SIRT1在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的探讨沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)在非小细胞肺癌组织中的表达情况及其与临床病理参数之间的关系。方法应用免疫组织化学(SABC)法检测112例经病理诊断确诊的非小细胞肺癌患者中SIRT1的表达情况,并分析其与相关临床病理参数之间的关系。结果 SIRT1在非小细胞肺癌组织中的表达高于周围正常肺组织,差异具有统计学意义(P<0.05),在腺癌组织中的表达明显高于在鳞癌组织中的表达(P<0.05),并且分化程度越高,表达越好(P<0.05),有淋巴结转移者表达明显高于无淋巴结转移者,而与年龄、性别、临床分期等无明显关系。结论 SIRT1在非小细胞肺癌组织中的表达与病理分型、分化程度、淋巴结转移情况相关,可能成为判定非小细胞肺癌恶性程度及评估预后的生物学指标。     

周期素依赖激酶2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 观察细胞周期因子周期素依赖激酶2(CDK2)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达，探讨其临床意义。方法 采用免疫组织化学链霉素亲生物蛋白—过氧化酶(S—P)法，观察66例临床资料完整的NSCLC组织和12例正常肺组织中CDK2的表达，并对其与临床预后的关系进行相关分析。结果 在66例NSCLC患者中，CDK2在细胞核呈阳性免疫反应，其阳性表达率为84．85％。CDK2表达对年龄、性别、组织学类型、pTNM分期和淋巴结转移均无显著的影响(P＞O．05)，而对肿瘤的大小、病理分级有显著影响(P＜O．05)。CDK2表达阳性者与阴性者比较生存时间明显缩短(P＝O．O14)，CDK2阳性患者估计增加相对风险为2．5。结论 CDK2在NSCLC组织中细胞核呈阳性免疫反应，其过度表达与NSCLC患者临床病理特征和预后不良有关。     

CK在Ⅰ期非小细胞肺癌患者淋巴结中的表达及其临床意义

目的通过检测Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者淋巴结中细胞角蛋白(CK)的表达,确定微转移灶的存在及其与肿瘤复发、转移和预后的关系。方法以CK作为肿瘤标记物,应用免疫组化链霉亲生物素-生物素-过氧化酶复合物(Streptavidin biotin-peroxidase complex,SABC)法,检测根治术后常规病理HE染色阴性的33例Ⅰ期NSCLC患者的246枚淋巴结中的微转移灶。结果33例患者246枚淋巴结中有10例(30.3%)患者的12枚(4.9%)淋巴结中CK阳性表达。有或无CK阳性表达的患者复发转移率差异有统计学意义(80.0%vs.26.1%,χ2=7.015,P=0.016),CK阳性表达患者的中位生存期显著短于CK阴性表达者(21个月vs.60个月,P=0.016);Cox单因素风险模型(P=0.004)和多因素风险模型(P=0.004)均显示存在淋巴结微转移的期NSCLC患者预后不良。结论CK免疫组化染色可以作为检测和判定肺癌淋巴结微转移的有效方法。CK免疫组化染色检测淋巴结微转移与Ⅰ期NSCLC复发转移相关,有助于更加精确的分期,可以作为Ⅰ期NSCLC患者根治术后的一个预后指标,并为其综合治疗提供理论依据。     

转化生长因子β1基因产物在人非小细胞肺癌中的表达研究

目的探讨转化生长因子β１基因表达产物在人非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法对７３例人非小细胞肺癌组织中转化生长因子β１基因表达蛋白水平进行了研究。结果转化生长因子β１基因表达水平与肺癌的病期、组织学类型、细胞分化程度，以及肺癌转移有密切关系。转化生长因子β１基因表达水平在腺癌明显高于鳞癌和腺鳞癌，低分化癌明显低于中－高分化癌，Ⅲ、Ⅳ期癌明显低于Ⅰ、Ⅱ期癌，转移癌明显低于原发癌，有淋巴结转移的原发癌明显低于无淋巴结转移的原发癌（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。结论转化生长因子β１基因参与调控肺癌的发生、发展和转移过程。     

非小细胞肺癌环氧化酶-2的增强表达及其临床意义

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)在非小细胞肺癌组织中的表达水平与其临床特征和预后的关系。方法 收集外科切除的79例非小细胞肺癌的组织标本石蜡切片,应用抗人COX-2抗体进行免疫组织化学染色,用COX-2阳性表达血管内皮细胞作阳性对照。结果 肺腺癌和鳞癌COX-2阳性表达率分别为85％(28／33)和57％(26／46)(P=0．013),COX-2的表达与腺癌的分化程度(P=0．007)、肿瘤的大小(P=0．011)和TNM分期有密切关系(P=0．021),与鳞癌分化程度无明显关系(P=0．550)。COX-2阳性组患者5年生存率27．1％,中位生存期53个月;COX之阴性组患者5年生存率52．0％,中位生存期61个月,2组差异有显著性意义(P=0．029)。结论 COX-2的增强表达与非小细胞肺癌的浸润性发展有密切关系,是非小细胞肺癌患者预后不良的风险因素之一。     

S100A4蛋白在人非小细胞肺癌间质中的表达及其临床意义

目的 探讨S100A4蛋白在人非小细胞肺癌(NSCLC)间质中的表达及其临床意义,以确定其与肿瘤的侵袭、转移及预后的关系.方法 130例NSCLC 患者手术切除的肺癌组织标本,应用免疫组织化学方法(SP法)检测S100A4蛋白在肺癌组织间质中的表达,分析其与预后的关系.结果 S100A4蛋白在NSCLC间质表达的总阳性率为72.3%(94/130),在鳞状细胞癌、腺癌、腺鳞癌和大细胞癌间质表达的阳性率分别为84.3%、59.6%、70.0%和75.0%.S100A4蛋白在NSCLC间质的阳性表达与淋巴结转移(χ2=18.91,P=0.000)、远处转移(χ2=5.51,P=0.019)及TNM分期(χ2=21.54,P=0.000)明显相关.间质S100A4蛋白表达阳性患者3年生存率为36.2%(34/94),明显低于表达阴性的患者[63.9%(23/36),P=0.003].Cox风险比例模型分析结果表明,年龄≤50岁(OR=1.866)、有淋巴结转移(OR=1.826)、有远处转移(OR=6.224)、肿瘤低、未分化(OR=1.793)、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期(OR=2.573)和间质中S100A4蛋白表达阳性(OR=1.776)是影响肺癌患者预后的危险因素.结论 S100A4蛋白在NSCLC间质中的表达与肺癌的侵袭、转移、分期及预后密切相关,它有希望成为一种能预测肿瘤进展及指导临床治疗的标记物.     

Bax基因产物在人非小细胞肺癌中的表达

目的 探讨Ｂａｘ基因产物在人非小细胞肺癌中的表达水平与肺癌病理生理特征之间的关系。方法 应用免疫组织化学法检测１３７例人非小细胞肺癌组织中Ｂａｘ基因产物的表达。结果 肺癌组织Ｂａｘ基因产物的表达水平明显低于癌旁肺组织和正常组织，而正常肺组织与癌旁组织间无差异。转移癌组织Ｂａｘ表达水平明显低于原发癌组织，但Ｂａｘ表达水平与肺癌组织学类型及细胞分化程度无明显关系。     

富含脯氨酸蛋白11和沉默信息调节因子2在非小细胞肺癌组织的表达及其临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的富含脯氨酸蛋白11(PRR11)和沉默信息调节因子2(SIRT2)的表达水平及临床意义。方法:收集山西医科大学第二医院2015年4月至2020年6月病理学检查确诊的100例NSCLC患者癌组织和癌旁组织标本用于免疫组织化学法检测PRR11和SIRT2水平,结合临床资料采用 ...     

aPKC-ι在非小细胞肺癌组织中的表达及其与预后的关系

目的研究非典型蛋白激酶C-ι(aPKC-ι)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,探讨其表达与NSCLC各临床病理因素及其预后的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测80例NSCLC癌组织和20例肺良性疾病组织中aPKC-ι蛋白的表达情况,并随访所有患者的生存时间。结果NSCLC组织中aPKC-ι蛋白表达较肺良性疾病组织明显增高(P=0.006),aPKC-ι表达与性别(P=0.806)、组织学类型(P=0.140)差异无统计学意义,与淋巴结转移(P=0.003)、病理分期(P=0.000)、分化程度(P=0.006)差异有统计学意义;生存分析显示:aPKC-ι表达与预后明显相关(r=0.914)。结论aPKC-ι的表达强弱与NSCLC的发生及发展有关,可作为NSCLC患者预后参考指标,有利于个体化治疗。     

真核翻译起始因子5A2和蛋白精氨酸甲基转移酶5在非小细胞肺癌组织的表达及临床意义

目的:探讨真核翻译起始因子5A2(EIF5A2)和蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织的表达水平,以及两者与NSCLC临床病理特征之间的关系。方法:收集诸城市人民医院2015年1月至2020年7月病理检查确诊的106例NSCLC患者癌组织以及癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测EIF5...     

SH2-B对结肠癌HT-29细胞增殖的影响

目的：探讨SH2-B对结肠癌HT-29细胞周期演进和细胞增殖的影响。
方法：免疫荧光筛选SH2-B低表达结肠癌细胞（HT-29）。用LipofectAMINE2000将pcDNA3.1-SH2-B质粒转染至HT-29细胞（转染组）,并设空载体转染组和未转染组作为对照。Western-blotting分析SH2-B转染后SH2-B的表达,MTT法分析SH2-B转染后HT-29细胞的增殖,流式细胞术分析SH2-B转染后HT-29细胞周期变化。
结果：将pcDNA3.1-SH2-B质粒转染至HT-29细胞后可获得SH2-B的有效表达。转染SH2-B 后HT-29细胞增殖显著增强（P＜0.05）。流式细胞仪检测结果显示,转染SH2-B组S期细胞显著高于未转染组和空载体组（P＜0.05）。
结论：SH2-B促进结肠癌HT-29细胞增殖和细胞周期演进。

     

H2-B1基因转染小鼠内皮细胞对其免疫原性的影响

目的 转染pEGFP-N1-H2B1质粒载体至小鼠血管内皮细胞(VEC),观察导入H2-B1基因后VEC免疫原性的变化,探讨借鉴母胎免疫耐受模型诱导心脏移植术后免疫耐受的机制.方法 以未处理的VEC为对照,采用流式细胞仪和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别于转染H2-B1基因后24、48、72 h检测质粒转染效率以及H2-B1基因的mRNA相对表达量;将同源小鼠外周血单个核细胞(PBMC)和VEC按100:1和10:1两种不同效靶比混合,观察PBMC对靶细胞杀伤活性的变化.结果 H2-B1基因组H2-B1基因在VEC中的mRNA表达量明显高于对照组(0.5mg/L组,P<0.05;1.0 mg/L组,P<0.01).H2-B1基因转染48 h后,当效靶比为100:1时,与对照组细胞毒性14.29%比较,0.5 mg/L基因组细胞毒性为4.28%,提示转染H2-B1基因组PBMC对VEC的毒性作用明显降低(P<0.05).结论 H2-B1基因可能具有免疫调节功能,可降低VEC的免疫原性,抑制PBMC对VEC的杀伤活性,诱导免疫耐受.     

H2-B1基因转染小鼠内皮细胞对其免疫原性的影响

目的 转染pEGFP-N1-H2B1质粒载体至小鼠血管内皮细胞(VEC),观察导入H2-B1基因后VEC免疫原性的变化,探讨借鉴母胎免疫耐受模型诱导心脏移植术后免疫耐受的机制.方法 以未处理的VEC为对照,采用流式细胞仪和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别于转染H2-B1基因后24、48、72 h检测质粒转染效率以及H2-B1基因的mRNA相对表达量;将同源小鼠外周血单个核细胞(PBMC)和VEC按100:1和10:1两种不同效靶比混合,观察PBMC对靶细胞杀伤活性的变化.结果 H2-B1基因组H2-B1基因在VEC中的mRNA表达量明显高于对照组(0.5mg/L组,P<0.05;1.0 mg/L组,P<0.01).H2-B1基因转染48 h后,当效靶比为100:1时,与对照组细胞毒性14.29%比较,0.5 mg/L基因组细胞毒性为4.28%,提示转染H2-B1基因组PBMC对VEC的毒性作用明显降低(P<0.05).结论 H2-B1基因可能具有免疫调节功能,可降低VEC的免疫原性,抑制PBMC对VEC的杀伤活性,诱导免疫耐受.     

H2-B1基因转染小鼠内皮细胞对其免疫原性的影响

目的 转染pEGFP-N1-H2B1质粒载体至小鼠血管内皮细胞(VEC),观察导入H2-B1基因后VEC免疫原性的变化,探讨借鉴母胎免疫耐受模型诱导心脏移植术后免疫耐受的机制.方法 以未处理的VEC为对照,采用流式细胞仪和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别于转染H2-B1基因后24、48、72 h检测质粒转染效率以及H2-B1基因的mRNA相对表达量;将同源小鼠外周血单个核细胞(PBMC)和VEC按100:1和10:1两种不同效靶比混合,观察PBMC对靶细胞杀伤活性的变化.结果 H2-B1基因组H2-B1基因在VEC中的mRNA表达量明显高于对照组(0.5mg/L组,P<0.05;1.0 mg/L组,P<0.01).H2-B1基因转染48 h后,当效靶比为100:1时,与对照组细胞毒性14.29%比较,0.5 mg/L基因组细胞毒性为4.28%,提示转染H2-B1基因组PBMC对VEC的毒性作用明显降低(P<0.05).结论 H2-B1基因可能具有免疫调节功能,可降低VEC的免疫原性,抑制PBMC对VEC的杀伤活性,诱导免疫耐受.     

Alveolar Bone Protection by Targeting the SH3BP2-SYK Axis in Osteoclasts

Periodontitis is a bacterially induced chronic inflammatory condition of the oral cavity where tooth-supporting tissues including alveolar bone are destructed. Previously, we have shown that the adaptor protein SH3-domain binding protein 2 (SH3BP2) plays a critical role in inflammatory response and osteoclastogenesis of myeloid lineage cells through spleen tyrosine kinase (SYK). In this study, we show that SH3BP2 is a novel regulator for alveolar bone resorption in periodontitis. Micro-CT analysis of SH3BP2-deficient (Sh3bp2 ^−/−) mice challenged with ligature-induced periodontitis revealed that Sh3bp2 ^−/− mice develop decreased alveolar bone loss (male 14.9% ± 10.2%; female 19.0% ± 6.0%) compared with wild-type control mice (male 25.3% ± 5.8%; female 30.8% ± 5.8%). Lack of SH3BP2 did not change the inflammatory cytokine expression and osteoclast induction. Conditional knockout of SH3BP2 and SYK in myeloid lineage cells with LysM-Cre mice recapitulated the reduced bone loss without affecting both inflammatory cytokine expression and osteoclast induction, suggesting that the SH3BP2-SYK axis plays a key role in regulating alveolar bone loss by mechanisms that regulate the bone-resorbing function of osteoclasts rather than differentiation. Administration of a new SYK inhibitor GS-9973 before or after periodontitis induction reduced bone resorption without affecting inflammatory reaction in gingival tissues. In vitro, GS-9973 treatment of bone marrow–derived M-CSF-dependent macrophages suppressed tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive osteoclast formation with decreased mineral resorption capacity even when GS-9973 was added after RANKL stimulation. Thus, the data suggest that SH3BP2-SYK is a novel signaling axis for regulating alveolar bone loss in periodontitis and that SYK can be a potential therapeutic target to suppress alveolar bone resorption in periodontal diseases. © 2019 American Society for Bone and Mineral Research. © 2019 American Society for Bone and Mineral Research.     

Decreased SH3BP2 inhibits osteoclast differentiation and function

Germline mutations in SH3BP2 gene have been identified in patients with cherubism, a skeletal disorder characterized by excessive osteoclastic bone resorption that is limited to the mandible and maxilla. We previously demonstrated that SH3BP2 overexpression in Raw264.7 cells increased RANKL‐induced osteoclastogenesis. Here, we examine the effect of decreased SH3BP2 on osteoclastogenesis. shRNA knockdown of SH3BP2 decreased PLCγ2 phosphorylation and NFATc1 expression, and reduced the expression of osteoclast‐specific genes. In BMMs knockdown of SH3BP2 led to reductions in both the number and the surface area of TRAP positive and multinucleated osteoclasts. Bone resorptive activity was also dramatically blocked by shRNA knockdown of SH3BP2. Similarly Sh3bp2(?/?) deficient mice BMMs formed smaller osteoclasts that stained less with TRAP than wild‐type mice. Taken together, this study demonstrates that SH3BP2 knockdown significantly decreases osteoclast differentiation and function. These results suggest that SH3BP2 plays a critical role in osteoclastogenesis and is a potential target for suppression of pathologic bone resorption. © 2011 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 29: 1521–1527, 2011