αvβ 3整合素在小细胞肺癌骨转移细胞株SBC-5中的表达及意义

目的:分析αvβ3整合素在特异性小细胞肺癌骨转移细胞株中的表达,探讨肺癌骨转移的机制.方法:RT-PCR、Western-blot和免疫荧光染色检测小细胞肺癌特异性骨转移细胞株SBC-5和非骨转移细胞株SBC-3中αvβ3整合素的表达差异.结果:αvβ3整合素在SBC-5细胞株中的表达显著高于SBC-3细胞株.结论:αvβ3整合素可能与小细胞肺癌骨转移的发生相关,可能促进了小细胞肺癌骨转移的发生.     

钙调神经磷酸酶Aα对不同骨转移潜能小细胞肺癌细胞株黏附作用的影响

目的:探讨CnAα在小细胞肺癌骨转移中对骨基质黏附作用的影响。方法:构建CnAα稳定高表达和低表达的小细胞肺癌细胞SBC-3和SBC-5细胞株;利用骨条技术对构建好的稳定表达细胞株的骨黏附能力强弱进行对比。结果:高骨转移潜能SBC-5细胞对骨组织的黏附能力强于非骨转移SBC-3细胞;上调CnAα的SBC-3细胞的黏附能力强于其亲本细胞SBC-3,而下调CnAα的SBC-5细胞的黏附能力低于其亲本SBC-5细胞。结论:CnAα可能是通过提高小细胞肺癌细胞对骨组织的黏附能力来促进肺癌骨转移。     

钙调神经磷酸酶CaNAαa和CaNAβ在肺癌中的表达及意义

目的：检测钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）Aα和Aβ亚基蛋白在肺癌细胞中的表达,研究CaN蛋白亚基的表达与肺癌骨转移发生是否相关。方法：应用PCR和Westernblot方法检测SBC-5、SBC-3和NCI—H345小细胞肺癌细胞中CaNAα和Aβ在基因和蛋白水平上的表达;通过免疫组织化学方法检测肺癌骨转移和肺癌无骨转移患者肺癌组织中CaNAα和Aβ的表达。结果：CaNAα和Aβ的表达强度在能产生骨转移的肺癌细胞SBC-5中明显高于非骨转移肺癌细胞SBC-3和NCI—H345。在肺癌伴有骨转移患者的肺癌组织中CaNAα和CaNAβ的表达强度也都明显较无骨转移肺癌患者组高（CaNAαP=n000;CaNAβP=n030）。结论：钙调神经磷酸酶不同亚基（CaNAα和Aβ）的表达可能在肺癌骨转移的发生和发展中具有重要意义。     

钙调神经磷酸酶CaN Aα和CaN Aβ在肺癌中的表达及意义

目的:检测钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)Aα和Aβ亚基蛋白在肺癌细胞中的表达,研究CaN蛋白亚基的表达与肺癌骨转移发生是否相关.方法:应用PCR和Western blot方法检测SBC-5、SBC-3和NCI-H345小细胞肺癌细胞中CaN Aα和Aβ在基因和蛋白水平上的表达;通过免疫组织化学方法检测肺癌骨转移和肺癌无骨转移患者肺癌组织中CaN Aα和Aβ的表达.结果:CaN Aα和Aβ的表达强度在能产生骨转移的肺癌细胞SBC-5中明显高于非骨转移肺癌细胞SBC-3和NCI-H345.在肺癌伴有骨转移患者的肺癌组织中CaN Aα和CaN Aβ的表达强度也都明显较无骨转移肺癌患者组高(CaN Aα P＝0.000;CaN Aβ P＝0.000). 结论:钙调神经磷酸酶不同亚基(CaN Aα和Aβ)的表达可能在肺癌骨转移的发生和发展中具有重要意义.     

M3R拮抗剂对人小细胞肺癌增殖、凋亡及粘附的影响

背景与目的 研究表明毒蕈碱胆碱受体3 (muscarinic receptor 3,M3R)在多种肿瘤的发生、发展中发挥重要的作用.本研究旨在探讨M3R在人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株SBC3的表达,M3R拮抗剂对细胞增殖、凋亡及粘附的影响.方法 体外培养SBC3细胞,RT-PCR和Western blot检测M3R的表达.MTT法及流式细胞法检测M3R拮抗剂(4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine methiodide,4-DAMP)对细胞增殖和凋亡的影响.流式细胞法检测细胞整合素的表达及碘化乙酰胆碱(acetylcholine iodide,Ach)和4-DAMP对整合素表达的影响.纤维结合蛋白(Fn)包被的96孔板用以研究Ach、4-DAMP及整合素抗体对细胞粘附的作用.结果 SBC3细胞表达M3R,4-DAMP浓度依懒性抑制细胞增殖.与对照组比较,10-4 M 4-DAMP能够明显地增加SBC3细胞凋亡.SBC3细胞表达αvβ1和α5β1整合素,10-4 M Ach刺激细胞粘附(P＜0.01)的作用几乎被10-5M 4-DAMP、5μg/mL抗-β1抗体或抗-αv和α5抗体完全阻断(P＜0.01),但Ach及4-DAMP不影响αv、α5和β1的表达水平.结论 SBC3细胞表达M3R,M3R拮抗剂能抑制细胞的增殖并促进凋亡.其抑制粘附的作用是通过抑制细胞含β1的整合素(αvβ1和α5β1)的功能实现的.     

上调GDF15表达对小细胞肺癌SBC-5细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨GDF15表达对小细胞肺癌SBC-5细胞增殖和侵袭能力的影响，寻找小细胞肺癌易发生 远处转移相关的可能分子标记物。方法:通过 RT-PCR和Western blot方法检测小细胞肺癌细胞株SBC-3和SBC-5中GDF15 mRNA及GDF15蛋白的表达；慢病毒感染构建GDF15过表达的SBC-5-GDF15细胞株（实验组:SBC-5-GDF15，对照组:SBC-5-NC），通过RT-PCR 和 Western blot鉴定感染效果；采用克隆形成实验和MTT实验检测上调GDF15表达对SBC-5细胞增殖能力的影响；侵袭实验检测上调GDF15表达对SBC-5细胞侵袭能力的影响。结果:在mRNA和蛋白水平上，GDF15在SBC-5细胞中的表达均显著低于SBC-3细胞，差异具有统计学意义（P<0.05）;慢病毒感染细胞后绿色荧光的比例大于80%，GDF15在 mRNA和蛋白表达水平均被明显上调；上调GDF15的表达抑制SBC-5细胞的增殖、克隆形成和侵袭能力。结论:DGF15抑制SBC-5细胞的增殖和侵袭能力，可能成为抑制小细胞肺癌转移的潜在靶点。     

慢病毒载体介导的RNA干扰下调膜联蛋白A1对小细胞肺癌细胞生物学行为的影响

目的:探究AnnexinA1对小细胞肺癌细胞生物学行为的影响。方法:构建干扰AnnexinA1的慢病毒载体,转染至SBC-5细胞株;体外增殖、迁移、侵袭实验观察下调AnnexinA1表达对小细胞肺癌细胞株生物学行为的影响。结果:干扰AnnexinA1的细胞株ANXA1 RNAi-SBC-5构建成功。与转染空载体的对照细胞相比,抑制AnnexinA1的表达能够显著抑制SBC-5细胞的增殖、迁移、侵袭能力。结论:AnnexinA1表达可能与肺癌骨转移密切相关。     

肺癌骨转移相关分子的比较蛋白质组学研究

目的:分析比较人肺癌不同骨转移潜能细胞株的差异表达蛋白质图谱,筛选在肺癌骨转移中起重要作用的关键蛋白质分子。方法:利用双向凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解析离子化-飞行时间-质谱技术,分析人肺癌骨转移细胞株SBC-5和非骨转移细胞株SBC-3/DOX蛋白质图谱的差异表达,查询数据库筛选肺癌骨转移相关蛋白质。结果:PDQuest 8.0软件分析3次相同条件下的2-DE图谱,结果显示重复性、匹配性较好。SBC-5检测到(1116±64)个蛋白点,平均匹配率为84%;SBC-3/DOX检测到(1132±72)个蛋白点,平均匹配率为82%;蛋白质点分布以PI 4-7、相对分子质量20 000-80 000范围内最多。两种细胞株16个差异蛋白质点胰酶胶内酶解,质谱分析获得14张肽质量指纹谱,鉴定出Annexin A1,CaN,IGFBP-1,ADAM32等8种胶内差异蛋白质。结论:人肺癌不同骨转移潜能细胞株SBC-5和SBC-3/DOX的2-DE蛋白质图谱具有明显的差异表达,多种差异表达蛋白可能与肺癌骨转移相关。     

化疗对骨肉瘤αv和β3整合素表达影响的研究

目的:探讨化疗对骨肉瘤αv、β3整合素表达的影响.方法:免疫组化法检测20例化疗前和31例化疗后骨肉瘤αv、β3整合素的表达情况.结果:αv、β3整合素在骨肉瘤细胞呈强阳性表达,而正常骨细胞均呈阴性表达.P=0.000;化疗后两者表达明显下降,P=0.000.秩和检验表明,化疗后αv整合素与肿瘤Enneking分期(P=0.014)、侵袭(P=0.007)、复发(P=0.021)明显相关;β3整合素表达与肿瘤复发明显相关,P=0.003.多因素分析显示,化疗后αv整合素表达水平是影响骨肉瘤侵袭独立因素,化疗后β3整合素是影响骨肉瘤复发独立因素.结论:αv、β3整合素可能成为骨肉瘤诊断的辅助指标;化疗可能通过下调骨肉瘤细胞αv、β3整合素表达而改变其相应的生物学活性;αv、β3整合素可能分别是影响骨肉瘤侵袭、复发的独立因素;αv、β3整合素可能作为判断骨肉瘤化疗预后的指标及化疗药物作用的靶分子.     

Lewisy抗原和整合素α、β1、αv、β3在上皮性卵巢癌中的表达及其与耐药和预后的关系

目的：探讨 Lewis y 抗原和整合素α5、β1、αv、β3在上皮性卵巢癌中表达及其与化疗耐药和患者预后的关系。方法：应用免疫组化方法检测 Lewis y 抗原和整合素α5、β1、αv、β3在92例上皮性卵巢癌中的表达,分析上述指标与临床病理参数及预后之间的关系。结果：卵巢癌耐药组中的 Lewis y 及整合素α5、β1、αv、β3的阳性表达明显高于敏感组,且整合素α5、β1、αv、β3的表达与 Lewis y 存在正相关;逻辑回归单元分析发现FIGO 晚期、淋巴结转移、残余病灶＞1cm 和 Lewis y、整合素α5、β1、αv、β3的高表达与卵巢癌化疗耐药相关,逻辑回归多元分析发现 FIGO 晚期和 Lewis y、整合素α5和β1的高表达是与耐药相关性最强的独立因子;Cox生存分析发现 Lewis y 及整合素β1的高表达提示更短的总体生存时间（OS）和无瘤生存时间（PFS）。结论：Lewis y 抗原及整合素α5、β1、αv、β3可以用于卵巢癌化疗耐药的预测,Lewis y 和整合素β1的阳性高表达提示着患者更差的预后,其中 Lewis y 的效能最强。     

整合素αvβ3在肿瘤血管生成中的作用

整合素是一种重要的黏附分子，整合素αvβ3是整合素家族中的重要成员。作为内皮细胞与细胞外基质的桥梁，整合素αvβ3通过调节内皮细胞的黏附、迁移、增殖、凋亡等功能，在肿瘤血管生成的过程中发挥重要的作用。整合素αvβ3的单克隆抗体和拮抗剂能抑制肿瘤血管的生成．可能是一种治疗肿瘤的新途径。     

MACC1基因siRNA对肺癌SBC-5细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨MACC1（metastasis-associated in colon cancer l）基因特异性siRNA（small interfering RNA）对肺癌细胞系SBC-5体外增殖和迁移的影响。方法：化学合成MACC1基因特异性siRNA,阳离子脂质体LipofectamineTM 2000转染肺癌细胞系SBC-5细胞,RT-PCR和Western blot方法检测转染后SBC-5细胞中MACC1基因和蛋白的表达情况;MTT法检测细胞的生长增殖状况;划痕试验观察细胞迁移能力的改变。结果：MACC1基因特异性siRNA转染细胞后,SBC-5细胞MACC1的mRNA和蛋白表达水平明显降低,MTT试验和划痕试验观察到转染MACC1-siRNA的SBC-5细胞增殖、迁移能力明显减弱。结论：MACC1基因特异性siRNA可以明显抑制肺癌SBC-5细胞增殖和迁移,MACC1可能成为肺癌治疗的新靶点。     

非小细胞肺癌中整合素和ECM蛋白表达与转移及预后的相关性研究

背景与目的 肿瘤的浸润和转移严重威胁着人类生命,正确认识和评估肿瘤的牛物学行为有重要的临床意义.整合素和细胞外基质(ECM)的异常表达在肿瘤浸润转移过程中发挥着重要作用.本研究的目的是探讨整合素α5、β1(integrin α5、β1)与细胞外基质(ECM)在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与淋巴结转移及患者预后之间的关系,评估它们在肿瘤转移过程中的作用.方法 采用免疫组化方法 测定119例NSCLC组织中整合素α5、β1及Ⅳ犁胶原、纤连蛋白(fibronectin,FN)、细胞黏合索的表达,探讨其与临床病理特征特别是与淋巴结转移的关系,并分析其与患者预后的相关性.结果 Ⅳ型胶原表达与淋巴结转移呈负相关(P＜0.01),与患者预后呈正相关(P＜0.01),而整合素α5和β1表达与淋巴结转移呈正相关(P＜0.01),且整合素α5表达与患者预后呈负相关(P＜0.01).整合素α5表达与整合素β1表达呈正相关而与Ⅳ型胶原表达呈负相关.Ⅳ型玵胶原在分期较早和分化较好时表达率较高,整合素α5和β1则相反.结论 整合素α5和β1的高表达与ECM蛋白的低表达与NSCLC的淋巴结转移及患者不良预后相关,整合素α5与Ⅳ型胶原可能可以作为评估患者预后的重要指标.     

αvβ6整合素与肿瘤关系的研究进展

目的:总结国内外关于αvβ6整合素与肿瘤关系的研究进展。方法:应用Medline和CNKI期刊全文数据库检索系统,以"αvβ6整合素"和"肿瘤"为关键词,检索1992-01-2008-05相关αvβ6整合素的文献174篇,其中英文文献172篇,中文文献2篇。纳入标准:1)αvβ6整合素的结构和功能;2)αvβ6在恶性肿瘤中的表达情况;3)αvβ6促进肿瘤进展的分子机制;4)以αvβ6为靶点的肿瘤靶向研究。根据纳入标准,精选73篇文献,最后纳入分析29篇文献。结果:αvβ6作为一类上皮限制性的特殊整合素亚型,在多种上皮源性恶性肿瘤中诱导表达,通过促进肿瘤细胞迁移、参与细胞外基质降解、激活细胞因子TGF-β1以及抑制肿瘤细胞凋亡等途径促进肿瘤侵袭和转移。结论:深入研究αvβ6在恶性肿瘤中的表达及功能,有助于进一步理解肿瘤侵袭和转移的分子机制,有望在肿瘤的靶向治疗方面取得新的突破。     

整合素α5β1介导细胞外信号调节激酶信号转导通路对A549细胞生长和侵袭的影响

背景与目的近年研究显示整合素α5β1作为整合素家族的重要部分与非小细胞肺癌的转移性、浸润性和低分化趋向密切相关.本研究应用整合素α5/β1 siRNA双链及ERK抑制剂PD98095干预人肺癌细胞A549,探讨整合素α5β1蛋白表达对A549细胞生长和迁移能力的影响及其细胞内信号转导机制.方法实验分为未转染组、脂质体组、整合素α5β1 siRNA染组和PD98095组四组.采用免疫印迹(Western blot)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测A549中整合素α5β1蛋白和mRNA表达水平,Western blot检测A549中ERK1/2、MMP-9和caspase-3蛋白水平,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和Annexin-V FITC PI双染色法检测A549增殖和凋亡.结果整合素α5/β1 siRNA双链在抑制α5/β1蛋白和mRNA表达的同时,可以下调ERK的mRNA和蛋白表达,并抑制其磷酸化水平.整合素α5/β1 siRNA双链和PD98059均可以明显抑制A549细胞的增殖,促进细胞凋亡和细胞内caspase-3蛋白表达,并抑制细胞内MMP-9蛋白表达.结论整合素α5β1可能通过介导的ERK信号转导通路参与了A549细胞的增殖和迁移调控.     

靶向整合素α_Vβ_3的分子影像探针

整合素αvβ3作为整合素家族中的重要成员,介导了细胞和细胞外基质、细胞和细胞之间的相互黏附,具有调控细胞增殖、分化、细胞形态和迁移等多种功能,在肿瘤血管生成的过程中发挥重要的作用.作为靶向肿瘤的受体,利用核素、核磁共振、超声波和光学等影像技术,结合靶向整合素αvβ3分子成像探针非侵入性的检测整合素αvβ3在肿瘤组织和肿瘤新生血管中的表达,具有潜在的临床应用价值,可用于临床肿瘤诊断和抗肿瘤药物的临床治疗后观察.本文主要针对现有靶向整合素αvβ3的分子探针及其影像技术作-简要综述.     

MACC1基因siRNA对肺癌SBC-5细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨MACC1(metastasis-associated in colon cancer l)基因特异性siRNA(small interfering RNA)对肺癌细胞系SBC-5体外增殖和迁移的影响。方法:化学合成MACC1基因特异性siRNA,阳离子脂质体LipofectamineTM 2000转染肺癌细胞系SBC-5细胞,RT-PCR和Western blot方法检测转染后SBC-5细胞中MACC1基因和蛋白的表达情况;MTT法检测细胞的生长增殖状况;划痕试验观察细胞迁移能力的改变。结果:MACC1基因特异性siRNA转染细胞后,SBC-5细胞MACC1的mRNA和蛋白表达水平明显降低,MTT试验和划痕试验观察到转染MACC1-siRNA的SBC-5细胞增殖、迁移能力明显减弱。结论:MACC1基因特异性siRNA可以明显抑制肺癌SBC-5细胞增殖和迁移,MACC1可能成为肺癌治疗的新靶点。     

整合素α5β1和细胞外信号调节激酶信号传导通路在非小细胞肺癌中的作用及其相关性研究

研究整合素α5β1 及磷酸化ERK1/2 （p-ERK1/2） 在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及整合素α5β1 和ERK1/2 信号通路在人肺癌A549 细胞生长和迁移中的作用。方法:采用免疫组织化学法和免疫印迹（Western blot）法检测41 例NSCLC 组织和15例正常肺组织中整合素α5β1 及p-ERK1/2 的表达并分析两者的相关性,体外培养肺癌A549 细胞,以Anti-α5β1 或ERK 激酶抑制剂PD98059 作为工具药物,采用四甲基偶氮唑盐比色 （MTT） 法和 Annexin-V FITC PI 双染色法检测A549 增殖和凋亡,采用Western blot 检测A549 中MMP-9 蛋白水平。采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot 检测Anti-α5β1 处理后A549 中ERK1/ 2 蛋白和mRNA 表达水平的变化。结果:人NSCLC 组织中整合素α5β1 及p-ERK1/2 阳性表达率（分别为58.53%,65.52%）明显高于正常肺组织（分别为26.67%, 20.00%）（P<0.01）。整合素α5β1与p-ERK1/2 表达均与病理分级（分别为P<0.001,P=0.030）、淋巴结转移（分别为P=0.014,P<0.001）、临床分期（分别为P=0.027,P=0.038）相关。整合素α5β1 与p-ERK1/2表达具有相关性（r=0.375, P<0.05）。经Anti-α5β1 或PD98059 处理后,A549 细胞增殖效应和早期凋亡细胞百分率增加,MMP-9 的表达均明显减弱。经Anti-α5β1 处理后A549 细胞中ERK 的mRNA 和蛋白表达受到抑制,ERK1/2 的磷酸化水平显著减少。结论: 整合素α5β1 及p-ERK1/2 在人NSCLC 组织中高表达,Anti-α5β1 在下调了细胞内ERK 的mRNA 和蛋白磷酸化的同时,可以明显抑制A549 细胞的增殖和MMP-9 蛋白表达,表明整合素α5β1 可能介导ERK1/2 信号转导通路参与了非小细胞肺癌中的异常增殖和迁移的调控。      

ER阳性和阴性人乳腺癌细胞株整合素亚型α_5β_1、α_4β_1及组织蛋白酶D表达的研究

目的　研究ER阳性和ER阴性的人乳腺癌细胞株整合素亚型α5β1、α4β1和组织蛋白酶D蛋白的表达和细胞生物学特性的关系。　方法　采用细胞培养、Southern杂交、Northern杂交和免疫组织化学技术,检测ER阳性MCF7及ER转染阳性MDAMB231和ER阴性MDAMB231人乳腺细胞中整合素亚型α5β1、α4β1和组织蛋白酶D蛋白的表达,了解它与细胞生物学特性的关系。　结果　MCF7、ER转染阳性MDAMB231和MDAMB231细胞中整合素亚型α5β1基因DNA,mRNA表达量各不相同。整合素亚型α5β1、α4β1和组织蛋白酶D蛋白在三株人乳腺癌细胞中的定位各不相同,且存在数量上的差别(P<005)。三苯氧胺具有诱导α5β1表达的作用,而对α4β1和组织蛋白酶D无影响。　结论　雌激素受体的表达和整合亚型α5β1、α4β1和组织蛋白酶D状态有关,三苯氧胺具有诱导转移相关基因表达的作用     

CD44v6和整合素α5β1在乳腺癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨乳腺癌中CD44v6、整合素α5β1的表达及其与预后的关系.方法 应用免疫组化S-P法,检测80例乳腺癌中CD44v6和整合素α5β1表达,分析其与临床病理学特征的关系.结果 80例乳腺癌中CD44v6、整合素α5β1表达阳性率分别为60.0%(48/80)和100%.CD44v6蛋白阳性表达率与肿瘤大小及淋巴结转移呈正相关(P＜0.05),与预后呈负相关(P＜0.01);整合素α5β1阳性表达率与组织学分级及淋巴结转移呈负相关(P＜0.05),与预后呈正相关(P＜0.05).结论 CD44v6、整合素α5β1的表达与乳腺癌的进展和转移密切相关,术后对乳腺癌组织CD44v6、整合素α5β1进行常规检测,有助于更准确评估乳腺癌的生物学行为,指导术后辅助治疗.