水样中病毒浓缩和回收

近年来,由于水污染的加剧,病毒污染引起的水源性疾病正在增多,已经引起人民的广泛关注。即使很少量的病毒颗粒亦可致病。目前各种水样微生物学质量控制主要是通过常规监测粪大肠菌群和大肠埃希菌这样的细菌指示物来实现的,然而大多数观点表明环境水样中细菌和病毒污染水平并不相关,因而建立饮用水中病毒学监测指标十分必要。由于水样中只有少量病毒颗粒存在,进行水样检测前必须浓缩水样中的病毒。水中病毒的检测除了要有准确、灵敏的检测方法外,水中病毒的浓缩与回收的效率亦是决定病毒检测成败的关键。目前水样中病毒浓缩的方法很多,本文对常用的浓缩回收方法作一综述,并对各个浓缩回收方法的优缺点作一评价。     

二级处理出水中伤寒沙门菌的定量PCR检测

目的 建立城市污水二级处理出水中伤寒沙门菌的定量PCR检测方法.方法 以构建的伤寒沙门菌重组质粒作为标准品,采用whatman2号(孔径为8μm)定性滤纸对水样预过滤,硝酸纤维素膜浓缩水样,选用伤寒沙门菌特异性引物ST3和ST4进行实时荧光定量PCR(quantitative PCR,QPCR)检测.结果 在2.8x1...     

水体中病毒的三种浓缩方法及其效果比较

目的 比较水体中病毒的三种浓缩方法,评价各方法的浓缩效果,为水体中病毒浓缩方法的选择提供依据.方法 将不同浓度的指示病毒(脊髓灰质炎病毒1型PV1)加入经高压灭菌处理后的污水处理厂二级出水中,采用钙离子法、牛肉汤洗膜法和载阳电荷滤料法对水样分别进行浓缩,采用逆转录-PCR技术检测灵敏度,观察指示病毒的某一特征基因片段P...     

果蔬生产用水中甲肝病毒检测方法和质控体系的研究

目的建立果蔬生产用水中甲型肝炎病毒(HAV)的检测方法和质量控制标准体系。方法在水样中添加2.5×10~9pfu/m L的质控物质大肠杆菌噬菌体MS2100μL,采用正电荷滤膜法捕获病毒,并根据大肠杆菌噬菌体MS2的标准曲线计算出病毒回收效率,实时荧光RT-PCR检测水样中甲肝病毒,并建立质量控制标准体系。结果对6个水质样品同时加入HAV和大肠杆菌噬菌体MS2并进行病毒回收率的比较,HAV回收率为1.24%~32.68%,MS2回收率为1.64%~14.24%,达到了ISO/TS 15216-2-2013对病毒回收率>1%的要求。同时对30个实际水质样品进行HAV检测,1个样品检出HAV,质控物质大肠杆菌噬菌体MS2提取回收率为1.24%~24.19%,标准偏差为0.0612。结论所建立的水样中病毒检测质量控制体系保证了检测结果质量。     

固相萃取-气质联用法测定水中三氯杀螨醇及百菌清

目的:建立了水中多种拟除虫菊酯类农药残留的固相萃取-气相色谱-质谱(GC/MS)联用检测方法。方法:采用C18固相萃取碟富集吸附水样中目标组分,以二氯甲烷洗脱浓缩; DB-5MS毛细管柱分离,采用选择离子监测SIM的质谱扫描模式进行定性定量分析。结果:在50~400μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数均>0 .995,三氯杀螨醇、百菌清加标平均回收率为90 .0% ~101 .1%,方法的相对标准偏差为4. 2% ~8. 3%,水样浓缩2 .500倍的最低检测限分别为0 .0012、0. 0024μg/L。结论:本法具有非常高的选择性、灵敏度和准确度,完全能满足水中痕量三氯杀螨醇及百菌清的分析。     

P公司生活饮用水的致突变性研究

饮用水中有机污染物对人群健康潜在的致突变/致癌效应,早已引起人们的关注。我们在1983年研究的基础上,又对该公司枯水期水样进行了更深入的研究。 材料和方法 水源水样采自自来水厂进水口,未经任何处理,饮用水样取自P劳研所管网水。水样用AmbeliteXAD-2-乙醚法浓缩萃     

应用细胞培养方法和核酸杂交试验从启东来源毛蚶中检出甲型肝炎病毒

应用细胞培养方法和核酸杂交试验从1988年1月份上海市各区搜集及同年3月份启东产地采集的毛蚶混合浓缩标本中均分离到甲肝病毒(HAV)和检测到 HAV RNA,表明启东产地的毛蚶确污染有 HAV。根据研究中核酸杂交试验的敏感性估算每只毛蚶约污染有2～8 TCID_(50)的 HAV。进一步证实了1988年春季上海地区的甲肝大流行与摄食不洁毛蚶有关。     

某部自备井水中甲型肝炎病毒消毒方法现场实验报告

为验证实验室用氯灭活甲型肝炎病毒(HAV)的试验结果,取某部自备井水,加入HAV,用氯和个人饮水消毒丸进行消毒试验.投加氟3mg/L,接触30min,能有效地灭活水中HAV;用个人饮水消毒丸(含氯12～16mg/丸)进行消毒,每壶水加1丸,接触时间5min,也能把HAV灭活.结果表明,在甲型肝炎发生流行时,用上述方法来灭活水中HAV,控制HAV经水传播,是一种简单、快速、安全的方法.     

蒸发浓缩-火焰原子吸收光谱法测定水中铁、锰、铜、锌、铅、镉

目的:利用蒸发浓缩同时测定水中多种重金属,以提高分析速度,节省试剂。方法:采用蒸发浓缩-火焰原子吸收光谱法测定水中铁、锰、铜、锌、铅、镉。结果:可有效扩大直接吸入-火焰原子吸收光谱法的测量范围,能充分满足低浓度地表水、地下水以及其它水样的检测。     

滤膜法浓缩水中病毒效果的实验研究

本文报道了滤膜吸附洗脱法浓缩水中病毒的效果。用Millipore硝酸纤维素膜吸附,洗脱液采用3％牛肉膏液,回收率为70±％。此法操作简单,可以连续过滤大量水样,是浓缩水中特别是饮水中病毒的有效方法。     

水中诺如病毒浓缩与应急检测研究

目的探索适合于基层实验室开展的水中诺如病毒浓缩与应急检测的方法,评估钙离子法对水体中诺如病毒的富集效果及检测灵敏度,为水源性诺如病毒突发疫情的病原检测提供可靠的检测数据。方法将不同浓度的指示病毒(GⅡ型诺如病毒)加入到不同水样中,用钙离子法进行富集,用荧光定量PCR检测,根据富集前后的病毒浓度,评估方法的回收率;根据不同梯度的检测值,评估方法的灵敏度。同时制备不同的模拟水样进行荧光定量PCR检测。结果钙离子法的平均回收率为81.6%,检测灵敏度为模拟样本中病毒浓度为10 copy/μl。而10份不同模拟水样荧光定量PCR检测阳性9份。结论钙离子法浓缩水样中的诺如病毒,回收率与灵敏度均较高,操作简单;同时,荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏的优点,适用于基层实验室开展水体中诺如病毒的应急检测。     

微量波动试验在水样检测中的应用

近年来,随着人们对饮水致突变和致癌性的重视,水样的致突变性检测工作得到了迅速发展。由于水中污染物的多样性和复杂性,水样的总致突变活性目前还不能用分离鉴定化合物的方法进行估计,而更多地采用短期生物试验。由于水样中污染物的浓度一般较低,因此在致突变性鉴定时,要求选用有     

水中粪链球菌显色培养基-滤膜法快速检测初步研究

目的:建立一种水中粪链球菌的快速检测方法.方法:在筛选粪链球菌特异性酶和显色底物的基础上设计了一种显色培养基HKCE,同时结合微孔滤膜和高压真空过滤装置,研制了一种便携式快速检测系统,用于城市供水、水源水和饮用水中粪链球菌的快速检测.参考ISO7899-2-2000和sN-T-2007水质检测标准,通过模拟水样和实际水样检测,分析其检测效果.结果:显色培养基HKCE灵敏度和传统的KF链球菌培养基相当,且具有较高特异性,所建立的便携式快速检测系统具有较高的检测效率,可在24~48h内完成水中粪链球菌的检测,特别适用于大批量水样的快速检测.     

水和废水中沙门菌检测扩项评审模拟试验

目的为了《水和废水监测分析方法》中水的细菌学测定—沙门菌扩项评审,对新方法检测进行确认〔1〕。方法依据《水和废水监测分析方法》水中细菌学水中沙门菌相关规定进行模拟试验。采集水样→水样浓缩→前增菌→增菌→分离平板→生化试验→血清凝集→结果报告。结果检出婴儿沙门菌(Salmonella infantis)〔6,7:r:1,5〕。结论通过方法验证确认本公司微生物实验室已具备开展《水和废水监测分析方法》水中细菌学测定的能力,并揭示地表水受到严重污染。     

两种方法浓缩污水水样及HBV-DNA基因探针检测

采用滑石粉-硅藻土浓缩法和Al_2(SO_4)_3·18H_2O浓缩法,浓缩某医院经处理的污水水样,并用基因探针检测该污水水样中的乙型肝炎病毒。将污水水样浓缩液点在硝酸纤维素膜上,再用HBV-DNA基因探针进行杂交。经放射自显影,结果表明,用Al_2(S0_4)_3·18H_2O浓缩法浓缩的经处理污水水样中发现有乙型肝炎病毒存在,其阳性率为50％;而用滑石粉-硅藻土浓缩法浓缩的经处理污水水样中未发现有乙型肝炎病毒。     

水病毒检测方法的研究及黄浦江源水病毒检测

以Ａｌｃｌ３－滤膜洗脱法、Ａｌ２（ＳＯ４）３－滤膜洗脱法及Ａｌｃｌ３沉淀法浓缩实验性污染水样中的病毒，并以单层细胞病变法检测病毒，３法的病毒平均回收率分别为３６．４３％、５０．５３％和２１．８２％，并以第二法和第三法检测黄浦江水中的病毒，４０价水样有８份检测出ＣｏｘＢ５病毒、ＥＣＨＯ４和ＥＣＨＯ１２病毒共９株，文中叙述了所用方法的优点。     

水中大肠菌群检测方法的等效性判定

目的 比较大肠菌群酶底物滤膜法与传统膜过滤法、固定底物技术法用于水中大肠菌群检测时是否具有等效性.方法 采集60份水源水水样,用三种方法 同时进行检测,检测结果 用ISO 17994-2004<水质-微生物方法 之间的等效性建立标准>比较酶底物滤膜法与国标法用于水中大肠菌群检测结果 的一致性.结果 当水样数为100份时...     

重庆市江水中有机污染物细胞毒性分析

目的了解重庆市主城区嘉陵江和长江水中有机物污染状况,评价水中有机污染物对人群健康的影响。方法固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜（DMSO）中,对H4IIE细胞进行染毒,用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）检测水中有机污染物对H4IIE细胞增殖的抑制作用,并用荧光比色法检测水中有机污染物对H4IIE细胞7-乙氧基-3-异吩嗯唑酮.脱乙基酶（EROD）的诱导作用。结果各水样处理H4IIE细胞后,H4IIE细胞的增殖随染毒时间和剂量的增加而呈下降趋势。48和72h处理组200和250倍浓缩的水样对细胞增殖有显著抑制作用（P〈0.05,与溶剂对照组比较）;2,3,7,8-四氯二苯并-对-二恶英（TCDD）对EROD诱导的半数有效剂量（EC50）值为4.4pg/ml,各水样相对于2,3,7,8-TCDD的毒性当量值分别为（2004.08）大溪沟：2.2×10^-4pg/L;（2004.08）寸滩：0.9×10^-4pg/L;（2005.01）大溪沟：13.3×10^-4pg/L;（2005.01）寸滩：3.7×10^-4pg/L。结论污染物对H4IIE细胞的毒性呈现出时间和剂量依赖性;各水样均可诱导H4IIE细胞EROD活性;同一采样点中,枯水期水样毒性大于丰水期水样。     

自动固相萃取-气相色谱-串联质谱法测定饮用水中18种多环芳烃

目的 建立饮用水中18种多环芳烃的固相萃取-GC-MS/MS检测方法。方法 建立自动固相萃取水样条件,对水样进行固相萃取,优化仪器的进样条件,并采用程序升温大体积不分流进样,气相色谱-串联质谱法分离检测。结果 使用大体积不分流进样技术,多环芳烃检测灵敏度比传统不分流进样提高了近10倍;使用自动固相萃取技术,500倍的水样浓缩进一步提高了检测灵敏度,同时缩短了前处理时间,提高了工作效率,避免低沸点多环芳烃组分的损失。18种多环芳烃在0. 1μg/L～25. 0μg/L线性相关系数都在0. 999以上,精密度5. 0%(n=8),低浓度(5 ng/L)、中浓度(25 ng/L)、高浓度(50 ng/L)的回收率分别为64. 8%～113. 1%、83. 2%～114. 2%和89. 2%～117. 3%。各组分检出限在0. 010 ng/L～0. 072 ng/L。结论 本方法是一种非常灵敏、高效的检测方法,能够满足饮用水中多环芳烃快速检测要求。     

水中酚及卤代酚的测定

本提出用高效液相色谱法测定水中酚及氯酚。水样经萃取，浓缩处理后，以甲醇４０％，乙腈８％，四的夫喃４％为流动相，ＳｈｉｍｐａｃｋＣ３柱为固定相，进行分析，结果表明线性良好，重现性，准确度均符合要求。方法较简便、快速，可做为测定水中酚及氯酚的标准检测方法。