柔肝煎冲剂防治大鼠免疫性肝纤维化的实验研究

有效地预防和治疗肝纤维化,是阻断或延缓慢性肝病向肝硬化发展的关键,黑龙江中医药大学附属一院消化内科在多年临床经验基础上,筛选研制成具有疏肝活血,健脾补肾功效的柔肝煎冲剂,并进行了临床和药理学研究,均取得了令人满意的结果,现对其进行专题报道。     

虎金丸对肝纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原,透明质酸及层？…

目的：观察虎金丸对肝纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原（ｐｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ Ⅲ,ＰＣⅢ）、透明质酸（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ,ＨＡ）及层粘蛋白（ｌａｍｉｎｉｎ,ＬＮ）的动态影响。方法：采用ＣＣｌ４所致肝纤维化动物模型,用放射法检测血清ＰＣⅢ、ＨＡ、ＬＮ。结果：虎金丸能显著降低各期模型大鼠血清中ＨＡ、ＬＮ的含量,与对照组比较有显著性差异（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）。长期疗效优于秋水仙碱组。能维持血     

鳖甲煎丸对大鼠肝纤维化过程中肝脏胶原及血清前胶原Ⅲ等影响的动态观察

鳖甲煎九天论对轻度或较重度肝纤维化均能明显减轻其CoI、CoⅢ、CoIV阳性程度,降低血清HA、LN、PcⅢ含量;改善血液循环,增加肝内循环血量,使肝内胶原纤维的降解增加;能直接抑制肝内胶原的沉积,从而减缓肝纤维化的发生。     

虎金丸对肝纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原、透明质酸及层粘蛋白作用的动态观察

目的：观察虎金丸对肝纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原（procollagenⅢ，PCⅢ）、透明质酸（hyaluronicacid，HA）及层粘蛋白（laminin，LN）的动态影响。方法：采用CCl4所致肝纤维化动物模型，用放免法检测血清PCⅢ、HA、LN。结果：虎金丸能显著降低各期模型大鼠血清中HA、LN的含量，与对照组比较有显著性差异（P＜0．05，P＜0．01）。长期疗效优于秋水仙碱组。能维持血清中PCⅢ的血清含量在肝纤维化期（9、12周）基本正常，与正常对照组比较无显著性差异（P＞0．05）。结论：虎金丸能延缓肝纤维化的形成，有较好的预防和治疗效果。     

柔肝抑纤饮对肝纤维化大鼠肝功能及I型胶原、Ⅲ型胶原水平的影响

目的：观察复方柔肝抑纤饮抗肝纤维化的疗效,并探讨其机制。方法：制备大鼠实验性肝纤维化模型。进行相应分组给予不同的处理,考察血清肝功能和肝纤维化指标,并对肝脏组织行免疫组化染色、Masson染色,结合图像定量分析等技术分析I型胶原（col—I）、Ⅲ型胶原（col-III）水平。结果：柔肝抑纤饮可明显改善大鼠肝纤维化,并使血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、透明质酸（HA）等指标降低,降低col—I、col—III水平,经统计分析有显著性差异。结论：柔肝抑纤饮具有抗脂质过氧化作用。降低了col-I、col-Ⅲ的抑制表达,可明显减轻大鼠肝脏内胶原纤维增生沉积,减少纤维化组织面积．减少了肝脏细胞外基质的产生和沉积。从而达到抗肝纤维化的作用。     

调脂积冲剂对肝纤维化大鼠HA PCⅢ及PDGF的影响

目的:采用复合因素建立大鼠肝纤维化模型,通过观察调脂积冲荆对实验大鼠的透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、血小板衍化生长因子(PDGF)、肝组织病理及部分肝功能生化指标的检测,探讨调脂积冲剂防治肝纤维化的有效性、可靠性,为进一步的研发提供理论依据.方法:将48只Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后,随机分成4组,即空白对照组、调脂积组、易善复组、模型对照组.采用CCl4合并高脂乳剂及酒精等复合因素建立大鼠肝纤维化模型,以易善复作对照,观察肝功能生化指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),血清HA、PCⅢ的含量及肝组织中PDGF含量及病理的改变.结果:模型组各项指标均高于正常组.调脂积冲剂组可减轻肝损伤和纤维化变性程度,显著降低血清中ALT、AST的含量,降低血清中HA、PCⅢ,减少机体对PDGF的释放.结论:调脂积冲剂防治肝纤雏化的作用机制为:降酶、护肝,促进肝功能恢复,降低血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶的含量.抑制细胞外间质中的胶原和蛋白多糖的生成,降低血清中HA、PcⅢ的含量.减少炎性介质的释放,降低肝组织中PDGF的产生.减轻肝细胞变性坏死,抑制汇管区和汇管区周围纤维化的形成.     

软肝煎对高脂饮食肝纤维化大鼠HA、LN、PCⅢ、CⅣ及病理的影响

[目的]探讨软肝煎对高脂饮食肝纤维化大鼠透明质酸(HA)、层连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)及病理的影响。[方法]高脂饮食确定肝纤维化模型成立后,分别对中药低剂量组和中药高剂量组以每日生药12.8 g/kg体质量和每日生药25.6 g/kg体质量行中药灌胃,模型组、正常组以生理盐水灌胃。治疗12周后处死,观察肝脏组织学改变;取血测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC);放射免疫法测血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平。[结果]两治疗组大鼠血清TC、ALT、AST明显低于模型组;模型组TG明显高于高剂量组。模型组大鼠血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ明显高于正常组及两治疗组。肝脏脂肪变性、炎症活动度、肝组织纤维化计分(SSS)结果均显示模型组与中药低剂量组无统计学差异;中药高剂量组低于模型组。[结论]软肝煎降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST、TC、TG、HA、LN、PCⅢ、CⅣ含量,保护肝细胞,改善肝功能,减轻肝脏炎症,抑制胶原合成,促进胶原降解,抑制了肝纤维化的发生、发展。     

HG颗粒对DMN肝纤维化大鼠血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白及羟脯氨酸含量的影响

目的:研究HG颗粒对肝纤维化(hepatic fibrosis)大鼠血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)及羟脯氨酸(Hyp)含量的影响。方法:用DMN腹腔注射建立肝纤维化大鼠模型,分别予HG颗粒、复方鳖甲软肝片灌胃治疗,对照观察药物对DMN肝纤维化模型大鼠血清HA、PCⅢ、LN及Hyp含量的影响。结果:肝纤维化模型大鼠血清HA、PCⅢ、LN及Hyp含量均明显增高。HG颗粒治疗后有明显缓解,综合疗效优于阳性药物对照组。结论:HG颗粒对DMN肝纤维化模型大鼠具有显著的治疗作用。     

调脂积冲剂对肝纤维化大鼠肝纤维化指标的影响

目的研究调脂积冲剂的抗肝纤维化作用并评价其疗效。方法清洁级Wister雄性大鼠48只,随机分为4组各12只,每日上午模型对照组、调脂积组、易善复组每只按1 ml/100 g体重灌服乳剂,正常对照组灌服等量蒸馏水,并每间隔2日按每只0.2 ml/100 g体重给模型对照组、调脂积组、易善复组腹腔注射25%四氯化碳(CCl4)油液1次,正常对照组注射等量0.9%氯化钠注射液。每日下午按1.5 ml/100 g体重给调脂积组、易善复组灌服调脂积药液,模型对照组和正常对照组灌服等量蒸馏水,连续8周。第8周末末次给药后禁食,应用放射免疫法测定大鼠血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ),光镜下行肝组织切片病理学观察。结果调脂积组可显著降低血清HA、PCⅢ[(141.52±3.81)ng/ml、(44.82±1.26)ng/ml],与易善复组[(143.04±12.37)ng/ml(、45.07±1.21)ng/ml]比较无显著性差异(P>0.05);光镜下显示调脂积组炎症活动度、肝纤维化程度较模型组轻(P<0.05),与易善复组比较无显著性差异(P>0.05)。结论调脂积冲剂具有良好的抗肝纤维化作用。     

肝纤克对大鼠肝纤维化的影响

目的研究肝纤克(GQK)对实验性大鼠肝纤维化的保护作用。方法以四氯化碳制备大鼠慢性肝纤维化模型,观察血清ALT,ALB,GLB含量;用放免法检测血清PC-Ⅲ,HA,LN,HYP含量以及肝组织中HYP含量,并计算出肝组织胶原含量。结果①GQK(0.5~1.0 g/kg.po)使肝纤维化大鼠血清ALT明显下降(n=10,P<0.01),ALB含量明显回升,A/G比值升高(n=10,P<0.05),提示GQK对肝纤维化大鼠的肝功能有保护伤作用;②GQK使肝纤维化大鼠血清HYP明显下降(n=10,P<0.05),肝组织HYP含量以及肝组织胶原含量也明显下降(n=10,P<0.01);③GQK使肝纤维化大鼠血清PC-Ⅲ,HA及LN均明显下降(n=10,P<0.01),提示GQK结四氯化碳致大鼠肝纤维化的过程有抑制作用。结论GQK对实验性大鼠肝纤维化有明显的保护作用。     

柔肝冲剂抗肝纤维化的临床研究

为观察柔肝冲剂抗肝纤维化的作用,62例慢性乙肝患者以柔肝冲剂(黄芪、丹参、郁金等组成)治疗6个月.结果症状与体征有较大的改善;血清肝功能指标ALT、AST、GGT、SB下降非常显著(P＜0.01),AKP、G也有明显下降(P＜0.05);B超显示,肝脏大小、门静脉、脾静脉、脾厚等指标均有一定程度的改善;血清HA、CⅣ、PⅢNP、AGA与肝纤维化呈正相关关系,而LN、APoAI、TRF与肝纤维化呈负相关关系.病毒学观察显示可能有一定抑制病毒复制的作用;病理观察结果显示有一定的抗炎、抗肝纤维化作用.表明柔肝冲剂具有较明显的抗肝纤维化的作用.     

柔肝煎对慢性乙型肝炎肝纤维化患者肝功能及血清肝纤维化指标的影响

目的:探讨柔肝煎治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效.方法:选择确诊为慢性乙型肝炎肝纤维化患者60例,随机分为2组.治疗组予以柔肝煎合甘草酸二铵注射液治疗,对照组单用甘草酸二铵注射液治疗.2组均治疗3个月后进行临床疗效评价.结果:治疗组在肝功能指标(ALT、AST、TBIL、ALB)、血清肝纤维化指标(HA、LN、PIIIP、IV-C)方面均明显优于对照组(P＜0.01,或P＜0.05).结论:柔肝煎能够改善慢性乙型肝炎肝纤维化患者肝功能,降低血清肝纤维化指标.     

针灸、穴位注射对肝纤维化大鼠肝组织Ⅲ型胶原影响的研究

目的 从针灸，穴位注射对肝纤维化大鼠肝组织Ⅲ型胶原影响角度探讨针灸，穴位注射抗肝纤维化的作用及机制。方法 用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型，以秋水仙碱为对照，观察针灸，穴位注射对大鼠肝组织Ⅲ型胶原的影响。结果 与模型组相比，针灸，穴位注射组大鼠肝组织Ⅲ型胶原明显减少。结论 针灸，穴位注射防治肝纤维化作用机制与针灸，穴位注射减少胶原沉积有关。     

加昧四逆散对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ，Ⅲ型胶原mRNA影响的研究

目的观察加味四逆散对肝组织Ⅰ，Ⅲ型胶原mRNA影响，探讨其抗肝纤维化的药理机制和作用。方法采用二甲基亚硝胺腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型，加味四逆散灌胃给药，采用实时定量PCR技术检测各组大鼠肝组织Ⅰ，Ⅲ型胶原mRNA表达的水平。结果加味四逆散能明显降低肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ，Ⅲ型胶原的含量，与病理模型组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论加味四逆散可有效的减少肝组织Ⅰ，Ⅲ型胶原的生成，对肝纤维化有肯定的治疗作用。     

肝复康对实验性大鼠肝纤维化肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响

目的研究肝复康对实验性大鼠肝纤维化的肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及其比值的影响.方法采用四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型,于造模60 d后给予肝复康治疗3个月,以秋水仙碱及肝脾康为对照药.检测肝组织羟脯氨酸含量,苦味酸天狼星红染色法偏振光显微镜显示肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原,并结合图像分析计算Ⅰ、Ⅲ型胶原面积及面积比.结果肝复康治疗后肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量较模型对照组明显减少,Ⅰ型胶原面积明显降低(P《0.01),Ⅲ型胶原面积明显降低(P《0.01),Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的比值明显降低(P《0.01).结论肝复康可明显降低肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,降低Ⅰ、Ⅲ型胶原含量比,使细胞外基质的成分趋于正常.     

肝舒康冲剂对肝纤维化大鼠肝细胞DNA及胶原合成影响的实验研究

1 材料与方法1.1 材料 Wistar大鼠,体重200±20g,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供,模型大鼠采用二甲基亚硝胺(DMN)造模。F_(12)培养液与DMEM培养液为美国Sigma公司产品,~3H—胸腺嘧啶(~3H—TdR)与~3H—脯氨酸(~3H—hyP)为上海原子能研究所产品。1.2 血清药物制备 将200±20g正常Wistar大鼠12只分为两组,分别灌服肝舒康冲剂(黑龙江中医药大学制剂室提供)与生理盐水,连续2d,然后行无菌门静脉采血,分离血清,于-20℃冰冻备用,分别为治疗血清和对照血清。     

加味四逆散对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA影响的研究

目的观察加味四逆散对肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA影响,探讨其抗肝纤维化的药理机制和作用。方法采用二甲基亚硝胺腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,加味四逆散灌胃给药,采用实时定量PCR技术检测各组大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA表达的水平。结果加味四逆散能明显降低肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原的含量,与病理模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论加味四逆散可有效的减少肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原的生成,对肝纤维化有肯定的治疗作用。     

化纤胶囊对特发性肺间质纤维化患者血清Ⅲ、Ⅳ型胶原及透明质酸的影响

目的：观察特发性肺间质纤维化患者血清Ⅲ型胶原、Ⅳ型胶原及透明质酸含量的变化及化纤胶囊对其的影响。方法：将40例特发性肺间质纤维化患者,随机分为中药组和西药组,中药组给予化纤胶囊加小剂量激素进行治疗,西药组给予单纯激素进行治疗,用放射免疫法测定患者的Ⅲ型胶原（Ⅲ一C）、Ⅳ型胶原（Ⅳ—C）、透明质酸（HA）的含量,同时选择15例健康非吸烟者作为健康对照组。结果：两组治疗前后进行比较,血清Ⅲ-C、Ⅳ-C、HA的水平均明显降低（P〈0．05或P〈0．01）,中药组和西药组比较,各指标组间差值无明显差异（P〉0．05）,两组治疗前血清Ⅲ-C、Ⅳ-C、HA的水平均明显高于健康对照组（P〈0．01）。结论：特发性肺间质纤维化患者血清Ⅲ-C、Ⅳ-C、HA含量明显增高,化纤胶囊加小剂量激素可明显降低特发性肺间质纤维化患者血清Ⅲ-C、Ⅳ-C、HA的水平,疗效与大剂量激素治疗相近。     

柔肝煎冲剂治疗肝炎后肝硬化的临床研究

补肾健脾,疏肝活血复方——柔肝煎剂是在总结名老中医治疗肝病的经验基础上结合现代药理学研究经临床进一步筛选,而成的复方中药制剂,经临床多年应用,疗效显著。现将其治疗肝炎后肝硬化疗效观察报告如下。1 一般资料 1994～1996—2本院住院的67例肝炎后肝硬化病人,诊断均符合1990年上海会议修订的诊断标准。随机分成治疗组35例,年龄28～50岁,男26例,女9例;对照组32例,年龄29～51岁,男23例,     

电针对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的 探讨电针对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响.方法 Wistar大鼠随机分为4组(电针治疗组、药物治疗组、模型对照组和正常对照组),应用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,电针治疗组采用电针肝俞、足三里治疗,药物治疗组采用秋水仙碱治疗.应用Masson染色观察肝组织胶原纤维增生情况,采用实时荧光定量PCR技术检测肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的变化.结果 与正常对照组比较,模型对照组大鼠肝组织胶原增生,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均明显增加(均P<0.01);与模型对照组比较,电针治疗组大鼠肝组织胶原面积明显减少,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均明显降低(均P<0.01).结论 电针肝俞、足三里能够下调肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达,该作用可能是其抗肝纤维化的重要分子机制.