HPLC法同时测定柴胡-黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类的含量

目的建立高效液相色谱测定柴胡—黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类含量的方法。方法采用MERCK PUROSPHERC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇—0.05%磷酸,梯度洗脱;流速:1.0 mL.min-1;柱温:35℃;检测波长为210 nm。结果皂苷成分(柴胡皂苷a)、3个黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)达到了完全分离,4个成分的峰面积与进样量线性关系良好。柴胡皂苷a、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素线性范围分别为0.219 6～17.568μg、0.214 75～17.18μg、0.093 1～7.448μg、0.107 6～8.608μg,(r≥0.999 8);平均回收率分别为97.71%、102.43%、101.16%、97.50%;RSD分别为0.52%、1.96%、1.55%、0.75%。结论该方法可同时测定柴胡—黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类成分的含量,并能有效表征水煎液中其他成分差别,也为建立柴胡—黄芩药对水煎液特征指纹图谱奠定了基础。     

柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的电磁裂解水提取工艺优化

目的:建立同时测定柴胡水提液中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d含量的方法,并优化其电磁裂解水提取工艺。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为SB-C_(18),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),柱温为40℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,进样量为10μL。在单因素试验基础上,以提取时间、物料粒度、料液比为考察因素,柴胡皂苷a与柴胡皂苷d的总提取率为响应值,采用Box-Behnken响应面法优化其提取工艺,并与超声法和煎煮法进行比较。结果:柴胡皂苷a、柴胡皂苷d检测质量浓度的线性范围分别为50.70～202.80μg/mL(r=0.999 9)、50.50～202.00μg/mL(r=0.999 9);定量限分别为0.16、0.13μg/mL,检测限分别为0.05、0.04μg/mL;精密度、稳定性、重复性的RSD均小于2%;加样回收率分别为98.23%～102.47%(RSD=1.80%,n=6)、98.84%～102.06%(RSD=1.60%,n=6)。最优提取工艺为以水提取1次,提取时间2.50 min、药材过80目筛、料液比1∶28(g/mL)。3次验证试验结果显示,最优工艺所得柴胡皂苷a与柴胡皂苷d的平均总提取率为8.42 mg/g,高于超声法(8.34 mg/g)和煎煮法(8.06 mg/g),且提取时间更短。结论:所建含量测定方法简便、准确,可用于同时测定柴胡水提液中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量;优化所得电磁裂解水提取的工艺稳定、可行。     

HPLC法测定柴胡口服液中柴胡皂苷a、d的含量

目的建立测定柴胡口服液中柴胡皂苷a、d含量的方法。方法用高效液相色谱法测定制剂中柴胡皂苷a和d的含量。色谱柱:W elchrom C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水(43∶57),检测波长:210 nm;流速:1.0 m l·m in-1。结果柴胡皂苷a线性范围为1.962~11.772μg,r=0.999 8,平均回收率99.66%,RSD为0.10%;柴胡皂苷d线性范围为2.772~16.632μg,r=0.999 9,平均回收率99.68%,RSD为0.28%。结论该方法操作简便、灵敏度高、结果准确、专属性强,能有效的控制柴胡口服液的质量。     

UPLC法测定小叶黑柴胡的根中柴胡皂苷a、d含量

目的:建立超高效液相色谱法检测小叶黑柴胡的根中柴胡皂苷a、d含量。方法:采用Waters Acquity UPLC系统,使用ACQUITY UPLC BEHTM C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速0.6 mL.min-1,检测波长203 nm,柱温30℃。结果:柴胡皂苷a线性范围为0.059～1.180μg(r=0.9998),平均回收率为96.7%(RSD=1.3%,n=6);柴胡皂苷d线性范围为0.112～2.230μg(r=0.9997),平均回收率为98.7%(RSD=1.5%,n=6)。结论:该方法操作简便,结果准确,可用于小叶黑柴胡的质量控制。     

HPLC测定柴胡口服液中柴胡皂苷a、d含量方法的改进

目的:改进HPLC测定柴胡口服液中柴胡皂苷a、d含量的方法.方法:采用Purospher STAR C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.05％磷酸(80∶20);流速:1.0 ml· min-1;柱温:35℃;检测波长为210 nm.结果:柴胡皂苷a线性范围为0.04192 ～ 2.096 μg,r=0.999 9,平均回收率99.08％,RSD为0.40％;柴胡皂苷d线性范围为0.032 18～1.609 μg,r=0.999 8,平均回收率98.27％,RSD为0.55％.结论:该法灵敏、简便、准确,适用于市售柴胡口服液中柴胡皂苷a、d的含量测定.     

柴胡的质量评价研究△

目的:建立柴胡的质量评价方法。方法:采用薄层色谱法进行定性鉴别;紫外分光光度法,测定柴胡中总皂苷的含量;利用HPLC法,采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)、乙腈-水为流动相,流速:1.0ml.min-1,检测波长:210nm,测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。结果:柴胡总皂苷在0.03256～0.1628mg、柴胡皂苷a在0.258～2.580μg、柴胡皂苷d在0.238～2.380μg范围内呈良好的线性关系,r分别为0.9969、0.9996、0.9997;平均回收率:柴胡总皂苷为99.73%,柴胡皂苷a为100.40%,柴胡皂苷d为99.70%;RSD:柴胡总皂苷为2.07%,柴胡皂苷a为1.72%,柴胡皂苷d为1.50%。结论:定性鉴别薄层色谱特征明显,专属性强,本研究建立的紫外分光光度法测定柴胡总皂苷及高效液相法测定柴胡皂苷a、d含量的方法,简单、易行、快速,结果准确可靠,能较全面地控制柴胡的质量,并为在安全剂量范围内正确使用柴胡提供依据。     

HPLC-ELSD指纹图谱分析柴胡配伍牡蛎后对柴胡皂苷类成分溶出的影响

摘要：目的:建立HPLC-ELSD指纹图谱研究牡蛎配伍生柴胡和醋柴胡后对柴胡皂苷类成分溶出的影响。方法:色谱条件:Phenomenex Kinetex C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相乙腈-水,梯度洗脱;流速1.0 ml·min-1;柱温30℃;进样量20μl;蒸发光散射检测器,氮气流速3.0 ml·min-1。分别对生柴胡单煎、生柴胡∶牡蛎（8∶3）、生柴胡∶牡蛎（1∶1）、醋柴胡单煎、醋柴胡∶牡蛎（8∶3）、醋柴胡∶牡蛎（1∶1）等6种水提液进行指纹图谱研究,得到共有模式色谱图后进行比对,并测定柴胡皂苷a,d,b1,b2的含量。结果:柴胡配伍牡蛎后,新生成1个化学成分（10号峰）,并且大幅度升高柴胡皂苷d的煎出率,同时显著降低柴胡皂苷a（SSa）、柴胡皂苷b1（SSb1）、柴胡皂苷b2（SSb2）、柴胡皂苷d（SSd）等7种成分的煎出率（16～22号色谱峰）,并且牡蛎配伍比例越大,这7个成分减少得越多甚至消失。结论:本研究建立的HPLC-ELSD指纹图谱能够较为全面地分析柴胡配伍牡蛎后柴胡中主要成分的变化,揭示柴胡与牡蛎的配伍规律。     

高效液相色谱法测定柴胡中柴胡皂苷a与柴胡皂苷d的含量

目的:对中药柴胡有效成分柴胡皂苷a、柴胡皂苷d进行含量测定,比较10种不同产地的含量差异,为该药材质量标准制定提供依据.方法:采用高效液相色谱法(HPLC).伊利特Cis柱,以乙腈-水(40:60)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长210 nm.结果:柴胡皂苷a在2.76～41.4 μg、柴胡皂苷d在3.32～49.8μg范围内,线性关系良好,平均回收率分别为101.39%、102.14%,RSD分别为2.7%、2.8%(n=5).结论:该方法准确灵敏、稳定可靠.柴胡皂苷a、柴胡皂苷d可作为控制柴胡质量的指标性成分.     

正交试验法优选柴胡中柴胡皂苷提取工艺

目的:以柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d含量为评价指标,优选柴胡最佳提取工艺.方法:采用L9(34)正交试验设计对提取方法进行优选,FIPLC-ELSD法测定柴胡皂苷a及柴胡皂苷d含量.采用Agilent TOG8(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(50:50);流速:0.8 mL·in-1;柱温:20℃;ELSD为检测器.结果:最佳提取方法为回流1 h,加5%氨水甲醇30mL.结论:优选出的提取方法经方法学考察符合要求,可为柴胡中化学成分的提取提供参考,使分析结果准确、可靠.     

UPLC-PDA切换波长法测定柴胡-白芍药对水煎液7种主要成分的含量

目的 建立超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)切换波长法同时测定柴胡-白芍药对水煎液中7种主要成分没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、柴胡皂苷A、柴胡皂苷C和柴胡皂苷D含量的方法。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈(2.1 mm×100 mm, 1.7μm)色谱柱,流动相：乙腈-0.1%乙酸水溶液,梯度洗脱;流速为0.2 mL·min^-1;检测波长分别为210(柴胡皂苷A、C、D)、237(芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷)、278 nm(没食子酸),柱温30℃;进样量8μL。结果 没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、柴胡皂苷A、柴胡皂苷C和柴胡皂苷D的线性范围分别为0.018～0.18μg(r=0.999 9)、0.047～0.47μg(r=1)、0.52～5.18μg(r=0.999 9)、0.021～0.21μg(r=0.999 9)、0.043～0.43μg(r=0.999 9)、0.073～0.73μg(r=0.999 9)、0.042～0.42μg(r=0.999 6)...     

HPLC法同时测定黑柴胡药材中柴胡皂苷a和d的含量

目的:建立同时测定黑柴胡药材中柴胡皂苷a和d含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Inertsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(38∶62,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为210 nm。结果:柴胡皂苷a和d的进样量分别在0.425⁶.375μg和0.1306.375μg和0.130³.250μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.999 9);精密度、稳定性和重复性试验的RSD<2%;平均加样回收率分别为96.66%(RSD=1.11%,n=6)和96.20%(RSD=0.78%,n=6)。结论:该方法简便、重复性好,结果稳定、可靠,可用于黑柴胡药材的质量控制。     

RP—HPLC法测定不同品种不同产地柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的：建立柴胡中柴胡皂苷a、d含量的RP—HPLC测定方法,以分别考察不同种植基地柴胡及野生柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。方法：采用BonChrom C18色谱柱（200mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（40：60）,流速1．0ml·min^-1,检测波长204nm。结果：柴胡皂苷a线性范围为1．94～19．44μg（r=0．9999）,柴胡皂苷d线性范围为1．96～19．60μg（r=0．9998）,柴胡皂苷a平均回收率为99．35％（RSD=1．14％）,柴胡皂苷d平均回收率为99．52％（RSD=1．18％）。不同品种不同产地柴胡中柴胡皂苷a、d含量之和的分布范围为0．44％-0．67％。结论：本法简便快捷,结果准确,重复性好,地道中药材规范化种植（GAP）基地的柴胡皂苷含量较高。     

吗替麦考酚酯胶囊含量和有关物质的测定

目的采用反相高效液相色谱法建立吗替麦考酚酯胶囊的有关物质测定法。方法色谱柱symmetry C18150＊4.6mm,流动相为：乙腈-水-三乙胺磷酸缓冲液（取三乙胺10mL,加水990mL,混匀,磷酸调节pH值至5.4±0.1）（40∶40∶20）;流速：1.0mL·min-1,检测波长为249nm;柱温45℃。结果制剂中辅料对主药测定无干扰,吗替麦考酚酯在60.2μg~602.4μg.mL-1浓度范围内,峰面积与浓度线性关系良好,相关系数r=0.99995;平均回收率为99.9%,变异系数为1.4%。溶液在冷藏5℃条件下,4h内稳定,24h降解产物明显增加,因此供试品溶液宜现配现用;麦考酚酸在4.6μg~46.05μg.mL-1范围内R=0.99995;平均回收率为98.5%;精密度测定变异系数为：0.46%。结论本法简便,准确,专属性强,可用于吗替麦考酚酯胶囊的有关物质检查和含量测定。     

尼美舒利含量测定和有关物质检查方法的研究

目的建立高效液相色谱法测定尼美舒利的含量及有关物质。方法色谱柱为Hypersil BDSC18柱（250mm×4.6mm,5μm）,以0.1%三氟乙酸-乙腈（60∶40）为流动相,流速1.0ml/min,检测波长分别为298nm（含量测定）与230nm（有关物质检查）,柱温35℃。结果尼美舒利在10～200μg/ml浓度范围内,线性关系良好（r=0.9999）;杂质邻氨基二苯醚、2-苯氧甲烷磺酰苯胺、邻硝基二苯醚均在0.1～10.0μg/ml浓度范围内,线性关系良好（r=0.9999）,最低检测限分别为0.8、0.9、0.5ng。结论本方法简便、快速,结果准确、可靠,重现性较好,可用于尼美舒利的有关物质检查和含量测定。     

SPE-UPLC-ELSD法测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的：应用超高效液相色谱-蒸发光散射（UPLC—ELSD）检测柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。方法：采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱（2．1mm×100mm,1．7μm）;以乙腈（A）-水（B）为流动相梯度洗脱（0－3min,43％A;3～9min,43％A→63％A）;流速：0．2mL．min-1：柱温：30℃;ELSD检测器漂移管温度为40℃,气体压力为40psi,测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。结果：柴胡中柴胡皂苷a在浓度为64．2-385．2Dg·mL—1（r=0．9994）内线性范围良好：柴胡皂苷d在浓度为67．3～403．8μg·mL-1（r=0．9992）内线性范围良好。结论：该方法简便、灵敏、可靠、准确、重现洼好,可作为柴胡的质量控制方法。     

大孔吸附树脂分离纯化柴胡总皂苷工艺研究

目的以柴胡皂苷a含量为指标,考察柴胡总皂苷的最佳分离纯化工艺。方法建立柴胡皂苷a的HPLC测定法,色谱柱为ODS-C18柱(150×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(70:30),流速为1mL.min-1,检测波长为210nm。以柴胡皂苷a为指标,比较不同型号大孔树脂对于柴胡总皂苷的分离纯化能力,对吸附流速、洗脱溶剂及用量、洗脱流速进行考察。结果柴胡皂苷a在50～250μg.mL-1的范围内,浓度与其峰面积具有良好的线性关系(r=0.9991),平均加样回收率为99.22%,RSD=1.07%(n=6)。确定D101大孔树脂为柴胡总皂苷的纯化材料,其最佳工艺条件是吸附流速为1BV.h-1,洗脱溶剂为70%乙醇,用量为5BV,洗脱流速为2BV.h-1。柴胡总皂苷精制品中柴胡皂苷a含量可达到3%左右。结论该含量测定方法操作简便、重复性好,可用于测定柴胡总皂苷精制品中柴胡皂苷a的含量。D101大孔树脂分离柴胡总皂苷工艺稳定可行,树脂可重复利用,对于柴胡总皂苷的分离精制具有良好的应用前景。     

HPLC法测定布洛芬缓释胶囊有关物质

目的：建立高效液相色谱法测定布洛芬缓释胶囊中的有关物质2-（4-丁基苯基）丙酸和4-异丁基苯乙酮。方法：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱,流动相为磷酸-乙腈-水（0.5：340：600,待平衡后加水稀释至1000mL）,检测波长214nm,进样量为20μL,流速为2.0mL/min。结果：布洛芬缓释胶囊中有关物质2-（4-丁基苯基）丙酸在3.00～9.00μg/mL浓度范围内线性关系良好（γ=0.9992）,平均回收率为99.9%,RSD为0.82%。检测限为0.1307μg/mL。4-异丁基苯乙酮在1.19～7.14μg/mL浓度范围内线性关系良好（γ=0.9995）,平均回收率为100.2%,RSD为1.00%,检测限为0.1428μg/mL。结论：该方法操作简单、准确,重现性、分离效果好,灵敏度高,能较好的进行布洛芬缓释胶囊中有关物质2-（4-丁基苯基）丙酸和4-异丁基苯乙酮的测定。     

HPLC法测定硝酸异山梨酯缓释片的有关物质

目的对硝酸异山梨酯缓释片有关物质进行测定。方法采用高效液相色谱,用Agilenteclipse XDB-C18柱(4.6×250mm,5μm),流动相为水-甲醇(70∶30);流速为1mL·min-1;检测波长为210nm;柱温为30℃。结果 2-单硝酸异山梨酯线性范围为0.4～20μg.mL-1(r=1.0000),平均回收率为100.3%,RSD为2.2%;单硝酸异山梨酯线性范围为0.4～20μg.mL-1(r=1.0000),平均回收率为101.6%,RSD为2.1%。结论本方法简便、准确,能够有效测定硝酸异山梨酯缓释片的有关物质。     

反相高效液相色谱法测定奥美拉唑镁肠溶片含量的研究

目的研究反相高效液相色谱法测定奥美拉唑镁肠溶片中有效成分的含量。方法采用Diamon-sil C18柱（4.6mm×250mm,5μm）;以甲醇-水-磷酸-三乙胺（70：30：0.12：0.3）为流动相,流速1.0ml/min,检测波长302nm,进量样20μl。结果奥美拉唑镁浓度在4～36μg/ml范围内,与峰面积呈良好的线性关系,r=1.0000（n=5）;最低检测浓度为0.5μg.ml-1;平均回收率为100.7%,RSD为0.27%（n=9）;奥美拉唑镁主峰与杂质峰能分离。结论采用反相高效液相色谱法测定奥美拉唑镁肠溶片的含量,方法简便,结果准确,专属性强,适用于奥美拉唑镁片剂的质量评价。