鱼胆汁毒素致肾小管上皮细胞死亡方式的试验研究

目的观察草鱼胆汁及鲤醇硫酸酯钠致人肾近曲小管上皮细胞（HK-2）的死亡方式。方法根据文献报道方法从草鱼胆汁中提取鲤醇硫酸酯钠,通过体外培养HK-2细胞系,应用MTT法评价草鱼胆汁和鲤醇硫酸酯钠对HK-2细胞增殖抑制作用,应用流式细胞术检测草鱼胆汁和鲤醇硫酸酯钠所致的HK-2细胞的主要死亡方式。结果 HK-2细胞存活率随着草鱼胆汁和鲤醇硫酸酯钠浓度的增加和时间的延长而降低,且草鱼胆汁和鲤醇硫酸酯钠对HK-2细胞的影响无明显差异;HK-2细胞染毒24h后,细胞凋亡和胀亡均明显增多,2、4μl/mL草鱼胆汁和66.7、133.4μg/mL鲤醇硫酸酯钠导致细胞凋亡样坏死明显增多,而8μl/mL草鱼胆汁和533.6μg/mL鲤醇硫酸酯钠导致细胞胀亡样坏死明显增多。结论中、小剂量的草鱼胆汁毒素主要导致HK-2细胞呈现凋亡样坏死,大剂量的草鱼胆汁毒素主要导致HK-2细胞呈现胀亡样坏死;鲤醇硫酸酯钠是草鱼胆汁毒素的主要毒性成分。     

鱼胆毒性成分的研究

用不同溶剂(或沉淀剂)从草鱼胆汁提得5种提取物,分别做毒性检查后发现,水溶性胆盐是毒性部分。进一步用液相层析法分得单一的毒性成分(鲤醇硫酸酯钠),结果证实该物质为鲤科鱼类胆汁中的主要毒性成分,其LD_(50)为668.70mg/kg(小白鼠灌胃),115.15mg/kg(小自鼠腹腔注射)。该结果可解释鱼胆中毒的原因。     

鲤醇的合成研究

鲤醇(cyprinol)最初是Haslewood(1955)从鲤鱼胆汁的水解液中分离得到的一种甾体化合物,其化学名称为3α,7α,12α,26,27-五羟基胆甾烷,它有两种构型(图1 Ⅰ、Ⅱ):     

鱼胆汁中鲤醇硫酸酯钠含量测定

为探讨各种鲤鱼科鱼类胆汁的毒性大小，应用磷钼酸比色法测定了草鱼、青鱼、鲤鱼、白鲢鱼及鲶鱼胆汁中有毒成分鲤醇硫酸酯钠的含量。     

广西南宁4种淡水鱼胆汁毒素的初步研究

本文报告鲤科的草鱼、鲤、鱅和鲢4种淡水鱼胆汁毒素实验,结果毒性各异。不同鱼种胆汁所致中毒死亡的小白鼠病理变化也有差异。4种鱼胆汁毒素的醇溶性,热稳定性较好。薄层层析结果表明,4种鱼胆汁的乙醇抽提物及非活性碳吸附物中,类固醇物质的组成有异同。     

血液透析抢救鱼胆中毒致多脏器损害1例

鱼胆汁中含胆酸、组织胺、鲤醇碳酸脂钠及氰化物等多种生物毒素,食用中毒后可引起多脏器损害,以急性肾功能衰竭为主,现报告血液透析抢救成功1例.     

酒精对草鱼胆汁急性毒性的影响

目的：研究体积分数95％食用酒精与草鱼胆汁的联合急性毒性。方法：用草鱼胆汁、酒精、草鱼胆汁．酒精混合物经口染毒；酒精经腹腔染毒；草鱼胆汁经口同时酒精腹腔染毒小鼠。急性毒性实验按寇氏法进行。结果：草鱼胆汁、酒精、草鱼胆汁-酒精混合物经口的半数致死剂量(LD50)分别为：4315、8396、9667mg/kg；酒精经腹腔染毒的LD50为4080mg/kg；草鱼胆汁经口的LD50(同时酒精腹腔染毒)为5718mg/kg。结论：草鱼胆汁与酒精混和后经口染毒，两者存在拮抗作用；草鱼胆汁经口与酒精腹腔同时染毒，两者也呈拮抗作用。     

异甜菊醇在大鼠离体肝灌流中的药代动力学研究

目的研究异甜菊醇在大鼠肝脏内的代谢情况。方法给予SD大鼠离体肝灌流（112）行异甜菊醇的初步药动学研究（体外试验）。分离5只大鼠肝脏然后用含有异甜菊醇的介质进行循环灌流,在时间为0、1、3、5、10、15、20、25、30、40、50、60rain时收集灌流液样品,每间隔10min收集胆汁样品,样品用HPLC—UV分析。尿液（前面实验收集）、灌流液和胆汁样品用β-葡萄糖醛酸酶（1-3U／μL）培养再进行HPLC—UV分析。结果40～50min后的灌流液中,HPLC法检测不到异甜菊醇,而胆汁中完全没有检测到。灌流液和胆汁分别经过β-葡萄糖醛酸酶／硫酸根培养后,色谱方法与灌流液的一样保持不变,胆汁样品中得到了明显的异甜菊醇峰。60min中的药动学参数正T1/2、AUClast、Vz（ods）、CLH、EH（肝脏提取率）和回收率（R0-60代谢率）分别为：（17．82±2．5）min、（258．18±33．2）min·μg／mL、（425．35±32．1）mL、（17．7±2．2）mL／min、（0．59±0．07）和（18．08±2．5）。结论经过40—50min灌流后异甜菊醇主要在肝脏中积累,以葡萄苷酸化形式从胆汁排泄,很可能大部分经过胆汁排泄慢慢的消除到粪便中。     

消化道重建术后维生素D研究进展

维生素D是一种人体必需的脂溶性维生素,为固醇类衍生物,主要以两种形式存在:维生素D2(麦角钙化醇)和维生素D3(胆钙化醇)。人体维生素D主要有两种来源:一是人皮肤中的7-脱氢胆固醇在紫外线照射下,转变为胆钙化醇,即维生素D3;二是通过饮食摄入,包括动物肝脏、蛋类、乳类,而植物中的麦角固醇经过紫外线照射后转变为维生素D2,其主要与脂肪一起在空肠、回肠被吸收,胆汁、胰液等消化液有助     

白桦酯醇的研究进展

白桦酯醇以及由白桦酯醇转化的次级产物白桦酯酸及其衍生物具有镇咳祛痰、清热利湿、消肿解毒、提高机体免疫力、调血脂等作用。更重要的是白桦酯醇、白桦酯酸作为天然药物在抗肿瘤和抗HIV等活性方面显示出了与以往药物不同的作用机制,靶向作用性更强,不良反应较小。因此,对于新型天然药物白桦酯醇和白桦酯醇的研究已逐步受到研究者的注视,就近年来白桦酯醇及其衍生物的制备,白桦酯醇的生物活性、合成途径及其关键酶等方面的研究追踪前人研究报道,为今后白桦酯醇相关研究的深入提供理论参考。     

蛇胆中胆酸的分离与结构鉴定

从蛇胆中分得胆酸和牛磺胆酸,并做了化学性质和物理常数测试。实验采用胆盐和胆汁酸的薄层层析(TLC)、胆盐的柱层析、胆盐的碱水解、胆汁酸的反相分配柱层析等技术。胆酸的化学结构通过IR、MS、~1H-NMR 等物理测试证实。胆盐碱水解水相产物纸层析和 TLC表明与胆酸及其它胆汁酸结合的氨基酸为牛磺酸,蛇胆汁中胆酸的天然存在形式为牛磺胆酸。本文从分离和结构鉴定角度证实蛇胆汁的主要成分为牛磺胆酸。     

血清TNF-α水平变化与对鱼胆中毒大鼠病情的相关性

目的探讨鱼胆中毒大鼠血清TNF-α浓度变化对病情程度的评价作用。方法通过预实验确定草鱼胆汁的LD50,制备草鱼胆汁中毒大鼠模型。用ELISA法检测受试者血清TNF-α浓度。取肾脏行病理活检,光镜下观察肾脏损害程度。所得结果进行统计检验,比较不同剂量鱼胆中毒组与正常对照组大鼠血清TNF-α的关系;比较急性肾功能衰组与非急性肾功能衰组血清TNF-α的关系。分析血清TNF-α浓度与鱼胆中毒程度的相关性。结果低剂量鱼胆中毒组大鼠血清TNF-α浓度与正常组比较,差异无统计学意义;随着鱼胆汁剂量的增加,大鼠血清TNF-α浓度显著增高,组间比较差异具有统计学意义;急性肾功能衰组大鼠血清TNF-α浓度高于非急性肾功能衰组(P<0.05)。结论 TNF-α水平变化可以客观准确评价鱼胆中毒程度,可作为一项临床诊断鱼胆中毒程度的实验室指标。     

急性草鱼胆汁中毒的实验病理研究

40只大鼠随机分为3个实验组和1个对照组,实验组灌服新鲜草鱼胆汁。结果表明:实验鼠肾小管及肾小球病变明显;肾小管上皮细胞碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)活性降低;肾小球和肾小管基底膜LN增多;血清BUN、SGPT升高。病变程度显示剂量一效应关系。进一步表明急性草鱼胆汁中毒病程迁延时,主要靶组织是肾小管和肾小球,其死因是急性肾功能衰竭。     

胆固醇饱和溶解度影响因素的实验研究

本研究采用含有６种结合型胆盐、粘蛋白及钙离子等１０种成份的模拟胆汁系统，着重探讨胆固醇饱和溶解度与这些成份之间的关系，实验结果发现胆汁中胆固醇饱和度及稳定性除了与胆汁干重和卵磷脂／（卵磷脂＋总胆盐）有关外，还与总胆盐内部构成有关。胆固醇饱和溶解度与总胆盐中甘氨鹅脱氧胆盐和甘氨脱氧胆盐的比重呈正相关，与粘蛋白的含量呈反相关，而与钙离子强度无明显相关。运用本研究结果能更准确地计算人胆汁胆固醇饱和度，有助于胆固醇性结石的研究和治疗。     

心脉龙与香丹及参脉注射液对大鼠草鱼胆中毒早期肾脏损害的影响

目的:观察心脉龙、香丹、参脉注射液对大鼠草鱼胆中毒早期肾脏损害的影响,为中药治疗草鱼胆中毒所致的肾脏损害提供实验依据. 方法:SD大鼠1次胃饲大理地区草鱼胆汁(6 ml/kg),复制草鱼胆中毒模型,10 min后分别腹腔注射心脉龙、香丹或参脉注射液.结果:上述中药均能降低血肌酐和血尿素氮的水平,增加肌酐清除率,减少近曲小管上皮细胞坏死及囊腔内有红细胞的肾小球数目,与对照组比较,P ＜0.01. 结论:中药制剂心脉龙、香丹、参脉注射液对大鼠草鱼胆中毒所致的早期肾脏损害均有防治作用.     

胆酸盐/脂类混合胶束对疏水性姜黄素的增溶性能

用含有不同浓度的胆酸盐、磷脂及脂肪水解产物（脂肪酸和单甘油酸酯）的胶束溶液模拟空腹和进食状态肠腔内的液体,测 定姜黄素在空腹和进食2种不同状态下的溶解度以预测其在体内的溶出和吸收情况。研究了过量姜黄素在固定摩尔比的混合胆酸盐溶 液中或者在由不同脂类组成的混合胶束溶液中的溶解情况,结果表明：只有当胆酸盐浓度超过5 mmol/L,即大于其临界胶束浓度 （CMC）时,姜黄素的溶解度才有明显的增加;姜黄素在进食状态下的溶解度要明显高于空腹状态下的溶解度;改变脂肪成分和浓度 ,姜黄素的溶解度几乎没有差异。     

PIGMENT GALL,STONES STUDY

The components and structure of pigment gallstones are investigated by chemical analysis, histochemistry, infrared spectroscopy, emission and atomic absorption spectrosco.py a al polya- crylamide gel electrophoresis. The results show that the components dissolved in ether, hydrochloric acid, chloroform and ethanol are cholesterol, inorganic salts and bile pigment. The residues called "insoluble" components consisting of proteins, glycoproteins, polysac- charides and bilirubin polymers. This suggests that chelate type bilirubin polymer formation may make solubilization of pigment stones difficult. When the supernatant of fresh human bile collected from a T-tube is incubated in vitro, precipitate may form. In this way, the process of bilirubin precipitation in bile can be observed. The authors conclude that the increment o,f bile salts or glucuronic acid concentration in bile prevents bilirubin precipitation; apart from J3- glucuronidase, there are other factors in the bile inducing conjugated bilirubin hydrolysis.     

"BILIRUBIN-CALCIUM COMPOUND" PRECIPITATION AND THE EFFECT OF BILE SALTS ON IT THE PATHOGENESIS OF PIGMENT GALLSTONE

The formation of insoluble "bilirubin-calcium compound" followed the principles of solubility pro- duct, i.e. (UCB). (Ca2+)2=Ks' (conditional equili brium constant). When the concentration of cholate exceeded l mM, it would combine with calcium to form a soluble compound, resulting in a decrease of calcium ion concentration. This reaction was rever sible and might be helpful in stabilizing the calcium ion concentration. There was a negative correlation between the concentration of cholic acid and calcium ion and also between the cholic acid concentration and the ratio of ionized calcium to total calcium in 41 samples of human bile. The cholic acid concen tration in bile of gallstone patients was lower and the calcium ion cortcentration was higher than those in bile of controls. Besides, the micella of bile salts might be able to enclose and isolate the unconjugated bilirubin (UCB) partially from calcium ion. Thus, the formation of "bilirubin-calcium compound" precipi. tate was inhibited. Study on the effect of eight bile components, i.e. UCB, bile salts, calcium, magnesium, pH, lecithin, cholesterol, and glycoprotein on the precipitation of bilirubin in imitating bile revealed that the higher the cholate or cholesterol concentration in imitating bile, the less the bilirubin in precipitate; and the more the other components in bile, the more the bilirubin in precipitate. Regression equation was established be tween these bile components and the amount of bili rubin in precipitate, suggesting that the discriminant distinguishing the lithogenic bile from nonlithogenic one might be a polyfactor function. A function in cluding UCB, total calcium, and bile salts was used iri 16 samples of human choledochal bile to predict lithogenic ability, a coincident rate being 81.3'70. Using this function, we would be able to investigate the effect of bile components on pigment gallstone formation both qualitatively and quantitatively.