肌钙蛋白和脑钠肽在蒽环类药物致心脏毒性中的预测价值

摘 要：［目的］ 探讨肌钙蛋白Ⅰ和脑钠肽评估蒽环类药物对心脏的早期毒性的价值。［方法］ 对2013年3月至2014年10月收治50例肿瘤患者,化疗方案以静脉滴注表阿霉素为主,表阿霉素总累积量300±75mg/m2,于化疗前及化疗结束后检测血浆肌钙蛋白Ⅰ和脑钠肽含量。［结果］ 全组患者中发生心脏毒性8例,发生心脏毒性患者化疗前肌钙蛋白Ⅰ和脑钠肽水平均无心脏毒性组升高,且具有统计学意义（P<0.05）。［结论］ 在监测表阿霉素心脏毒性上,肌钙蛋白Ⅰ和脑钠肽能较早期反映心脏损害。     

胰高糖素样肽-1受体激动剂对甲状腺乳头状癌细胞生长和增殖的影响

目的:探讨甲状腺癌细胞中胰高糖素样肽-1（Glucagon like peptide-1,GLP-1）受体的表达情况,及其对癌细胞生长和增殖的影响。方法:Western blot法检测甲状腺乳头状癌（Papillary thyroid cancer,PTC）细胞系GLP-1受体表达情况。采用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）评价两种GLP-1受体激动剂艾塞那肽和利拉鲁肽处理后细胞增殖情况。Western blot法测定细胞中蛋白激酶B（Protein kinase B,Akt）及细胞外信号调节蛋白激酶1/2（Extracellular signal-regulated kinase 1/2,Erk1/2）等细胞信号通路相关蛋白的表达。结果:PTC细胞系BCPAP、TPC-1中均可检测到GLP-1受体的表达。艾塞那肽和利拉鲁肽分别以1nmol/L、10noml/L和100nmol/L作用于细胞24h、48h和72h后,实验组细胞增殖率与对照组相比无统计学差异。不同浓度艾塞那肽和利拉鲁肽作用细胞24h后,实验组Akt和Erk蛋白表达水平及其磷酸化程度与对照组相比无统计学差异。结论:人甲状腺乳头状癌细胞中有GLP-1受体的表达。但是,GLP-1受体激动剂对甲状腺癌细胞的增殖无明显促进作用。同时,GLP-1受体激动剂对与细胞增殖密切相关的Akt和Erk通路无明显作用。     

脑钠肽早期诊断化疗相关心脏毒性的研究进展

摘 要：化疗引起的心脏毒性难以治愈,是导致肿瘤幸存者死亡的重要原因。早期诊断心脏毒性是获得治愈的关键,但是当前常规检测手段（如心脏超声）的早期诊断能力较差。脑钠肽在诊断心力衰竭方面有较好的灵敏度和特异性。本文综述近年来关于脑钠肽在早期诊断化疗相关心脏毒性方面的研究进展。     

应用噬菌体随机肽库筛选肿瘤MUC1/Y黏蛋白结合肽

目的：探索用噬菌体随机肽库筛选可用于肿瘤导向治疗的新型小分子载体。方法：以MUC1/Y黏蛋白的胞外段蛋白（MUC1/Yex）为靶分子,用凝胶亲和法和酶联板法分别筛选十二肽噬菌体随机肽库,ELISA鉴定阳性克隆,DNA序列测定后确定MUC1/Yex结合肽的氢基酸序列;免疫组化鉴定阳性噬菌体克隆及正常及肿瘤细胞的结合能力及特异 性。结果：通过4轮筛选,共获得3种MUC1/Yex的结合肽,分别为HHWHSRSQLSWF,HLKHKNYLPPTP和GNWYRHPHYLQP,其中HXXHS表位可能在与MU1/Yex的结合中起重要作用。阳性噬菌体克隆可与肿瘤细胞系MCF7,OVCA3,而不与正常外周血淋巴细胞结合。结论：筛选获得的MUC1/Yex结合肽具有一定的亲合力和肿瘤特异性,可进一步用于肿瘤导向治疗的研究。     

新型LL-37 杂合肽对乳腺癌MCF-7 细胞的抗肿瘤活性的研究

目的：探究新型LL-37 杂合肽对乳腺癌MCF-7 细胞的抗肿瘤活性及其作用机制。方法:利用抗菌肽数据库（http://aps.unmc.edu/AP/main.php）筛选出人源的抗肿瘤抗菌肽，即LL-37 和中性粒细胞防御素-1（human neutrophil peptide 1，HNP-1），经生物信息学软件分析提取有效肽片段，改造整合成新型LL-37 杂合肽；采用CCK-8 法检测0~70 μmol/L 的新型LL-37 杂合肽对MCF-7 细胞和人正常乳腺细胞MCF10A增殖的影响，激光扫描共聚焦显微镜观察分析新型LL-37 杂合肽与肿瘤细胞的亲和能力，流式细胞仪检测新型LL-37 杂合肽和caspase 抑制剂对MCF-7 细胞凋亡和周期的影响。结果:经软件分析得出新型LL-37 杂合肽为水脂两亲性的阳离子多肽，可靶向性地抑制乳腺癌MCF-7 细胞的增殖（P<0.05），其IC50值为58.34 μmol/L，而对正常乳腺MCF10A细胞无明显抑制作用；新型LL-37 杂合肽与MCF-7 细胞具有较高的亲和力，可引起细胞周期阻滞于S期及显著增加细胞早期凋亡率（P<0.01）；但在加入caspase 抑制剂后，细胞周期阻滞及凋亡情况明显缓解（P<0.01）。结论:新型LL-37 杂合肽对乳腺癌MCF-7 细胞具有抗肿瘤活性，可能通过caspase依赖的信号通路阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡。     

EBV-LMP2多肽所激活的特异性CTL对鼻咽癌细胞杀伤活性的研究

[目的]研究EB病毒编码的LMP2多肽片段所激活的肿瘤特异性CTL对鼻咽癌细胞的杀伤作用,探讨利用LMP2多肽对鼻咽癌进行免疫治疗.[方法]通过细胞免疫方法鉴定鼻咽癌细胞(CNE2)中的LMP2蛋白是否表达;外周血分离树突状细胞(DC)体外培养,以LMP2多肽片段负载DC激活产生特异性CTL;通过流式细胞仪、MTT法检测特异性CTL对CNE2细胞杀伤活性.[结果]在CNE2中表达LMP2蛋白,LMP2多肽所激活的肿瘤特异性CTL对鼻咽癌细胞具有杀伤活性.[结论]LMP2多肽片段所激活的肿瘤特异性CTL在体外对鼻咽癌细胞具有杀伤作用.     

HSPs/肽复合物疫苗免疫治疗小鼠肉瘤的初步实验观察

目的:观察热休克蛋白(heat shock pro-teins HSPs)/肽复合物对Balb/C小鼠S180移植性肉瘤模型免疫治疗的不同效果。方法:两种不同剂量的HSPs/肽复合物疫苗分别对Balb/C小鼠S180肉瘤模型进行预防性的免疫治疗实验观察。结果:混合HSPs/肽复合物蛋白组(含有HSP60、70和GP94)和纯化HSP70/肽蛋白组均可以明显降低成瘤率及抑制肿瘤生长速度、延长小鼠生存时间;部分小鼠甚至可以观察到对生长瘤体的免疫排斥过程,达到完全无瘤健康长期生存。结论:1)HSP70/肽、混合HSPs/肽在小鼠移植性S180肉瘤模型中有良好的免疫预防效果,以混合HSPs/肽效果最好。2)只经过简单纯化后的混合HSPs/肽复合物蛋白具有能提高蛋白产量、缩短纯化时间、减少对蛋白以及携带抗原多肽的破坏等优点,而且其免疫治疗效果优于纯化的HSP70/肽疫苗,可望在临床有广泛的应用前景。     

环7肽库筛选胃癌耐药细胞特异性结合短肽

目的获得与胃癌耐药细胞株SGC7901/VCR特异结合的抑制耐药短肽,作为提高胃癌化疗效果的先导化合物。方法以SGC7901/VCR细胞为靶细胞,胃粘膜永生化上皮细胞GES,胃癌药敏细胞SGC7901为吸附细胞对噬菌体7肽库进行消减筛选,用细胞ELISA鉴定阳性噬菌体克隆并测序,利用竞争抑制试验确定阳性克隆的结合部位是否为外源性肽段。结果经4轮筛选,从随机挑选的30个噬菌体克隆中得到14个能特异性与SGC7901/VCR结合而不与胃癌药敏细胞结合的阳性克隆,确定其氨基酸序列分别为SY1和SY2(筛选所得安基酸序列正在专利申请中),含SY1为阳性克隆。结论用噬菌体环7肽库成功筛选到能特异性结合胃癌耐药细胞株的短肽,为肿瘤治疗或药物靶向治疗奠定基础。     

黏蛋白1多肽对T淋巴瘤Jurkat 细胞生长的抑制及其机制

目的:探讨黏蛋白1(mucin 1,MUC1)多肽对人T淋巴瘤Jurkat 细胞生长的抑制作用及其机制。方法：将MUC1多肽与Jurkat细胞共同培养,锥虫蓝染色法观察MUC1多肽对该细胞生长的影响;流式细胞术检测Jurkat细胞生长周期及其细胞表面MUC1的表达;Annexin V/PI双标记法检测Jurkat细胞的凋亡;应用抗体封闭实验检测MUC1多肽在Jurkat细胞表面作用的位点。结果： 10、20、40 μg/ml MUC1多肽作用使Jurkat细胞生长抑制分别达（32±4）%、（37±2）%、（46±5）%,未见凋亡细胞。流式细胞术检测结果表明MUC1多肽可诱导Jurkat细胞周期阻滞在G0/G1期,在Jurkat细胞表面有MUC1蛋白的表达。采用5 μg/ml和25 μg/ml 抗MUC1抗体封闭Jurkat细胞表面MUC1表位后,MUC1多肽对细胞生长的抑制效应几乎全部消失。结论： MUC1多肽能明显抑制Jurkat细胞生长,其机制与该多肽通过和Jurkat细胞表面MUC1蛋白相互作用导致细胞周期阻滞在G0/G1期有关。     

奥曲肽逆转人胰腺癌细胞多药耐药机制的初步研究

目的:探讨生长抑素类似物奥曲肽对人胰腺癌细胞BxPC-3多药耐药现象的逆转作用及其机理,为临床应用奥曲肽提高胰腺癌化疗疗效提供实验依据.方法:应用不同浓度的奥曲肽(0-1.6 μg/ml)联合化疗药物顺铂、表阿霉素、氟尿嘧啶、吉西他滨共同处理稳定表达SSTR2的胰腺癌细胞BxPC-3-SSTR2,CCK-8比色法测定奥曲肽处理前后各化疗药物的IC50值,判断奥曲肽对胰腺癌多药耐药的逆转.Real-time PCR法检测SSTR2基因转染前后及奥曲肽处理前后的胰腺癌细胞中MDR1、MRP2、LRP基因表达.结果:奥曲肽可以显著降低顺铂、表阿霉素、氟尿嘧啶和吉西他滨的IC50值(P<0.05),并且这种作用呈剂最依赖性.胰腺癌细胞株BxPC-3在转染SSTR2基因后,细胞中MDR1、MRP2、LRP基因的表达分别下调57%、47%和56%(P<0.01);而转染后的胰腺癌细胞经过1.6 μg/ml奥曲肽作用48h后,其所表达的MDR1、MRP2、LRP基因出现进一步的下调,分别下降88%、73%和87%(P<0.01).结论:生长抑素类似物奥曲肽可逆转胰腺癌细胞的多药耐药,其机制可能与降低胰腺癌细胞中MDR1、MRP、LRP基因的表达,使胰腺癌细胞内细胞毒性药物浓度增加有关.     

RGD肽在肿瘤显像和治疗中的应用研究进展

介绍精氨酸（Arg）—甘氨酸（Gly）—天冬氨酸（Asp）肽（RGD肽）在肿瘤诊治领域应用研究新进展．内源性RGD肽存在于多种生物细胞外基质中，参与多条信号传导通路的活化，在多种生理和病理过程中发挥重要作用。外源性RGD肽与肿瘤细胞表面整合素结合后，可作为体内RGD肽类物质的竞争性抑制剂，从而能抑制肿瘤细胞与细胞外基质的黏附与迁移、抑制肿瘤血管形成、诱导肿瘤细胞凋亡。RGD肽能与肿瘤高表达的整合素受体结合，并从多个环节对肿瘤起到抑制作用，其具有靶向性进行肿瘤显像及肿瘤治疗的潜在应用价值。     

奥曲肽逆转人胰腺癌细胞多药耐药机制的初步研究

目的：探讨生长抑素类似物奥曲肽对人胰腺癌细胞BxPC-3多药耐药现象的逆转作用及其机理,为临床应用奥曲肽提高胰腺癌化疗疗效提供实验依据。方法：应用不同浓度的奥曲肽（0-1.6μg/ml）联合化疗药物顺铂、表阿霉素、氟尿嘧啶、吉西他滨共同处理稳定表达SSTR2的胰腺癌细胞BxPC-3-SSTR2,CCK-8比色法测定奥曲肽处理前后各化疗药物的IC50值,判断奥曲肽对胰腺癌多药耐药的逆转。Real-timePCR法检测SSTR2基因转染前后及奥曲肽处理前后的胰腺癌细胞中MDR1、MRP2、LRP基因表达。结果：奥曲肽可以显著降低顺铂、表阿霉素、氟尿嘧啶和吉西他滨的IC50值（P〈0.05）,并且这种作用呈剂量依赖性。胰腺癌细胞株BxPC-3在转染SSTR2基因后,细胞中MDR1、MRP2、LRP基因的表达分别下调57%、47%和56%（P〈0.01）;而转染后的胰腺癌细胞经过1.6μg/ml奥曲肽作用48h后,其所表达的MDR1、MRP2、LRP基因出现进一步的下调,分别下降88%、73%和87%（P〈0.01）。结论：生长抑素类似物奥曲肽可逆转胰腺癌细胞的多药耐药,其机制可能与降低胰腺癌细胞中MDR1、MRP、LRP基因的表达,使胰腺癌细胞内细胞毒性药物浓度增加有关。     

奥曲肽抑制人肝癌细胞生长机制的探讨

生长抑素对肿瘤细胞的抑制作用受到人们越来越多的观注。奥曲肽 (Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ ,ＳＭＳ 2 0 1 995 )是体外合成的一种生长抑素 8肽。同天然的生长抑素 14肽相比 ,Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ具有作用更强、血浆半衰期长、作用时间更持久、使用方便等优点。近来的研究显示 ,Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ能抑制原发性肝癌的生长 ,且效果良好[1] ,但作用机理尚未明了[2 ] 。为此 ,我们观察在体外Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ能否诱导人肝癌细胞凋亡 ,从诱导肿瘤细胞凋亡的角度探讨其抑癌机理。一、材料与方法1 主要试剂与药物 :ＤＭＥＭ培养液 (美国Ｇｉｂ…     

法氏囊活性肽-Ⅱ对肿瘤细胞增殖的抑制作用及其可能机制

目的： 研究法氏囊活性肽（Bursal-derived pentapeptide,BPP）-Ⅱ对肿瘤细胞增殖的抑制作用及其可能的作用机制。 方法： 采用不同质量浓度(0.02、0.2、2、20 μg/ml)的BPP-Ⅱ分别处理小鼠B细胞淋巴瘤细胞WEHI-231、人鼻咽癌细胞CNE、大鼠肝癌细胞RH-35和正常细胞系人胚肾细胞293、猪肾细胞PK15、中国仓鼠卵巢细胞CHO,48 h后采用MTT法检测细胞增殖情况;以双荧光素酶报告系统和Western blotting方法检测BPP-Ⅱ对荧光素酶标记的p53-Luc质粒转染的Vero细胞中 p53 转录活性和P53蛋白表达的影响;利用噬菌体随机12肽库筛选BPP-Ⅱ特异性结合肽,人工合成BPP-Ⅱ结合肽,采用MTT法检测BPP-Ⅱ结合肽对BPP-Ⅱ抗WEHI-231细胞增殖能力的影响。 结果： 2和20 μg/ml 的BPP-Ⅱ对肿瘤细胞WEHI-231 、CNE、RH-35的增殖均有抑制作用（均P<0.05）,而对正常细胞系293、PK15、CHO的增殖均不表现出抑制作用。BPP-Ⅱ明显激活 p53 基因的转录,并上调P53蛋白的表达。应用噬菌体展示技术筛选获得3个BPP-Ⅱ结合肽P3-12、P5-12、P6-12,其中2和20 μg/ml的P3-12能显著抑制BPP-Ⅱ的抗WEHI-231细胞增殖能力\[（97.5±3.4）%、（98.9±3.5）% vs （86.3±1.9）%, P<0.05 \];20 μg/ml 的P5-12和P6-12均能显著抑制BPP-Ⅱ的抗WEHI-231细胞增殖能力\[（96.7±3.1）%、（95.4±3.8）% vs （86.3±1.9）%,P<0.05\]。 结论： BPP-Ⅱ可特异性抑制WEHI-231、CNE、RH-35等肿瘤细胞增殖,其机制可能与激动 p53 信号通路有关。     

奥曲肽联合化疗治疗中晚期肝癌疗效观察

目的：观察奥曲肽注射液联合化疗治疗中晚期肝癌的疗效.方法：54例中晚期原发性肝癌患者分为两组各27例,对照组用改良FOLFOX化疗方案[奥沙利铂（L-OHP） 85mg/m2静脉滴注d1、8;亚叶酸钙（CF）200mg静脉滴注d1-5;5-氟尿嘧啶（5-FU） 400mg/m2静脉滴注d1-5],每3周重复;观察组在改良FOLFOX方案的同时加用奥曲肽注射液,奥曲肽注射液0.2mg加5%葡萄糖注射液100-250ml静脉点滴,每日2次,3周为1个周期,每例至少化疗2个周期后评价疗效及毒副反应.根据WHO实体瘤客观疗效评定标准评价疗效,根据KPS评分评价生活质量,采用外周血白细胞和血小板计数评价骨髓毒性.结果：观察组缓解率高于对照组,恶化率低于对照组（P＜0.05）,总生存期（OS）无显著差异（P＞0.05）,而在缓解率（ORR）和无病生存期（DFS）方面表现出明显的优势（P＜0.05）,生活质量提高稳定率高于对照组（P＜0.05）;对照组外周血白细胞和血小板明显降低（P＜0.05）.结论：奥曲肽注射液联合改良FOLFOX方案化疗治疗中晚期肝癌具有改善临床症状、提高生活质量、减少毒副反应等作用,可提高肝癌患者的总病情缓解率和无病生存期.     

塞来昔布联合奥曲肽对人胃癌多药耐药细胞生长的影响

背景与目的:环氧合酶-2(cyclooxygenase,COX-2)抑制剂塞来昔布及奥曲肽(octreotide)均对肿瘤细胞有抑制作用,本研究旨在探讨塞来昔布及其与奥曲肽联合对人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/ADR生长的影响。方法:塞来昔布组:塞来昔布浓度为1×10-4～1×10-8mol/L;奥曲肽组:奥曲肽浓度为1×10-5～1×10-9mol/L;合用组:塞来昔布在上述浓度范围内加1×10-6mol/L的奥曲肽;对照组:无血清RPMI-1640培养液。比较各实验组对SGC7901、SGC7901/ADR细胞生长的影响。采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测细胞的增殖;免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达;DNA末端原位标记染色法(TUNEL法)及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:塞来昔布较对照组明显降低SGC7901/ADR细胞的3H-TdR掺入,掺入值分别为(471.3±79.7)cpm及(917.5±130.8)cpm,塞来昔布与奥曲肽联合应用时,3H-TdR掺入值较单独用药(220.0±19.7)cpm下降53.3%。两药联合对SGC7901/ADR细胞DNA合成的抑制效应与塞郑文斌,等.塞来昔布联合奥曲肽来昔布的浓度呈显著正相关(r=0.996,P<0.001)。单用塞来昔布或联合用药都能明显降低SGC7901/ADR细胞PCNA的表达。单用塞来昔布时SGC7901/ADR细胞凋亡率为32.9%,当其与奥曲肽合用,凋亡率增加至5     

三叶肽与肿瘤

三叶肽 (ｔｒｅｆｏｉｌｐｅｐｔｉｄｅｓ)是新近发现的一组小分子蛋白 ,它们与肿瘤相关 ,可能影响上皮肿瘤的生物学 ,能作为有些肿瘤的标记物或预后指标 ,因此 ,三叶肽在肿瘤临床上有重要意义。一、概述　三叶肽是一族富含半膀氨酸的小分子肽 ,以部位特异性方式在一定的上皮组织表达。 1989年Ｔｈｉｍ发现它们带有三对二硫键 ,呈“三叶草”襻状结构图案特征 ,故命名为三叶肽。迄今发现哺乳动物有三种三叶肽。 1982年Ｍａｓｉ ａｋｏｗｓｋｉ等当从人ＭＣＦ 7乳腺癌细胞系寻找雌激素诱导的信使ＲＮＡｓ时发现ｐＳ2 (ＴＦＦ1)。同年 ,Ｊ ｒ…     

肾癌T7噬菌体展示肽库构建的实验研究

目的:构建肾细胞癌T7噬菌体展示肽库,为下一步筛选肾癌早期诊断分子标志群打下基础.方法:用传统Trizol方法分别抽取31例涵盖各种组织类型肾癌组织标本的总RNA,确定完整性后再根据OD值等量混合总RNA,用试剂盒完成mRNA的分离并电泳检测其质量,经反转录、末端平齐、片段长短筛选、加接头、双酶切、去除多余接头和<300 bp的cDNA片段等步骤,再与T7Select10-3b载体连接、体外包装并扩增得到肾癌T7噬菌体展示cDNA文库.通过铺平板测定和PCR技术鉴定所建文库质量.结果:建成原始文库的库容量为5.0×107 pfu/mL,扩增后文库滴度为3.5×1012 pfu/mL,重组率为95%,插入片段为300～2 000 bp.结论:成功用T7噬菌体构建了高质量的肾癌cDNA文库,为筛选可用于临床早期诊断的肾癌特异标志奠定基础.     

肿瘤抗原肽及CTL杀伤机理的研究进展

目前,对肿瘤抗原及其特异性T细胞介导的抗肿瘤免疫机理的研究,已成为抗肿瘤免疫治疗的一个热点［1］。本文对此领域的研究进展作简要综述如下：1肿瘤抗原肽肿瘤的抗原性是细胞毒T淋巴细胞（CTL）介导特异性抗肿瘤免疫治疗的关键。现已发现肿瘤细胞表面抗原分子是由MHC分子提呈的,这种肿瘤源性的多肽是通过分析MHCI类分子抗原结合沟槽的结构,以及与之相结合的抗原肽的序列所发现的。研究表明,与MHCI类分子结合的抗原肽来源于细胞内抗原,这些蛋白抗原被酶解成短肽后即转运至粗面内质网,在此与MHCI类分子结合的抗原肽片段一般为…     

奥曲肽抑制胃癌细胞系SGC-7901生长的实验研究

目的　研究奥曲肽对胃癌细胞系SGC -790 1生长的抑制作用。方法　将奥曲肽注入胃癌细胞 ,采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT )法测定细胞生长抑制效应 ,将3 H -胸腺嘧啶核苷 (3 H -TdR )掺入试验测定奥曲肽对胃癌细胞DNA合成的影响 ,显微镜下观察胃癌细胞形态变化 ,应用流式细胞仪 (FCM )检测细胞周期 ,并采用TRAPPCR -ELISA法对胃癌细胞端粒酶活性进行检测。结果　奥曲肽对胃癌细胞系SGC -790 1的生长及DNA合成均有抑制作用 ,显微镜下可见细胞变圆、变小、脱落 ,FCM检测结果显示奥曲肽作用后 ,G0 /G1期细胞比例增高 ,S期、G2 /M期细胞比例下降 ,端粒酶活性显著受抑制。结论　奥曲肽能明显抑制胃癌细胞系SGC -790 1的生长 ,形成G0 /G1期阻滞 ,并抑制端粒酶活性