血管内皮生长因子与骨折愈合

骨折愈合是一个复杂的过程 ,涉及多种细胞的增殖 ,分化和细胞外基质的合成与钙化等修复过程。随着分子生物学技术的发展 ,现已发现骨折位点存在多种生长因子 ,它们在骨折修复中的作用正引起人们的广泛关注。血管的重建贯穿骨折修复的全过程 ,多种细胞因子和生长因子参与新血管的形成 ,如成纤维细胞生长因子、转化生长因子α、β、血小板生长因子、前列腺素 E、血管内皮细胞生长因子、肿瘤坏死因子等。其中血管内皮细胞生长因子 (Vascular endothelialgrowth factor,VEGF)是最有力的血管生长因子 ,它通过与血管内皮上的特异性受体结合 ,发…     

血管内皮生长因子对骨折愈合相关因子表达的调控

目的探讨应用和拮抗血管内皮生长因子(VEGF）对骨折愈骨相关因子表达的影响，并观察骨折愈台过程中的病理改变。方法用105只天上I=白兔制作骨折模型．随机分为对照组、应用VECF组和拮抗vEGF组，分别于伤后8、24、72b和1．3、5、8周测定各组动物骨折端相关因子的表达变化、同时取骨折端标本脱钙进行兜镜观察。结果应甩VEGF使骨折端埘BMP的表达时同提前和延良，拈抗VEGF抑制rBMP的表达，应用VEGF组伤后3J嗣时骨折端充填有纤维性骨痴，软骨骨痂和骨性骨痂．5周时新生骨以编织骨为主，8周时骨折正常愈合；括抗VH押导受伤后初期骨细胞坏死增多，1～5周各时相点骨折端均有灶性坏死出现，3同时骨折部位血管生成明显减少。结论骨折愈台过程需要多因子参与、协调，VEGF有可能是作为骨折愈台过程中的一种重要因子在发挥作用     

血管内皮生长因子在骨折愈合中的作用

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)在骨折愈合过程中的作用 ,探讨应用 VEGF及拮抗VEGF对骨折愈合所产生的影响。方法　利用新西兰大耳白兔 10 5只制作左侧桡骨中段骨折动物模型 ,随机分成三组 ,两组分别应用 VEGF多克隆抗体及 VEGF,另一组为对照组 (不作任何处理 )。在伤后 8、2 4、72小时和 1、3、5、8周利用单光子放射计算机断层显像术测定骨折端血流量变化 ,在 1、3、5及 8周摄 X线片观察骨折愈合情况。结果　应用 VEGF使骨折端血流量在 8小时～ 3周较对照组增高 ,但 X线片却未见明显差异 ;而 VEGF多克隆抗体可导致骨折端血流量在各时相点较对照组明显减少 ,并阻碍了骨折的愈合进程 ,最终使骨折端形成骨不连样改变。结论　骨折愈合过程中缺乏 VEGF将严重影响骨折的正常愈合过程 ,并导致骨不连接 ,应用外源性 VEGF可能通过增加骨折端血流量而对骨折愈合有益     

骨折愈合过程中血管内皮生长因子基因扩增及蛋白表达研究

目的　探讨骨折愈合过程中血管内皮细胞生长因子 (VEGF)基因转录及蛋白表达特点。方法　利用 3 5只大耳白兔制作桡骨骨折模型 ,于不同时相点将兔处死。从骨折端提取总RNA及蛋白样品 ,并进行VEGF基因逆转 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增和蛋白免疫印记检测。结果　从伤后各时相点骨折端提取的总RNA中扩增到 2 3 0bp的目的基因片段 ;利用免疫印记法进行的VEGF多克隆抗体杂交检测到相对分子质量为 45× 10 3 的蛋白条带。结论　骨折后 72h～ 3周为VEGF表达的高峰期 ,其表达亚型为VEGF165。     

血管内皮生长因子基因转染促进骨折愈合的实验研究

目的:(1)寻找外源性血管内皮生长因子(VEGF)体内转染的有效途径;(2)了解外源性VEGF基因表达对于骨折愈合的促进作用.方法:建立大鼠股骨干骨折模型,将Lipofectamine、pBLAST49-mVEGF质粒混合物局部注射于骨折断端的骨膜下,在术后不同时间点观察大体标本,X线摄片和HE染色比较,观察外源性VEGF基因在体内表达对于骨折愈合的影响.结果:大鼠股骨骨折术后,pBLAST49-mVEGF基因转染组骨折愈合及重新塑形时间较对照组缩短2周.结论:(1)局部注射阳离子脂质体Lipofectamine、质粒混合物是一种有效的体内转染途径;(2)pBLAST49-VEGF基因转染能有效促进骨折的愈合.     

血管内皮生长因子防治骨质疏松的研究进展

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与骨质疏松的发生关系密切。其不仅能够促进血管生成,亦在骨形成与重建过程中发挥着重要的作用。现代研究表明,其能够促进内皮细胞增殖及新血管生成,加速骨形成及重建过程,直接促进骨髓间充质干细胞及增加成骨细胞的成骨活性,降低破骨细胞溶骨活性来促进骨形成及增加骨密度,在骨质疏松的发生发展中起到重要的作用。本文就VEGF对骨形成过程中相关细胞的作用及其机制做一分析总结,综述近年来研究进展及临床治疗效果,旨在为今后相关研究及骨质疏松临床治疗提供指导。     

骨折愈合过程中血管内皮细胞生长因子表达的实验研究

目的 观察骨折愈合过程中骨痂组织内血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的表达,进一步探讨ＶＥＧＦ对骨折愈合的影响。方法 采用免疫组织化学方法愈合的不同阶段,骨痂组织内表达ＶＥＧＦ的细胞来源不同,同时表达程度也存在差异。结论 骨折愈合的不同时期,骨痂组织内间充质细胞、软骨细胞、成骨细胞等出现程度不同的ＶＥＧＦ表达,表明ＶＥＧＦ参与调节     

血管内皮生长因子在骨折愈合中的自分泌作用

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在骨折愈合中的自分泌作用。方法利用鼠股骨闭合性骨折模型，应用组织学和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法，观察骨折不同的愈合修复阶段中骨痂的组织学变化，检测各种相应骨痂组织中VEGF及其受体VEGFR1（Flt-1）和VEG-FR2（KDR／Flk-1）的mRNA的表达。结果骨折愈合是一个高度有序的组织学变化过程，骨痂内的膜内化骨，软骨形成，软骨内化骨等过程可同时或连续出现。vEGF（251bp）及受体Flt-1（272bp）和KDR／Flk-1（252bp）在骨折后第7、14天的软骨性骨痂（软骨组织）和骨性骨痂（小梁骨-膜内化骨和软骨内化骨）中均同时清晰表达。表达信号均匀，强度较大。结论骨折愈合过程中的软骨性骨痂和骨性骨痂中的软骨-骨细胞系统共表达VEGF及其两种受体，提示VEGF自分泌作用参与骨折愈合过程。     

大豆异黄酮对去势大鼠骨质疏松性骨折愈合的影响

目的研究大豆异黄酮在大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中的干预效果。方法将50只6月龄雌性SD大鼠随机分成5组:正常对照组、骨折组、骨质疏松组、骨质疏松性骨折组、骨质疏松性骨折治疗组,每组10只。正常对照组、骨折组只进行手术入路而不切除卵巢。骨质疏松组、骨质疏松性骨折组、骨质疏松性骨折治疗组摘除双侧卵巢制备骨质疏松模型。8周后,骨折组、骨质疏松性骨折组、骨质疏松性骨折治疗组制备右侧股骨干中段横行骨折模型。骨质疏松性骨折治疗组每日灌胃大豆异黄酮50 mg/kg(剂量1.5 ml/kg),骨折组、骨质疏松性骨折组灌胃等量生理盐水,连续8周。结果去卵巢后8周,骨质疏松组的骨密度显著低于正常对照组(P0.05),说明骨质疏松模型制作成功。灌胃8周后,骨质疏松性骨折组骨痂组织骨小梁数量及致密度、骨密度、血管内皮细胞生长因子的表达均显著低于骨折组和骨质疏松性骨折治疗组(P0.05)。结论大豆异黄酮在大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中具有积极促进作用。     

血管内皮生长因子在骨折修复过程中血管生成的促进作用

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)在骨折修复过程中对骨折端微血管密度(MVD)的影响，探讨VEGF在骨折端血管生成中的作用。方法用168只大白鼠制作股骨骨折模型，随机分为VEGF组、拮抗VEGF组、对照组，用免疫组织化学分别测定伤后不同时间骨折端MVD的变化。结果应用外源性VEGF后。骨折端MVD明显增加；拮抗VEGF组，骨折端MVD明显下降；对照组MVD低于VEGF组，但高于拮抗VEGF组。结论VEGF在骨折修复过程中，对血管生成具有重要作用，并可能作为一种重要细胞因子参与和调节了骨折修复过程。     

Effect of fluvastatin on vascular endothelial growth factor in rats with osteoporosis in process of fracture healing

OBJECTIVE: To explore the effect of fluvastatin on vascular endothelial growth factor (VEGF) in rats with osteoporosis in the process of fracture healing. METHODS: Fractures at the intermediate piece of the femur were made on 72 Sprague Dawley (SD) rats (weighing initially 290-340 g and aged 6 months) with osteoporosis after ovariectomy for three months, then these rats were divided randomly into the medication administration group (the experimental group) and the control group, 36 rats each. In the experimental group, the rats received fluvastatin lavage (10 mg/kg per day) since the next day of operation lasting for 6 weeks, and the rats in the control group received placebo. Then the expression of VEGF and VEGF mRNA in bony callus of the two groups was measured respectively with immunohistochemistry and in situ hybridization on days of 3rd, 7th, 14th, 21st, 28th, and 42nd, and image analysis was made with real-color image analysis machine. RESULTS: No difference was found in the cellular localization of VEGF and VEGF mRNA gene expression between the experimental group and the control group in process of fracture healing and their expression modes were almost similar. On the 14th day postoperatively, the positive extent of positive cells in the experimental group was higher than that of the control group (P < 0.05). CONCLUSION: Fluvastatin can promote the VEGF level in rats with osteoporosis in process of fracture healing.     

成骨细胞移植促进老龄鼠骨质疏松性骨折愈合过程中VEGF的动态变化

目的：动态观察在幼龄成骨细胞移植促进骨质疏松性骨折愈合过程中，VEGF在不同时相的表达及其生物学意义。方法：通过建立老龄骨质疏松SD大鼠骨折的动物模型，并将体外培养的SD雄性乳鼠成骨细胞移动到SD雌性鼠老年骨质疏松性骨缺损部位，利用免疫组化及原位杂交检测骨折愈合过程中不同时间相的移植标本VEGF、VEGFmRNA的表达，并作图像分析、绘出其动态变化图。结果：实验组VEGF、VEGFmRNA均在7d左右可见有阳性表达的细胞，14d有分泌,高峰其中以软骨细胞中阳性最强，21 d分泌量开始下降，56d后基本消失。而对照且未见明显分泌高峰。结论；成骨细胞细胞促进老龄鼠骨质疏松性骨折愈合，其机制可能是通过促进VEGF的转录和表达，从而促进骨折部位建立良好的血液循环，加速骨形成。     

Regulation of vascular endothelial growth factor on the expression of fracture healing,related factors

Objective ： To study the effect of vascular endothelial growth factor （VEGF）and anti-VEGF on the expression of fracture healing-related factors and observe pathological changes at fractured sites. Methods： Fracture models were established in 105 New Zealand white rabbits and they were randomly divided into control group, VEGF group and anti-VEGF group. The relevant factors expression at fractured sites was assayed and pathological changes were observed in decalcified samples at 8, 24, 72 hours and 1,3,5,8 weeks after fracture. Results： After application of VGEF, the expression of BMP appeared earlier and expression time lasted longer. On the contrary, anti-VEGF completely inhibited the expression of BMP. The fractured sites were filled with fibrous callus, cartilaginous callus and bony callus at the 3rd week and woven bone was constructed at the 5th week. Fracture healing was accomplished at the 8th week in VEGF group. In anti-VEGF polyclonal antibody group, cellular necrosis increased at early period. Continuous focal necrosis was seen in the fractured sites from the 1st week to 5th week. Vascularization reduced obviously at the 3rd week. Conclusions： Fracture healing is a result of mutual regulation and coordination among many factors. VEGF may be an important factor in fracture healing.     

血管内皮生长因子在骨折伴颅脑损伤患者血清中的表达

目的探讨骨折伴颅脑损伤患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)与骨折愈合的关系。方法收集我院2008年9月至2010年9月期间收治的骨折患者40例,分为骨折伴颅脑损伤组及单纯骨折组,每组各20例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定所有患者血清中VEGF水平,并摄X线片观察骨痂出现及骨折愈合情况,分析VEGF水平变化及骨折愈合过程。结果骨折伴颅脑损伤患者血清中VEGF含量在7d左右出现高峰期(519±44ng/ml),维持较高水平至42d,以后逐渐下降;单纯骨折患者血清中VEGF含量在14d左右为高峰期(438±28ng/ml),28d左右开始逐渐下降。骨折伴颅脑损伤患者骨痂形成时间(8d±0.3d)明显早于单纯骨折患者(18d±0.1d),P<0.01;骨折伴颅腑损伤患者骨折愈合时间(42d±0.4d)明显早于单纯骨折患者(84d±0.2d),P<0.01。结论骨折伴颅脑损伤患者血清中VEGF含量明显高于单纯骨折患者,骨痂形成及骨折愈合时间均比单纯骨折患者所需时间短。颅脑损伤患者VEGF升高可能是骨折愈合加快的原因之一。     

VEGF抗体抑制磨损颗粒诱导骨溶解的实验研究

目的通过观察局部注射VEGF及VEGF抗体对小鼠植骨气囊模型中磨损颗粒诱导骨溶解的影响,探讨VEGF在人工关节无菌性松动中的作用。方法取人工髋关节翻修术取出的金属关节假体柄,参照真空球磨法体外制备磨损颗粒,PBS配制成浓度为10 mg/mL颗粒悬液。取8～10周龄雌性昆明小鼠50只,体重约25 g。10只作为气囊植骨模型颅骨供体。剩余40只小鼠随机分为4组(n=10),分别为空白对照组(A组)、颗粒组(B组)、VEGF刺激组(C组)和VEGF抑制组(D组);小鼠背部皮下注射无菌空气制备气囊,第8天切开气囊植入颅骨骨片,制备植骨气囊模型。于植骨后第1天B、C、D组气囊内注入0.5 mL颗粒悬液,A组注入0.5 mL PBS。气囊制备期间第6、7天及植骨后隔天,C、D组气囊内分别注射0.2 mL重组人VEGF和Bevacizumab溶液,A、B组注射0.2 mL生理盐水。植骨2周后取囊壁连同骨片行HE染色、实时荧光定量PCR及ELISA检测。结果各组小鼠均存活至实验完成。大体观察见A组气囊红肿程度轻,新生血管少;B、C、D组气囊明显红肿,可见较多渗出及新生血管,其中C组最重,B组次之,D组介于A、B组间。组织学及分子生物学检测发现,B组囊壁明显炎性反应及骨溶解,囊壁厚度、细胞密度及TNF-α、IL-1β、VEGF表达均较A组明显增加(P<0.05);C组囊壁炎性反应及骨溶解最显著,以上观察指标均高于B组(P<0.05);D组囊壁亦可见炎性反应及骨溶解,但以上指标均低于B组(P<0.05),高于A组(P<0.05)。结论 VEGF在人工关节无菌性松动中具有促进炎性反应及骨溶解作用,局部给予VEGF抗体可抑制磨损颗粒诱导的骨溶解。     

Vascular endothelial growth factor and its receptor expression during the process of fracture healing

Objective： To study the expression regularity of vascular endothelial growth factor （VEGF） during the process of fracture healing, and the type of VEGF receptor expressed in the vascular endothelial cells of the fracture site.
Methods： The fracture model was made in the middle part of left radius in 35 rabbits. The specimens from the fracture site were harvested at 8, 24, 72 hours and 1, 3, 5, 8 weeks, and then fixed, decalcified, and sectioned frozenly to detect the expression of VEGF and its receptor at the fracture site by in situ hybridization and immunochemical assays.
Results： VEGF mRNA and VEGF expression was detected in many kinds of cells at the fracture site during 8 hours to 8 weeks after fracture. Fltl receptor of VEGF was found in the vascular endothelial cells at the fracture site during 8 hours to 8 weeks after fracture, and strong expression of flkl receptor was detected from 3 days to 3 weeks after fracture.
Conclusions： The expression of VEGF and fltl receptor appears during the whole course of fracture healing, especially from 1 to 3 weeks. Flkl receptor is highly expressed in a definite period after fracture. VEGF is proved to be involved in the vascular reconstruction and fracture healing.     

微动对骨折端微循环及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响

目的研究外固定架微动对骨折端微循环及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法60只新西兰大白兔随机分为微动组与固定组,利用微循环检测仪、免疫组化等方法检测固定组和微动组动物骨折端血流量、VEGF蛋白表达。结果微动组骨折端血流量在骨折后2、3、4、5周较固定组有显著增加。骨折后3、4、5周微动组骨折端软骨细胞、成骨细胞中VEGF蛋白表达均较固定组增强。结论微动可以增加VEGF表达,使毛细血管再生增加,促进骨痂生长。     

血管内皮生长因子反义核酸对肝癌生长的抑制作用

目的　探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）在实体肿瘤中的作用。方法　应用分子克隆技术构建人全长ＶＥＧＦｃＤＮＡ反义基因真核表达载体,并用脂质体法转入人肝癌细胞系（ＨｅｐＧ２） ,观察转染后肝癌细胞在裸鼠体内的生长及瘤体内微血管的通透性。结果　各组细胞在裸鼠体内的成瘤时间无明显差别,但反义核酸转染组肿瘤的生长速度及瘤体的重量均明显落后于其他组,肿瘤内血管的通透性也显著降低。结论　ＶＥＧＦ在实体肿瘤的生长过程中起着十分重要的作用。     

血管内皮生长因子在脑胶质瘤中自分泌研究

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)在脑胶质瘤中自分泌现象.方法 采用免疫组织化学及图像分析方法 ,检测74例脑胶质瘤中肿瘤细胞上血管内皮生长因子受体VEGFR1和VEGFR2的表达,取其中42例检测VEGF的表达的情况.结果 VEGF在胶质瘤中表达强度与肿瘤病理级别明显相关(P＜0.05,r=0.331);VEGFR1、2在胶质瘤瘤细胞中表达强度吸光值分别为:正常组织(0.2104±0.0297)和(0.2100±0.0257);WHO I(0.2328±0.0194)和(0.2324±0.0186);WHOⅡ级(0.2533±0.0155)和(0.2514±0.0147);WHO Ⅲ级(0.2709±0.0203)和(0.2720±0.0149);WHOⅣ级(0.2906±0.0282)和(0.2834±0.0285);表达强度与胶质瘤病理级别明显相关(P＜0.01,r=0.748;P＜0.01,r=0.754).结论 在脑胶质瘤中存在VEGF的旁分泌和自分泌现象,并与病理级别有关.