慢性氟中毒大鼠骨组织Gli1、β-catenin表达变化及其与骨形成增强间的相关性分析

目的观察使用刺猬蛋白(Hedgehog)信号阻断剂环巴胺(cyclopamine,Cycl)对慢性氟中毒大鼠骨组织中神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(glioma-associated oncogene homolog 1,Gli1)及β链蛋白(β-catenin)表达的影响,探讨两者表达变化在氟致骨形成增强中的意义。方法SD大鼠48只分为4组,每组12只。对照组饮用自来水(含氟量<1 ppm),氟中毒组(F组)、氟+环巴胺组(F+Cycl组)和氟+二甲基亚砜组(F+DMSO组)分别饮用含50 ppm氟化钠(NaF)的自来水。饲养6个月后分别给F+Cycl组和F+DMSO组大鼠腹腔注射环巴胺和DMSO。检测各组大鼠尿氟含量;酶联免疫吸附试验测定血清骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)含量;HE染色观察骨组织形态计量学变化;实时荧光定量PCR法、免疫组织化学和蛋白印迹法检测骨组织中Gli1和β-catenin的mRNA和蛋白表达情况。结果染氟后F组、F+Cycl组和F+DMSO组大鼠尿氟含量、骨小梁密度、骨小梁宽度较对照组明显增加,但3组间未见明显差异(P>0.05)。F组较对照组血清BALP含量增加,Cycl阻断后血清BALP含量明显降低(P<0.05)。与对照组比较,F组Gli1和β-catenin mRNA和蛋白均有表达增强。使用Cycl后,两者表达均较F组降低(P<0.05),而F+DMSO组则无明显变化。Gli1与β-catenin的表达呈正相关关系(r=0.476,P<0.05);Gli1、β-catenin蛋白表达与血清BALP、骨小梁密度分别呈正相关关系(r1=0.457,r2=0.466,r3=0.581,r4=0.554,P<0.05)。结论Cycl可阻断慢性氟中毒大鼠骨组织Gli1表达,并且其影响成骨相关因子β-catenin的表达,这可能参与到氟致骨形成增强的过程中。     

强骨康疏胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨细微结构及骨代谢的影响

目的:观察强骨康疏胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度、OPG及RANKL蛋白表达、骨组织形态计量学参数及骨组织细微结构的影响。方法:制备去卵巢骨质疏松大鼠模型后,分组:正常对照组、模型空白组、中药低剂量预防组、中药高剂量预防组、雌激素预防组。给药1月后,检测各组股骨骨密度值,显微镜下观察股骨骨小梁的结构变化,并检测骨组织形态计量学参数。采用免疫组织化学染色法检测大鼠股骨OPG及RANKL蛋白表达。结果:模型空白组大鼠股骨骨密度减少,骨小梁厚度、面积、面积百分数均减少,骨小梁间距增大,股骨OPG蛋白平均光密度值显著降低,RANKL蛋白平均光密度值明显增高;雌激素预防组、中药低剂量组、中药高剂量组对上述指标均有明显改善。结论:强骨康疏胶囊能有效提高骨量,维持骨小梁立体空间结构,改善大鼠股骨远端松质骨的显微结构,能够提高骨OPG蛋白表达及抑制RANKL蛋白表达。     

益气活血通络汤干预膝骨关节炎大鼠关节滑膜细胞凋亡及ADAMTS-5蛋白的表达

背景：近年来中医治疗膝骨关节炎无论从发病机制还是临床应用方面都有了新的进展,因此在治疗中应以舒筋通络、益气补血中药为治疗准则。目的：探究益气活血通络汤对膝骨关节炎大鼠关节滑膜细胞、骨微结构及金属蛋白酶的影响。方法：选取健康大鼠60只,随机分为健康组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、西药组,后5组均建立膝骨关节炎大鼠模型。建模24 h后健康组与模型组采用生理盐水3 mg/(kg·d)灌胃,中药低、中、高剂量组分别采用3,6,9 mg/(kg·d)益气活血通络汤灌胃,西药组采用5 mg/(kg·d)泼尼松灌胃。连续干预4周后进行骨微结构检测,采用TUNEL检测大鼠滑膜细胞凋亡率,苏木精-伊红染色观察病理形态,免疫印迹与PCR分别检测大鼠骨关节中带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的金属蛋白酶5(ADAMTS-5)、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3表达。结果与结论：(1)与健康组比较,模型组大鼠膝关节中骨小梁数量、骨小梁厚度、骨体积分数及骨密度降低,结构模型指数、骨小梁分离度及ADAMTS-5、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3蛋白与mRNA表达量升高(P <0.05),...     

颗粒蛋白前体促进去卵巢小鼠的骨质疏松

目的探讨颗粒蛋白前体(PGRN)对去卵巢小鼠骨质疏松的影响。方法建立野生型和PGRN敲除(PGRN~(-/-))小鼠卵巢切除骨质疏松模型,采用微型计算机断层扫描(Micro-CT)和三维重建获得小鼠骨组织微观结构并进行骨小梁数据分析, HE染色观察骨组织形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察骨组织中破骨细胞数量,免疫组织化学染色法检测骨组织核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 P65表达,荧光定量PCR检测骨组织TRAP mRNA水平, Western blot法检测骨组织基质金属蛋白酶9(MMP9)、 MMP14、 P65蛋白水平。结果与野生型小鼠相比, PGRN~(-/-)组小鼠骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)及骨小梁厚度(Tb.Th)均显著增加,骨小梁空间距(Tb.S)显著降低;在PGRN~(-/-)小鼠中观察到骨质疏松程度更轻,破骨细胞数量更少,骨组织RANKL、 TNF-α、 P65蛋白, TRAP mRNA, MMP9、 MMP14表达均低于野生型小鼠。结论 PGRN促进卵巢切除小鼠骨质疏松。     

来氟米特对子宫内膜异位症大鼠模型作用机制的研究

目的观察来氟米特用于子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)大鼠模型的整个影响过程,检测模型异位灶中p-STAT和SOCS mRNA表达情况,探讨来氟米特对子宫内膜异位症的作用机制。方法采用自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,移植后第4周开腹建模成功的大鼠并随机分为空白对照组(每天0.15%羧甲基纤维素水1 ml/kg)、来氟米特高剂量组(每天35 mg/kg)、低剂量组(每天10 mg/kg)及阳性对照组(达那唑组每天25 mg/kg),连用3周,测量用药前后病灶体积,并采用Western blot和RT-PCR法分别检测异位子宫内膜灶中p-STAT蛋白和SOCS mRNA表达情况。结果来氟特高剂量组和达那唑组大鼠异位灶体积较空白对照组明显缩小(P<0.05),SD大鼠异位内膜p-STAT蛋白表达均低于对照组(P<0.05),而且SOCS-1 mRNA表达也均低于对照组(P<0.05)。结论来氟米特对对子宫内膜异位灶生长行为有抑制作用,而其发挥这种作用的机制可能是通过抑制子宫内膜移位灶JAK/STAT信号转导途径来实现的。     

大鼠急性甲醇中毒大脑皮质单核细胞趋化蛋白-1蛋白的表达

目的　观察大鼠急性甲醇中毒后单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）在大脑皮质的表达变化。 方法　应用通有混合气体（N2O/O2）的密闭有机玻璃箱并灌胃相应剂量甲醇溶液复制急性高剂量和低剂量甲醇中毒大鼠模型,运用Western Blot和免疫组化染色检测不同时间点大脑皮质中MCP-1的表达变化。 结果　Western Blot显示急性甲醇中毒后低剂量组和高剂量组MCP-1蛋白表达在12 h明显升高（P<0.01）,24 h达高峰,然后逐渐下降,3 d仍高于对照组（P<0.01）。高剂量组MCP-1蛋白表达在12 h和24 h高于低剂量组（P<0.05）,3 d 组MCP-1的表达无显著差异。免疫组化染色显示对照组大鼠大脑未见明显MCP-1阳性表达,急性甲醇中毒后,高剂量组24 h MCP-1阳性表达数增加,3 d达高峰,和对照组相比有显著差异（P<0.01）,阳性表达多集中在梨状皮质,1周阳性反应减少,但与对照组相比仍有显著差异（P<0.01）。 结论　大鼠急性甲醇中毒后,脑组织MCP-1蛋白表达显著增高并持续一定时间,可能参与了脑组织病理变化过程,程度与甲醇中毒剂量有关。     

益骨胶囊含药血清对大鼠成骨细胞IGF-ImRNA及其蛋白表达的影响

目的:观察益骨胶囊含药血清对SD大鼠成骨细胞(OB)增殖和胰岛素样生长因子I(IGF-I)mRNA及其蛋白表达的影响。方法:(1)将40只12月龄SD雌性大鼠分为益骨胶囊灌胃组(高、中、低剂量)和蒸馏水对照组,制备含药血清和对照血清,并确定最佳灌胃剂量和最佳血清添加浓度;(2)分离、培养新生大鼠成骨细胞,传代后分为两组(含药血清组和对照组),分别在培养48、72和96 h时做相关指标的测定,采用MTT法测定OB增殖,RT-PCR法检测IGF-ImRNA的相对表达量,ELISA法检测培养上清中IGF-I的浓度。结果:在48、72和96 h时,益骨胶囊含药血清组OB增殖明显高于对照组(P<0.01),OB表达IGF-I mRNA和蛋白的量明显高于对照组(P<0.01或P<0.05)。结论:益骨胶囊含药血清具有促进成骨细胞增殖、表达IGF-I mRNA和蛋白的作用,可能是该方防治骨质疏松的机理之一。     

成纤维细胞生长因子23和骨形态发生蛋白7介导维生素D受体表达下降在2型糖尿病并发骨质疏松大鼠发病中的作用

目的 探讨2型糖尿病并发骨质疏松大鼠肾和骨组织维生素D受体(VDR)、成纤维细胞生长因子(FGF)23、骨形态发生蛋白(BMP)7的表达及意义.方法 雌性Wistar大鼠随机分为假手术对照组(NS组)、单纯去卵巢组(NOVX组)、2型糖尿病假手术组(DS组)、2型糖尿病去卵巢组(D0VX 组).糖尿病组大鼠予高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射制备2型糖尿病模型,模型成功后去卵巢组行双侧卵巢切除术,去卵巢后4周、8周、12周末随机分批处死.用RT-PCR法观察各组肾和骨组织VDR、FGF23、BMP7的mRNA表达,Western免疫印迹法观察各组肾组织VDR、FGF23、BMP7蛋白表达.结果 成功制备2型糖尿病并发骨质疏松模型.随着时间延长,DS组和DOVX组肾和骨组织VDR、BMP7的mRNA表达和肾组织VDR、BMP7蛋白表达均较NS组和NOVX组降低,且以DOVX组表达最低(P＜0.05)；DS组和DOVX组骨组织FGF23的mRNA表达明显低于NS和NOVX组(0.566±0.059,0.452±0.057比1.008±0.068,0.520±0.049,P＜0.05),而DS组和DOVX组肾组织FGF23的mRNA和蛋白(1.034±0.071,1.136±0.112比0.919±0.086,0.952±0.143)表达明显高于NS和NOVX组,以DOVX组表达最高(P＜0.05).结论 FGF23和BMP7在肾和骨组织共同介导2型糖尿病并发骨质疏松大鼠维生素D受体表达中起不同作用.     

氟中毒兔股骨骨形态发生蛋白2表达与骨氟含量的关系

背景：氟中毒是一种常见的地方性疾病,其严重程度主要取决于氟化物暴露剂量和暴露持续时间。骨形态发生蛋白2在氟骨症发病过程中有重要作用。目的：探究兔股骨骨形态发生蛋白2表达与骨氟含量的关系,以及骨形成标志物骨钙素与Ⅰ型前胶原氨基端原肽在不同氟浓度下的变化。方法：将16只新西兰白兔随机分为对照组、低氟组、中氟组和高氟组,每组4只,分别饮用含0,100,200,400 mg/L氟化钠的自来水,饲养期间动物自由饮水、进食,实验周期6个月。观察氟斑牙发生发展情况,采用灰化蒸馏-氟试剂比色法测定兔股骨中氟含量,蛋白免疫印迹法检测股骨中骨形态发生蛋白2蛋白表达,采用酶联免疫吸附实验检测血清骨钙素和Ⅰ型前胶原氨基端原肽水平。结果与结论：(1)低氟组以轻度氟斑牙为主,表现为牙齿失去光泽,部分可见细纹;中氟组以中度氟斑牙为主,表现为牙齿表面凹凸不平、色泽不均,个别表现为重度氟斑牙,表现为牙齿缺损;高氟组以重度氟斑牙为主,表现为牙齿表面无光泽,牙齿发育畸形;(2)随着摄氟质量浓度的升高,兔股骨内骨氟含量增加,其中高氟组骨氟含量高于其他3组(P <0.01,P <0.001);高氟组血清骨钙素水平高...     

氟中毒大鼠脑组织中NMDA受体及内质网应激相关通路蛋白的表达

背景：前期研究发现N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDA)受体与氟相关，但其在氟诱导的内质网应激中的作用尚不明确。目的：观察实验性氟中毒大鼠脑组织中兴奋性神经递质NMDA受体及内质网应激IRE1α-ASK1-JNK通路蛋白表达变化，并应用NMDA受体抑制剂干预SH-SY5Y细胞，探讨氟中毒神经系统损伤的发病机制。方法：(1)动物模型：18只1月龄SD大鼠随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为10.0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为100.0 mg/L)，每组6只，雌雄各半。饮水摄氟饲养6个月后，观察大鼠氟斑牙发生情况，测定24 h尿氟含量；大鼠麻醉处死后取脑组织观察组织病理变化，蛋白印迹法检测脑组织中NMDA受体及IRE1α、ASK1、JNK蛋白表达。(2)细胞模型：体外培养SH-SY5Y细胞，选择终浓度为0.3 mmol/L和3 mmol/L的氟化钠染氟处理，并用10μmol/L的NMDA受体拮抗剂Ifenprodil、MK-801对染氟细胞进行干预，观察相关蛋白改变。结果与结论：(1...     

氟暴露患者外周血中MCM3的表达及肝肾功能变化

背景：前期研究发现MCM3与氟中毒相关,但其在氟中毒早期暴露者中的表达情况尚不清楚。 目的：分析氟暴露患者及对照人群外周血中MCM3 mRNA的表达量。 方法：选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合荧光法实时定量PCR检测外周血单个核细胞中MCM3 mRNA的表达,同时测定两组肝肾功能指标。 结果与结论：暴露组及非暴露组MCM3 mRNA表达量分别为0.573 60±0.102 59、0.550 0±0.171 81,两组差异无显著性意义(P > 0.05)。所测的肝肾功能指标在两组中差异无显著性意义。结果显示轻度氟暴露对患者外周血单个核细胞中MCM3 mRNA表达无显著影响。氟对暴露者肝、肾功能的影响需要选取更多的指标综合分析。     

低强度脉冲超声对兔下颌骨骨折愈合中OPG/OPGL及COX-2表达的影响

目的通过观察低强度脉冲超声（low intensity pulsed ultrasound,LIPUS）治疗新西兰大白兔下颌骨骨折后骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、骨保护素配体（osteoprotegerin ligand,OPGL）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）蛋白及mRNA的动态变化,探讨LIPUS促进骨折愈合的作用机制。结论健康雄性新西兰大白兔84只,随机分为对照组（42只）和实验组（42只）,建立下颌骨骨折模型,用LIPUS治疗,分别于术后1、3、14、21、28、56d各取相同例数动物（n=6）处死取样。采用免疫组织化学、RT-PCR技术检测OPG、OPGL、COX-2蛋白及mRNA动态变化。结果 LIPUS治疗兔下颌骨骨折后,OPG、OPGL、COX-2蛋白浓度和mRNA及OPGL/OPG比值在不同时间点均有不同程度上调（P〈0.05）,但各指标上调幅度最大（P〈0.01）的时间点不同,且上调幅度无相关性,只有OPG的上调幅度与OPGL比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 LIPUS能促进兔下颌骨骨折部位OPG、OPGL、COX-2的表达,从而促进骨折愈合。     

燃煤型氟中毒对雄性大鼠生殖内分泌激素的影响

 摘要 目的：研究燃煤型氟中毒对雄性大鼠生殖内分泌的影响。方法：将105只雄性SD大鼠随机分为7组：对照组、低氟组、中氟组、高氟组、低氟加营养组、中氟加营养组、高氟加营养组。各染毒组喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘玉米的饲料,复制燃煤型氟中毒动物模型。分别于染毒90d、120d和180d三阶段以股动脉放血法处死动物,查看氟斑牙,测尿氟,用RIA法测定大鼠睾丸内T,血清T、E2、LH、FSH 、GnRH、PRL。结果：建成氟中毒动物模型。与对照组相比,各染毒组大鼠血清T、E2、PRL水平随染毒时间延长和染氟剂量增加逐渐降低（p<0.05或p<0.01）; LH、FSH均水平随染毒时间延长和染毒剂量增加逐渐增高（p<0.05或p<0.01）;与对照组相比,而各染毒组GnRH水平随染毒时间延长逐渐降低（p<0.05或p<0.01）,而不同剂量的染毒组之间,随染氟剂量增加逐渐升高（p<0.05或p<0.01）。相同染氟剂量加营养组性激素水平均有所改善（p<0.05或p<0.01）。结论：燃煤型氟中毒对雄性大鼠生殖内分泌有明显的影响作用,染氟剂量越多、染毒时间越长,影响越重,降低摄氟量及提高饮食营养可改善其影响。     

PI3K-Akt1 expression and its significance in liver tissues with chronic fluorosis

This study was to explore the effect and significance of PI3K signal pathway on mechanism of liver injury in chronic fluorosis. We used 48 Sprague-Dawley rats which were randomly divided into 4 groups according to the body weight, 12 in each group, half of male and female. The control group was fed with the solid feed (the fluorine content was 1.5 mg/kg). The fluorosis animals were fed with the corn containing fluorine content of 17 mg/kg from the endemic fluorosis areas. Blocking agent {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002 was injected in the blocking group and phosphate buffer solution was injected in the blocking control in the caudal vein with 10 mg/kg once every other day in the one week before the end of the experiment. The animals were drunk by tap water freely. The fluoride contents of urinary and skeletal were determined by the F-ion selective electrode method. The mRNA and protein expressions of PI3K, Akt1 in the liver tissues were determined by real-time polymerase chain reaction, and streptavidin-perosidase and Western blot, respectively. Results showed that fluoride contents of the urine and bone were increased in the fluorosis compared to those in the control. The expression of PI3K and Akt1 mRNA and proteins was significantly increased in fluorosis hepatocytes, and lower than that of the fluorosis in the blocking. The apoptosis and the intracellular calcium concentration were increased. Therefore, we conclude that PI3K-Akt signaling pathway may be one of the signaling pathways in the pathogenesis of liver injury caused by fluorosis.     

仙茅苷对血管性痴呆模型大鼠海马区Caspase-3、PARP-1和雌激素受体表达的作用

目的:研究仙茅苷对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马区Caspase-3、PARP-1和雌激素受体(ER)表达的作用.方法:确立SD大鼠对照组后,用构建的血管性痴呆模型大鼠随机分成模型组、药物仙茅苷低(24 mg/kg)和高剂量(72 mg/kg)组(予以仙茅苷灌胃4周),每组8只.用药结束后,按设计用Morris水迷宫测试大鼠空间学习记忆功能;流式细胞术分析海马区神经细胞元凋亡;Caspase-3、PARP-1和ER蛋白水平用Western Blot测定;Caspase-3、PARP-1和ER mRNA表达用Realtime PCR检测.结果:Morris水迷宫试验结果显示,药物组和模型组大鼠逃避潜伏期均明显延长(P ＜0.05～0.01),模型组大鼠更明显(P＜0.01);药物组和模型组大鼠空间探索距离百分比均降低(P ＜0.05 ～0.01),模型组大鼠降更明显(P＜0.01).与对照组比较,药物组和模型组大鼠海马神经细胞凋亡率显著提高(P＜0.01),模型组大鼠更明显(P＜0.01).与对照组比较,模型组的Caspase-3、PARP-1蛋白和mRNA表达均增加(P＜0.05);与模型组相比,仙茅苷各剂量组可见ER表达增加(P＜0.05),Caspase-3和PARP-1表达降低(P＜0.05).与对照组比较,模型组的Caspase-3和PARP-1表达增加(P＜0.01),而ER未见明显变化(P＞0.05);与模型组相比,仙茅苷各剂量组ER表达均增加(P＜0.01),Caspase-3和PARP-1表达不明显(P＞0.05),但不同剂量仙茅苷组间未见明显差异(P＞0.05).结论:结果表明仙茅苷具有改善血管性模型大鼠空认知功能的作用是通过抑制海马区神经细胞凋亡,下调Caspase-3和PARP-1表达,上调海马ER表达实现的.     

慢性低O2高CO2性肺动脉高压大鼠肺血管基质金属蛋白酶基因表达

目的:研究基质金属蛋白酶在低O₂高CO₂性肺动脉高压中的作用。方法:在慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠模型上,采用图像分析、免疫杂交、免疫组化、组织原位杂交技术等方法测定不同缺氧时间(1周、2周、3周)肺细小动脉基质金属蛋白酶(MMPs)的含量及肺小血管显微结构。结果:①慢性低O₂高CO₂大鼠的肺动脉平均压(mPAP)和右心室(RV)与左心室加室间隔(LV+S)重量比(RV/LV+S)随缺氧时间延长而增高,显著高于正常对照组(P<0.01)。②光镜下正常对照组肺细小动脉内弹力板自然弯曲,平滑肌层未见明显增厚,管壁均匀一致,而低O₂高CO₂组内弹力板扭曲,中膜平滑肌细胞增生,管腔明显狭窄。③免疫杂交、免疫组化、原位杂交法发现肺细小动脉MMP-2、MMP-9及其mRNA平均吸光度值,低O₂高CO₂高于正常对照组(P<0.01),且随着低氧时间的延长而升高。结论:低O₂高CO₂促使基质金属蛋白酶表达升高,提示金属蛋白酶可能参与了肺动脉高压及肺血管重建的形成。     

骨保护蛋白和骨保护蛋白配体在脊柱结核病灶骨中的表达

背景：脊柱结核病灶骨组织硬化的病理过程较为复杂,其发生机制尚不明确。 目的：探讨脊柱结核病灶骨不同部位的骨保护蛋白和骨保护蛋白配体的表达。 方法：取脊柱结核患者脊柱结核术中切除的骨质,按照部位分成硬化骨组,亚正常骨组和正常骨组。应用PV-6000二步法免疫组化检测技术测定各组标本中骨保护蛋白和骨保护蛋白配体的平均吸光度及阳性面积比,并进行统计学分析。 结果与结论：脊柱结核硬化骨组骨保护蛋白平均吸光度,阳性面积比以及骨保护蛋白和骨保护蛋白配体表达的比值均显著高于亚正常骨组和正常骨组(P < 0.01或P < 0.05)。结果表明骨保护蛋白和骨保护蛋白配体的表达变化与脊柱结核病灶周围硬化骨的产生有关。     

缺氧缺血新生大鼠脑组织水通道蛋白4的表达变化

目的 研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)病理过程中水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP-4)的作用及其意义.方法 120只7日龄新生Wistar大鼠按照完全随机化方法分为4部分,每部分(n=30)再分为对照组、HIBD后6 h、24 h、3 d、5 d和7 d共6组,每组5只.分别测定脑组织含水量;原位杂交和免疫组化检测AQP-4表达;检测脑组织病理变化.结果 HIBD组6 h,24 h,3 d的脑组织含水量较对照组显著增加(P＜0.05);且各组脑组织含水量随时间延长而增加,组间差异有统计学意义(P＜0.05);HIBD 5 d,7 d组脑组织含水量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).对照组AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白少量表达(吸光度A值为0.29±0.07和0.06±0.01).与对照组相比,HIBD后6～24 h,AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白表达显著增加.AQP-4 mRNA的A值由0.42±0.04上升到0.80±0.02(P＜0.05);AQP-4蛋白A值由0.14±0.03上升到0.23±0.05(P＜0.05),同时光镜下可见脑组织轻度水肿;3 d时AQP-4 mRNA和蛋白表达达高峰,AQP-4 mRNA的A值为0.91±0.08,AQP-4蛋白A值为0.41±0.04,此时脑组织严重水肿,神经元、胶质细胞和内皮细胞明显肿胀;第5～7天AQP-4的表达已下降(尤其mRNA明显),但仍显著高于对照组(P＜0.05),此时脑水肿已减轻.在整个HIBD脑水肿形成的过程中,AQP-4 mRNA和蛋白的表达呈正相关(rs＞0.82,Ps＜0.05).结论 AQP-4参与了HIBD的发生发展过程,AQP-4在HIBD脑水肿的形成过程中可能起重要作用.     

艾麻口服液对慢性支气管炎大鼠支气管TNFα、ICAM-1蛋白及mRNA表达的影响

目的:研究中药复方"艾麻口服液"对慢性支气管炎(chronicbronchitis,CB)支气管TNFα、ICAM-1蛋白及mRNA表达的影响,探讨其治疗CB的疗效机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、慢支(CB)组和慢支+艾麻口服液治疗(CB+AM)组,每组5只。大鼠CB模型通过气管内注入低剂量脂多糖制成,利用免疫组织化学和原位杂交法并结合半定量图像分析技术观察各组大鼠支气管TNFα、ICAM-1蛋白、mRNA的表达情况。结果:Sham组支气管上皮细胞中可见TNFα、ICAM-1蛋白和mRNA弱阳性表达;CB组TNFα蛋白和mRNA在支气管上皮细胞、支气管周围的淋巴滤泡炎性细胞和肺泡间质炎性细胞中可见强阳性表达,ICAM-1蛋白和mRNA在CB组支气管上皮细胞中可见阳性表达。半定量图像分析显示,CB组支气管上皮细胞中TNFα、ICAM-1蛋白、mRNA表达明显强于Sham组(P＜0.01),CB+AM组的表达则明显弱于CB组(P＜0.05)。结论:下调CB支气管上皮细胞中TNFα、ICAM-1mRNA和蛋白的表达,从而减轻气道炎症反应是艾麻口服液治疗CB有效的部分机制。