双价肾综合征出血热纯化疫苗人群接种安全性与免疫学效果评价

1996年对浙江天元生物药业股份有限公司 (天元公司 )研制的肾综合征出血热 (ＨＦＲＳ)双价灭活疫苗进行观察 ,安全性及免疫学效果均较好 ,但Ｉ型中和抗体阳转率稍低[1 ] 。2 0 0 1年 8～ 9月 ,在江苏省金坛市进行了天元公司生产的ＨＦＲＳ双价纯化疫苗临床研究 ,观察人群接种反应与免疫效果 ,并为其确定基础免疫程序及向人群大规模推广应用提供科学依据。一、材料与方法1.疫苗 :双价ＨＦＲＳ纯化疫苗由天元公司生产 ,以沙鼠肾细胞为培养基质 ,所用毒株为Ｚ1 0 (Ⅰ型 )和Ｚ37(Ⅱ型 ) ,经浓缩、灭活、纯化制成。观察疫苗批号为 2 0 0 0 0 5 0 …     

β-丙内酯在Vero细胞HFRS疫苗中的应用

目的 探讨β-丙内酯灭活双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗的最佳条件。方法 采用不同终浓度的β-丙内酯和不同的灭活时间对疫苗进行灭活，用细胞培养法进行病毒增殖试验，以确定灭活效果。应用高效液相色谱法分析β-丙内酯的最佳水解条件和3批双价Vero细胞出血热纯化灭活疫苗β-丙内酯残留虽。检测3批双价纯比灭活疫苗的免疫效果。结果 疫苗经终浓度为1：2000和1：4000的β-丙内酯作用24h，均可完全灭活病毒；疫苗中的β-丙内酯在37℃水浴下，随着水解时间的延长，其含量逐渐下降，水解2h后已无β-丙内酯检出；3批经β-丙内酯灭活的双价Vero细胞出血热纯化疫苗均未检出β-丙内酯残留，在家兔体内诱导产生针对汉滩型和汉城型病毒的中和抗体效价均达到1：20。结论 肾综合征出血热纯化疫苗经终浓度为1：4000β-丙内酪4℃灭活24h，然后再于37℃水浴中水解2h，既可达到完全灭活病毒且无β-丙内酯残留的目的；采用此方法灭活的双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗保持良好的免疫原性。     

肾综合征出血热双价纯化疫苗中残余DNA的去除

为了避免外源DNA与人染色体整合 ,保证生物制品的安全性 ,WHO及欧共体等均制定标准以控制生物制品外源DNA的含量。据 2 0 0 0版《中国生物制品规程》 ,标准为外源DNA含量不大于 1 0ng 剂量。用Vero细胞为基质制备肾综合征出血热 (HFRS)双价纯化疫苗 ,是国家“九五”科技攻关课题。在完成了HFRS病毒株在Vero细胞上适应性的筛选及提高毒力滴度等一系列试验后 ,控制疫苗原液中残余DNA含量成为保证疫苗安全性的重要方面。在小量试验基础上 ,采用硫酸鱼精蛋白沉淀残余DNA获得有效结果。现报告如下。1 .材料与方法 :①Vero细胞CBCC …     

双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫反应的动态观察

为动态观察沙鼠肾原代细胞双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫动物后的免疫反应 ,采用人用剂量的 1/ 2 0肌内注射免疫小鼠 ,局部麻醉下采集尾血 ,分离血清 ,用间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定血清抗体水平 ;处死动物时分离腹股沟淋巴结和脾脏淋巴细胞进行分类计数。结果显示 :双价肾综合征出血热疫苗在初次免疫后第 2针血清抗体有较大提高 ,并维持在高水平。流式细胞分类计数 ,疫苗注射组腹股沟淋巴结CD+ 4 细胞的免疫荧光强度显著高于对照组 (P<0 0 5 ) ,但脾脏的B细胞荧光强度却显著低于对照组 (P<0 0 5 ) ,提示接种该疫苗后细胞免疫亢进。表明沙鼠肾原代细胞双价肾综合征出血热灭活疫苗随接种时间的推移 ,产生良好的免疫反应。这种反应在免疫 2针后能够维持较高水平。该疫苗的免疫机理可能是通过局部淋巴结对抗原呈递来实现的。同时提示 ,疫苗可能造成细胞免疫功能亢进     

人群接种双价肾综合征出血热纯化疫苗后的安全性和血清学临床研究

目的评价双价肾综合征出血热(HFRS)纯化疫苗(Vero细胞)在人群中接种的安全性和免疫性,为确定2针基础免疫程序及进行市场推广的可行性论证提供依据。方法对每位接种者进行临床观察和血清学检测,用间接免疫荧光法(IFAT)检测特异性IgG抗体,用空斑减少中和试验(PRNT)检测中和抗体。结果全身及局部总反应率分别为3.66%和1.83%,均为轻度反应,且基本于接种后3d内消退。2针基础免疫前后双份血清81份,用IFAT和PRNT检测免前抗体均为阴性,免后抗体阳转率分别为95.06%、Ⅰ型90.12%、Ⅱ型91.35%。结论该疫苗的安全性和免疫原性均较好。     

肾综合征出血热疫苗后备筛选毒株在Vero细胞上的适应传代及其抗原性研究

〔目的〕将肾综合征出血热疫苗后备毒株适应于Vero细胞 ,观察病变情况 ,并对其抗原性和繁殖特性进行研究。〔方法〕将新分离的汉坦病毒ZJ2、ZJ4、ZJ7株和汉城病毒ZJ5株在Vero细胞上进行连续传代 ,采用间接免疫荧光法(IFA)、反向被动血凝试验 (RPHA) ,研究传代后毒株的病毒滴度、抗原量以及细胞的病变情况 ,同时将传代后的病毒接种敏感动物 ,观察动物的发病情况和毒株的繁殖特性。〔结果〕经过 5次连续传代 ,四株病毒在Vero细胞上均显示出良好的适应性 ,从第二代开始病毒滴度稳定在 6.0 0LgTCID5 0 ml以上 ,第五代时最高达 7.5 0LgTCID5 0 ml ,第三代毒株抗原量均已达到 1:12 8,ZJ7株抗原量最高时达 1:768,四株毒株感染Vero细胞 ,连续观察 12d不见细胞产生病变 ,第五代细胞病毒液接种敏感动物 ,9d后动物发病甚至死亡。〔结论〕四株病毒已适应于Vero细胞 ,且具有病毒滴度高、毒力强和抗原性良好的特性 ,是Vero细胞肾综合征出血热灭活疫苗良好的后备筛选毒株。     

肾综合征出血热双价纯化疫苗的稳定性试验

将检定合格的连续三批肾综合征出血热双价纯化疫苗(Vero细胞) 2～8℃放置3、6、1 2、1 8、2 4、30月和37℃放置7、1 4、2 1、2 8天,对其稳定性进行系统试验。从疫苗的外观、pH值变化及疫苗免疫家兔后的中和抗体水平检验疫苗的稳定性。结果表明三批疫苗具有良好的稳定性。     

进口和国产Vero细胞狂犬病疫苗安全性分析

近年我国已推广应用国产经Vero传代细胞培养制成的纯化狂犬病疫苗。我们于 2 0 0 2年 2～ 12月按《国际临床试验规范》(GCP)方法对进口和国产Vero细胞狂犬病疫苗的安全性进行了临床试验观察。1.材料与方法 :实验组为维尔博 (Veroab)精制纯化Vero细胞狂犬病冻干疫苗 ,由安万特 巴斯德公司生产 ,0 .5ml× 5针 ,批号 :U 0 940 2 ;对照组为人用狂犬病纯化疫苗 (Vero细胞 )由中国长春长生实业股份有限公司生产 ,为液体疫苗 ,1.0ml× 5针 ,批号 :0 2 0 80 9 9。试验目的旨在评价暴露后伤者使用进口精制纯化Vero细胞狂犬病疫苗 (维尔博 )和国…     

双价肾综合征出血热沙鼠肾细胞灭活疫苗基础免疫两针后的预防效果

目前经国家批准生产的肾综合征出血热 (ＨＦＲＳ)灭活疫苗的单价疫苗 (Ⅰ型、Ⅱ型 )对同型病人保护性较好 ,对异型病人也有一定程度保护 ,而双价疫苗则对Ⅰ型和Ⅱ型病人皆产生保护。现行的 3针 (0、7、2 8ｄ)第 2年再加强 1针的免疫程序 ,由于注射针次较多 ,费时长 ,给较大人群的推广使用带来一定困难 ,并影响全程接种的完成 ,为减少或优化免疫针次 ,在试区进行了双价疫苗基础免疫接种 2针 ,6个月后加强针的免疫效果和防病效果考核 ,结果报告如下。1.材料和方法 :(1)疫苗 :双价ＨＦＲＳ沙鼠肾细胞灭活疫苗 ,Ｚ10 (Ⅰ型 ,即汉滩型 )、Ｚ3 7(…     

肾综合征出血热灭活疫苗大鼠效力试验模型

目前肾综合征出血热灭活疫苗效力试验采用家兔作为免疫动物 ,对疫苗免疫能产生较好的中和抗体和免疫荧光法(ＩＦＡ)抗体应答 ,但购买和饲养家兔成本较高。实验用大鼠为汉坦病毒的敏感动物 ,我们已经报道汉滩病毒 (ＨＴＮＶ)型(Ⅰ型 )肾综合征出血热灭活疫苗免疫大鼠 ,观察表明大鼠对Ⅰ型疫苗的反应性良好 ,同型中和抗体应答类似于家兔 ,异型中和抗体和ＩＦＡ抗体应答较家兔为好。我们继续研究汉城病毒 (ＳＥＯＶ)型 (Ⅱ型 )和双价肾综合征出血热灭活疫苗在大鼠的免疫反应 ,并观察了疫苗的稳定性。一、材料和方法1.动物 :大鼠 :ＳＤ品种 ,刚…     

快速试验中肾综合征出血热灭活疫苗效力的稳定性

按《肾综合征出血热灭活疫苗生产和检定暂行规定》(简称规定 ) ,生产肾综合征出血热灭活疫苗的效力检定仅检测生产时其半成品的家兔中和抗体滴度 ,试验疫苗还需观察疫苗 4℃放置 1 8个月以后的效力。目前 ,参照世界卫生组织生物制品规程 ,国内也要求检测每批疫苗 37℃放置 1周后的效力 ,作为疫苗的稳定性快速试验 ,以规范疫苗的质量控制。我们对杭州天元生物药业公司生产的Ⅰ型、Ⅱ型和双价疫苗进行了稳定性快速试验 ,现报道如下。一、材料与方法1 家兔 :新西兰品种 ,2 0 0 0～ 2 50 0ｇ,购于浙江省实验动物中心。2 疫苗和免疫规程 :Ⅰ型…     

两种狂犬病疫苗接种后副反应观察及免疫效果比较

从 2 0 0 0年 1月份起 ,靖江市对犬咬伤病人一律使用人用精制狂犬疫苗 ( Vero细胞 ) (以下简称精制苗 ) ,替代使用已久的人用浓缩狂犬病疫苗 (以下简称浓缩苗 )。作者对接种浓缩苗和精制苗后副反应发生情况及免疫效果进行了观察 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1.1　观察对象　为 1999年门诊接种浓缩苗与 2 0 0 0年接种精制苗的犬咬伤病例。1.2　疫苗来源与使用方法　浓缩苗为上海生物制品研究所生产的地鼠肾原代细胞苗。精制苗为长春长生实业股份有限公司生产的 Vero细胞纯化苗。两者均采用暴露后 5针次免疫程序( 0、3、7、14、3 0天 ) …     

汉坦病毒Vero细胞灭活疫苗候选毒种筛选

目的将肾综合征出血热疫苗后备筛选毒株适应于Vero细胞，并对其抗原性和免疫原性进行研究。方法将新分离的4株汉坦病毒接种敏感动物，在乳沙鼠脑内连续传代。比较脑内病毒抗原的含量以及乳鼠的发病情况；在Vero细胞中传代，比较培养液中的病毒滴度和抗原滴度以及细胞的病变情况；利用筛选出的毒株研制Veto细胞灭活疫苗。研究疫苗的免疫原性。结果4株病毒经乳沙鼠脑内传代，鼠脑悬液的病毒滴度和抗原滴度分别达7．00～7．75LgCCID50／ml和1：3201：1280；4株毒株经Vero细胞连续传5代，培养液病毒滴度和抗原滴度分别达6．50～7．50LgCID50／ml和1：160～1：768；疫苗免疫家兔2针后，其中出血热病毒株Z34与ZJ5株疫苗免疫血清对同型毒株的中和效价达到1：10。结论ZJ4与ZJ5两毒株已适应于Vero细胞，且具有病毒滴度高和免疫原性良好的特性，适合用作Vero细胞肾综合征出血热疫苗理想的候选毒株。     

冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎灭活疫苗在流行区的人体反应及免疫效果

为了进一步观察冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎 (乙脑 )灭活疫苗 (Vero细胞乙脑疫苗 )的接种反应及免疫效果 ,在乙脑流行区江苏省苏州市吴中区选择 6～ 18月龄未接种过乙脑疫苗的健康婴幼儿为观察对象 ,分别接种Vero细胞乙脑疫苗、原代地鼠肾细胞 (PHK)乙脑灭活疫苗和乙脑减毒活疫苗。结果显示 :接种Vero细胞乙脑疫苗第 1剂后体温中、强反应率为 12 4 % ,未见局部及其它不良反应 ;接种第 2剂后无发热反应。用Vero细胞乙脑疫苗免疫 2针后 1个月 ,血清中和抗体阳转率和几何平均滴度 (GMT)分别为 10 0 0 %和 1∶2 7 7,显著高于PHK乙脑灭活疫苗和乙脑减毒活疫苗的免疫后血清学效果。用Vero细胞乙脑疫苗初免的儿童 ,1年后抗体阳性率与GMT分别为 88 3%和 1∶2 6 4 ,用同一种疫苗加强免疫后抗体阳性率与GMT分别为 10 0 0 %和 1∶2 80 1。此外 ,用Vero细胞乙脑疫苗对该区的 1～ 6岁已接种过乙脑疫苗的儿童进行加强免疫 ,结果显示 :免疫前阳性率与GMT分别为 6 8 2 %和 1∶10 2 ,免疫后阳性率为 10 0 0 % ,GMT达 1∶2 32 4 ,≥ 4倍增长率为 98 5 % ,加强免疫前后差异显著。由此可见 ,用Vero细胞乙脑疫苗对儿童进行初免或加强免疫 ,除初免第 1针有一过性发热外 ,无其它不良反应 ,血清学效果明显优于PHK乙     

肾综合征出血热Vero传代细胞疫苗的研究

目的研究肾综合征出血热(HFRS)Vero传代细胞疫苗。方法将HFRS双价沙鼠肾细胞灭活疫苗的生产疫苗株Z10(Ⅰ型)、Z37(Ⅱ型)适应到Vero细胞上进行连续传代，并用不同代次的Vero细胞适应株制备Vero传代细胞疫苗。结果Z10、Z37，株感染Vero细胞后第1代即可达到较高病毒滴度，并且在Vero细胞中持续传代适应，病毒滴度分别维持在6．25～6．75和6．50～7．00logTCID50／ml之间，较为稳定。用不同代次的Vero细胞适应株制备而成的HFRS Vero细胞灭活疫苗抗原效价和疫苗的病毒滴度有较大提高，反向间接血凝效价从Z10 Cp1 Vero细胞疫苗的阴性上升到Z10 Cp10 Vero细胞疫苗的1：64，从Z37 Cp1 Vero细胞疫苗的1：2上升到Z37 Cp10 Vero细胞疫苗的1：64；疫苗病毒滴度(logTCID50／ml)从Z10 Cp1 Vero细胞疫苗的4．25上升到Z10 Cp10 Vero细胞疫苗的6．50，从Z37 Cp1 Vero细胞疫苗的6．25上升到Z37 Cp10 Vero细胞疫苗的7．50。疫苗在抗原量和病毒滴度上基本符合中国生物制品的要求。结论HFRS Vero传代细胞疫苗的生产，疫苗株在Vero细胞中的连续传代适应起关键性作用。     

两种无佐剂国产狂犬病疫苗的免疫效果观察

目的评价以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)及以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)的免疫效果。方法选取35名(1组)和46名(2组)一般的Ⅱ级暴露后患者,按0、3、7、14和28d的免疫程序,分别接种武汉生物制品研究所(CTN-1株毒种、Vero细胞)和河南普新生物技术公司生产的无佐剂狂犬病疫苗(aG株毒种、原代地鼠肾细胞),观察接种后的不良反应,采用快速荧光灶抑制实验(RFFTT)检测初免后7、14d血清狂犬病毒中和抗体。结果两种疫苗初免后7d的抗体阳转率分别为58.52%和65.22%,无显著性差异,初免后14d的抗体阳转率均为100%,接种Vero细胞狂苗组无不良反应;接种原代地鼠肾细胞狂苗组有1人接种第二针后出现4cm×4cm的红肿。结论两种无佐剂国产狂犬病疫苗产生保护性抗体时间短,以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)免疫效果好于以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)。     

大规模接种双价肾综合征出血热纯化疫苗效果观察

目的评价双价肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)纯化疫苗对人群的保护效果。方法按照实验期间完成3针疫苗接种和从未进行疫苗接种分为接种组和对照组。治疗组按0、14 d 2针基础免疫,6个月后1针加强免疫的程序对适龄人群接种疫苗,采用实验流行病学研究方法,构建疫苗接种观察队列,对接种组和对照组连续观察3年并进行比较分析。结果疫苗接种后的3年内,接种组年均发病率为0,对照组年均发病率为0.02%,3年内疫苗保护率达100.00%。结论大规模接种双价HFRS纯化疫苗的中远期流行病学效果良好,可推广应用。     

广州市8417例狂犬病疫苗免疫者流行病学分析

为进一步有效地预防狂犬病 ,广州市疾病预防控制中心预防门诊部坚持对完成全程狂犬病疫苗接种者进行流行病学观察 ,现将 841 7例狂犬病疫苗免疫者的流行病学分析报告如下。1 .对象与方法 :(1 )对象 :收集 2 0 0 2年 3～ 1 0月因动物致伤后在门诊部全程接种人用狂犬病疫苗者的记录 ,并加以整理和统计。 (2 )疫苗来源 :分两种。其中维尔博狂犬病疫苗为进口Vero细胞疫苗 (经活化、提纯并真空冻干 ) ,需用稀释液 0 .5ml,稀释后注射。辽宁生物技术公司地鼠肾纯化人用精制狂犬病疫苗 (纯化疫苗 )每支 1ml。2 .结果 :(1 )免疫时间分布 :841 7例均…     

江苏省东海县1996至1998年人间肾综合征出血热监测研究

为进一步查清肾综合征出血热(HFRS)在我县人群中的发生发展规律及双价疫苗的免疫防病效果,1996～1998年开展了较系统的监测工作.     

狂犬疫苗和肾综合征出血热灭活疫苗联合接种后免疫效果及副反应调查

目的探讨双价肾综合征出血热灭活疫苗对狂犬病疫苗免疫效果及一般反应的影响。方法研究对象选择300例犬、猫致伤、狂犬病暴露程度II级,单纯接种狂犬疫苗者为对照组,选择300例鼠致伤,狂犬病暴露程度II级,接种狂犬疫苗,同时接种双价肾综合征出血热灭活疫苗者为观察组,年龄均为16~60岁的健康人群,无性别差异,孕妇除外,每次接种狂犬疫苗前后在一定时间内观察局部及全身反应。两组完成一疗程的免疫后14 d进行狂犬病毒抗体测定。结果两组抗狂犬病毒抗体阳性率及一般反应差异无统计学意义（P〉0.05）。结论双价肾综合征出血热灭活疫苗,对狂犬病疫苗免疫效果及一般反应发生无明显影响。