迷走神经刺激对致(癎)大鼠脑内NOS免疫反应阳性细胞的影响

目的 :探讨迷走神经刺激抗癫作用与脑内一氧化氮 ( NO)的关系。　方法 :大鼠用戊四氮 ( PTZ)腹腔注射致 ,行迷走神经刺激抗癫 ,应用免疫组化方法观察大鼠脑皮质及海马一氧化氮合酶 ( NOS)免疫反应阳性神经细胞的变化。　结果 :PTZ致后 ,大鼠皮层、海马 NOS阳性细胞数及阳性细胞光密度较对照组明显增加 ( P<0 .0 1) ;而行迷走神经刺激 ( VNS)抗癫组动物上述脑区 NOS阳性细胞及光密度明显减少 ( P<0 .0 1)。　结论 :VNS的抗癫作用与脑内 NO的减少相关 ,VNS可能通过抑制脑内谷氨酸的释放而发挥抗癫作用     

戊四氮致癫痫大鼠脑内nNOS表达的实验研究

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)的nNOS(神经元型)亚型在戊四氮致癫痫大鼠模型中海马部位的变化情况。方法 PTZ点燃癫痫大鼠,随机分为对照组、PTZ组观察大鼠癫痫发作后的行为学变化,脑电图描记,采用免疫组化,免疫印迹(Western blot)方法检测大鼠海马组织中nNOS表达的影响。结果注射PTZ后大鼠出现癫痫发作。EEG表现为尖、棘波节律。nNOS在癫痫大鼠大脑海马区阳性细胞表达升高。结论 PTZ诱导癫痫发作大鼠海马区内nNOS阳性细胞表达升高,起到致癫痫的作用。     

迷走神经刺激对戊四氮癫痫大鼠海马区γ-GABA、Glu和脑电变化

目的 观察VNS对正常大鼠和戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠的脑电图的影响,以及测定海马区GABA,GLU的变化.进一步探讨迷走神经刺激(VNS)的抗癫痫机制.方法 随机分为对照组、刺激A组、刺激B1组、刺激B2组、刺激B3组、刺激C组,各10只.分别观察脑电图和测定海马GABA、GLU的变化.结果 VNS可明显延长致病大鼠癫痫发作和痫波释放的潜伏期(P<0.05),减轻癫痫发作的严重程度,并能抑制皮层及海马癫痫波的释放,VNS对正常人鼠脑电图无影响.刺激各组海马GABA升高,GLU下降,组与组之间有明显差异P<0.05.结论 VNS可明显抑制PTZ诱导的大鼠癫痫.     

慢性VNS对点燃大鼠大脑皮质及海马神经元兴奋性的影响

目的：探讨迷神经刺激（VNS）抗癫痫作用的细胞机制。方法：用戊四氮（PTZ）行大鼠腹空注射点燃制作癫痫模型,行迷走神经刺激抗癫痫,应用荧光分光光度法测定不同浓度谷氨酸（Glu）对正常、PTZ点燃及VNS治疗动物大脑皮质及海马神经元胞内游离钙升高的影响,同时观察VNS对动物癫痫行为的影响。结果：VNS组动物胞内游离钙浓度较PTZ点燃组明显降低,并对外源性Glu的升谪胞内游离钙有明显抑制作用,行为观察显示VNS能明显抑制癫痫发作的严重程度,延长癫痫的发作的潜伏期。结论：VNS能明显抑制大鼠PTZ的点燃效应,降低Glu对神经元胞内游离钙的升高作用。VNS可能通过调节神经元兴奋性／抑制性受体的活性来发挥抗癫痫作用。     

蓝斑核损伤对迷走神经刺激抗癫癎效应的影响

目的：探讨刺激迷走神经（ＶＮＳ）的抗癫癎作用与蓝斑核（ＬＣ）的相互关系。　方法：立体定向下注射６－羟多巴胺（６－ＯＨＤＡ）毁损大鼠双侧ＬＣ,２ 周后腹腔注射戊四氮（ＰＴＺ）,８０ ｍ ｇ／ｋｇ 体重致癎,然后观察刺激迷走神经的抗癫癎效应,同时测定大鼠大脑皮质及海马中去甲肾上腺素（ＮＡ）水平。　结果：ＶＮＳ明显减轻ＰＴＺ致癎大鼠癫癎发作的严重程度,但对蓝斑核毁损的大鼠抗癫癎作用明显减弱,同时蓝斑核毁损后皮质及海马内ＮＡ含量较对照组明显下降。　结论：实验证明蓝斑核参与ＶＮＳ的抗癫癎作用,ＶＮＳ可能通过增加脑内ＮＡ 的释放而发挥抗癫癎效应。这一结论提示,拟去甲肾上腺素类药物可能有增强ＶＮＳ的抗癫癎作用。     

褪黑素、5-羟色胺对戊四氮致痫大鼠脑内一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨褪黑素（MT）、5-羟色胺（5-HT）对致痫大鼠大脑皮质一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法用免疫印迹技术和图像分析技术观察经MT预处理后致痫大鼠行为学的改变与脑内NOS表达的变化,用免疫组织化学方法检测大鼠海马内5-HT含量变化。结果戊四氮（PTZ）组大鼠大脑皮质内NOS含量明显高于对照组,PTZ＋MT组大鼠大脑皮质内NOS含量明显低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。PTZ组、PTZ＋MT＋MT拮抗剂Luz组大脑皮质内5-HT含量与对照组比较均减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MT、5-HT具有明显的抑制大鼠大脑皮质NOS表达的作用和抗痫效应。     

迷走神经刺激对海人酸致痫大鼠海马胶质细胞胶原纤维酸性蛋白的影响

目的观察迷走神经刺激（VNS）对海人酸（KA）致痫大鼠海马星形胶质细胞（AS）的胶原纤维酸性蛋白（GFAP）的影响,探讨AS与癫痫的关系及在VNS治疗癫痫中的作用。方法 36只SD大鼠随机分为对照组、KA组和VNS＋KA组,每组12只。侧脑室注射0.05%KA溶液3μL制作大鼠癫痫模型;采用免疫组织化学和western blot方法检测VNS后KA致痫大鼠海马星形胶质细胞GFAP的变化。结果大鼠侧脑室注入KA后3～5min内癫痫发作,发作级别按国际公认Racine标准均达到Ⅳ～Ⅴ级;KA组大鼠海马GFAP阳性细胞数,western blot值显著高于对照组（P〈0.01）,VNS＋KA组大鼠海马GFAP阳性细胞数和western blot值显著低于KA组（P〈0.01）。结论 VNS可抑制KA致痫大鼠海马星形胶质细胞GFAP的表达,提示抑制星形胶质细胞激活可能是VNS抑制癫痫的作用机制之一。     

癫疒间发作过程中细胞凋亡与一氧化氮合酶、核因子-B的关系

目的 探讨癫疒间发作过程中细胞凋亡与一氧化氮合酶(NOS)、核因子- B(NF- B)的关系.方法 采用戊四氮(PTZ )致疒间大鼠模型,检测癫疒间发作后神经细胞凋亡、NOS和NF- B的变化.结果 细胞凋亡率在癫疒间发作后6 h开始升高,至24 h达到高峰,48 h下降,与对照组比较差异有显著性(P<0.05).NOS在癫疒间发作后1 h、24 h有2个分泌高峰,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);对照组大鼠海马没有NF- B核转位细胞,而致疒间后NF- B核转位细胞显著上调,24 h达高峰(P<0.01).结论 PTZ致疒间大鼠模型中NOS早期可能参与癫疒间发生,后期可能通过诱导NF- B产生而参与了神经细胞的凋亡.     

"手十二井穴"刺络放血对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响

目的探讨"手十二井穴"刺络放血对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性变化的影响及机制.方法采用大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.大鼠随机分为假手术组、缺血组、缺血+刺络放血组.每组分别在缺血30min、1h、2h、4h不同时间点取脑,测定NO含量和NOS活性.结果 MCAO后,与假手术组各时间点比较,脑组织NO含量及NOS活性明显升高(P<0.05、P<0.01、P<0.001)."手十二井穴"刺络放血,使缺血后NO含量、NOS活性降低(P<0.05、P<0.01).结论 "手十二井穴"刺络放血可抑制脑缺血后脑组织NO含量、NOS活性的升高,减轻自由基对脑组织损伤,从而对大鼠局灶性脑缺血有保护作用.     

VNS对癫(疒间)大鼠行为及脑皮层氨基酸递质含量的影响

目的：探讨自制迷走神经刺激器对癫大鼠的抗疒间作用及对额叶皮层氨基酸递质的影响。方法：利用A、B、C型刺激器对慢性点燃癫大鼠进行迷走神经刺激术（VNS），氨基酸分析仪测定癫大鼠接受不同刺激后1h、24h、1周时额叶皮层内的主要兴奋性与抑制性氨基酸递质含量变化和行为学变化。结果：发生变化的氨基酸递质主要是GABA，其中A、B组较对照组GABA含量高、Glu/GABA值低，B组刺激后1h、24h与对照组间的氨基酸含量变化均有GABA含量高、Glu/GABA值低，B3组刺激后1d时（癫）发作明显减少，但4d后恢复到刺激前水平。结论：自制的中、高强度刺激器进行VNS可以减少1d内的癫发作，抑制癫主要是通过发生GABA递质变化发生作用。     

L-NAME对匹罗卡品致痫大鼠痫性活动的影响

探讨内源性一氧化氮(NO)在癫痫中的作用，采用一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L—NAME)对匹罗卡品致痫大鼠进行事先处置，观察其对匹罗卡品致痛大鼠痫性活动的影响，并用免疫组织化学方法研究大鼠海马结构NOS的改变。结果显示：内源性的NO在早期可能具有一定的抗痫作用；匹罗卡品致痫大鼠痫性发作后海马结构NOS1、NOS2表达显著增加，并且二者可能具有不同的作用。     

戊四唑致痫小鼠海马结构内一氧化氮合酶阳性神经元的时程变化

目的：观察海马内一氧化氮合酶（NOS）在戊四唑（PTZ）致痫后的时程变化。方法：用NADPH-黄递酶（NADPH-d)组织化学方法的方法,分别观察正常及致痫后15min,30min,1h、2h、4h、6h、12h海马内NOS阳性神经元变化。结果：致痫后15min-1h,NOS阳性神经元数量明显减少,1-2h增加至最高峰,2-12h逐渐降低,12h阳性细胞数目最少,2h最高,结论：一氧化氮的含量,随癫痫发作状态的不同而增、减。     

戊四唑致痫小鼠海马结构内一氧化氮合酶阳性神经元的时程变化

目的观察海马内一氧化氮合酶(NOS)在戊四唑(PTZ)致痫后的时程变化.方法用NADPH-黄递酶(NADPH-d)组织化学方法的方法,分别观察正常及致痫后15min、30min、1h、2h、4h、6h、12h海马内NOS阳性神经元变化.结果致痫后15min～1h,NOS阳性神经元数量明显减少,1～2h增加至最高峰,2～12h逐渐降低,12h阳性细胞数目最少,2h最高.结论一氧化氮的含量,随癫痫发作状态的不同而增、减.     

抗癫一号对癫痫大鼠自由基代谢及海马神经元能影响

目的 探讨抗癫一号对慢性致痫大鼠自由基含量及海马神经元的影响.方法 腹腔注射戊四唑（PTZ）造成慢性癫痫大鼠动物模型,化学比色法测定其自由基含量,HE染色观察海马区神经元变化.结果 抗癫一号可减少癫痫大鼠血清内自由基含量,与模型组比较差异具有统计学意义（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）;可增加海马区神经元的数目,恢复神经元形态及结构.结论 抗癫一号通过增加抗氧化酶活性来阻止PTZ点燃后所产生的自由基对神经元的损害,从而起到神经保护作用.     

盐酸沙格雷酯对糖尿病大鼠肾脏的作用机制

目的探讨5-羟色胺2A型受体及其阻滞剂盐酸沙格雷酯对糖尿病大鼠肾脏病变的影响及其作用机制。方法设立正常对照组(NC组)、盐酸沙格雷酯治疗组(SH组)、糖尿病组(DM组)。检测各组第12周的肾功能、尿微量白蛋白排泄率(UAER)、血清一氧化氮(NO)浓度;应用免疫组织化学法检测肾内Ⅳ型胶原、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达水平;在光学显微镜、透射电子显微镜下观察各组大鼠肾小球病理改变。结果与DM组相比,SH组大鼠UAER、相对肾重显著降低(P值均&lt;0.01);SH组病理改变明显改善,足突融合现象不明显,滤过膜结构基本完整,系膜区无明显增宽,内皮细胞肿胀不明显,图像分析结果表明,肾小球截面积及体积较DM组显著减小(P值均&lt;0.01);与DM组比较,SH组血清NO浓度显著升高(P&lt;0.05),Ⅳ型胶原表达水平显著下调(P&lt;0.01),eNOS表达水平显著上调(P&lt;0.05)。结论盐酸沙格雷酯对糖尿病肾脏有保护作用,其机制可能包括减少Ⅳ型胶原沉积,提高eNOS表达水平及NO的血清浓度,从而有效改善糖尿病肾病的病理损害,延缓其发展。     

利鲁唑对戊四氮致癫痫大鼠海马CA3区IL-1β、TNF-α的影响

目的 探讨利鲁唑对戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠海马CA3区白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 将45只大鼠按完全随机设计方法分为对照组、癫痫模型组(PTZ组)和利鲁唑组(Riluzole组),每组15只;造模大鼠连续给予PTZ(35 mg·kg-1·d-1)腹腔注射30 d,3次Ⅳ级或以上发作大鼠为癫痫造模成功;免疫组织化学法检测各组大鼠海马CA3区IL-1β、TNF-α的表达和分布.结果 对照组、PTZ组及Riluzole组大鼠的IL-1β阳性细胞平均光密度值(OD)分别为(0.210±0.002)、(0.241±0.002)和(0.220±0.002),不同组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);TNF-α阳性细胞OD值分别为(0.191±0.003)、(0.230±0.003)和(0.202±0.003),不同组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);大鼠海马CA3区IL-1β与TNF-α表达水平呈显著正相关(r=0.969,P<0.01).结论 利鲁唑通过抑制癫痫大鼠脑内神经细胞过度表达IL-1β、TNF-α,可能降低其对正常神经细胞的损伤作用,可能减缓癫痫发病对正常神经细胞的损伤,产生神经保护作用.     

异丙酚对大鼠脑内nNOS活性及NO含量的影响

目的 通过观察异丙酚对大鼠海马以及基底前脑内神经型一氧化氮合酶(nNos)的活性和一氧化氮(NO)释入量的影响，探讨异丙酚的中枢麻醉机制。方法 选择正常雄性Wistar大鼠30只随机为A、B、C三组，分别腹腔注射异丙酚(50mg／kg和100mg／kg)及生理盐水(10ml／kg)。10min后，各组大鼠经主动脉灌注生理盐水，随机选取5只取新鲜鼠脑，分离海马及基底前脑，分光光度法测其NO释放量。另5只大鼠继续灌注固定液后取脑，免疫组化检测海马及基底前脑内nNOS阳性细胞数。结果 与对照组C组相比，海马及基底前脑内nNOS阳性细胞数、NO释放量都显著减少(P＜0．01)。结论 异丙酚可能通过抑制海马及基底前脑内nNOs的活性，使NO的释放减少而发挥麻醉作用。     

香菇多糖对糖尿病大鼠巨噬细胞脂质过氧化和一氧化氮的影响

目的：研究香菇多糖(LNT)对糖尿病大鼠巨噬细胞脂质过氧化作用和一氧化氮水平的影响。方法：SD大鼠分三组，正常对照组、糖尿病组、LNT治疗组，分别灌洗大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞，并测定巨噬细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)、一氧化氮合酶(NOS)的活性及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量。结果：糖尿病大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞内SOD、GSH-PX、NOS活性及NO含量下降，MDA含量增高，经LNT治疗后，SOD、GSH-PX、NOS活性及NO含量升高，MDA含量下降。结论：LNT可提高糖尿病大鼠巨噬细胞抗脂质过氧化作用及NO水平。     

惊厥阈下电刺激致大鼠海马NO含量及nNOS表达变化

目的　探讨海马一氧化氮 (NO)及NO合酶 (NOS)在惊厥阈下电刺激所致创伤后应激障碍 (PTSD)样行为异常中的可能意义。方法　在大鼠海马惊厥阈下电刺激PTSD动物模型基础上 ,动态检测了大鼠海马、额叶皮层组织匀浆NO、NOS含量及神经元型NOS(nNOS)表达。结果　惊厥阈下电刺激所致PTSD样行为异常大鼠海马NO于电刺激停止后 12h明显升高 [( 4 65± 1 2 2 ) μmol/gprotein ,P <0 0 1] ,2 4h达高峰 [( 6 44± 1 5 3 ) μmol/gprotein ,P <0 0 1] ,72h时仍明显增多[( 3 17± 0 91) μmol/gprotein ,P <0 0 5 ] ,海马nNOS表达亦同步增高 ,而海马NOS仅轻度短期增高 ,额叶皮层nNOS则无明显改变。结论　海马结构nNOS持续性高表达与NO含量明显增多 ,在惊厥阈下电刺激所致实验大鼠PTSD样行为异常中可能有重要意义     

戊四氮点燃致发育期癫(疒间)大鼠海马神经元突触结构的改变

目的 观察戊四氮(PTZ)点燃后发育期癫(疒间)大鼠海马神经元海马突触素(P38)和突触后致密物质(PSD95)及电镜超微结构的变化.方法 21日龄SD大鼠随机分为生理盐水组(NS)和实验组(PTZ),用戊四氮建立点燃模型,免疫组化检测大鼠P38及 PSD95阳性细胞的数量及分布,电镜观察海马CA3区超微结构的变化.结果 PTZ组大鼠海马区P38及PSD95免疫反应产物表达量较NS组明显减少(P<0.05);电镜下NS组海马CA3区神经元形态及突触结构未见明显异常,PTZ组大鼠神经元细胞及突触结构均有改变.结论 戊四氮点燃所致癫(疒间)对发育期大鼠海马神经元的突触结构有明显损害.