改良的高效液相色谱法测定尿中1-羟基芘

改进并规范了尿中 1 羟基芘的碱水解 -高效液相色谱分析方法。尿样经碱水解、二氯甲烷提取后 ,用反相柱分离 ,荧光检测器检测。内标标准曲线法定量。标准曲线线性范围 10～ 50 0 μg L。尿样加标的检出限 (三倍噪声 )为 0 0 1ng ,定量限为 1 0 μg L尿。高、低两个浓度下的回收率分别为 99 5%和 94 0 % ;天内精密度为 5 8%和 6 2 % (RSD) ;天间精密度为 7 7%和 8 9% (RSD)。该方法可用于测定接触多环芳烃人群的尿中 1 羟基芘 ,具有快速简便、准确可靠的特点     

南方某市儿童尿中1-羟基芘水平检测

目的 探讨中国南方某市<6岁儿童尿液中1-羟基芘的暴露水平。方法 采集某幼儿园80名4～6岁儿童晨尿,尿液经过酶解、固相萃取(SPE)富集、净化,采用高效液相色谱-荧光检测器检测1-羟基芘含量。结果 在所有样品中均检测出1-羟基芘,浓度范围0.10～1.64μmol/mol肌酐,浓度中位数为0.38μmol/mol肌酐;儿童尿液中1-羟基芘浓度水平不仅均高于国内背景人群,也高于国外儿童,其中>75%儿童尿液中1-羟基芘的浓度高于一般人群暴露限值;该人群体内多环芳烃(PAHs)来源和暴露途径复杂。结论 南方某市<6岁儿童可能处于较高PAHs暴露风险。     

尿液中1-羟基芘的高效液相色谱紫外检测器测定

目的 建立在带有紫外检测器的高效液相色谱仪上测定尿中1-羟基芘的方法.方法 用ZORBAX ExtendC18液相色谱柱(150 mm×4.6 mm i.d,5μm),以60%A泵(100%甲醇)和40%C泵(60%水+40%甲醇)组成流动相,等浓度洗脱,在流速0.8 ml/min、波长240nm下进行检测.结果 方法检出限为0.0014μg/L,在1～200μg内呈良好线性关系,线性回归方程为Y=1.738 3X-0.106 73,相关系数r为0.999 9,加标回收率为95.8%.结论 该方法可用于测定接触多环芳烃人群的尿液中1-羟基芘含量,具有快速简便、准确可靠的特点.     

碱水解高效液相色谱法测定尿中1—羟基芘

多环芳烃(PAH)广泛存在于生活和工作场所,内含多种强致物。流行病学研究结果表明PAH与众多职业肿瘤有关,也是造成近年来城市居民尤其是吸烟人群肺癌发病率上升的重要因素。准确监测人体接触PAH水平可为环境治理及及疾病预防提供依据,在这方面,生物监测的价值正受到重视。先期提出的PAH生物监测     

高效液相色谱法测定尿样中的1-羟基芘

目的建立尿样中1-羟基芘的高效液相色谱法(HPLC)测定方法。方法样品经酶避光水解后,通过C18固相萃取小柱,甲醇洗脱后,使用反相C18柱分离,液相色谱-荧光器检测器检测。以乙腈∶水=75∶25为流动相,流速为0.8mL/min,荧光检测器λex=275nm,λem=430nm。结果在给定浓度范围内1-羟基芘的峰面积与浓度有良好的线形关系,r=0.9997,添加一定浓度的1-羟基芘标准品测定其加标回收率为100%～126%,相对标准偏差为4.61%(n=6)。结论该方法可以快速的测定尿样中痕量的1-羟基芘,具有操作简便、快捷,回收率高,重现性好等特点。     

尿中1—羟基芘测定方法的研究

对尿中１－羟基芘（１－ＯＨ芘）的测定方法进行了研究与改进。采用ＰＴ－Ｃ１８小柱对水解后的尿样富集，再以甲醇洗脱，减压浓缩后通过反相就压液相色谱（ＨＰＬＣ）分离，荧光分光光度法测定。１－ＯＨ芘检出限为０．０５ｎｇ，方法回收率可达９７．６％－９８．８％，测定结果用尿比重法校正。     

人尿中多环芳烃代谢物的液相色谱-质谱测定法

目的 建立用于检测尿液中痕量多环芳烃(PAHs)代谢产物[1-羟基萘酚(1-N)、2-羟基萘酚(2-N)、2-羟基芴(2-F)、1-羟基芘(1-P)]的高灵敏度的液相色谱-串联质谱联用分析方法.方法 尿液经β-葡糖苷酸酶水解、固相萃取处理后,用高效液相色谱-串联质谱联用仪分析.结果 尿液中4种PAHs代谢产物在1～100 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,线性相关系数r均大于0.99;加标回收率80.8%～122.7%;2-F的最低检出浓度为1 μg/L,1-N、2-N、1-P的最低检出浓度为0.5 μg/L;日间精密度为9.59%～21.35%,日内精密度为3.28%～12.34%.结论 该方法回收率稳定、重现性好、检出限低,可以检测人体尿液中PAHs代谢产物的含量.     

液相色谱-质谱/质谱联用技术分析18种游离氨基酸

目的：建立氨基酸的液相色谱-质谱检测方法。方法：无需衍生处理，直接用乙腈：水：甲酸（5：95：0．1．v／v／v）为流动相进行反相液相色谱分离，用电喷雾正离子源进行离子化，选择反应监测方式（SRM）对这18种氨基酸的母离子及子离子进行监测，三级四极质谱测定。结果：该方法抗干扰能力强，方法重现性好，RSD0．4％。3．7％，回收率95％～104％，相关系数0．9931-0．9999，检出限0．5～8mol／ml。结论：该方法简单、快速、准确、灵敏，适合测定各种样品中的游离氨基酸。     

液相色谱-质谱/质谱联用技术及其应用

1　引言近年来液相色谱一质谱联用技术的应用进展随着接口技术进展成为热门的研究应用领域 ,特别是液相色谱与串联质谱 (MS/MS)的联用得到了极大的重视和发展。自 195 7年首次实现气相色谱 (GC)和质谱仪 (MS)联用以来 ,气相色谱 -质谱联用 (GC—MS)技术已经得到迅速的发展及广泛应用 ;然而实际分析中 ,只有 2 0 %左右的样品可以通过GC—MS进行分析 ,绝大多数化合物由于具有极性大、低挥发度、高分子量或热不稳定性等特点 ,不能够采用这一方法进行分析。这些物质的分离需要采用液相色谱 (LC)才能够完成 ,因此 ,LC和质谱的联用被研究…     

尿中多环芳烃单羟基代谢产物的液相色谱-质谱测定方法研究

目的建立同时测定尿液中萘、菲和芘的单羟基代谢产物1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘等的液相色谱-质谱检测方法。方法尿液样品经酶水解后,利用液液萃取进行净化提取,吹氮定容后进液相色谱质谱仪进行分析,利用内标标准曲线法对目标化合物进行定量。结果利用内标法进行定量分析,提高了方法的重现性和精密度,4种目标化合物的回收率在89.7%～103.0%范围内,批内和批间精密度分别在1.0%～4.2%和1.8%～5.8%范围内;1-羟基萘、2-羟基萘和1-羟基芘的检出限为0.2μg/L,3-羟基菲的检出限为0.1μg/L。结论液相色谱-质谱法灵敏度高,重现性和回收率好,适用于正常人群和多环芳烃暴露人群尿中1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘等多环芳烃代谢产物的检测。     

蜂蜜中4种氟喹诺酮残留的高效液相色谱-质谱测定

目的:建立蜂蜜中氧氟沙星、恩诺沙星、双氟沙星、沙拉沙星4种氟喹诺酮残留的高效液相色谱-质谱联用检测方法。方法:样品经磷酸盐缓冲液稀释、溶解后,用Waters Oasis MAX小柱进行净化、提取,Cloversil-C18柱(150 mm×4.6 mm×5μm)分离;流速:0.5 ml/min;柱温:30℃;流动相:乙腈/0.05%三氟乙酸(25/75,v/v);通过电喷雾电离离子化在选择离子监测(SIM)模式下测定,氧氟沙星、恩诺沙星、双氟沙星、沙拉沙星定量分析离子m/z:362.0[M+H]+、360.1[M+H]+、400.0[M+H]+和386.0[M+H]+,外标法定量。结果:在0.50~100.0μg/kg范围内4种目标化合物均呈良好的线性关系,平均回收率大于95.3%,RSD均小于3.5%,检出限为0.5μg/kg。结论:本法简便、灵敏、重现性好、特异性强,是蜂蜜中4种氟喹诺酮残留检测的有效方法。     

液相色谱串联质谱法同时检测饮用水中8种氨基甲酸酯类农药的方法学研究

目的:建立自来水中8种氨基甲酸酯农药(仲丁威,异丙威,速灭威,甲萘威,灭多威,残杀威,苯氧威,猛杀威)的液相色谱-串联质谱分析方法。方法:水样在离心或液液萃取后通过C18色谱柱,以含0.2%的甲酸的甲醇和0.2%的甲酸溶液进行梯度洗脱,采用电离喷雾电离方式(ESI ),通过多反应监测(MRM)定量。结果:在20 m in完成分析,离心处理后8种农药在0.05~5μg/m l浓度范围内线性相关系数>0.9973。加标回收率为96.67%~111.52%(添加水平分别为0.1,1和5μg/m l),相对标准偏差5.4%~14.2%,最低检出限介于0.02~0.03μg/m l。对0.1μg/L的加标样在液液萃取后回收率在75.5%~128.3%,相对标准差4.7%~31.5%。结论:本法灵敏度高,选择性强,分析时间短,适合于对水中该8种氨基甲酸酯类的分析。     

LC-MS/MS法同时测定消毒产品中6种抗生素残留

目的建立同时测定消毒产品中甲硝唑、盐酸金霉素、土霉素二水合物、盐酸米诺环素、红霉素及盐酸四环素的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。方法样品经甲醇超声提取,0.45μm聚四氟乙烯膜过滤后,选择WatersSymmetryC18(2.1mm×150mm,3.5μm)为分析柱,5mmol/L乙酸铵缓冲溶液、甲醇和乙腈为流动相,用LC-MS/MS正离子扫描多反应监测模式检测。结果上述6种抗生素在0～2000ng/ml范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998,回收率为74.7%～114%,相对标准偏差为1.6%～20.2%。该法成功用于115件皮肤、黏膜使用的膏霜剂型抗(抑)菌制剂消毒产品中抗生素残留量的检测。结论该法操作简单,灵敏度高,选择性强,可用于膏霜剂型消毒产品中抗生素残留量的测定。     

尿液中杀它仗的高效液相色谱-串联质谱测定研究

目的建立尿液中测定杀它仗的高效液相色谱-串联质谱联用检测方法.方法尿液酸化后经固相萃取浓缩、净化,采用XDB C18柱(150 mm×2.1 mm i.d.,5 μm);流速0.5 ml/min;柱温30℃;流动相甲醇+0.2%乙酸(88+12);通过电喷雾电离离子化在多离子反应监测技术(MRM)模式下测定.结果在0.002～0.5 mg/L范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.5%,其批内精密度小于6.0%,批间精密度小于6.5%,定量检出限为0.087 ng.结论本方法简便、灵敏、重现性好、专属性强,能满足杀它仗中毒病人的诊断要求.     

液相色谱-质谱/质谱法测定尿中11种邻苯二甲酸酯代谢物

目的建立同时测定尿中11种邻苯二甲酸酯代谢物的液相色谱-质谱/质谱的方法。方法尿样中邻苯二甲酸酯代谢物经葡萄糖苷酸酶水解后,采用瓦里安NEXUS固相萃取柱富集,甲醇/乙腈(1∶1,V/V)洗脱后,经Waters XTerraphenyl分离,在负电离模式下用串联质谱仪定性定量分析。结果 11种邻苯二甲酸酯代谢物的方法检出限为0.13～2.27ng/ml,两个水平的加标回收率在67%～108%,相对标准偏差均小于12%。结论该方法测定尿中11种邻苯二甲酸酯代谢物方法准确可靠,灵敏度高。     

液质联用测定猪肌肉组织中的克伦特罗

目的：建立液质联用法测定猪肌肉组织中克伦特罗的方法。方法：采用0．2mol／L高氯酸溶液水解样品，碱化后乙醚提取克伦特罗，选用Waters Atlantis^TM C18色谱柱，流动相甲醇-0．1％甲酸（30：70），通过质谱对样品进行确证。结果：盐酸克伦特罗的线性范围为2．5～50ng／ml，绝对线性方程Y=0．0394X＋0．0283（r=0．9997），相对线性方程Y=0．0414X-0．0275（r=0．9993）；方法的绝对回收率为66．4％（25ng／ml）和60．1％（5ng／ml）；相对回收率为100．9％（25ng／ml）和100．3％（5ng／ml）；方法的最低检出限为1．0μg盐酸克伦特罗／kg猪肉。结论：本法操作简便，结果准确，可用于猪肌肉组织中克伦特罗的含量测定。     

适用于代谢组学研究的人体尿液保存与气相色谱-质谱联用分析方法

目的 建立适用于代谢组学研究的人体尿液保存方法及其代谢物气相色谱-质谱(GC-MS)联用分析方法.方法 向尿样中分别加入1％ HNO3、1％ HCl、2％抗坏血酸作为保存剂,并设空白对照,置于-80℃保存0、5、39 d后连续3次反复冻融,每次取样100μl,加入20 g/L尿素酶50μl,于37℃酶解2h,加入去氧保护剂甲氧基胺盐处理后,再加入衍生剂(MSTFA)于37℃反应过夜,取上清液进行GC-MS测定,并以马尿酸为指标测定方法学参数.结果 以原尿在-80℃保存,在39 d内测得所选8个不同保留时间色谱峰面积的RSD均小于10％.以马尿酸为指标,在0.005～1.75 g/L的线性范围内,所得线性方程为y=0.127 4x+0.473 8,r=0.999 2;该方法的检出限为1.26 mg/L,加标回收率为75％～125％,RSD为1.1％～8.5％.对22名膳食镉暴露人群与12名对照人群尿样进行检测发现,两组人群尿液中代谢产物的种类和含量均有较大变化.结论 该方法具有尿样稳定性良好,尿液分析方法学参数优良的优点,适用于膳食重金属暴露人群尿样中内源性代谢物的检测.     

高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用测定尿中河豚毒素的研究

目的 建立一种高效液相色谱-质谱联用快速检测尿样中河豚毒素(TTX)的方法.方法 采用以HLB为填料的固相萃取小柱对尿样进行预处理,以ZORBAX C18(100.0 mm×2.1 mm,直径3.5 μm)为色谱分析柱;体积分数为0.1%乙酸-水溶液:乙腈(35:65,V/V)为流动相;流速0.2 ml/min;紫外检测波长为200 nm.柱温25℃;质谱采用电喷雾离子源,以正离子模式进行定性定检测.结果 讨论了不同色谱、质谱参数下TTX分子离子,其碎片离子的响应值,特征离子峰及其子离子的断裂规律,方法采用TTX分子的二级碎片子离子(m/z 301.6)进行定性、定量.通过尿样中TTX的检测,该方法在0.5～100.0μg/L范围内有良好的线性关系,相关系数(r)>0.99,方法的回收率为65.4%～84.4%,相对标准偏差(RSD)=8.6%(n=5),方法检出限为0.1μg/L(按照3倍信噪比计算).结论 方法应用于尿样中加标检测,结果较满意,可为TTX中毒的快速定性、定量分析提供一种有效的手段,具有一定的临床诊断意义.     

人尿中9种单羟基多环芳烃的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱同时测定法

目的建立同时测定尿中9种单羟基多环芳烃(OH-PAHs,即1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基芴、3-羟基菲、1-羟基芘、3-羟基■、6-羟基■、3-羟基苯并蒽和9-羟基苯并芘)的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱(SPE-UPLC-MS/MS)法。方法将10 ml尿样经酶水解、C18固相萃取柱(500 mg,3 ml)提取富集后,用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1×100 mm,1.7μm)分离,在三重四级杆串联质谱负离子模式下检测,以内标法定量分析。结果尿中9种目标化合物在0.102~40 ng/ml范围内均呈良好的线性关系(r0.999),检出限(S/N=3)为0.01~0.32 ng/ml,样品在1.6、4.0、10 ng/ml浓度水平的平均加标回收率为91.5%~128%,相对标准偏差(RSD)15%。结论该方法用时短,灵敏度高,准确度好,精密度高,适合人群尿中多环芳烃代谢物的监测。