丙泊酚预处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤与其抑制线粒体通透性转换的关系

目的 观察丙泊酚预处理减轻大鼠心肌缺血／再灌注损伤与其抑制线粒体通透性转换的关系。方法建立大鼠在体心脏局部缺血／再灌注模型,成年雄性SD大鼠随机进入4组（n=8）：假手术组（Sham组）;缺血再灌注组（IR组）,结扎LADCA（1eftanterior descending coronaryartery,LADCA）60min后放松120min;二甲亚砜组（DMSO组）和丙泊酚预处理组（PP组）,结扎LADCA前20min经股静脉分别注射注射20μmol·L^-1二甲基亚砜和丙泊酚1mg·kg^-1·min^-1共20min。结果再灌注120min后,PP组凋亡指数（24．35±2．35）％明显低于IR组（33．38±3．47）％（P〈0．05）;DMSO组心肌细胞凋亡指数与IR组无明显差异（P〉0．05）。电镜下IR组线粒体微观结构损伤严重,膜电位较Sham组显著降低（0．25±0．06vs0．91±0．24,P〈0．05）。PP组线粒体形态学改变明显减轻,膜电位（0．67±0．13）显著高于IR组（P〈0．05）。DMSO组则没有线粒体保护作用。结论丙泊酚预处理可减轻大鼠心肌缺血／再灌注损伤,其机制与抑制线粒体通透性转换有关。     

丙泊酚对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨异丙酚的心肌保护作用及机制.方法 阻断大鼠左冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h引起心肌缺血再灌注(I/R)损伤.缺血前10 min分别灌注异丙酚3,6及12 mg·kg-1至再灌12 h后实验结束.记录心率和平均动脉压,并计算心率-血压指数;光镜电镜观察心肌组织的形态学变化;原位末端标记检测心肌细胞凋亡...     

Urantide对缺血/再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡的影响(英文)

目的探讨urantide对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)或缺氧/复氧损伤(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响及其相关机制。方法①在体实验采用冠状动脉左前降支缺血30 min/灌注60 min法建立大鼠在体心肌I/R模型。Urantide 3,10和30μg.kg-1分别于缺血前10 min经舌下静脉给药。TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学方法检测心肌细胞内Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。②离体实验乳大鼠心肌细胞行缺氧3 h/复氧3 h处理制备H/R模型。Urantide 0.1,1和10 nmol.L-1分别于缺氧前加入。Ho-echst33258染色和流式细胞术检测心肌细胞凋亡。结果①在体实验与假手术组相比,I/R组TUNEL阳性细胞数量明显升高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达量轻度升高,但无统计学差异,Bax蛋白表达量显著升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.01)。与I/R组相比,urantide 10,30μg.kg-1组心肌凋亡细胞显著降低,分别较模型组降低36.6%和57.2%(P<0.05);Bax蛋白表达量显著降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.05);同时,urantide 30μg.kg-1组Bcl-2蛋白表达量也明显升高(P<0.05)。②离体实验与正常对照组相比,H/R组细胞凋亡率明显升高(P<0.01);Hoechst33258结果显示,与模型组相比,uran-tide 0.1,1和10 nmol.L-1组细胞凋亡率分别显著降低了27.9%,59.0%和75.4%(P<0.05)。流式细胞术结果显示,urantide 1和10 nmol.L-1组细胞凋亡率显著降低,分别较H/R模型组降低32.8%和64.7%(P<0.01)。结论 Urantide可减轻I/R或H/R损伤诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与增加Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达有关。     

丙泊酚与肝缺血/再灌注损伤后细胞凋亡

<正>细胞凋亡(apoptosis)是肝缺血/再灌注损伤的一个重要特征[1,2]。众多研究显示,缺血/再灌注损伤后细胞凋亡是多因素、多环节、多途径参与的复杂过程,有氧自由基产生增加、细     

线粒体融合素2通过Ras-PI3K-Akt信号途径抑制缺血再灌注诱导的乳鼠心肌细胞凋亡

目的：研究线粒体融合素2（Mfn2）基因对缺血再灌注诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其相关的信号通路。方法：乳鼠心肌细胞经缺氧/复氧（H/Re）处理模拟心肌缺血再灌注损伤。用Mfn2基因的重组腺病毒（Adv-Mfn2）感染经缺氧复氧处理的乳鼠心肌细胞。采用TUNEL染色、ELISA、流式细胞术等方法检测Mfn2对缺血再灌注诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响。Western blot分析线粒体凋亡路径中Bcl-2蛋白、Bax蛋白、Caspase-9以及磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）的表达变化。结果：TUNEL染色发现Adv-Mfn2感染乳鼠心肌细胞后,细胞凋亡较H/Re组和Adv-LacZ组显著减少。ELISA和流式细胞仪检测结果表明,Adv-Mfn2组心肌细胞凋亡较H/Re组及Adv-LacZ组明显减少,且这一作用呈时间依赖性。Western blot结果显示,Adv-Mfn2组中Bcl-2蛋白表达较H/Re组和Adv-LacZ感染组上升,Bax蛋白表达下降,各组中Caspase-9的表达变化与Bax相同,Adv-Mfn2组的p-Akt蛋白表达水平则较H/Re组和Adv-LacZ感染组明显上升。结论：Mfn2基因主要通过正向调控RasPI3K-Akt信号通路,促进Akt的磷酸化水平,使Bcl-2蛋白表达量增加,Bax蛋白表达量降低,抑制Caspase-9活化,从而抑制缺血再灌注诱导的乳鼠心肌细胞凋亡。     

黄芩苷对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的探讨黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、黄芩苷组(50,100和200 mg.kg-1),以及尼莫地平0.4 mg.kg-1组。利用大鼠大脑中动脉内栓线阻断法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型,通过HE染色、流式细胞术、免疫组化及RT-PCR等方法,观察黄芩苷对缺血再灌注大鼠脑组织形态学改变、神经细胞凋亡率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3表达的影响。结果黄芩苷50,100和200 mg.kg-1iv均可明显改善缺血再灌注损伤所致的大鼠脑组织病理形态学改变,神经细胞凋亡率从模型组的(20.6±5.4)%分别降至(14.5±3.1)%,(11.12±4.2)%及(10.2±2.6)%,促凋亡基因caspase-3 mRNA表达比模型组分别降低23.2%,36.5%及41.0%,其蛋白表达比模型组分别降低25.6%,41.2%及49.3%。结论黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与黄芩苷抑制caspase-3表达有关。     

丹参注射液对兔缺血再灌注心肌损伤中细胞凋亡的影响

目的 力求探明丹参对缺血性心肌损伤凋亡过程的影响,并对缺血再灌注的心肌细胞凋亡是否产生保护作用。方法 将18只新西兰白兔分成假手术组、丹参治疗组、对照组,每组织6只。按心肌缺血再灌注的模型,分别取再灌注部位心肌标本,切片后用TUNEL法检测心肌细胞凋亡的情况,计算心肌细胞凋亡阳性指数(AI)并作统计学分析。结果 3组凋亡细胞数量变化及AI有明显差异,对照组、治疗组与假手术组相比,P<0.01,治疗组与对照组相比,P<0.05。结论 丹参注射液能使缺血再灌注后的心肌凋亡细胞数明显减少,提示丹参可通过显著抑制心肌细胞坏死性损伤及心肌细胞凋亡的发生,保护缺血再灌注的心肌细胞。     

牛磺酸对心肌缺血再灌注损伤保护

目的　研究牛磺酸在兔心肌缺血再灌注(I-R)损伤中的保护作用。方法　采用急性缺血再灌注心肌损伤模型。试验分两组:对照组和牛磺酸治疗组。分别于缺血前,再灌注前和再灌注 2h 取血测内皮素(ET)。结果　牛磺酸治疗组再灌注2hET含量与同期对照组比较有显著性差异 (P<0.05)。结论　牛磺酸的心肌保护作用与其降低再灌注时心肌的内皮素有关。     

卡托普利对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

采用大鼠离体工作心脏,观察卡托普利(CAP)对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。结果表明:CAP 减少心肌肌酸磷酸激酶(CPK)释放、减少心肌丙二醛(MDA)生成、降低心肌细胞内钙含量、减少再灌注诱发的室颤(VF)和室速(VT)的发生率,并对心肌超微结构具有保护作用。作者还把CAP 和超氧化物歧化酶(SOD)作了比较。提示CAP 具有自由基清除作用,对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

线粒体在心肌缺血再灌注损伤中的作用研究进展

心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的关键环节之一是细胞能量供应缺乏。线粒体作为细胞的能量供应站,与缺血再灌注损伤机制的多个环节密切相关,其功能障碍造成缺血再灌注对心肌细胞的严重损害的同时又能启动保护机制减轻MIRI。目前对线粒体在MIRI中所起作用的研究已深入到分子水平,以线粒体上某些分子如线粒体通透性转换孔和敏感性钾通道等为靶点,探索治疗MIRI的新策略成为近来研究的热点。本文就线粒体与MIRI相关的分子机制和以线粒体为治疗靶点的药物研究等方面做一综述。     

异丙酚对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的观察异丙酚对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响并从氧化应激和线粒体介导的凋亡方面探讨其作用机制。方法应用langendorff离体心脏灌注系统建立心肌缺血/再灌注损伤模型。40只SD大鼠随机分为正常对照组、缺血/再灌注模型(I/R)组、异丙酚15、30、60μmol.L-1组。除正常对照外,各组分别平衡灌注20min后,常温全心停灌25min,再灌注30min。Powerlab/8s仪记录各组平衡末、缺血前及再灌30min时的各项心功能指标并测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)活性;检测心肌线粒体活力、膜肿胀度、锰超氧化物岐化酶活性(Mn-SOD)和丙二醛(MDA)含量;原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;流式细胞术检测Bcl-2和Bax的表达,免疫组化法测定天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,9,8蛋白的表达。结果与I/R组相比,异丙酚30、60μmol.L-1能明显改善缺血/再灌后的心功能,减弱冠脉流出液中LDH、CK的活性(P<0.05);心肌线粒体活力有所恢复,膜肿胀度减轻,升高Mn-SOD活性,MDA生成明显减少(P<0.05),心肌细胞凋亡明显减少,Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Caspase-3,9阳性表达细胞数明显减少(P<0.05)。结论异丙酚明显减轻缺血/再灌所致的心肌线粒体的过氧化损伤,抑制线粒体途径的凋亡,可能是其心肌保护作用机制之一。     

Tribulosin protects rat hearts from ischemia/ reperfusion injury

Aim:

To investigate the protective effect of tribulosin, a monomer of the gross saponins from Tribulus terrestris, against cardiac ischemia/reperfusion injury and the underlying mechanism in rats.

Methods:

Isolated rat hearts were subjected to 30 min of ischemia followed by 120 min of reperfusion using Langendorff''s technique. The hearts were assigned to seven groups: control, ischemia/reperfusion (I/R), treatment with gross saponins from Tribulus terrestris (GSTT) 100 mg/L, treatment with tribulosin (100, 10, and 1 nmol/L) and treatment with a PKC inhibitor (chelerythrine) (1 μmol/L). Infarct size was assessed by triphenyltetrazolium chloride staining. Malondialdehyde (MDA), aspartate aminotransferase (AST), and lactate dehydrogenase (LDH) contents as well as superoxide dismutase (SOD) and creatine kinase (CK) activities were determined after the treatment. Histopathological changes in the myocardium were observed using hematoxylin-eosin (H&E) staining. Apoptosis was detected with terminal deoxynucleotidyl transferase nick-end labeling (TUNEL) assay. Bcl-2, Bax, caspase-3, and PKCɛ protein expression were examined using Western blotting.

Results:

Tribulosin treatment significantly reduced MDA, AST, CK and LDH contents, and increased the activity of SOD. The infarct size of I/R group was 40.21% of the total area. GSTT and various concentrations of tribulosin treatment decreased the infarct size to 24.33%, 20.24%, 23.19%, and 30.32% (P<0.01). Tribulosin treatment reduced the myocardial apoptosis rate in a concentration-dependent manner. Bcl-2 and PKCɛ protein expression was increased after tribulosin preconditioning, whereas Bax and caspase-3 expression was decreased. In the chelerythrine group, Bcl-2 and PKCɛ expression was decreased, whereas Bax and caspase-3 expression was increased.

Conclusion:

Tribulosin protects myocardium against ischemia/reperfusion injury through PKCɛ activation.     

异丙酚对离体大鼠缺血/再灌注心肌丙二醛和含水量的影响

目的 :探讨异丙酚对离体大鼠缺血 /再灌注心肌丙二醛 (MDA)和水肿程度的影响。方法 :采用改良Langendorff离体大鼠心脏模型 ,将 2 4只大鼠随机分成 4组。正常对照组 :用K H液持续灌注 80min ;缺血 /再灌注模型组 :用K H液预灌 30min ,然后用4℃的St.Thomas停搏液使心脏停跳 ,常温下全心停灌 2 0min ,K H液再灌注 30min ;异丙酚组和异丙酚 +格列本脲组 :从预灌第 15min改用含相应药液的K H液灌注 ,停灌同缺血 /再灌注模型组 ,然后用含相应药液的K H液再灌注 30min。测定心肌含水量、MDA含量和冠脉流出液肌酸激酶 (CK)活性。结果 :缺血再灌注可使心肌含水量、MDA含量和CK活性明显增高 (P <0 .0 1) ,30 μmol·L- 1异丙酚能显著减轻上述损伤性变化 ,格列本脲对异丙酚的心肌保护作用无影响 (P >0 .0 5 )。结论 :心肌缺血 /再灌注可致心肌水肿 ,异丙酚减轻水肿作用与其抗氧化有关 ,而与ATP 敏感性钾通道的开放无关     

异丙酚对兔缺血/再灌注损伤心肌m-calpain激活线粒体膜通透性转换的影响

目的观察异丙酚对缺血-再灌注损伤心肌细胞中线粒体膜通透性转换（MPT）和细胞凋亡的影响,探讨异丙酚对缺血-再灌注损伤心肌的保护机制。方法4月龄健康雄性新西兰大耳白兔24只,体重2.1～2.3 kg,随机分为3组：假手术组（Sham组）、缺血-再灌注组（I-R组）和丙泊酚组（P组）,每组8只。实验结束取缺血区心肌标本,免疫组织化学方法（SP法）检测m型钙激活蛋白酶（m-calpain）的表达,采用Motic 6.0图像分析系统进行处理,采集平均光密度值（AO值）进行统计分析;JC-1检测线粒体膜电位（Δψm）,流式细胞术（AnnexinⅤ-PI双染色法）测定细胞凋亡。结果Sham组中m-calpain低程度表达,可见少量凋亡细胞;与Sham组比较,I-R组和P组m-calpain值、凋亡细胞数升高,Δψm降低（P〈0.05）;与I-R组比较,P组m-calpain、凋亡细胞数降低,Δψm升高（P〈0.05）。结论异丙泊酚抑制心肌缺血-再灌注损伤时m-calpain的激活,降低线粒体膜通透性转换,对缺血-再灌注心肌产生保护作用。     

雷诺嗪后处理对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

雷诺嗪被认为是新型调节心肌代谢药物,在不影响细胞功能的前提下,降低细胞对氧的需求,改善氧的代谢,缓解心肌缺氧,从而缓解心绞痛[1].雷诺嗪预处理的心肌保护作用已有研究[2],雷诺嗪后处理是否亦具有心肌保护作用尚未见报道.本研究将利用大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤模型,观察雷诺嗪后处理的心肌保护效应,并与雷诺嗪预处理比较.     

异甜菊醇抗豚鼠离体心脏缺氧复灌损伤作用

目的　拟证实双萜类化合物异甜菊醇抗豚鼠离体心脏缺氧复灌损伤作用及与线粒体ATP敏感性钾通道 (mito KATP)的关系。方法　Langendorff装置逆向心脏灌注。预先灌注异甜菊醇 1,5和 10μmol·L- 1,5min ,流速约为 9.5mL·min- 1,全心停灌 30min ,复灌 2 0min ,观察心脏舒缩功能、冠脉流出液酶学和心肌组织学改变。结果异甜菊醇预处理有效减轻缺氧复灌引起的左室舒缩功能下降 ,降低冠脉流出液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶浓度 ;延迟停灌后心脏出现挛缩的时间。mito KATP关闭剂 5 羟基癸酸 10 0 μmol·L- 1可部分逆转异甜菊醇 10 μmol·L- 1的心肌保护作用。光学和电子显微镜观察结果表明 ,异甜菊醇预处理可减轻缺氧复灌引起的心肌纤维和线粒体损伤。结论　异甜菊醇 1～ 10 μmol·L- 1预灌注可有效减轻豚鼠离体心肌缺氧复灌引起的损伤 ,该作用可能与mito KATP的开放有关。     

尼可地尔合用KB-R7943对缺血再灌注损伤离体大鼠心脏的保护作用

目的研究ATP敏感性钾通道开放药尼可地尔合用钠钙交换阻滞药KB-R7943对缺血再灌注损伤离体大鼠心脏的作用。方法离体大鼠心脏通过改良Langendorff装置灌流,减少灌流量造成缺血45 min后再灌注2 h建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,分模型组、尼可地尔组、KB-R7943组、尼可地尔+KB-R7943组,每组10只。TTC染色观察心肌梗死面积,比色法检测冠脉灌流液中过氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,电镜观察心肌超微结构。结果与模型组比较,尼可地尔组和KBR7943组的心肌梗死面积均减小、冠脉灌流液中SOD活性升高、MDA含量下降(P<0.05);与模型组相比,尼可地尔+KB-R7943组的心肌梗死面积、冠脉灌流液中SOD活性和MDA含量改变均非常显著(P<0.01),心肌超微结构损伤减轻,均较尼可地尔组和KB-R7943组有显著改善(P<0.05)。结论尼可地尔合用KB-R7943可显著缩小心肌梗死面积,提高冠脉灌流液中SOD活性,减少MDA含量,减轻心肌超做结构损伤,对缺血再灌注损伤大鼠心脏有保护作用。     

Sevoflurane post-conditioning protects isolated rat hearts against ischemia-reperfusion injury via activation of the ERK1/2 pathway

Aim:

To investigate the role of extracellular signal-regulated kinases (ERKs) in sevoflurane post-conditioning induced cardioprotection in vitro.

Methods:

Isolated rat hearts were subjected to 30 min ischemia followed by 120 min reperfusion (I/R). Sevoflurane post-conditioning was carried out by administration of O₂-enriched gas mixture with 3% sevoflurane (SEVO) for 15 min from the onset of reperfusion. Cardiac functions, myocardial infarct size, myocardial ATP and NAD⁺ contents, mitochondrial ultrastructure, and anti-apototic and anti-oncosis protein levels were measured.

Results:

Sevoflurane post-conditioning significantly improved the heart function, decreased infarct size and mitochondria damage, and increased myocardial ATP and NAD⁺ content in the I/R hearts. Furthermore, sevoflurane post-conditioning significantly increased the levels of p-ERK and p-p70S6K, decreased the levels of porimin, caspase-8, cleaved caspase-3, and cytosolic cytochrome c in the I/R hearts. Co-administration of the ERK1/2 inhibitor PD98059 (20 μmol/L) abolished the sevoflurane-induced protective effects against myocardial I/R.

Conclusion:

Sevoflurane post-conditioning protects isolated rat hearts against myocardial I/R injury and inhibits cell oncosis and apoptosis via activation of the ERK1/2 pathway.     

Schisandrin B decreases the sensitivity of mitochondria to calcium ion-induced permeability transition and protects against ischemia-reperfusion injury in rat hearts

Aim： In order to elucidate the molecular mechanism underlying the cardioprotection afforded by schisandrin B （Sch B）, the effect of Sch B treatment on the sensitivity of mitochondria to Ca^2＋-stimulated permeability transition （PT） was investigated in rat hearts under normal and ischemia-reperfusion （I-R） conditions. Results： Myocardial I-R injury caused an increase in the sensitivity of mitochondria to Ca^2＋ -stimulated PT in vitro. The enhanced sensitivity to mitochondrial PT was associated with increases in mitochondrial Ca^2＋ content as well as the extent of reactive oxidant species production in vitro and cytochrome c release in vivo. The cardioprotection afforded by Sch B pretreatment against I-R-induced injury was paralleled by the decrease in the sensitivity of myocardial mitochondria to Ca^2＋ -stimulated PT, particularly under I-R conditions. Conclusion： The results suggest that Sch B treatment increases the resistance of myocardial mitochondria to Ca^2＋ -stimulated PT and protects against I-R-induced tissue injury.