5-氟脲嘧啶对L_(1210)细胞中低分子量核RNA的合成及甲基化反应的作用

5-FU的抗肿瘤作用过去一直认为是由其代谢产物FdUMP封闭胸苷酸合成酶,从而抑制DNA的合成而产生的。但这种生化损伤,即DNA合成的抑制却从末明确证实过。因为一些不经过胸苷酸合成酶的同位素标记的DNA前体,仍然可以用正常或加速的速度编进DNA中。这些实验结果说明5-FU的的细胞毒性至少在某些肿瘤中是可以归结为对其他一些新陈代谢过程,例如RNA的合成的干扰。 5-FU对肿瘤细胞中RNA的合成的影响已经过     

TS、DPD表达水平对5-FU疗效的预测价值

目的:探讨胸苷酸合成酶(TS)及二氢嘧啶脱氢酶(DPD)转录水平及其对5-氟脲嘧啶疗效的预测价值.方法:利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从胃肠癌细胞株中扩增胸苷酸合成酶及二氢嘧啶脱氢酶的DNA片段,并与内参照基因GAPDH进行比较.结果:对5-FU敏感的细胞株MKN45 TS和DPD的表达水平较低,而其他对5-FU不敏感的细胞株则无此现象.结论:TS及DPD mRNA水平对应用5-氟脲嘧啶治疗胃肠癌的疗效具有一定预测价值.     

5—氟脲嘧啶与醋酸安宫黄体酮联合治疗对二甲基苯并蒽诱导的肿瘤细胞中嘧啶核苷磷酸化酶和胸苷酸合成酶活性的影响

醋酸安宫黄体酮与 5 -氟脲嘧啶联合治疗 ,对二甲苯并蒽诱导的 SD大鼠乳腺肿瘤的体积、嘧啶核苷磷酸化酶活性及胸苷酸合成酶活性的影响。醋酸安宫黄体酮能增加 5 -氟脲嘧啶抗肿瘤活性 ,并能抑制因用 -氟脲嘧啶所致的体重下降。与单用 5 -氟脲嘧啶的对照组相比 ,醋酸安宫黄体酮组和醋酸安宫黄体酮与 5 -氟脲嘧啶联合用药组均能增加嘧啶核苷磷酸化酶的活性。与单用 5 -氟脲嘧啶组相比 ,醋酸安宫黄体酮与5 -氟脲嘧啶联合组 ,胸苷酸合成酶活性的抑制程度增加。这些结果提示 :醋酸安宫黄体酮能提高 5 -氟脲嘧啶的抗肿瘤活性 ,并能降低 5 -氟脲嘧…     

胃癌干细胞对氟尿嘧啶敏感性及化疗药物耐受细胞的生物学机制

背景：氟尿嘧啶是胃癌化疗的基础药物,临床上耐药现象较为常见。肿瘤干细胞对化疗药敏感性较低,可能是导致化疗后肿瘤复发进展的重要原因。 目的：探讨胃癌干细胞对氟尿嘧啶敏感性,从细胞生物学角度分析胃癌的化疗耐药机制。 方法：利用免疫组织化学染色法检测69例胃癌组织内干细胞标志物CD44和耐药蛋白胸苷酸合成酶表达情况;基于克隆形态的分选策略,从AGS胃癌细胞系内分离胃癌干细胞克隆,检测CD44和胸苷酸合成酶的表达和自我更新能力;利用CCK-8法检测不同AGS细胞克隆的5-氟尿嘧啶半数抑制浓度(IC50)。 结果与结论：69例胃癌组织标本中,胸苷酸合成酶和CD44的表达阳性率分别为57%(39/69)和61%(42/69),CD44与胸苷酸合成酶的表达之间呈正相关关系(Kappa=0.41,χ²=11.59,P < 0.05)。AGS细胞系的克隆形成率为39%(29/69),其中,副克隆、次克隆、全克隆所占比例分别为 17%(5/29)、69%(20/29)、14%(4/29)。二代克隆形成后,采用胰酶消化克隆并再次低密度接种传代,副克隆均无法传代,次克隆仅少数可连续传代,全克隆均可连续传代。不同浓度5-氟尿嘧啶作用之后,全克隆的生长抑制率均显著低于次克隆和AGS细胞,经比较差异均有显著性意义(P < 0.05)。以上结果表明胃癌干细胞对5-氟尿嘧啶敏感性较低,其对化疗药物耐受,可能是临床胃癌化疗耐药的产生机制之一。     

胃癌干细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性

背景：5-氟尿嘧啶是一种常用的胃癌化疗药物,但临床治疗过程中较易出现耐药现象,影响治疗效果。研究表明肿瘤干细胞对化疗药敏感性较低,可能是导致化疗耐药的重要原因。 目的：体外环境下分析胃癌干细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性,了解胃癌化疗耐药相关机制。 方法：基于克隆形态的分选策略,从人胃癌AGS细胞系内分离胃癌干细胞克隆,采用免疫细胞化学染色分析不同克隆CD44和胸苷酸合成酶的表达,克隆形成实验评估不同类型克隆的自我更新能力,CCK-8法检测不同浓度5-氟尿嘧啶作用下人胃癌AGS细胞克隆生长抑制率。 结果与结论：人胃癌AGS细胞经低密度接种培养后,可形成32个不同形态的克隆,其中,副克隆、次克隆、全克隆所占比例分别为19%(6/32)、66%(21/32)、16%(5/32)。全克隆高表达CD44和胸苷酸合成酶,接种后可再次形成大量二代克隆;次克隆弱表达CD44和胸苷酸合成酶,接种后形成少量的二代克隆;副克隆不表达或弱表达CD44和胸苷酸合成酶,接种后未形成二代克隆。在不同浓度5-氟尿嘧啶的作用下,次克隆以及人胃癌AGS细胞的生长抑制率均显著高于全克隆(P均 < 0.05)。结果表明,在体外条件下,胃癌干细胞对5-氟尿嘧啶敏感性较低,推测其可能为临床化疗耐药的重要机制。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

寡脱氧胸苷酸磁珠的制备

与寡脱氧胸苷酸偶联的磁珠可用于mRNA的快速提取,但价格昂贵。本文介绍了一种将寡脱氧胸苷酸共价偶联于磁性颗粒的有效方法,偶联反应可在半天内完成,而且其价格大大低于商品磁性珠,可用于mRNA的提取和作为cDNA合成的引物。寡脱氧胸苷酸磁性珠的制备所需的试剂为:5′-氨基-寡脱氧胸苷酸(5′-amino-oligo(dT)_(30)),1-甲基咪唑,1-     

细胞外信号调节激酶在缓激肽引起血管平滑肌细胞增殖反应中的调节作用

目的 :本研究主要从细胞外信号调节激酶 (ERKs)的角度 ,研究丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号途径在缓激肽 (BK)介导的大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)促增殖等反应中的作用及其可能的调控机制。方法 :通过3H 胸苷 ( 3H TdR)掺入率与SMC3H 亮氨酸掺入率分别反映SMC的DNA代谢与蛋白质合成代谢速率 ;并通过给予MAPK激酶 (MEK )特异性抑制剂PD0 980 5 9及ERKS抑制剂UO12 6预处理 ,观察它们对细胞蛋白合成和DNA代谢及细胞增殖的影响。结果 :①BK( 10 - 8mmol/L)处理 3 0minVSMC3H 胸苷掺入率和3H 亮氨酸掺入率均明显增高 ;②BK增高3H 胸苷掺入的作用可明显被PD0 980 5 9所抑制和部分被UO12 6所抑制 ;③BK增高3H 亮氨酸掺入的作用可部分被PD0 980 5 9和UO12 6所抑制。结论 :ERKs激活在缓激肽导致VSMC增殖反应中具有重要作用 ,并可通过ERKs信号途径的特异性抑制剂的抑制效应 ,影响血管平滑肌细胞的增殖效应     

胸苷酸合成酶(TS)基因多态性及其与肿瘤的关系

胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)是DNA合成的关键酶,也是5-FU为基础化疗的靶向酶。TS基因多态性可能导致酶活性或功能的改变,从而改变个体对肿瘤的易感性以及肿瘤患者对化疗药物的敏感性。因此,TS基因多态性的研究为化疗方案制订及预后评估提供了广阔的前景。本文就TS基因多态性的结构、对表达的影响及其与肿瘤易感性和预后的关系做一简要综述。     

HPD-红光对离体人胃癌MGC80-3细胞DNA合成和细胞杀伤作用

血卟啉衍生物(HPD)光敏作用有明确的杀伤肿瘤效应,其作用机制已有不少报导;我们在研究离体人肿瘤和正常细胞对[~3H]-HPD的摄取和存留的基础上,用液闪计数及细胞计数方法,测定HPD-红光对离体人胃癌MGC80-3细胞DNA合成和细胞杀伤作用。 MGC80-3细胞用小方瓶培养,每瓶接种1.5×10~5细胞,加2ml培养液(含15％小牛血清的Eagle液),细胞在37℃温箱培养16～18小时,以5μg/mlHPD处理30分钟、红光(波长6300A±,功率密度50mw/cm~2)照射5分钟,换含[~3H]-胸苷(1μcl/ml)培养液,继续培养,用液闪计数方法,测定5和30分钟及2、6、10、24、48、72小时标本中掺入[~3H]-胸苷的cpm值。为测定HPD-红光的细胞杀伤效应,经     

胸苷酸合成酶（TS）基因多态性及其与肿瘤的关系

胸苷酸合成酶(thylnidylate synthase，TS)是DNA合成的关键酶，也是5-FU为基础化疗的靶向酶。TS基因多态性可能导致酶活性或功能的改变，从而改变个体对肿瘤的易感性以及肿瘤患者对化疗药物的敏感性。因此，TS基因多态性的研究为化疗方案制订及预后评估提供了广阔的前景。本文就TS基因多态性的结构、对表达的影响及其与肿瘤易感性和预后的关系做一简要综述。     

激素难治性前列腺癌细胞对化疗药物敏感性的比较

为临床选择激素难治性前列腺癌 (HRPC)的化疗方案提供参考 ,采用3 H -胸苷酸 (3 H -TdR)掺入法检测了 2 0例HRPC细胞对常用化疗药物的敏感性。HRPC对单药的敏感性依次为足叶乙甙 >阿霉素、5 -氟尿嘧啶、雌二醇氮芥 >长春花碱 >顺铂 ;两药联合可使敏感性进一步提高 ,依次为雌二醇氮芥 +足叶乙甙、5 -氟尿嘧啶 +阿霉素 >雌二醇氮芥 +长春花碱 >5 -氟尿嘧啶 +顺铂 ;三药联用抑瘤作用更强 ,雌二醇氮芥 +长春花碱 +阿霉素、5 -氟尿嘧啶 +阿霉素 +顺铂 >雌二醇氮芥 +长春花碱 +顺铂。对HRPC以联合化疗效果较好 ,　3 H -TdR掺入法体外检测化疗药物的敏感性有助于化疗方案的选择     

一个新的明显叶酸敏感脆性位点:5q35

人类核型中已发现100多个脆性位点,多数是人类发生率高的普通型,它们多是阿非迪霉素诱导。可将少数人中发生的罕见脆性位点分为BrdU诱导类、远霉素A诱导类或叶酸敏感类等。26个稀有脆性位点中17个属于叶酸敏感类,在叶酸减少,或由于氨甲蝶呤、5-氟脱氧尿苷或过量胸苷,使胸苷代谢阻断的条件下,它们最大限度地表达。     

5-氮杂胞苷与盐酸洛拉曲克体外联合用药的抗癌增效作用观察

目的 通过在体外分别对DNA甲基化转移酶（DNA methy ltransferase，DNMT）抑制剂5-氮杂胞苷（5-azacytidine，5-aza-C）和新型脂溶性胸苷酸合成酶抑制剂盐酸洛拉曲克（nolatrexed dihydrochloride，Nolatrexed）联合用药于人大肠癌细胞LoVo和人肝癌细胞Hep3B 的相互作用的性质观察，探讨DNMT抑制剂和胸苷酸合成酶抑制剂联合用药的可能性．方法 使用MTT法测定5-aza-C和Nolatrexed单独用药或联合用药的抗癌活性，用抑制浓度的分数之和（a sum of fractio nal inhibitory concentration，SFIC）值及等效剂量分析方法（Isob010gram）评价5-aza-C和Nolatrexed联合用药的作用性质．结果 在5-aza-C和Nolatrexed联合用药时其SFIC值均小于或等于l，由此得到的等效剂量曲线图形表现为凹形．结论 5-aza-C和Nolatrexed体外联合用药抗癌相互作用性质为明显的增效作用，DNMT抑制剂和胸苷酸合成酶抑制剂联合用药达到抗癌增效作用是可能的．     

胸苷酸合成酶对结肠癌5-FU治疗耐药的影响

目的 探讨结肠癌对5-FU产生耐药的机制，揭示不同胸苷酸合成酶(TS)蛋白表达水平的结肠癌患者对5-Fu治疗的敏感性。方法 采用免疫组化S-P法检测60例结肠癌组织及正常对照组中TS蛋白的表达情况。结果 正常结肠黏膜组织中的TS表达水平高于结肠癌组织，结肠癌组织中TS表达水平与5-Fu化疗患者的预后呈负相关，与患者的性别、有无淋巴结转移及癌组织的分化程度无关。结论 结肠癌组织中TS的表达水平可以作为患者对5-Fu为主的化疗疗效及预后的判断指标。     

在同一标本上的高分辨R带和G带

从1975年以来,提出了用胸苷或氨甲喋呤来得到R带或G带的前期和早中期染色体的细胞同步化技术。作者报导了用5-溴脱氧尿苷(BrdU)来同步分裂细胞,并在同一标本的不同细胞中获得优良的R带、G带和H带以及不同阶段的染色体凝聚。同以前发表的方法比较,用胸苷和BrdU更易获得每套单倍染色体组大约具有1千个带的较高比例的前期有丝分裂相。方法是外周血淋巴细胞生长72小时之后加入最终浓度200μg/ml     

一例有脆性X患者的叶酸代谢

近年来,一种新的细胞遗传学标记—人类染色体脆性位点,引起了人们的重视,尤其是认识到智力迟钝者与脆性X染色体Xq~(28)的脆性位点有关。脆性位点只有当细胞在特殊环境中培养后才能见到。这种对叶酸敏感的脆性位点包括脆性X的表达取决于少量叶酸和/或培养基中胸苷浓度。Sutherland     

细菌对苯噻唑力复霉素的耐药性与细菌膜屏障关系的研究(摘要)

苯噻唑力复霉素为力复霉素的一种新的衍生物。本文报告苯噻唑力复霉素的耐药性与细菌膜屏障的关系。材料和方法苯噻唑力复霉素由四川抗菌素研究所提供[~3H]-苯噻唑力复霉素由北京原子能研究所标记。金色葡萄球菌209P和大肠杆菌2281用普通营养肉汤培养。[~3H]-尿苷和[~3H]-苯噻唑力复霉素掺入细菌的量用玻纤滤纸液体闪烁计数法测定。     

信息动态

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)和甲硫氨酸合成酶还原酶(5-methyltetrahydrofolate-homocysteine methyltransferase reductase,MTRR)是参与体内叶酸代谢的关键酶,其基因多态性会影响体内叶酸及同型半胱氨酸水平,与神经管畸形、复发性流产、妊娠期高血压疾病的发生密切相关,严重影响母婴健康.     

耐5-氟尿嘧啶的人结肠癌HT-29/5-FU细胞株的建立及其生物学特性

目的建立耐5-氟尿嘧啶人结肠癌细胞株(HT-29/5-FU)并观察其生物学特性。方法采用5-FU持续接触浓度递增法诱导;观察细胞形态变化和克隆形成率;MTT法测定生长曲线和药物敏感性;Western blot法分析胸苷酸合成酶(TS)、二氢嘧啶脱氢酶(DPD)的表达情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果 HT-29/5-FU的耐药指数为3.59;与HT-29细胞相比,HT-29/5-FU细胞形态发生改变、生长缓慢、克隆形成率降低,TS和DPD高表达;S期细胞比例增多,更能耐受5-FU诱导的细胞凋亡。结论 HT-29/5-FU细胞株生物学性状的改变可能是5-FU化疗耐药机制的重要组成部分,有助于阐明肿瘤潜在耐药机制和逆转肿瘤耐药。     

苯噻唑力复霉素作用机理的初步研究

苯噻唑力复霉素为我国创新的抗生素、该药对金色葡萄球菌、结核杆菌有高效。本文报导苯噻唑力复霉素对细菌生物大分子合成和超微结构的影响以及细菌对该药的耐药性与细菌膜屏障的关系。 1、苯噻唑力复霉素对细菌大分子合成的影响:苯噻唑力复霉素(0.5μg/ml)加入金色葡萄球菌209P后可立即而显著地抑制[~3H]一尿嘧啶核替的掺入;对[~3H]一亮氨酸掺入的抑制作用弱且慢;对[~3H]一胸嘧啶核苷的掺入无影响。说明该药抗菌机制主要是抑