暴发性肝衰竭时肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin表达下降

目的:研究暴发性肝衰竭小鼠大肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin表达的变化.方法:BALB/c小鼠150只随机分为生理盐水对照组(n=30)、内毒素(LPS)对照组(n=30)、D-氨基半乳糖(D-GalN)对照组(n=30)和暴发性肝衰竭(LPS GalN)组(n=60).采用D-GalN和LPS联合ip制备暴发性肝衰竭小鼠动物模型.应用免疫组织化学技术、Westernblot及实时定量PCR检测暴发性肝衰竭进程中,小鼠大肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin的定位、表达及mRNA的变化.结果:occludin蛋白主要沿小鼠大肠黏膜上皮细胞膜的顶端呈线状分布,在暴发性肝衰竭组小鼠,6h时occludin的阳性染色开始减少,9h时更为明显.Westernblot结果与免疫组织化学结果相一致,6h时开始下降(0.48±0.07),9h达到最低值(0.36±0.05),与生理盐水对照组(0.71±0.09)相比差异显著(P<0.05).实时定量PCR结果显示,暴发性肝衰竭小鼠2h时occludinmRNA即开始下降(0.85±0.12),6h时达到最低值(0.72±0.04),与生理盐水对照组(1.00±0.05)相比有明显差异(P<0.05),9h时有所恢复(0.93±0.10).结论:在暴发性肝衰竭过程中,大肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin表达下降,其mRNA也呈下调趋势.     

肿瘤坏死因子α对暴发性肝衰竭小鼠肠上皮细胞紧密连接蛋白表达的影响

目的 研究TNFα对暴发性肝衰竭（FHF）小鼠大肠上皮细胞紧密连接蛋白occludin表达的影响。方法 采用D-氨基半乳糖（GaIN）和内毒素（LPS）联合腹腔注射（ip）制备FHF小鼠动物模型,并设立TNFα组（TNFα10μs／kg,ip）,TNFα抗体组（注射LPS和GaIN前30min尾静脉注射TNFd抗体100μg/只）。在不同的时间点（6h,9h）处死动物,应用免疫组织化学技术、Westernblot及实时定量PCR检测各组小鼠大肠上皮细胞紧密连接蛋白occludin表达的变化。结果 在生理盐水（NS）对照组,几乎整张切片上均可见到沿大肠黏膜上皮细胞膜顶端呈线性分布的occludin阳性染色,但FHF组及TNFα组小鼠的阳性染色较之明显减弱,TNFα抗体组occludin的阳性反应与Ns对照组比较无明显减弱。Westernblot结果与免疫组织化学结果相一致,FHF组及TNFα组小鼠9h时occludin蛋白含量明显下降,与NS对照组相比差异有统计学意义（0．36±0．05,0．48±0．02比0．71±0．09,P〈0．05）,TNFα抗体组与NS对照组相比差异无统计学意义（0．74±0．03比0．71±0．09,P〉0．05）。实时定量PCR结果显示,FHF组与TNFα组小鼠6h时occludinmRNA水平最低,与NS对照组相比差异有统计学意义（0．72±0．04,0．81±0．03比1．00±0．05,P〈0．05）,TNFα抗体组与Ns对照组相比差异无统计学意义（1．01±0．10比1．00±0．05,P〉0．05）。结论 在小鼠暴发性肝衰竭过程中,TNFα介导大肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin表达的下降。     

联合IL-4突变体及IL-5可溶性受体α对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响

目的观察联合应用IL4突变体（IL-4MT）及IL-5可溶性受体d（sIL-5Rα）对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道炎症水平的干预。方法50只雌性BALB／c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、IL-4MT治疗组、sIL-5Rα治疗组、联合IL-4MT及sIL-5Rd治疗组（简称联合治疗组）。哮喘组和治疗组分别给予卵蛋白（OVA）致敏和激发。其中,IL-4MT治疗组、sIL-5Rα治疗组、联合治疗组分别于激发前30min腹腔注射IL-4MT100μg、sIL-5Rα100μg及IL-4MT、sIL-5Rα各100μg进行干预,正常对照组和哮喘组给予生理盐水代替。末次激发后收集BALF计数白细胞和嗜酸粒细胞（EOS）比例;HE染色观察肺组织病理变化;ELISA法测定各组BALF中IL4、IL5、嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）水平变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的d-UTP切口末端标记（TUNEL）法检测肺组织EOS凋亡情况。结果与正常对照组比较,哮喘组小鼠肺组织出现典型病理损害,EOS比例（t=-50．48,P〈0．001）、IL-4（t=-12．98,P〈0．001）、IL-5（t=-20．51,P〈0．001）、Eotaxin（t=-17．56,P〈0．001）水平均显著升高,EOS凋亡率（t=5．35,P〈0．001）显著下降;与哮喘组比较,各治疗组小鼠肺组织病理损害明显减轻,EOS比例（II,4MT治疗组t=27．4,P〈0．001;sIL-5Rα治疗组t=29．41,P〈0．001;联合治疗组t=37．25,P〈0．001）明显下降;Eotaxin（IL-4MT治疗组t=6．92,P〈0．001;sIL-5Rα治疗组t-4．96,P〈0．001;联合治疗组t=9．95,P〈0．001）水平明显下降;EOS凋亡率（IL-4MT治疗组t=-4．26,P〈0．001;sIL-5Rα治疗组t=-5．81,P〈O．001;联合治疗组t=-7．28,P〈0．001）明显增高;与单独治疗组相比,联合治疗组对炎症的缓解效果更为明显。结论联合IL-4MT及sIL-5Rα可明显降低哮喘小鼠IL-5、Eotaxin水平,减少肺部EOS的浸润和增加其凋亡,可以明显缓解哮喘气道炎症。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织肾上腺髓质素的表达

目的 探讨肾上腺髓质素（adrenomedullin，ADM）在不同月龄大鼠脑缺血再灌注（I／R）脑组织的表达情况。方法 采用栓线法制成大鼠大脑中动脉I／R模型，阻断血流2h后再灌注4h。应用免疫组织化学染色法检测不同月龄段大鼠局灶性脑I／R后血浆ADM。结果 正常大鼠脑内即有ADM表达，假手术后ADM表达略有增加，但与正常对照组相比无明显差异（P〉0．05）；大鼠脑I／R后ADM免疫阳性细胞增多，与正常对照组及假手术组相比差异显著（均P〈0．05）；大鼠脑I/R后缺血侧及缺血对侧ADM免疫阳性细胞均增多，但以缺血侧区域增多最为明显（P〈0．05）。老龄大鼠脑I／R后ADM免疫阳性细胞数明显高于青年大鼠（P〈0．05）。结论 脑I／R后ADM表达增强，ADM表达增强与血管硬化相关。     

利拉鲁肽在体内外调节microRNA促进胰岛β细胞增殖

目的探讨利拉鲁肽对db／db小鼠胰腺及大鼠胰岛细胞瘤细胞系INS-1中microRNA表达的影响。方法将20只4周龄雄性db／db小鼠按随机数字表法分为对照组和利拉鲁肽组（每组10只）。分别给予0．1ml生理盐水或300ng／g利拉鲁肽皮下注射,每E12次。8周后测定糖化血红蛋白,行腹腔注射葡萄糖耐量试验（TPGTT）。8周末处死小鼠,免疫组化法分析小鼠胰腺B细胞增殖水平;实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定小鼠胰腺microRNA（miR．375和miR-34a）的表达。INS-1细胞分别给予0．5mmol/L棕榈酸培养0、48、72h或100nmol／L利拉鲁肽预处理12h后,给予0．5mmol／L棕榈酸培养72h,RT—PCR测定miR-375和miR-34a表达水平。采用t检验及方差分析进行组间数据比较分析。结果与对照组相比,利拉鲁肽组小鼠糖化血红蛋白水平降低（分别为7．3％±0．3％和4．7％±0．6％,t=16．47,P〈0．01）;IPGTT血糖曲线下面积降低[分别为（4568-4-197）和（1927±127）mmol·L-1·min-1,t=26．53,P〈0．05];胰岛素曲线下面积增加[分别为（1080±247）和（2818±378）μg·L-1·min-1,t=7．73,P〈0．05]。免疫组化法显示,与对照组相比,利拉鲁肽组小鼠胰岛素阳性面积增加（分别为1．40±0．30和0．37±0．09,t=19．14,P〈0．01）,Brdu染色阳性细胞比例增加（分别为2．40％±0．22％和0．73％±0．10％,t=4．97,P〈0．01）。利拉鲁肽组小鼠胰腺miR-375与miR-34a表达较对照组分别降低50％（分别为1．1±0．3和2．2±0．5,t=3．08,P〈0．05）和71％（分别为1．1±0．3和3．8±1．2,t=2．80,P〈0．05）。棕榈酸培养使INS-1细胞miR-375表达呈剂量、时间依赖性增加,利拉鲁肽可抑制棕榈酸诱导的miR-375表达（F=7．20,P〈0．01）。结论microRNA可能是利拉鲁肽调节β细胞增殖的靶点之-。     

肝硬化大鼠肾小球血管袢和肾小球前小动脉Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体的表达

目的 探讨跨膜信息传导机制在肝硬化并肝肾综合征发病机制中的作用。 方法 应用40％四氯化碳制备肝硬化动物模型,免疫组织化学方法检测肝硬化大鼠肾小球血管袢和肾小球前小动脉的Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R),观察其表达情况。 结果 肾小球血管袢和肾小球前小动脉Ⅰ型IP3R表达,实验组分别为:4.97±1.34、4.09±1.14,正常大鼠组分别为:2.43±1.67、1.83±1.32,两组之间差异有非常显著性,t值分别为3.43和3.70,P值分别为0.0037和0.0022;实验组肾小球血管袢和肾小球前小动脉Ⅰ型IP3R表达,差异有显著性,t值为2.28,P=0.0458。大鼠肾脏常规病理检查均无改变。 结论 跨膜信息传导机制在肝硬化并肝肾综合征发生机制中发挥重要作用。     

阿托伐他汀对糖基化白蛋白诱导的大鼠肾脏病变的保护作用

目的观察阿托伐他汀能否改善牛血清糖基化白蛋白（GBA）诱导的肾脏病变。方法健康雄性SD大鼠40只（体重230～250g）,采用随机数字表法分为正常对照组（给予普通饲料）、高脂组（仅给予高脂饲料）、GBA组（腹腔注射GBA40mg·kg-1·d-1,并给予高脂饲料）、GBA＋阿托伐他汀组（腹腔注射GBA40mg·kg-1·d-1,阿托伐他汀20mg·kg-1·d-1灌胃,并给予高脂饲料）,每组各10只。24周后酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测血清糖基化终末产物水平,采用实时定量聚合酶链反应（PCR）法测定大鼠肾组织糖基化终末产物受体（RAGE）mRNA表达,采用免疫组化法检测大鼠肾组织中S100（一种糖基化终末产物）、RAGE蛋白的表达,采用HE染色进行肾脏病理观察,同时测量肾小球及系膜区面积。应用t检验和方差分析进行数据分析。结果实验24周4组大鼠之间血糖、血清胆固醇和血肌酐水平差异均无统计学意义（F=1．780、2．012、2．075,均P〉0．05）。与高脂组比较,GBA组的大鼠血清糖基化终末产物水平明显升高[（72±4）比（50±5）μg／L,t=3．445,P〈0．05],肾脏中肾小球肥大,系膜区基质增生明显[肾小球面积分别为（9505±326）、（7920±518）μm2,t=2．587,P〈0．05;系膜区面积分别为（5752±316）、（1898±259）μm2,t=9．435,P〈0．05],肾脏RAGEmRNA表达明显升高（9．7±1．0比2．4±0．5,t：6．629,P〈0．05）,同时肾脏S100、RAGE蛋白表达增加。与GBA组比较,GBA＋阿托伐他汀组的大鼠血清糖基化终末产物水平明显降低[（53±3）比（72±4）μg／L,t=3．298,P〈0．05],肾脏中肾小球肥大明显好转、系膜基质增生程度减轻[肾小球面积分别为（7276±326）、（9505±326）μm2,t=4．834,P〈0．05;系膜区面积分别为（2436±316）、（5752±316）μm2,t=7．418,P〈0．05],肾脏RAGEmRNA表达水平下降（3．3±0．8比9．7±1．0,t=4．978,P〈0．05）,同时肾脏S100、RAGE蛋白表达减少。结论阿托伐他汀可通过降低血清糖基化终末产物水平、下调肾脏RAGE的表达来减轻糖基化终末产物诱导的肾脏病变。     

组织蛋白酶B在小鼠暴发性肝衰竭肝组织中的表达

目的研究组织蛋白酶B在暴发性肝衰竭小鼠肝组织中的表达。方法雄性昆明种小鼠腹腔同时注射脂多糖和D-氨基半乳糖,动态观察给药后2、4、6、8 h肝脏病理改变;以TUNEL法检测肝细胞凋亡;应用免疫组化和RT-PCR检测肝组织中组织蛋白酶B的表达。结果肝组织病理：给药后4 h出现凋亡细胞,6 h大量肝细胞凋亡,8 h以肝细胞坏死为主;TUNEL：给药后凋亡指数逐渐升高,6 h达到高峰,8 h有所降低;免疫组化：组织蛋白酶B表达2 h无明显变化（P〉0.05）,4 h逐渐增加,8 h达到高峰（P〈0.05）;RT-PCR：2 h组织蛋白酶B mRNA的表达量无明显变化（P〉0.05）,4 h表达略有升高,6 h表达最高,8 h表达有所降低（P〈0.05）。结论组织蛋白酶B在小鼠暴发性肝衰竭肝组织中表达明显增加,提示其可能通过促进肝细胞的凋亡而参与了暴发性肝衰竭的发病。     

心肌去乙酰化酶SIR33对缺血／再灌注小鼠心律失常的影响

目的探讨心肌线粒体去乙酰化酶SIRT3对急性缺血再灌注（I／R）所致心律失常的影响。方法：以24只SIRT3基因敲除型小鼠为实验对象,用24只野生型小鼠为对照,两种小鼠均随机各分为对照组、假手术组、I／R模型组及I／R＋烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）治疗组,每组6只小鼠（rt=6）。采用冠脉左前降支结扎缺血30 min再灌注2 h建立在体大鼠急性心肌I／R模型,于术中监测心电指标。取心肌组织检测SIRT3、锰超氧化物歧化酶（MnSOD）和过氧化氢酶（Catalase）蛋白的表达和心肌内氧自由基（ROS）的水平。结果：与野生型对照小鼠相比,SIRT3基因敲除型小鼠心肌中SIRT3、MnSOD和Catalase蛋白表达的水平显著降低。心律失常评分的结果显示,SIRT3基因敲除型小鼠的假手术组即可观察到心律失常。SIR13基因敲除可导致小鼠心肌I／R所致心律失常显著加重（与野生型模型组相比,P〈0-05）。心肌I／R后,SIRT3基因敲除型小鼠心肌中ROS的增加程度明显高于野生型模型组小鼠（P〈0-05）。预先采用NAD＋治疗,可显著提高野生型I／R小鼠心肌SIRT3的活性（与野生型小鼠模型组相比,P〈0-05）,显著增加心肌MnSOD的活性,进而有效地抑制I／R小鼠心肌中ROS的水平,有效缓解I／R所致心律失常（与野生型小鼠模型组相比,均P〈0-05）。但是,SIR73基因敲除后,NAD＋治疗引起的上述心肌保护作用基本消失。结论：心肌中SIRT3表达的降低可能是加重心肌I／R过程中氧化应激损伤并促发心律失常的重要机制。SIRT3正常活性的维持有助于对抗心肌I／R损伤（MIRI）的发生。     

脑脉通促进老龄大鼠脑缺血再灌注微血管再生作用

目的证实脑脉通促进老年脑缺血再灌注（I／R）脑微血管再生的作用。方法将SD雄性的老龄大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、脑脉通组，测定各组神经功能评分、脑组织含水量、梗死面积、脑组织病理改变、细胞凋亡和脑组织微血管密度（MVD）及血管场面积变化。结果脑脉通组I／R3d微血管超微结构改善明显，仅见毛细血管周围轻度水肿，吞饮泡减少，微绒毛减少，线粒体水肿减轻，基底膜仅有轻度缺损，局部水肿，到I／R12d血管超微结构基本恢复正常。脑脉通组I／R3、6、12d神经功能评分均低于模型组（P〈0．01）。脑脉通组I／R6、12d神经功能评分低于尼莫地平组（P〈0．05），脑脉通组I／R6、12d神经功能评分低于I3h、1、3d（P〈0．01，P〈0．05）。与模型组比较，尼莫地平组和脑脉通组I／R 1、3、6、12d凋亡细胞数减少（P〈0．01）；与尼莫地平组比较，脑脉通组I／R3、6d凋亡细胞数减少（P（0．01）。脑脉通组I／R3d细胞凋亡数多于I／Rld（P〈0．05）。与模型组比较，脑脉通组I3h、I／R1、3、12dMVD增多（P〈0．01）；脑脉通组I／R12dMVD增多较尼莫地平组显著（P〈0．01）；脑脉通组I／R6d微血管数低于脑脉通组I3h、I／R1、3d（P〈0．01，P〈0．05），脑脉通组I／R12dMVD高于脑脉通组I／R6d（P〈0．01）。与模型组比较，脑脉通组I3h、I／R3、6、12d血管场面积增加（P〈0．01，P〈0．05）；与尼莫地平组比较，脑脉通组I3h血管场面积增多（P〈0．01）。结论脑脉通对老年脑I／R损伤具有明显保护作用，抑制细胞凋亡和促进脑微血管再生。     

慢性间断性缺氧对小鼠肾组织结构、基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

目的 观察慢性间断性缺氧（chronic intermittent hypoxia，CIH）对小鼠肾脏结构，基质金属蛋白酶-1、9（matrixmetallo-proteinase-1、9，MMP-1、9）及其组织抑制因子-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）表达变化的影响，探讨其在睡眠呼吸暂停综合征（sAs）肾损害中的作用。方法 将30只ICR小鼠随机分为4组，空气模拟对照组（10只）、CIH2周组（5只）、CIH4周组（5只）、CIH8周组（10只）。采用光镜下病理检查和免疫组织化学方法观察实验小鼠肾组织结构变化和MMP-1、MMP-9及TIMP-1在肾脏的表达。结果 ①CIH各组见肾小管上皮细胞肿胀、空泡、颗粒变性，随缺氧时间延长，变性范围扩大，主要表现为近曲小管的病理改变，其中8周组可见部分肾小管坏死。②MMP-1、MMP-9及TIMP-1主要表达于肾小管上皮细胞。③与对照组比较，CIH各组MMP-1表达均明显减少（P均d0．01），2周时降至最低，随后MMP-1表达略有回升；CIH组间两两比较差异无显著性（P〉0．05）。MMP-9在2周组的表达水平与对照组相比均显著升高（P〈0．01），而在4、8周两组则显著降低（P均d0．01）。CIH各组TIMP-1均呈高表达（P均〈0．01），其中高峰表达在2周缺氧组。CIH各组MMP-1／TIMP-1均显著降低（P均〈0．05），其中2周组达最低（P〈0．01），CIH各组间两两比较差异无显著性（P〉0．05）。MMP-9／TIMP-1随间断缺氧时间的延长呈下降趋势，CIH4周、8周两组均低于对照组（P〈0．05），最低表达在8周组（P〈0．01）。④随间断缺氧时间延长，TIMP-1与MMP-1之间存在负相关关系（r=-0．769，Pd0．01）；TIMP-1与MMP-9之间存在正相关关系（r=0．392，PdO．05）。结论 CIH可引起实验小鼠肾小管变性、坏死等病理变化；同时肾小管上皮细胞MMP-1、MMP-9、TIMP-1表达异常；MMP-1／TIMP-1与MMP-9／TIMP-1下降，这可能参与了SAS肾损害的发生发展过程。     

JNK通路在内质网应激预处理诱导脑缺血耐受中的作用

目的 探讨JNK通路在内质网应激预处理诱导海马CAI区神经元缺血耐受中的作用及其机制。方法将144只SD大鼠随机分为假手术（SH）组、缺血／再灌注（I／R）组、内质网应激预处理（IP））组、IP＋IR组、Curcu-min＋I／R（CU）组、Curcumin＋IP＋I／R（CP）组、Anisomyein＋IR（AN）组、Anisomycin＋IP＋VR（AP）组及溶剂对照＋I／R（VE）组。采用TUNEL法检测海马CA1区凋亡细胞,免疫组化法和Western-Blot法检测GRP78、p-JNK及c—Jun蛋白在海马CA1区的表达。结果SH组GRP78蛋白表达微弱,与其相比,I／R、CU、AN及VE组表达升高（P〈0．05）,IP、IP＋IR、cP、AP组表达明显升高（P〈0．01）;与IP组比较,IP＋IR、CP、AP组GRP78蛋白表达升高（P〈0．05）;与I／R组比较,IP＋I／R、cu及cP组海马CA1区凋亡锥体细胞数和p-JNK及c-Jun蛋白表达水平均降低（P均〈0．01）,降低程度为CP组〉IP组〉cu组,AN组CA1区凋亡锥体细胞数和p-JNK、c-jun蛋白表达水平升高（P均〈0．01）;Anisomycin可部分抵消内质网应激预处理的保护效应。结论JNK通路参与大鼠海马CA1区神经元缺血性凋亡,内质网应激预处理可通过抑制CA1区JNK磷酸化、减少c-Jun蛋白表达而保护海马细胞,内质网应激预处理与抑制JNK通路激活对脑缺血耐受有相似的保护作用。     

Ⅱ型单纯疱疹病毒／人类免疫缺陷病毒-1共感染者肾功能损伤危险因素的分析北大核心CSCD

目的揭示Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）／HIV1共感染对HIV-1感染者肾功能的影响,分析肾损伤相关危险因素。方法收集2011年10月至2014年2月广州市第八人民医院就诊的HIV-1阳性者302例,分为HIV阳性HSV-2阳性组和HIV阳性HSV-2阴性组,选取同期HIV阴性HSV-2阳性者作为对照组。比较3组患者肾功能指标的差异,Pearson相关分析HSV-2DNA定量与肾功能受损程度的相关性,多因素Logistic回归筛选肾损伤相关危险因素。结果HIV-1阳性HSV-2阳性组128例,HIV-1阳性HSV-2阴性组174例,HIV-1阴性HSV2阳性组143例。与HIV1阴性HSV-2阳性组相比,HIv_1阳性HSv-2阳性组和HIV-1阳性HSV-2阴性组血肌酐（F=14．37,P〈0．01）、BUN（F=12．54,P〈0．01）、24h尿蛋白定量（F=16．58,P〈0．01）和尿蛋白／肌酐比值（F=6．37,P=0．018）均显著升高,而肾小球滤过率（eGFR）显著下降（F=11．96,P〈0．01）。同时,与HIV-1阳性HSV-2阴性组相比,HIV1阳性HSV-2阳性组HIV1RNA定量水平（t=5．876,P〈0．01）、血肌酐（t=2．315,P=0．012）、24h尿蛋白定量（t=3．648,P=0．004）和尿蛋白／肌酐比值（t=2．312,P=0．012）均升高,而CD4＋T淋巴细胞计数（t=4．903,P〈0．01）,eGFR（t=2．275,P=0．016）则降低,差异均有统计学意义。HSV-2DNA与HIV-1RNA定量水平（r=0．626,P=0．002）、血肌酐（r=0．798,P〈0．01）、24h尿蛋白定量（r=0．702,P〈0．01）、尿蛋白／肌酐比值（r=0．686,P〈0．01）呈正相关,而与CD4＋T淋巴细胞计数（r=0．796,P〈0．01）、eGFR（r=0．656,P〈0．01）呈负相关。HSV-2DNA定量（OR=1．166,P=0．021）、HIV-1RNA定量（OR=1．581,P〈0．01）、CD4＋T淋巴细胞计数〈200／μL（OR=1.762,P〈0．01）、年龄（OR=1．472,P〈0．01）、≥1项并发症（OR=1．062,P=0．032）、糖化血红蛋白（OR=1．124,P=0．015）是患者肾损伤的独立危险因素。结论HSV-2／HIV-1共感染可能加重HIV-1感染者肾损伤,且HSV2DNA定量是肾损伤潜在危险因素之一。     

妊娠期糖尿病妇女产后转归的随访性研究

目的探讨妊娠期糖尿病（GDM）对女性产后3-4年糖、脂代谢的影响。方法选取2006年6月至2007年12月于北京大学第一医院分娩的妇女222人为研究对象,其中妊娠期糖尿病患者124例（GDM组）,另外同期分娩的糖代谢正常妇女98名为对照组。在2010年11月至2011年1月对受试者进行随访。体格测量包括身高、体重、腰围、臀围、收缩压、舒张压及体脂百分数。血清学测量包括空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹胰岛素及C肽,并计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）及敏感指数（HOMA．IS）。采用t检验、方差分析行统计学分析。结果产后3-4年,与对照组妇女相比,GDM组体重[（61±10）vs（59±9）kg,t=2．023,P〈0．05]、腰围[（78±9）vs（76±8）cm,t：2．229,P〈0．05]、体脂百分数（34．3％vs31．4％,t=3．102,P〈0．05）、空腹血糖[（5．3±0．8）vs（4．9±0．3）mmol／L,t=5．369,P〈0．001]和甘油三酯[（1．1±0．6）vs（0．9±0．4）mmol／L,t=2．346,P〈0．05]均显著增加,HOMA-IS[（0．077±0．029）vs（0．086±0．029）,t=-2．221,P〈0．05]水平显著下降。GDM组及对照组中心性肥胖的比例（37．1％vs24．5％,X^2=4．03,P〈0．05）、空腹血糖受损的比例（7．4％vs1．0％,X^2=5．05,P〈0．05）、舒张压≥85mmHg（1mmHg=0．133kPa）的比例（16．9％vs6．1％,X^2=5．991,P〈0．05）及代谢综合征的比例（13．2％vs5．2％,X^2=4．026,P〈0．05）显著升高。结论妊娠期糖尿病妇女在产后3-4年发生中心性肥胖、胰岛素敏感性下降、FBG受损、高脂血症以及代谢综合征的风险显著高于孕期血糖正常的妇女。     

50例非心源性猝死患者心肺复苏后24小时内左室功能变化的临床研究

目的：研究心肺复苏后多器官功能障碍综合征（PR-MODS）患者在24h内左心室功能变化规律。方法：对急诊50例既往无心功能障碍的PRMODS患者，监测心肺复苏后12、24h左心室舒张末期容积（LVEDV）、收缩末期容积（LVESV）、射血分数（LVEF）和每搏输出量（SV）。将存活〉12h组与存活〈12h组比较。结果：存活〉12h组（36例）其LVEDV和LVESV高于正常值[（106．22±16．06）ml vs （70．0±20．0）ml，t=16．96，P〈0．01；（46．94±11．72）ml vs （24．0±10．0）ml，t=11．74，P〈0．01）]；且其12h内LVEDV和LVESV低于存活〈12h组（14例）[（112．58±16．06）ml vs（129．35±21．15）ml，t=3．03，P〈0．01；（51．56±14．12）ml vs （64．14±14．32）ml，t=2．82，P％0．01）]。存活〉12h组其LVEF和SV低于正常值[（48．78％±5．76％）vs 〉50％；（62．17±5．56）ml vs（71．3±9．97）ml ，t=7．74，P〈0．01）]；且12h内LVEF和SV高于存活〈12h组[（45．06％±6．62％）vs （39．43％±8．14％），t=2．53，P〈0．01；（56．31±7．10）ml vs（54．57±6．80）ml，t=0．78，P〈0．01）]。结论：PR-MODS患者左心功能均较正常低下，且存活时间与心脏损伤程度有关。     

单纯葡萄糖筛查试验异常孕妇的胰岛素敏感性与β细胞功能变化

目的探讨单纯葡萄糖筛查试验（GCT）异常孕妇在孕期24～28周及产后6～12周胰岛素敏感性和胰岛B细胞功能。方法50gGCT异常而75g口服葡萄糖耐量试验（OGTT）正常者120例为单纯GCT异常组;50gGCT正常,75gOGTF亦正常者80名为正常对照组。采用稳态模式胰岛素抵抗指数（HOMA．IR）和胰岛素敏感指数（ISOGTF）评价胰岛素敏感性,稳态模式胰岛13细胞功能指数（HBCI）和30min净增胰岛素／30min净增血糖比值（△I30／△G30）评价胰岛β细胞分泌功能。比较孕期24～28周及产后6～12周的相关指标。统计学计量资料采用x±s表示,计数资料采用x2检验。结果（1）孕期24～28周,两组孕妇葡萄糖曲线下面积（AUCG）、糖化血红蛋白（HbAlC）和△I30／△G30比较差异无统计学意义;单纯GCT异常组空腹胰岛素（Fins）、HOMA—IR明显高于对照组（分别为14±6VS13±4,t=12．814;2．8±1．3VS2．5±0．9,t=11．7,均P〈0．01）;单纯GCT异常组ISOGTT低于对照组（0．8±0．6VS1．1±1．0,t=4．837,P〈0．05）;单纯GCT异常组胰岛13细胞功能指数（HBCI）低于对照组（369±301VS567±486,t=5．321,P〈0．05）;（2）单纯GCT异常组新生儿出生体质量高于对照组[（3．4±0．2）VS（3．2±0．1）kg,P〈0．01];（3）产后6～12周,单纯GCT异常组AUCG、HbAlc明显高于对照组[分别为30．7±2．6VS27．7±1．2,（5．6±0．3）％VS（5．3±0．2）％,均P〈0．01];单纯GCT异常组Fins、HOMA—IR明显高于对照组（分别为124-5VS11±3,P〈0．05：2．5±0．9VS2．2±0．6,P〈0．01）;单纯GCT异常组的ISOGTT低于对照组（1．0±0．6VS1．5±1．0．P〈0．01）;单纯GCT异常组HBCI低于对照组（1794-95VS307±165,P〈0．01）;（4）单纯GCT异常组产后有9．1％糖代谢异常者,对照组有1．2％糖代谢异常者,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论单纯GCT异常者孕期和产后均存在更重的胰岛素抵抗和β细胞功能受损。单纯GCT异常产后糖代谢异常发生的风险增加。     

环氧合酶-2在小肠缺血再灌注损伤中对免疫状态的影响

背景：小肠缺血再灌注（I／R）是危重症过程中常见的病理改变,研究其损伤发生机制对多器官功能障碍综合征的防治具有重要意义。目的：探讨COX-2在小肠I／R损伤中对免疫状态的影响。方法：48只大鼠随机分为假手术组（n=8）、I／R模型组（n=20）和COX-2选择性抑制剂尼美舒利干预组（n=20）,干预组于造模前1h予尼美舒利80mg／kg灌胃。各组分别于再灌注3、6、12、24h后采集标本,行小肠组织COX-2mRNA、血清D-乳酸、血清促炎（IL-6、TNF-a）和抗炎（IL-10）细胞因子以及全血T细胞亚群检测。结果：I／R模型组小肠组织COX-2mRNA表达、血清D-乳酸水平在再灌注后3h即明显增高,6h时达峰值,各时点均显著高于假手术组（P〈0．05）,同时血清IL-6、TNF-a、IL-10水平显著增高（P〈0．05）,全血CD4＋／CD8＋比值持续降低（P〈0．05）。与同时点I／R模型组相比,尼美舒利干预组COX-2mRNA表达、D哥L酸水平显著降低（P〈0．05）,IL-10水平、CD4＋／CD8＋比值显著增高（P〈0．05）,IL-6、TNF-a水平略有降低。结论：COX-2在小肠I／R损伤中发挥重要作用,其机制可能为改变促炎／抗炎细胞因子之间以及CD4＋／CD8＋细胞之间的动态平衡,即同时作用于非特异性和特异性免疫系统,导致严重的机体免疫状态紊乱。COX-2选择性抑制剂可能系通过抗炎和免疫调节作用改善小肠I／R损伤。     

“冠心颗粒”抗缺血／再灌注损伤作用及JNK蛋白信号通路在其中的调节作用

目的：观察具有抗心肌缺血／再灌注（I／R）损伤作用的中药“冠心颗粒”（GXKL）对心肌I／R损伤的拮抗作用及其可能的机制。方法：将36只SD大鼠随机分为3组：对照组,I／R组及GXKL组,每组12只大鼠。制备大鼠离体心脏心肌I／R模型再灌注30rain时,分别检测①离体心脏功能指标：左室收缩压（LVDP）、心率（HR）、左室舒张末压（LVEDP）及心室内压最大变化率（±dp／dtmax）;②心律失常评分;③应用生化法检测肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）的活性;④应用蛋白印迹法检测再灌注0min时,心肌组织中JNK的磷酸化水平。结果：与I／R组比较,GXKL组：①可明显提高I／R大鼠心肌中的±dp／dtmax[（2327．1±334．5）US．（1823．1±499．8）mmHg／s,P〈0．05],并明显改善LVDP、LVEDP等指标[LVDP：（39．6±9．1）vs．（24．2±10．1）mmHg,P〈0．05;LVEDP：（19．9±9．9）摊．（31．0±9．4）mmHg,P〈0．05];②可明显降低心律失常的评分（11．58±4．81郴．6．33±1．88,P〈0．05）;③可明显降低LDH和CK的水平[（282．2±29．6）YS．（222．9±30．2）U／L和（299．8±45．4）US．（251．9±41．8）U／L,P〈0．05];④可明显降低缺血心肌组织中磷酸化JNK的水平（0．75±0．07椰．1．54±0．10,P〈0．05）。结论：GXKL可明显改善缺血心肌抗缺血、缺氧的能力,增加心肌收缩力,减轻心律失常;其对离体心肌I／R的拮抗作用可能与JNK途径密切相关。     

Notch胞内域1对高糖诱导小鼠肾小球足细胞凋亡的影响

目的通过体外高糖培养小鼠肾小球足细胞,检测Notch胞内域1（NICDl）的表达与肾小球足细胞凋亡的关系并了解其他信号通路是否介导高糖对Notch通路的激活,以探讨治疗糖尿病肾病的潜在方向。方法高糖培养小鼠足细胞,于刺激0、12、24、48、72h后收集细胞,检测NICDl蛋白表达情况。将细胞分为7组：正糖组、高糖组、高糖＋1分泌酶抑制剂（GSI,抑制NICDl活化）组、高糖＋p38细胞分裂素活化蛋白激酶抑制剂组、高糖＋Janus激酶2抑制剂组、高糖＋转化生长因子B,I型受体抑制剂组和高糖＋磷酸肌醇3激酉每／蛋白激酶B抑制剂组。分别采用免疫细胞化学和Westernblotting法检测NICDl的表达,流式细胞术和原位缺口末端标记法（TUNEL）观察足细胞凋亡情况。两组间数据比较采用t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析。结果高糖培养足细胞NICDl蛋白较正糖组（0．079±0．010）增加,12h开始增加（0．443±0．075）,48h达峰（0．746±0．034）,72h略下降（0．658±0．056,F=6．235,P〈0．01）。流式细胞术及TUNEL显示48h时足细胞凋亡率升高,给予GSI后抑制NICDl的活化及足细胞凋亡（P〈0．01）;给予Janus激酶2（0．193±0．096）和转化生长因子B,I型受体抑制剂（0．225±0．067）可抑制高糖对NICDl蛋白的活化（t=6．781、4．287,均P〈0．叭）。结论高糖通过Notch通路诱导足细胞凋亡,高糖对Notch通路的激活可能通过Janus激酶／转录激活因子和转化生长因子β1／Smad通路。     

冬虫夏草对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞色素上皮衍生因子和血管内皮生长因子表达的影响

目的观察冬虫夏草对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞色素上皮衍生因子（PEDF）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨其肾脏保护的作用机制。方法35只8周龄清洁级雄性sD大鼠,体重260～280g,根据体重按随机数字表法分为正常血清组（n=18）、低剂量虫草提取液喂养组（5g·kg^-1·d^-1,n=8）和高剂量虫草提取液喂养组（10g·kg^-1·d^-1,n=9）,采用生理盐水及不同剂量虫草提取液灌胃8d后,分离静脉血提取对照血清及不同浓度的冬虫夏草含中药血清。体外培养HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,之后分别加入正常血糖正常血清[正常血糖组（NC组）：5．6mmol／L葡萄糖＋10％胎牛血清（FBS）＋1％正常大鼠血清]、高血糖正常血清[高血糖组（HG组）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％正常大鼠血清]、低剂量虫草含药血清[低药组（LD）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％低剂量虫草含药血清]和高剂量虫草含药血清[高药组（HD）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％高剂量虫草含药血清]进行培养,采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）测定各组细胞PEDF及VEGFmRNA的表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组细胞上清液中PEDF及VEGF的水平。组间资料比较采用单因素方差分析,样本间资料比较采用t检验。结果与NC组相比,HG组PEDFmRNA表达明显下降（24h：0．375±0．011比0．507±0．008,t=16．828,P〈0．0l;72h：0．376±0．014比0．515±0．010,t=14．034,P〈0．01）,VEGFmRNA表达明显上升（24h：1．005±0．011比0．864±0．012,t=14．963,P〈0．01;72h：1．168±0．012比0．873±0．011,t=31．417,P〈0．01）;LD组和HD组PEDFmRNA表达较HG组显著上调（24h：0．505±0．018、0．639±0．012比0．375±0．011,F=354．719,P〈0．01;72h：0．612±0．023、0．700±0．019比0．376±0．014,F=97．82,P〈0．01）,VEGFmRNA表达明显下降（24h：0．838±0．014、0．767±0．017比1．005±0．011．F=79．55,P〈0．01：72h：0．923±0．016、0．784±0．012比1．168±0．012,F=244．28,P〈0．01）,且HD组疗效更明显。经对照血清及CS血清培养24、72h后,与NC组相比,HG组PDEF水平明显降低[24h：（267±8）比（303±10）ng／L,t=6．493,P〈0．01;72h：（265±27）比（338±42）ng／L,t=3．259,P〈0．01],VEGF明显升高[24h：（128±3）比（113±8）ng／L,t=3．737,P〈0．01;72h：（144±7）比（125±7）ng／L,t=4．215,P〈0．01;与HG组相比,LD组和HD组PEDF明显升高[24h：（297±12）、（296±26）比（267±8）ng／E,F=5．427,P〈0．01;72h：（323±20）、（332±33）比（265±27）ng／L,F=5．690,P〈0．01],VEGF明显降低[24h：（106±6）、（109±11）比（128±3）ng／L,F=5．738,P〈0．01;72h：（124±9）、（125±7）比（144±7）ng／L,F=7．878,P〈0．01]。结论冬虫夏草可能通过降低肾小球系膜细胞VEGF的表达,升高PEDF的表达,对肾脏起到保护作用。