钠/碘转运体与甲状腺疾病

钠/碘转运体（NIS）是一种膜蛋白,在甲状腺细胞摄碘中起重要作用。此蛋白受多种因素的调控,与其他甲状腺自身抗原关系密切。NIS在某些甲状腺疾病的发病及治疗中起重要作用,成为目前研究的热点。     

干扰素-酌对甲状腺细胞钠/碘转运体基因调控的研究

目的:研究干扰素-酌(IFN鄄酌)对甲状腺滤泡细胞膜上钠/碘转运体(NIS)基因表达的影响,探讨细胞因子在甲状腺生理功能调控和甲状腺疾病发病机制中的作用和地位。方法:取Graves病(GD)患者的甲状腺组织,进行甲状腺细胞原代培养,培养5天后,吸去培养液,换用含不同浓度IFN鄄酌的试验液,与单层培养的滤泡上皮细胞共同孵育48h,运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)技术检测钠碘转运体(NIS)mRNA表达的变化。结果:IFN鄄酌浓度在0、1U/ml时,GD甲状腺滤泡上皮细胞膜上NISmRNA表达无明显差异;IFN鄄酌浓度在10、100U/ml时,NIS基因表达比前一浓度时明显受抑制(P<0.05);IFN鄄酌浓度为1000U/ml时,NIS基因表达量与前一浓度比较无统计学差别。结论:IFN鄄酌可抑制甲状腺滤泡细胞基膜上NIS基因的表达,提示细胞因子在甲状腺生理功能调控和甲状腺疾病发病机制中发挥重要作用。     

先天性甲状腺功能减退症与人钠/碘转运体的研究进展

先天性甲状腺功能减退症(congenital hypothyroidism CH)是新生儿常见的内分泌疾病，患病率为1：3000～1：4000，男女比例为1：2。碘转运障碍(ITD)是引起CH的一种重要病因，它是由于钠／碘协同转运体基因突变导致甲状腺主动浓聚碘的功能缺陷所致。人NIS(Na^ ／I^- -symporter)基因突变与CH之间的关系已成为目前研究的热点问题。本文就NIS与CH的关系作如下综述。     

皮质醇对TSH调节猪甲状腺细胞钠/碘转运体的影响作用

目的研究皮质醇在促甲状腺激素（TSH）调节甲状腺细胞功能中的作用。方法采用细胞原代培养技术，检测不同浓度皮质醇（HC）对TSH刺激的甲状腺细胞摄碘能力和Na^＋-K^＋-ATP酶活力的影响。结果皮质醇在10—500nmo]／L浓度时可促进1U／L的TSH刺激的甲状腺细胞对碘的摄取，增强Na^＋-K^＋-ATP酶的活力，且成剂量依赖性；但当皮质醇的浓度达到一定范围（1000nmo]／L），其对TSH效应的促进作用不再随着浓度的升高而增强。结论皮质醇与TSH对甲状腺细胞钠／碘转运体（NIS）功能具有协同促进作用。     

甲状腺组织中钠/碘转运体基因表达的研究

甲状腺钠／碘转运体（ＮＩＳ）是一种糖化膜蛋白，主要表达于甲状腺细胞基底外侧膜，属于钠／葡萄糖共转体家族，其主要功能是转运细胞外碘进入细胞内，使细胞内碘浓度高于细胞外碘浓度达２０～４０倍。细胞转运碘需要Ｎａ＋＋－Ｋ＋＋－ＡＴＰ酶提供能量，借助于Ｎａ＋＋－Ｋ＋＋交换而产生的细胞内外Ｎａ＋＋浓度梯度，碘可与Ｎａ＋＋偶联转运进入甲状腺细胞，因此，甲状腺细胞摄入碘必须依赖ＮＩＳ。另一方面，ＮＩＳ又是继Ｔｇ、ＴＰＯ和ＴＳＨ受体后发现的又一甲状腺自身抗原，它作为一种抗原，在机体内不同程度地存在着相应的抗体。许…     

人钠/碘同向转运体基因转染肺癌A549细胞介导放射性碘摄取实验研究

目的:研究重组人钠/碘同向转运体基因(hNIS)腺病毒介导肺癌A549细胞的碘摄取、外流和杀伤情况,为放射性碘治疗肺癌提供理论和实验依据。方法:用重组hNIS腺病毒(AdNIS)感染肺癌A549细胞,检测感染细胞内hNIS蛋白的表达;在体外培养的条件下研究其125I的摄取、外流情况以及131I的杀伤情况。结果:hNIS蛋白在实验组肺癌A549细胞中表达阳性且主要分布于细胞膜上;实验组细胞摄碘能力较对照组高;细胞摄碘后碘外流过程十分迅速;实验组细胞可被131I有效杀伤。结论:应用腺病毒为载体,可以有效的将hNIS基因转染至体外培养的肺癌A549细胞中,并介导肺癌细胞对放射性碘的摄取及选择性杀伤作用。     

干扰素-γ对甲状腺细胞钠/碘转运体基因调控的研究

目的研究干扰素-γ(IFN-γ)对甲状腺滤泡细胞膜上钠/碘转运体(NIS)基因表达的影响,探讨细胞因子在甲状腺生理功能调控和甲状腺疾病发病机制中的作用和地位.方法取Graves病(GD)患者的甲状腺组织,进行甲状腺细胞原代培养,培养5天后,吸去培养液,换用含不同浓度IFN-γ的试验液,与单层培养的滤泡上皮细胞共同孵育48 h,运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测钠碘转运体(NIS)mRNA表达的变化.结果IFN-γ浓度在0、1 U/ml时,GD甲状腺滤泡上皮细胞膜上NIS mRNA表达无明显差异;IFN-γ浓度在10、100U/ml时,NIS基因表达比前一浓度时明显受抑制(P＜0.05);IFN-γ浓度为1000U/ml时,NIS基因表达量与前一浓度比较无统计学差别.结论IFN-γ可抑制甲状腺滤泡细胞基膜上NIS基因的表达,提示细胞因子在甲状腺生理功能调控和甲状腺疾病发病机制中发挥重要作用.     

甲状腺组织中钠/碘转运体基因表达的研究

目的：研究各种病理甲状腺组织中钠／碘转运体（NIS）基因的表达情况，探讨NIS与甲状腺疾病之间的关系。方法：甲状腺组织取自3例Graves病（GD）患者，2例桥本甲状腺炎（HT），2例甲状腺乳头状癌（TC），2例癌旁正常甲状腺组织，运用半定量逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测NIS mRNA的表达情况。结果：癌旁正常甲状腺组织表达NIS mRNA,GD甲状腺组织NIS基因表达量明显增多（P＜0．05）；HT组织中，1例NIS mRNA表达量减少，1例不表达；甲状腺癌组织不表达NIS基因。结论：不同病理甲状腺组织中NIS基因表达存在一定变化，NIS可能参与自身免疫性甲状腺疾病及甲状腺癌的发病机理。     

高碘、钠碘转运体及甲状腺肿瘤的关系

近年,国内外学者相继提出甲状腺结节性疾病发病率呈逐年增高趋势,以结节性甲状腺肿、甲状腺癌为甚。钠碘转运体（ sodium iodide symporter ,NIS）作为机体的“碘泵”,是甲状腺激素合成的必需原料-碘的运输载体,与甲状腺肿瘤的发生相关。碘营养与甲状腺结节性疾病的关系也是近年的研究热点。本文就高碘、NIS及甲状腺肿瘤3者的关系做一综述。     

人甲状腺钠/碘转运体基因全长的克隆及其重组表达质粒的构建

目的:利用基因工程的方法制备甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)cDNA,为今后的转基因治疗奠定物质基础。方法:采用TRIzol一步法,从甲状腺组织中提取总RNA,再应用RT-PCR扩增出hNIS基因全长,然后采用TOPO克隆技术构建重组表达质粒pcDNA3.1D/FLhNIS,并进行酶切和测序鉴定。结果:成功制备了hNIScDNA并构建了其重组表达质粒。结论:为最终实现131I治疗不摄碘的肿瘤提供了分子生物学基础。     

MUC1启动子驱动人钠/碘共转运体基因靶向表达于胰腺癌细胞的研究

目的克隆人Mucin1（MUC1）黏蛋白的启动子序列,并研究其驱动人钠／碘共转运体（hNIS）基因在胰腺癌细胞内的靶向性表达功能。方法利用巢式PCR方法从人胰腺癌细胞株CAPAN-U细胞中扩增出MUC1启动子。采用基因重组方法构建质粒pDC316-MUC1／hNIS。采用脂质体转染的方法把pDC316-MUC1／hNIS导人到MUC1阳性的人胰腺癌细胞株CAPAN-U、PANC-1和MUC1阴性的人宫颈癌细胞株HeLa,转染后48h采用RT-PCR方法及免疫组化方法检测转染细胞内的hNIS mRNA水平和蛋白表达,转染48h后检测肿瘤细胞内NIS对125碘吸收功能。结果扩增的MUC1启动子核心调控区序列与参考序列一致。重组pDC316-MUC1／hNIS转染后48h,hNIS蛋白在CAPAN-U、PANC-1细胞阳性表达,而在Hela细胞内不表达。pDC316．MUC1／hNIS转染后仅在CAPAN-U、PANC-1细胞内检测到高水平吸碘,分别是pDC316-MUC1转染组的7和12倍。结论MUC1启动子能驱动NIS基因在MUC1阳性的肿瘤细胞内靶向功能表达,为进一步在体内运用放射碘靶向治疗胰腺癌奠定了基础。     

射频对甲状腺癌细胞钠／碘转运体表达的影响

目的 探讨射频对甲状腺癌细胞钠/碘转运体表达的影响.方法 对29例钠/碘转运体低表达或不表达的甲状腺癌,采用射频联合131I治疗,射频前后分别行全身核素显像及血清Ig测定.结果 全身显像摄碘阳性分别为射频前4例（4/29）,射频2周19例（19/29）、4周12例（12/29）.射频4周时血清Ig水平升高5例、降低17例、无变化7例.治疗总有效25例（25/29）,治愈15例（15/29）.结论 射频诱导钠/碘转运体失表达的甲状腺癌细胞出现了碘摄取,提高了131I治疗失分化甲状腺癌的临床疗效.     

钠/碘转运体在不同甲状腺组织中的表达

目的：检测钠/碘转运体（sodium/iodide symporter,NIS）在不同甲状腺组织中的表达以及在甲状腺乳头状癌中的分布。方法：选取正常甲状腺组织16例、结节性甲状腺肿组织14例、甲状腺乳头状癌23例,运用蛋白免疫印迹（Western blot）技术检测NIS的表达,并分开提取甲状腺乳头状癌胞浆、胞膜蛋白,分析NIS在甲状腺乳头状癌组织中的分布情况。结果：乳头状癌组、结节性甲状腺肿组NIS表达与正常组相比增高,差异有统计学意义（P〈0.05）;23例乳头状癌中,21例表达于胞浆,仅10例在胞膜上检测到,阳性率分别为91.3%和43.5%,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;10例胞浆、胞膜均阳性者胞浆组NIS表达高于胞膜组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：在甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿中NIS表达增高,但是在甲状腺乳头状癌中NIS主要表达在细胞浆中,而非细胞膜上。     

甲状腺乳头状癌钠碘同向转运体基因启动子区域CpG岛异常甲基化状态检测及其意义

目的 通过检测甲状腺乳头状癌中钠碘同向转运体(NIS)基因的启动子区域甲基化状态及其与各项临床指标之间的关系,探讨NIS基因甲基化在甲状腺乳头状癌发病过程中的地位、作用和相关机制.方法 取2007年5～7月手术切除的甲状腺乳头状癌及正常组织标本各11份,液氮保存.针对NIS-L区域设计新的甲基化特异PCR(MSP)引物,对所有亚硫酸氢钠修饰后的甲状腺癌及对照组织标本DNA进行MSP检测,比较肿瘤和对照甲状腺组织的NIS-L甲基化状态,分析其与有关临床指标之间的相关性.结果 实验发现11例甲状腺癌中NIS-L区域CpG岛甲基化率达81.8%(9/11),与肿瘤直径存在相关性,与年龄、性别、AJCC分期、淋巴结转移情况、多灶性等临床指标无相关性;相应对照组织中NIS-L甲基化率为36.4%(4/11),与所有临床指标无相关性.结论 甲状腺乳头状癌组织中NIS-L区域CpG岛甲基化率异常增高,且与肿瘤直径存在相关性.NIS-L与其它NIS表达调控因素的关系有待进一步研究.     

甲状腺癌钠／碘转运蛋白及促甲状腺激素受体表达及相关性研究

目的研究甲状腺癌钠／碘转运蛋白（NIS）和促甲状腺激素受体（TSHR）的表达特征及其相关性。方法收集正常甲状腺组织52例、结节性甲状腺肿58例和甲状腺癌56例,通过荧光定量分析和免疫组化法研究NIS和TSHR的表达。结果甲状腺癌NISmRNA和TSHRmRNA的表达显著低于正常甲状腺组织和结节性甲状腺肿（P〈0．001）,正常甲状腺组织和结节性甲状腺肿NIS和TSHR的表达呈正相关（r=0．758和0．653,P=0．006和0．005）,而在甲状腺癌中无显著相关性（r=0．389,P=0．136）。免疫组化结果表明甲状腺癌NIS阳性产物主要定位于细胞质,TSHR阳性产物定位于细胞质和细胞膜。甲状腺癌和结节性甲状腺肿NIS及TSHR蛋白表达显著高于正常甲状腺（P〈0．001）;同正常甲状腺组织相比,甲状腺癌NIS及TSHRmRNA表达下降同时伴有细胞质蛋白表达升高的分别为45例和47例（80％,85％）。结论甲状腺癌NIS和TSHR表达具有非相关性以及在转录和翻译水平上具有矛盾性,NIS蛋白非功能定位于细胞质,因而不能发挥正常的运输及聚碘功能。     

萝卜硫素对分化型甲状腺癌细胞NIS基因表达及摄碘能力的影响

目的:研究萝卜硫素对分化型甲状腺癌细胞NIS基因表达及摄碘能力的影响。方法:选择乳头状甲状腺癌细胞系K1及滤泡状甲状腺癌细胞系FTC133进行体外培养,给予不同浓度萝卜硫素处理24h,通过反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测钠/碘同向转运体(NIS)mRNA的表达;通过γ计数仪检测甲状腺癌细胞摄碘能力。结果:反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测结果表明,萝卜硫素可以上调NIS基因的表达,并呈浓度依赖性;γ计数仪检测结果表明,萝卜硫素可以提高分化型甲状腺癌的摄碘能力。结论:萝卜硫素为放射性碘治疗分化型甲状腺癌提供了新的思路。     

钠/碘转运体在甲状腺乳头状癌的表达和分布

目的:研究钠/碘转运体(NIS)在甲状腺乳头状癌内表达情况,探求NIS与甲状腺乳头状癌的关系.方法:取甲状腺乳头状癌组织22例,正常甲状腺组织12例,淋巴结转移组织7例及结节性甲状腺肿组织12例,运用蛋白免疫印迹技术(Westemblot)检测各实验组NIS的表达情况.结果:乳头状癌组和淋巴结转移组中NIS的阳性率为77.3%和85.7%,高于正常甲状腺组和结节性甲状腺肿组的25%和41.7%,且各实验组之间阳性表达率存在显著性差异(P<0.05),在17例NIS表达阳性的乳头状癌组标本中,有16例阳性表达集中于细胞浆内,仅2例在细胞膜上检测有表达,阳性率分别为94.1%和11.8%.两者差异有统计学意义(P<0.05).结论:在甲状腺乳头状癌组织内,NIS可正常,甚至过度表达,而且分布主要集中于细胞浆内.并非功能靶位细胞膜上,与肿瘤导致的基因翻译和修饰的改变有关.     

中药夏枯草对甲状腺癌细胞NIS基因表达及摄碘率的影响

目的:探讨中药夏枯草对甲状腺癌细胞株K1钠/碘同向转运体(NIS)基因表达及摄碘率的影响,为夏枯草辅助放射性碘治疗甲状腺癌提供依据.方法:分别以不同浓度(0,20,50,100,150,200 g/L)的夏枯草处理体外培养的甲状腺癌细胞株(K1),48 h后利用半定量RT-PCR检测细胞NIS mRNA表达,γ-计数仪检测细胞摄碘能力.结果:夏枯草浓度在0～100 g/L范围内,细胞NIS基因表达及摄碘能力随夏枯草浓度的增加而增加(P<005).当夏枯草浓度达150～200 g/L时,增加后浓度与100 g/L浓度相比差别无统计学意义(P>0.05).结论:夏枯草可上调甲状腺癌K1细胞NIS基因表达,增强其摄碘率,而且这种作用在一定浓度范围内具有剂量依赖性.