入自体腹腔大网膜中.在术后1,2,3,5,9,12wk分别从两组中各取3例移植段气管行组织学检查和骨钙素(BGP)的放免测定.结果:rhBMP2植入区内软骨再生存在于移植后的各个时间段,且以术后2wk至5wk较为明显.两组标本BGP水平测定均随着时间的延长而增高,除术后1wk无显著性差异(P>0.05),其余各时间段两组差异均有显著性(P<0.05).结论:rhBMP2可诱导气管移植段软骨再生,但在不同时间段的作用效果不同.     

犬同种异体气管移植中骨形成蛋白-2对气管软骨碱性磷酸酶的影响

目的: 明确局部应用骨形成蛋白-2(BMP-2)对犬同种异体移植段气管碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.方法: 将西安地区健康雄性杂种犬40只随机平均分为实验组与对照组,两组间动物各取一6环颈段气管,交换后原位移植,应用犬双侧胸骨舌骨肌-胸骨甲状肌联合肌瓣包裹移植段气管提供良好血运,试验组在移植段气管环间注射BMP-2/I型胶原复合物,对照组仅注射I型胶原作为空白对照,术后2,4,8,12 wk分别处死实验动物,取移植段气管标本,观察其大体形态,HE染色观察软骨环的微观变化;改良钙-钴法测定移植段软骨组织中碱性磷酸酶的分布.结果: 术后4 wk后实验组移植段气管通畅度高于对照组(0.84±0.04, P<0.05); HE染色发现各个时间点两组移植段软骨细胞密度无显著性差异( P>0.05);应用图像分析软件计算切片染色阳性的像素面积,发现在术后8 wk及以前,试验组动物的碱性磷酸酶染色阳性面积比例明显高于对照组(0.29±0.02,P<0.05),术后12 wk两者的差别无统计学意义(P>0.05).结论: BMP-2可以提高移植段气管软骨碱性磷酸酶表达,增强气管软骨的钙化,维持移植段气管环状软骨形态及气管环的稳定,为临床应用同种异体气管移植解决大段气管缺失奠定基础.     

BMP诱导同种异体气管移植体的软骨再生

目的 :重组人骨形态发生蛋白 2 (rhBMP 2 )植入犬的同种异体气管移植体内诱导软骨再生 .方法 :1 4只犬 ,两两配对 ,随机分为A ,B 2组 .配对者两两交换移植体 ,异位移植(植入腹腔大网膜内 ) .移植体一端环间植入rhBMP 2 ,另一端做对照 .B组术后加服免疫抑制剂 .术后 4wk处死动物 ,标本行大体及组织学观察 .结果 :2组实验动物均于术后 4wk处死 .移植段气管植入rhBMP 2后新生软骨面积为 (pix el) 1 4 1 8.7± 5 1 2 .3,对照组为 2 78.2± 1 83.1 (P <0 .0 1 ) .应用免疫移植剂后 ,植入rhBMP 2组新生软骨面积 (pixel)增加为 1 936 .0± 6 0 9.8(P <0 .0 5 ) .结论 :rhBMP 2可刺激同种异体气管移植体软骨再生 ;免疫抑制剂的应用将会增强其作用效果 .     

骨形态发生蛋白质诱导犬的自体气管移植段软骨再生

目的：将重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）植入的犬的自体气管移植段内，促进新生软骨形成，克服移植后软骨软化吸收造成的移植段气管塌陷。方法：24只杂种犬随机等分为三组，颈部切除5个气管环段作为移植段。A组原位再植，外覆带蒂大网膜；B组移植段植入rhBMP-2后埋入腹腔大网膜中；C组移植段植入rhBMP-2后原位再植，外覆带蒂大网膜。以上rhBMP-2均以胶原溶液作为缓释载体，用注射器直接注入各环间。术后1、2、4、8周处死动物，标本行大体及组织学观察。结果：三组移植体软骨环均有不同程度的吸收。B、C组移植体的rhBMP-2植入区有软骨再生，且以B组再生更明显。结论：rhBMP-2可刺激气管移植段软骨再生；胶原可充当rhBMP-2的缓释载体，用于气管移植有良好的协助促软骨再生作用。     

深低温冷冻对rhBMP-2诱导犬气管移植体软骨再生的影响

目的: 研究应用重组人骨形态发生蛋白-2 (rhBMP-2)/胶原缓释系统诱导犬冷冻气管移植软骨再生的作用.方法: 将32只杂种犬随机等分为4组,行5个颈部气管环原位异体移植,带血管蒂大网膜包绕.A组为未冷冻组,气管环间植入rhBMP-2/胶原组标记为A1组,空白对照标记为A2组;B组术前将移植体气管经深低温液氮保存2 mo,处理同A组,分别标记为B1、B2两组.所有实验犬于术后8 wk处死,行大体及病理学检查,评测各组新生软骨面积. 结果: B组犬移植气管结构保持较好、狭窄程度低.4组均有软骨再生, B1组新生软骨面积1835.9(527.2)高于A1组1408.5(492.6)及B2组336.8(121.3),各组新生软骨面积差异有显著性(χ2 = 24.010 ,df=3 ,P <0.01).结论: 应用rhBMP-2可刺激冷冻气管移植体软骨再生,其刺激深低温冷冻犬气管移植体成骨效果优于未冷冻气管移植体.     

BMP诱导自体气管移植段软骨再生的量效关系

目的：将重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)植入犬的自体异位气管移植段内诱发新生软骨,寻求rhBMP-2在气管移植段内诱发软骨的量效关系及最佳的rhBMP-2用量．方法：8只杂种犬,颈部切取5环气管段作为移植段．移植段各环间软组织中植入不同含量的rhBMP-2后埋入自体的腹腔大网膜中．不同含量的rhBMP-2均以胶原为缓释载体．术后4wk处死动物取材,并行大体及组织学观察．结果：各组移植段固有软骨环均被轻度吸收．rhBMP-2植入组移植段环间均有不同程度的软骨再生,且各组新生软骨量随植入物中rh—BMP之含量的增加而增加．结论：rhBMP-2可刺激气管移植段软骨再生,且存在量效关系,以每环间植入5mg的rhBMP-2较为合适．     

重组人骨形态发生蛋白诱导气管软骨再生的剂量效应

目的:观察重组人骨形态发生蛋白(rhBMP) 2诱导犬自体原位气管移植段软骨再生过程中的剂量效应.方法:4组小鼠气 管移植段各环间软组织中植入rhBMP 2胶原缓释系统,其rhBMP 2含量分别为1,2,5和10mg.将移植段气管原位移植,4wk后 观察标本大体和组织学改变,并将测得的新生软骨面积进行比较.结果:rhBMP 2植入组移植段环间均有不同程度的软骨再生 随植入物中rhBMP 2含量的增加,新生软骨面积分别为:(1768.1±449.0),(2364.1±444.3),(3000.7±488.3),(3188.3± 388.3)pixel.4组新生软骨面积差异有显著性(F=5.246,P<0.01).结论:rhBMP-2诱导气管移植段软骨再生的作用具有剂 量效应.     

bFGF对rhBMP-2诱导犬气管损伤后软骨再生的作用

目的:研究应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导犬气管环部分缺损后软骨再生的可行性.方法:切除连续5个气管环前端的部分软骨,形成1 cm×3 cm的气管原位软骨缺损,建立犬气管软骨缺损模型.将18只犬随机分为A,B,C组,每组6只,A组为对照组,于软骨缺损处未行任何处理,B组于气管软骨缺损部位植入rhBMP-2/聚乙烯吡咯烷酮(PVP)复合材料,C组于气管软骨缺损部位植入rhBMP-2/bFGF/PVP复合材料.于术后12wk处死各实验犬,行大体及组织学检查,组织学半定量测定新生软骨情况.结果:A组气管软骨损伤残端出现气管软骨软化现象,气管管腔狭窄明显,软骨缺损处未见新生软骨生成;B,C两组气管软骨损伤部位残端未见气管软化,管腔狭窄不明显,软骨缺损处可见新生软骨及软骨岛生成,其中C组诱导新生软骨面积较B组更大(P<0.05).结论:rhBMP-2/PVP及rhBMP-2/bFGF/PVP缓释系统均可诱导气管软骨再生,rhBMP-2/bFGF/PVP缓释系统效果优于rh-BMP-2/PVP缓释系统.bFGF可能具有促进rhBMP-2诱导犬气管损伤后软骨再生的作用.     

胶原蛋白海绵复合BMP-2修复兔耳软骨缺损的实验研究

目的探讨以胶原蛋白海绵为载体,复合重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)植入兔耳软骨损体内诱导软骨膜再生软骨的效果。方法选用日本大耳白兔9只,随机将兔分为3组,分别完整去除1 cm×1cm软骨,完整保留软骨膜。A组植入胶原蛋白海绵组、B组植入含0.5mg/ml的rhBMP-2/胶原蛋白海绵复合物、C组不植入任何材料。术后4、8、12周分批处死动物,取材,去除软骨膜观察新生软骨情况、面积;通过HE染色、Masson染色和醛品红染色,观察标本中细胞浸润和分化生长情况、新生软骨情况和弹力纤维变化和生成情况。采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图像分析仪测定新生软骨的面积。结果组织学评分A组、B组和C组在各个时期均存在显著性差异,有统计学意义(P<0.01)。两个实验A、B组4、8、12周比较差异有统计学意义(P<0.01),同一时间点两实验组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。新生软骨面积,胶原蛋白海绵组、rhBMP-2/胶原蛋白海绵复合物组、空白对照组像素分别为1452±549.8、1962±524.4、1197±496.2。方差分析,三组结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论 rhBMP-2能促进促进软骨膜处的软骨再生。胶原蛋白海绵可作为rhBMP-2安全有效的载体,同时为软骨膜再生软骨提供条件,二者复合体的应用为软骨切取术后的修复软骨缺损提供了一种新方法。提示胶原蛋白海绵有利于软骨膜再生的作用。     

rhBMP2/TGF-β对β-磷酸三钙与骨髓基质细胞自体皮下成骨能力的影响

目的：观察rhBMP₂/TGF-β对β-磷酸三钙与骨髓基质细胞在自体皮下成骨能力的影响。方法：应用矿化条件培养液体外培养成年新西兰兔的骨髓基质细胞,收集细胞并以5×10⁶,·mL^-1浓度分成4组,A组加入rhBMP₂（15 μg）／TGF-β(30 ng) ,B组加入rhBMP₂（15 μg）,C组不加因子作为对照,然后将细胞接种在β-磷酸三钙上,体外培养3 d,D组细胞不接种材料上,继续体外培养。组织化学方法检测碱性磷酸酶。将复合物埋植于新西兰兔自体皮下。5周后常规HE染色、免疫组织化学染色并进行图像分析,观察Ⅰ型胶原、骨形成蛋白合成情况。结果：A、B组的碱性磷酸酶平均A值显著高于C、D组（P<0.01）;复合物植入皮下5周时HE染色见各组均有条索状骨基质形成, A、B组Ⅰ型胶原平均灰度值明显低于C组（P<0.01）,各组免疫组织化学检测及图像分析显示骨形成蛋白的表达差异无显著性（P>0.05）。结论：β-磷酸三钙与骨髓基质细胞在自体皮下能够形成骨组织,rhBMP₂/TGF -β较rhBMP₂有更强的促进骨形成作用。     

重组合冷冻同种异体皮质骨修复大段负重骨缺损的实验研究

目的 比较不同处理方式的深低温冷冻同种异体皮质骨修复兔大段负重骨缺损的效果，为临床大段负重骨缺损的重建提供新方法．方法 40只新西兰大白兔随机分为5组，造成左侧股骨中上段缺损2cm的模型，A组植入异体骨 rhBMP-2 ACS，B组植入异体骨 rhBMP-2，C组植入异体骨 ACS，D组单纯植入异体骨，E组植入自体骨。术后3、6、9、12周照X线片，观察骨愈合情况并测量骨痂形成面积。术后12周处死动物，对标本进行三点弯曲力学测试，检测新骨形成率、骨孔隙率。结果 A组在X线表现、骨痂形成面积、三点弯曲破坏负荷、新骨形成率及骨孔隙率等方面均优于B、C、D组，与E组相仿。结论 同种异体皮质骨、rhBMP-2和ACS复合移植既具有高效持续的骨诱导作用，又能提供足够的机械强度，是修复大段负重骨缺损的好方法。     

微骨折结合bFGF纤维蛋白胶复合物修复关节软骨缺损的实验研究

目的探讨微骨折结合碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor bFGF）与纤维蛋白胶复合物对关节软骨缺损的修复作用。方法选择健康成年新西兰大白兔24只,随机分为A实验组、B对照组、C对照组、D空白对照组,每组6只（12膝）,所有兔子均造成股骨髁间窝直径4mm全层软骨缺损。A实验组：软骨缺损区造成微骨折并注入1μg bFGF和0．1ml纤维蛋白胶的混合物;B组：软骨缺损区造成微骨折并注入0．1ml纤维蛋白胶;C组：软骨缺损区注入1μg bFGF和0．1ml纤维蛋白胶的混合物;D组：软骨缺损区注入0．1ml纤维蛋白胶;术后8、12周处死动物取标本每次每组3只（6膝）,大体观察膝关节活动度及修复组织与周边组织的结合情况,苏木素一伊红染色和甲苯胺蓝染色观察修复组织的形态。根据Wakitani评分标准测定各组不同时间点标本光镜组织学评分,进行统计学分析。结果术后8、12周大体观察与织学观察结果,实验组关节软骨缺损的再生修复均明显优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论微骨折和碱性成纤维细胞生长因子都有促进软骨修复的作用,两者结合起来对软骨再生具有更明显的促进作用。