不同嗜性HIV复制与树突状细胞成熟状态关系的研究

目的 探讨不同嗜性HIV-1在人树突状细胞（dendriticcell，DC）内复制与DC成熟状态的关系。方法 采用MACS磁珠分选法纯化出CD14^＋细胞，加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素-4体外培养7d，得到未成熟DC；再加入肿瘤坏死因子-α继续培养3d，得到成熟DC。感染不同嗜性HIV-1病毒株后，检测培养上清p24含量，观察HIV-1复制能力。结果 受T嗜性HIV-1攻击后，未成熟DC及成熟DC培养上清p24抗原含量随培养时间延长无明显增加。受M嗜性HIV-1攻击后，未成熟DC培养上清p24抗原含量随培养时间延长明显增加，成熟DC培养上清p24抗原含量不随培养时间延长明显增加。结论 T嗜性HIV-1不能在未成熟DC和成熟DC内复制，M嗜性HIV-1能在未成熟DC内复制但不能在成熟DC内复制，提示HIV-1能否在DC内复制与HIV-1嗜性和DC成熟状态有关。     

未成熟树突状细胞对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响

目的:探讨未成熟树突状细胞(DC)对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响。方法:通过诱导Lewis大鼠骨髓前体细胞,获取未成熟(iDC)和成熟(mDC)两种状态的DC;将两种DC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后进行T细胞重复刺激、交叉刺激和无关抗原刺激试验,观察T细胞增殖情况并测定T细胞IFN-γ、IL-12的表达水平。结果:(1)AChR负载的iDC可明显抑制T细胞增殖,且这种被抑制的T细胞对AChR负载的mDC的交叉刺激也不引起增殖,但对无关抗原OVA负载的mDC的刺激可产生明显增殖。(2)与mDC组比较,AChR负载的iDC初次和重复刺激均明显抑制T细胞IFN-γ和IL-12的表达。结论:iDC可诱导抗原特异性T细胞耐受,耐受机制可能与Th1细胞因子IFN-γ和IL-12的抑制有关。     

吴茱萸碱对小鼠树突状细胞分泌细胞因子的影响

目的:利用抗体芯片技术和ELISA检测吴茱萸碱(EVO)对小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)分泌相关细胞因子的影响,研究EVO的生物学调节功能。方法:体外诱导培养未成熟DC细胞(iDC),经LPS和EVO处理后,通过混合淋巴反应检测DC诱导异源T细胞的应答能力,ELISA检测上清中IL-12p40、IL-12p70和IL-10,小鼠抗体芯片检测细胞上清中细胞因子。结果:EVO促进了iDC和成熟DC(mDC)抗原提呈功能(P0.05),对iDC、mDC的细胞因子IL-10、IL-12分泌功能无影响(P0.05),另外EVO处理iDC后上调大于2倍的细胞因子有7个(VEGF、DPPIV/CD26、IGF-Ⅰ、IL-17BR、MDC、Pro-MMP-9、Eotaxin-2),处理mDC后上调大于2倍的细胞因子有2个(Eotaxin-2、IL-13)。结论:EVO处理mDC和iDC后,细胞因子的分泌功能发生了明显改变,这些细胞因子影响着DC的抗原摄取、迁移、抗原提呈,为进一步寻找药物靶点提供了线索。     

不同成熟阶段树突状细胞的免疫耐受功能

大量研究证实具有抗原递呈作用的树突状细胞（DC）能够诱导免疫耐受，处于不同成熟阶段不同活化条件下的DC激活T细胞的能力不同。进一步研究发现DC产生的外染色体能够诱导T细胞免疫耐受，具有免疫原性。非成熟DC（iDC）产生的外染色体能够维持外周耐受，而成熟DC（mDC）产生的外染色体能够刺激效应性T细胞，因此外染色体在诱导免疫耐受中发挥着重要作用。     

HIV-1感染单核细胞来源的DC后抑制其成熟,促进IL-10产生及T细胞调节

病毒感染后DC可介导产生不同的保护性反应,通过处理和递呈抗原来激发适应性免疫。DC的成熟对激发细胞免疫和避免未成熟DC(iDC)诱导免疫耐受至关重要。为研究HIV感染后DC功能的变化,以单核细胞来源的未成熟细胞为研究对象进行如下实验。从供者血中提取CD14+单核细胞,体外培养使其分化为iDC。加入细胞因子或表达CD40L的细胞可诱导其分化为成熟的DC(mDC)。病毒为Ba-L HIV-1隔离株,在MAGI细胞中测定其感染滴度,同时以流感A类病毒感染iDC,对比观察。感染结束后,用PCR检测HIV-1的逆转录本,以荧光来标记抗体双重感染色,进行FACS…     

未成熟树突状细胞诱导实验性自身免疫性重症肌无力耐受的试验研究

目的 探讨未成熟树突状细胞(iDC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的影响。方法 用小剂量粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)体外诱导骨髓前体细胞，获得的iDC用乙酰胆碱受体(ACAR)负载后皮下接种同基因大鼠，3周后通过体外试验观察脾细胞对AChR的增殖反应，同时用AChR和完全弗氏佐剂(CFA)免疫大鼠，观察免疫7周后MG相关指标的改变。结果 小剂量GMCSF诱导所获得的iDC与成熟DC(mDC)相比，其表面MHCⅡ和共刺激分子CD80、CD86的表达低，摄取dextran-FITC的能力强但刺激同种T细胞增殖的能力弱。接种iDC、mDC、AChR负载的mDC的大鼠和对照组一样，体外脾细胞对AChR的刺激均强烈增殖，用AChR和CFA免疫后，产生明显的MG症状，重复电刺激出现明显衰减，血清AChRAb滴度明显增高，神经肌肉接头呈现典型的MG样改变；而接种AChR负载的iDC的大鼠脾细胞对AChR的刺激呈现明显的增殖抑制但对卵清蛋白的刺激仍强烈增殖，MG相关指标均未见明显改变。结论 骨髓前体细胞经小剂量GM-CSF诱导产生了iDC，AChR负载的iDC可诱导EAMG耐受。     

白杨素对HIV-1感染、复制和CD4+T细胞活化的抑制作用研究

目的:研究白杨素(CR)体外对人类免疫缺陷病毒(HIV-1)感染和复制的影响及对植物血凝素(PHA)刺激的正常人外周血CD4 T细胞活化的影响。方法:以CR对Calcein-AM标记的慢性感染HIV-1ⅢB的H9细胞(H9/HIV-1ⅢB)和MT-2细胞的融合、对HIV-1诱导的MT-2细胞形成合胞体及对感染HIV-1的MT-2细胞产生p24抗原的影响,探讨其抗HIV-1活性;以PHA刺激人外周血单个核细胞,利用流式细胞术,检测CD4 T细胞CD69表达的百分率,分析CR对免疫活化的影响。结果:CR抑制H9/HIV-1ⅢB细胞与MT-2细胞融合、HIV-1诱导的MT-2细胞形成合胞体和P24抗原产生的选择指数分别为7.24±0.43、6.74±0.47和8.16±0.30;CR降低PHA刺激的CD4 T细胞CD69的表达。结论:CR体外对HIV-1的感染和复制有一定的抑制作用,且可抑制抗原刺激的CD4 T细胞的活化。     

树突状细胞表达分子DC-SIGN在HIV-1感染传播中的作用

DC-SIGN是一种特异性表达于树突状细胞(DC)表面的Ⅱ型跨膜蛋白，它可以通过识别人HIV-1包膜糖蛋白gp120介导DC与HIV-1特异性粘附，并增强HIV-1感染力，在HIV-1水平和垂直传播过程中起重要作用。分析DC-SIGN影响HIV-1传播过程的分子机制有利于探讨HIV-1感染的免疫和基因治疗，本文拟就有关问题作一综述。     

075 DC-SIGN结构和功能的研究进展

树突细胞(DC)是目前已知的功能最强的抗原提呈细胞，它能直接激活静息T细胞的应答反应。90年代开始，DC在人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)感染过程中的作用逐渐受到重视，但是，研究结果颇具争议。最近，在DC表面新发现一种蛋白质——DC-SIGN，它参与了静息T细胞的激活以及HIV-1的感染过程。DCSIGN的发现不仅有助于阐述HIV-1的致病机理，而且对DC功能的研究开辟了一个崭新的视角。本文就DCSIGN的研究近况做一综述。     

树突状细胞与HIV-1传播

树突状细胞(DC)对机体的获得性免疫应答的产生和调节具有重要作用.不成熟树突状细胞(iDC)在体内广泛分布,特别是病原体容易侵入的部位.iDC通过胞饮及吞噬的机制摄取周围的抗原,并在适当的炎症信号刺激下,逐渐成熟,细胞表面上调表达MHC分子及淋巴细胞辅助刺激分子,并向淋巴组织迁移.iDC在严格的控制和调节下完成抗原的摄取、加工、呈递及成熟、迁移及辅助刺激分子的表达,最终有效的将抗原呈递给T细胞,使机体快速产生并维持特异性免疫应答,最终消灭病原体.而最近的研究却发现DC能够被HIV-1利用并协助其进行感染[1].