栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型吸附量的影响

目的 观察栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型（HSV-1）吸附过程中病毒吸附量的影响，以探讨其抗病毒作用机理。方法 采用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FTrc）作为荧光探针标记病毒，以肝素钠为对照，借助流式细胞仪，通过收集多种不同的加药方式后细胞表面的荧光强度，来考察病毒吸附过程中病毒吸附量的变化及栀子提取物ZG对此变化的影响。结果 单纯疱疹病毒1型在Hep-2细胞表面吸附存在饱和性、特异性；肝素钠3种加药方式均能明显降低病毒吸附量，先加药后吸附及吸附和加药同时进行两种方式，优于先吸附后加药的方式，其吸附抑制率分别为84．76％和82．02％；栀子提取物ZG3种加药方式均能明显降低病毒吸附量，其中以吸附和加药同时进行组最为显著，吸附抑制率为68．46％。结论 栀子提取物ZG可能是通过作用于病毒吸附的多个环节来达到抑制HSV-1的吸附作用。     

栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型感染后细胞膜流动性的影响

目的 观察栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型感染后宿主细胞膜流动性的影响，以探讨其抗病毒作用机理。方法 采用NBD-C6-HPC特异性荧光探针标记Hep-2细胞膜脂质，以肝素钠为阳性对照，借助激光共聚焦扫描技术检测栀子提取物ZG对病毒感染后宿主细胞膜流动性的影响。结果 正常细胞膜具有良好的流动性，漂白后荧光恢复率为73．89％；病毒感染后Hep-2细胞膜流动性显著降低，荧光恢复率为18．54％；栀子提取物ZG作用后细胞膜流动性明显恢复，荧光恢复率为61．21％；肝素钠作用后细胞膜流动性明显恢复，荧光恢复率为56．62％。结论通过改善细胞膜的流动性，从而维持细胞膜的正常功能可能是栀子提取物ZG抗病毒感染的机理之一。     

栀子提取物T9对单纯疱疹病毒1型感染小鼠脑内VP16mRNA的影响

目的 观察不同时间栀子提取物T9对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)感染后的BALB/c小鼠脑内间层蛋白16(VP16)的影响,探讨栀子提取物T9抗HSV-1的作用机制.方法 采用对HSV-1易感的BALB/c小鼠,以HSV-1 VP16为研究对象,借助RT-PCR方法检测栀子提取物T9对小鼠脑内HSV VP16的影响.结果 栀子提取物T9各给药组在同一时间内VP16 mRNA相对表达量均低于病毒对照组.结论 栀子提取物T9能够使HSV感染小鼠脑内VP16 mRNA相对表达量降低,可能是它抗HSV的作用机制之一.     

Effect of Gardenia extract ZG on the adsorption quantity of herpes simplex virus type 1 （HSV-1）

To observe the effect of Gardenia extract ZG on the adsorption quantity of herpes simplex virus type 1 (HSV-1) so as to explore the mechanism of its antiviral activity, fluorescein isothiocyanate (FITC) was used as the fluorescent probe to label viruses and heparin sodium was used as control. Meanwhile , the effect of Gardenia extract ZG on the adsorption quantity on the surface of Hep-2 cells was determined by flow cytometry. It was demonstrated that adsorption of HSV-1 on the surface of Hep-2 cells exhibited the character of saturation and specificity and heparin sodium could prevent attachment of viruses on these cells. These results are in accord with those reported previously. It was also proved that the manner of drug-use prior to adsorption or simultaneous use of drug and adsorption was better than adsorption prior to drug-use, and the inhibition rates of the former and latter manner were 84. 76% and 82.92% respectively. Three manners of drug-use with Gardenia extract ZG were all effective to reduce the adsorption quantity of viruses, especially the manner of simultaneous use of drug and adsorption with an adsorption inhibition rate of 68.46% . From the above observation, it is apparent that the mechanism of anti-viral activity of Gardenia extract ZG may be via several steps involved in the HSV-1 adsorption.     

T细胞对单纯疱疹病毒1的潜伏和再活化的调节

单纯疱疹病毒1型（HSV-1），像所有的疱疹病毒一样，拥有多种逃逸宿主免疫系统的机制，它可以长期持续存在于宿主体内，说明在多数情况下，机体免疫系统对它是无能为力的。HSV-1感染粘膜或皮肤的上皮细胞，然后进入外周神经末梢，经过神经轴突传导到感觉神经节。HSV-1潜伏在神经元中，并周期性的再活化，逆向沿着神经纤维到达表皮肤，开始新一轮的病毒复制，此为再感染或复发。     

T细胞对单纯疱疹病毒1的潜伏和再活化的调节

单纯疱疹病毒1型(HSV-1),像所有的疱疹病毒一样,拥有多种逃逸宿主免疫系统的机制,它可以长期持续存在于宿主体内,说明在多数情况下,机体免疫系统对它是无能为力的。HSV-1感染粘膜或皮肤的上皮细胞,然后进入外周神经末梢,经过神经轴突传导到感觉神经节。HSV-1潜伏在神经元中,并周期性的再活化,逆向沿着神经纤维到达表皮肤,开始新一轮的病毒复制,此为再感染或复发。     

大黄乙醇提取物体内抗单纯疱疹病毒作用的研究

目的　了解大黄乙醇提取物 (大黄 )体内抗单纯疱疹病毒 (HSV)的作用。方法　小鼠尾静脉接种滴度为 10 3TCID50 HSV Ⅰ型 0 15ml,第 2天皮下注射给药。将BALB c小鼠分为 7个组 ,分别给予不同剂量的药物 ,不同时间取肝、脾、肾等组织 ,做病理切片 ,观察病变情况 ;用空斑形成法滴定各脏器中的病毒滴度 ,观察药物在动物体内对HSV感染的抑制作用。结果　大黄乙醇提取物经皮下注射未发现小鼠有毒性反应 ;大黄各治疗组脾脏不出现病理变化 ,中、高剂量组肝脏、肾脏的病理损伤也能逐渐消失 ;大黄低剂量组与ACV阳性对照组效果相当 ;病毒滴度测定说明大黄能使各脏器中病毒滴度迅速下降 ,中、高剂量组比低剂量组作用明显 ;将各组数值进行两两比较 (Q检验 ) :F =4 9 14 5 9,P <0 0 0 1,总体均数差异有显著性 ;治疗组 (ACV、DH1、DH2、DH3)与非治疗组 (VC)差异有显著性 (P <0 0 1) ;DH2、DH3、与DH1差异有显著性 (P <0 0 1) ;DH1、DH2、DH3与ACV差异无显著性 (P >0 0 5 )。结果说明 ,对于总滴度平均值的下降 ,大黄与ACV同样有效 ,且中、高剂量组的效果优于低剂量组。结论　大黄乙醇提取物在体内具有非常明显的抗HSV感染作用 ,应用前景广阔。     

单纯疱疹病毒1型对体外培养鸡胚端脑神经元活性的影响

目的：观察单纯疱疹病毒1型（HSV－1）感染对体外原代培养鸡胚端脑神经元活性的影响。方法：在Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）上接种HSV－1，并利用空斑实验测定病毒滴度；以10^6PFU／ml病毒吸附感染原代培养鸡胚端脑神经元，用倒置显微镜、透射电镜、MTT细胞活性分析、DNA琼脂糖凝胶电泳，观察HSV－1感染对细胞活性的影响。结果：HSV－1感染神经元24，48，72h与同时正常细胞比较，活性分别下降25％，56％，97％。形态学及DNA电泳显示神经元主要以坏死的形式死亡。结论：HSV－1感染导致神经元活性下降。     

1型单纯疱疹病毒突变体治疗肿瘤的研究进展

病毒溶瘤治疗的研究由来已久,但治疗多种人类恶性肿瘤的溶瘤病毒的选择构建仍在不断的探索与研究中.目前1型单纯疱疹病毒(HSV-1)被认为是最为有效的溶瘤病毒.作者阐述了溶瘤病毒治疗肿瘤的现状及研究机制、HSV-1的生物学特点、HSV-1突变体构建及其治疗肿瘤的现状,并探讨了放射性核素标记HSV-1突变体的可行性及标记物治疗肿瘤的前瞻性.     

单纯疱疹病毒2型30kD糖蛋白的鉴定及其编码基因的定位

用放射免疫沉淀试验和单纯疱疹病毒1型与2型(HSV-1／HSV-2)型间重组株作物理图谱的方法，鉴定出单克隆抗体(McAb)CH-A9靶抗原是一分子量约为30kD的糖蛋白，存在于HSV-2感染的BHK细胞膜上，其编码基因定位于长单一序列(UL)上，在0.490～0．564遗传单位之间，与已报道的HSV-2蛋白编码基因元重叠，因此g30kD可能是一种新的HSV-2糖蛋白。     

单纯疱疹病毒1型感染人胚神经细胞的研究

目的 观察人胚脑皮层细胞受到ＨＳＶ－１攻击后的连续病变过程及感染特征,方法 采用人胚脑皮层细胞原培养,接种１００ＴＣＩＤ５０ＨＳＶ－１后用光镜、免疫组化染色观察病变全过程。结果 接种ＨＳＶ－１后４ｄ逐渐出现细胞肿胀、变园、呈气球样改变,。出现核内包涵体。结论 ＨＳＶ－１接种所致的人胚脑皮层细胞出现连续的细胞病变,更接近地反映了人体在自然状态下感染ＨＳＶ－１后的神经细胞病变过程。     

单纯疱疹病毒1型与阿尔茨海默病的研究进展

单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1, HSV-1)感染常引起口唇疱疹,但近年来其引发的生殖器疱疹越来越多,且与阿尔茨海默病等神经系统疾病的发生密切相关。阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种慢性进行性的中枢神经系统变性病,其发病机制尚未完全阐明,目前也缺乏能...     

单纯疱疹病毒Ⅰ型基因治疗载体的快速构建

背景：单纯疱疹病毒Ⅰ型载体因具有独特的优点目前被广泛应用,但其构建尚缺乏一种快速有效的方法。 目的：利用Cre/Loxp高效重组系统构建单纯疱疹病毒Ⅰ型载体。 方法：分离单纯疱疹病毒HSV-1,将含Cre重组酶的c66-SV40-cre质粒转染Vero细胞,构建一株带有Loxp位点的重组HSV-1框架载体HSVLoxp。构建穿梭载体pShuttle- SV40-Cre-Loxp-IRES及重组单纯疱疹病毒Ⅰ型载体HSV-GDNF,用HAT培养基筛选出阳性毒株后用GDNF引物做PCR鉴定,扩增培养后测定滴度。 结果与结论：成功构建pHV-TK-GFP质粒,并在Vero细胞内发生重组,分离出缺失了Us3基因的重组病毒HSVtk-Loxp-GFP01。成功构建HSV-1框架载体HSVLoxp及穿梭载体pShuttle- SV40-Cre-Loxp-IRES,成功获得GDNF基因,并将其转移到了HSV-1基因组上,成功构建了表达GDNF的单纯疱疹病毒HSV-1载体,测定其滴度约为2.25×10⁶ IU/mL。     

单纯疱疹病毒1感染后细胞间黏附特性的变化及甘草甜素的干预

本研究对细胞间黏附分子在单纯疱疹病毒（herpes simplex virus，HSV）感染中是否发挥作用及甘草甜素抵抗HSV感染的机制这两个问题进行了探讨。     

单纯疱疹病毒1型诱导的Hela细胞凋亡及钙浓度的变化

一方面认为宿主细胞可利用细胞凋亡来清除病毒感染细胞 ;另一方面病毒可以抑制细胞凋亡 ,以利于自身增殖需要。而病毒诱导细胞凋亡还是抑制凋亡 ,取决于多方面因素。Ｌｅｐｐａｒｄｉ研究表明野生株ＨＳＶ 1感染Ｖｅｒｏ细胞并不引起Ｖｅｒｏ细胞凋亡 ,但缺乏调节性基因α4的Ｈ     

细胞ERK信号通路对单纯疱疹病毒Ⅱ型增殖复制的影响

目的以Raf-MEK-ERK通路关键激酶MEK1（MAPK／extraeellular signal-regulated kinasekinase-1）为研究重点，利用MEK1-siRNA（small interfering RNA for MEK1）阻断宿主Raf-MEK-ERK通路，阐述该通路对病毒复制的作用。方法用HSV-2感染预转染MEK1-siRNA的HEK293细胞，应用观察细胞病变效应、病毒滴度以及病毒蛋白表达等研究方法，揭示细胞Raf-MEK-ERK通路对HSV-2增殖复制作用的影响。结果MEK1-siRNA在特异性阻断MEKl表达的同时，能明显抑制HSV-2的复制。结论体外实验表明，Raf-MEK-ERK通路在HSV-2增殖复制过程中具有十分重要的作用，MEK1-siRNA具有药物开发的潜能。     

单纯疱疹病毒1型 US12 基因siRNA筛选及其对病毒增殖的影响

目的: 筛选高效沉默单纯疱疹病毒1型(HSV-1) US12 基因的siRNA,研究siRNA沉默 US12 基因后对HSV-1增殖的影响。方法: 构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,设计并化学合成3对靶向 US12 基因的siRNA,与pEGFP-N1-US12融合表达质粒共转染Vero细胞,流式细胞术筛选高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siRNA,实时荧光定量PCR检测siRNA对细胞内US12 mRNA表达水平的抑制效果,空斑减数实验评价siRNA对HSV-1增殖的抑制效果。结果: 共转染实验筛选出高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siRNAS121、siRNAS122及siRNAS123。3对siRNA均能显著降低感染细胞US12 mRNA的表达水平,但空斑减数实验均未发现3对siRNA对HSV-1的增殖有显著抑制效果。结论: 成功构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,筛选到高效抑制 US12 基因表达的3对siRNA,但是对病毒的体外增殖无显著影响,表明 US12 表达的立即早期蛋白ICP47的功能可能与HSV-1体外增殖无直接相关。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型和人乳头瘤病毒的感染与人工流产术后不孕症的关系

目的探讨性传播病毒和不孕症的关系。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对６０例人工流产术后不孕症妇女和３９例正常妇女进行了生殖道单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ２）和人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）的检测。结果不孕组和对照组ＨＳＶ２的阳性检出率分别是８０．０％和２５．５％，两组间有极显著性差异（Ｐ＜００１）；ＨＰＶ的阳性率分别是５３３％和３３３％，两组间无显著性差异（Ｐ＜０．０５）；ＨＳＶ和ＨＰＶ在两组中的混合感染的阳性率分别是４３．３％（２６／６０）和２３．１％（９／３９），两者有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。表明ＨＳＶ２或ＨＳＶ２和ＨＰＶ的混合感染与人工流产术后不孕症有显著的相关性，很可能是不孕的原因之一。两组９９份标志中，ＨＳＶ２和ＨＰＶ混合感染的阳性率为３５．３５％，统计学分析表明，ＨＳＶ２和ＨＰＶ感染与不孕有极显著的相关性χ＝１２．５，Ｐ＜０．０１。结论ＨＳＶ２和ＨＰＶ的感染和不孕症相关     

HBV感染PBMC后对宿主细胞CD25 mRNA表达的影响

HBV除对肝细胞具有高度亲和性外，还可侵犯外周血单个核细胞（PBMC）,这不仅是HBV肝外感染的直接证据，也是HBV潜伏或隐匿的场所。CD25是IL-2Rα链，主要存在于T淋巴细胞表面，是T淋巴细胞活化的标志，在抗病毒免疫反应中起重要作用。为探讨HBV感染PBMC后对宿主细胞CD25mRNA表达的影响，本文选择249例慢性乙肝患者进行观察，现将结果报道如下。     

单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及鉴定

 目的 原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1) 糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定。方法 用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED;将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3) pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST?Bind 纯化试剂盒对gD MED融合蛋白进行纯化;Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析。结果 HSV-1 gD在266~394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED;gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95%;Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合。结论 成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制奠定了基础。