昆布多糖对哮喘小鼠呼吸道炎性反应的影响

目的 探讨海洋药物昆布多糖对哮喘小鼠呼吸道炎性反应的影响.方法 SPF级昆明系小鼠32只随机分为阳性对照组、布地奈德组、昆布多糖组和阴性对照组,每组8只,通过长期反复吸入卵清蛋白(OVA)建立小鼠哮喘模型.布地奈德组自第14天起,每天雾化吸入布地奈德混悬液200μg加9g/L盐水共4mL干预;昆布多糖组以昆布多糖50mg/kg灌胃;阳性对照组自第14天起,以9g/L盐水0.3mL灌胃干预;阴性对照组在致敏激发和灌胃干预阶段采用9g/L盐水.所有动物在第42天灌胃雾化24～48h处死.HE染色观察各组呼吸道炎性反应并评分,光镜计数各组支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞数及分类计数,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠BALF中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平.结果 阴性对照组小支气管无炎性细胞浸润;阳性对照组肺组织呈明显炎性浸润,渗出液堵塞呼吸道;布地奈德和昆布多糖组肺组织炎性浸润明显减轻,偶见肺泡内渗出液,小支气管上皮完整.昆布多糖组小鼠BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数、IL-4与阳性对照组比较均有降低(t=5.942,7.089,7.078 Pa<0.01),IFN-γ升高(t=6.171 P<0.01),差异有显著性,肺病理评分降低(P<0.01);与阴性对照组相比,细胞总数、EOS、IL-4均显著升高(t=2.150,3.977,2.593 Pa<0.05),IFN-γ降低(t=4.116 P<0.01),肺病理评分增高(P<0.01);与布地奈德组比较,BALF细胞总数、EOS明显升高(t=4.984,6.195 Pa<0.01),IL-4无明显差异(t=1.424 P>0.05),IFN-γ显著降低(t=4.275 P<0.01),肺组织病理评分明显升高(P<0.01).结论 海洋药物昆布多糖能在一定程度上减轻哮喘小鼠呼吸道炎性反应,可能是一种新的治疗哮喘的辅助药物.     

支气管哮喘患儿血清白细胞介素-4、白细胞介素-5和γ干扰素水平检测的意义

目的 探讨支气管哮喘患儿血清IL-4、IL-5和γ干扰素(IFN-γ)水平及其在支气管哮喘发病中的作用.方法 选取30例门诊随诊的哮喘缓解期患儿作为哮喘组,30例同期健康体检儿童作为健康对照组,2组儿童均于清晨空腹取外周静脉血1.0 mL制备血清,应用ELISA法对2组儿童血清IL-4、IL-5和IFN-γ水平进行测定.结果 哮喘组患儿血清IL-4、IL-5水平均较健康对照组升高,差异有统计学意义(t= 2.48、2.63,Pa<0.05),但其血清IFN-γ水平较健康对照组显著降低(t= 3.02 ,P<0.01).结论 哮喘患儿存在Th1/Th2细胞免疫失衡,Th1免疫功能低下,IFN-γ下调可能是哮喘发病的重要原因,对哮喘有负向调节作用. 哮喘患儿同时存在Th2细胞免疫功能亢进,以IL-4、IL-5为代表的Th2免疫功能在儿童哮喘的发病中发挥正性促炎作用.     

香菇多糖对哮喘大鼠模型气管炎性反应及辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2免疫应答失衡的调节

目的 研究哮喘大鼠模型辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫应答失衡及香菇多糖(LNT)对哮喘气管炎性反应及Th1/Th2失衡影响.方法 雄性SD大鼠30只随机分为健康对照组、哮喘组和LNT组.以卵清清蛋白(OVA) 致敏激发法复制大鼠哮喘模型.对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行嗜酸性粒细胞(Eos)计数和分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(Sandwich ELISA)法测定BALF中IL-4和γ干扰素(IFN-γ)水平变化.结果 1.哮喘组BALF中Eos绝对值和Eos占细胞总数百分比(Eos%)均高于对照组(t=21.94,12.81 Pa＜0.01),LNT组上述指标均低于哮喘组(t=17.26,8.55 Pa＜0.01);2.BALF中IL-4水平哮喘组显著高于对照组(t=8.04 P＜0.01),LNT组显著低于哮喘组(t=6.25 P＜0.01);而IFN-γ水平哮喘组显著低于对照组(t=10.82 P＜0.01),LNT组显著高于哮喘组(t=11.63 P＜0.01).结论 LNT下调IL-4表达水平,上调IFN-γ水平,可能为其抑制哮喘呼吸道炎性反应的重要作用机制之一.     

过敏性紫癜患儿血树突状细胞共刺激分子表达及其与辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2平衡相关性

目的观察过敏性紫癜(HSP)患儿外周血树突状细胞(DC)共刺激分子表达及其与辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2平衡的相关性。方法HSP患儿40例。健康对照儿童18例。酶联免疫吸附法(ELISA)检测其血浆IFNγ-、IL-4水平。对其中HSP 28例及18例健康对照儿童外周血单个核细胞(PBMC)体外经细胞因子重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、rhIL-4和rhTNF-α以诱生DC并培养8 d,流式细胞仪检测DC表面CD86(B7-2)、CD80(B7-1)、CD83表达率。结果1.HSP组血浆IFN-γ水平显著低于健康对照组(t=4.26 P<0.01),IL-4水平显著高于健康对照组(t′=5.09 P<0.01),IFN-γ/IL-4比值显著低于健康对照组(t′=7.98 P<0.01)。2.HSP组外周血DC表面CD83表达率与健康对照组无显著性差异(P>0.05);HSP组外周血DC表面CD86表达率显著高于健康对照组(t=3.94 P<0.01),CD80低于健康对照组(t′=2.60 P<0.05)。3.二组外周血DC表面CD86表达率与血浆IL-4水平均呈显著正相关(r=0.53,0.63 Pa<0.01),与IFN-γ/IL-4比值均呈显著负相关(r=-0.55,-0.80 Pa<0.01),而与血浆IFN-γ水平均无相关性(Pa>0.05);二组外周血DC表面CD80表达率与血浆IFN-γ水平均呈正相关(r=0.43,0.49 Pa<0.05),与IFN-γ/IL-4比值均呈显著正相关(r=0.49,0.63 Pa<0.05),而与血浆IL-4水平均无相关性(Pa>0.05)。结论HSP患儿存在Th1/Th2失衡,HSP患儿DC表面共刺激分子差异表达直接或间接导致Th1/Th2失衡。     

IL-12对小鼠哮喘模型Th亚群和气道炎症的影响

目的观察腹腔注射IL-12对哮喘小鼠Th亚群的调节和气道炎症的影响,并寻找更有效的干预阶段。方法将36只BALB/c小鼠分为4组,每组9只,分别为哮喘组、IL-12干预A组、IL-12干预B组及正常对照组。采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入激发的方法制成哮喘模型,正常对照组小鼠同时以等量的生理盐水腹腔注射加雾化吸入。干预A组在致敏和激发阶段均给予IL-12腹腔注射进行干预,干预B组仅在激发阶段给予IL-12腹腔注射进行干预。最后1次激发结束后24h处死所有小鼠,取左肺作病理切片(HE染色),右肺提取总RNA并逆转录成cDNA后,应用半定量RT-PCR法检测肺组织内IFN-γ基因mRNA的转录表达情况,实时定量PCR法检测肺组织内IL-4基因mRNA的转录表达情况。结果与正常对照组相比,哮喘组小鼠肺组织内IFN-γmRNA表达显著减少(P<0.05),IL-4mRNA表达显著增多(P<0.05);与哮喘组相比,IL-12干预A、B组小鼠肺组织内IFN-γmRNA表达均显著增多(P均<0.05),IL-4mRNA表达均显著减少(P均<0.05)。干预A组与干预B组相比,IL-4mRNA的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),而IFN-γmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-12能有效纠正哮喘小鼠失衡的Th亚群及控制气道炎症;致敏、激发阶段同时干预与仅激发阶段的干预均能有效的抑制Th2型免疫反应和气道炎症改变,前者能更有效的降低IL-4mRNA的表达水平。     

毛细支气管炎患儿血清γ干扰素、白细胞介素-4水平变化及其临床意义

目的 探讨毛细支气管炎患儿血清γ干扰素(IFN-γ)、IL-4水平变化及其与病情严重程度的相关性.方法 1.采用ELISA法检测54例毛细支气管炎患儿治疗前后和随访2个月时血清IFN-γ、IL-4水平;2.将54例毛细支气管炎患儿按呼吸困难评分平分为轻度组、中度组和重度组,比较3组患儿血清IFN-γ、IL-4水平变化.同时采用ELISA法检测20例健康儿童血清IFN-γ及 IL-4水平做比较.结果 1.毛细支气管炎患儿治疗前血清IFN-γ水平显著低于健康对照组(P<0.01),治疗后其水平升高,显著高于治疗前(P<0.01),但仍低于健康对照组(P<0.01).治疗前血清IL-4水平显著高于健康对照组(P<0.01),治疗后其水平下降,显著低于治疗前(P<0.01),但仍高于健康对照组(P<0.01).随诊2个月后,IFN-γ、IL-4水平接近健康对照组.2.轻度组血清IFN-γ水平显著高于中度组,中度组显著高于重度组(Pa<0.01);中度组血清IL-4水平显著低于重度组(P<0.01).结论 毛细支气管炎患儿血清INF-γ水平降低,IL-4水平升高,FN-γ/IL-4水平失衡,并与病情严重程度有关.     

布地奈德对哮喘大鼠肺部炎症及血清白细胞介素-5水平的影响

目的比较布地奈德雾化液与地塞米松对哮喘大鼠肺部过敏性炎症抑制作用及其对血清IL-5的影响,探讨布地奈德治疗哮喘与全身用糖皮质激素的差异。方法健康Wistar大鼠26只随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组和地塞米松组。以卵清蛋白致敏激发法制作哮喘大鼠模型。布地奈德组每次激发前予布地奈德雾化吸入,地塞米松组每次激发予地塞米松(0.2mg/kg)腹腔注射。用ELISA试剂盒测定大鼠血IL-5水平。采血后取肺,作病理切片,HE染色观察。结果哮喘组大鼠肺及支气管的病理改变与其他各组比较有显著差异,布地奈德组与地塞米松组无显著差异,但两组与正常组比较有差异。哮喘组血清IL-5水平明显升高,与正常组比较有显著性差异(P<0.01)。布地奈德组及地塞米松组血清IL-5水平均下降,与正常组相比无显著性差异(P>0.05),与哮喘组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论布地奈德局部吸入治疗可明显抑制哮喘大鼠肺部过敏性炎症反应,改善过敏性哮喘症状。     

缺锌对哮喘大鼠Th1/Th2型细胞因子的影响

目的 探讨缺锌对哮喘大鼠Th1／Th2型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）和白细胞介素-4（IL-4）的影响。方法 建立缺锌及哮喘模型，SD大鼠32只，体质量45～65g，按体质量随机分为4组，每组8只。A组为缺锌饲料＋卵清蛋白（OVA）激发组；B组为正常锌饲料＋OVA激发组；C组为正常锌饲料配对饲养＋OVA激发组；D组为正常锌饲料＋生理盐水激发组。利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺组织IFN-γ和IL-4水平；逆转录PCR（RT-PCR）检测肺组织IFN-γ、IL-4mRNA表达。结果 与D组比较，A～C组大鼠肺组织匀浆IFN-γ水平、IFN-γ mRNA表达均明显减少（P均〈0．05），而IL-4水平、IL-4mRNA表达均明显增加（P均〈0．05）。与B组比较，A组大鼠IFN-γ水平、IFN-γmRNA明显减少（P均〈0．05）；IL-4水平无显著性差异（P〉0．05），IFN-γ／IL-4比例明显减少（P〈0．05）。B与C组比较检测结果均无显著性差异。结论 哮喘大鼠缺锌时其IFN-γ明显减少，而IL-4不受影响，Th1／Th2细胞比例严重失衡，是缺锌时呼吸道炎症反应增加原因之一。     

新生期卡介苗接种对实验性哮喘小鼠肺Th17细胞和IL-17的影响

目的：通过实验性哮喘小鼠模型探讨新生期卡介苗（bacillus Calmette-Guérin,BCG）接种对肺Th17细胞和IL-17的影响。方法：新生期小鼠分3组：对照组,卵白蛋白组（OVA）,BCG干预组（BCG/OVA）。除对照组外,其余两组均给予OVA致敏和激发。观察支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中细胞总数及分类,ELISA法检测BALF中IFN-γ、IL-17含量,流式细胞术检测肺Th17细胞。结果：两哮喘组BALF中细胞总数、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞比例均明显高于对照组,而BCG/OVA组上述细胞均显著低于OVA组。两哮喘组BALF中IFN-γ水平明显低于对照组,IL-17显著高于对照组,同时BCG/OVA组IL-17水平明显低于OVA组。流式细胞术显示,两哮喘组Th17细胞比例均明显高于对照组,但两哮喘组间差异无统计学意义。结论：Th17细胞/IL-17在实验性哮喘小鼠发病中起作用,新生期BCG接种可抑制气道IL-17的产生,其抑制的IL-17可能并非主要由Th17细胞产生,而来源于其他细胞。［中国当代儿科杂志,2010,12（8）：650-653］     

褪黑素对哮喘大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响及抗感染作用

目的 探讨褪黑素(MT)对哮喘大鼠CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 Tr)的影响及抗感染作用.方法 SPF级SD大鼠32只随机分成4组,每组8只.哮喘组:造模第1、7天,大鼠腹腔注射卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝混悬液体,第14天,用10g/L的OVA溶液对大鼠进行雾化激发,1次/d,20min/次,连续7d;MT组:致敏、诱导哮喘方法同哮喘组,在每次激发前30min,腹腔注射MT0.1mg/kg;地塞米松组:致敏、诱导哮喘方法同哮喘组,在每次激发前30min,腹腔无菌注射地塞米松0.5mg/kg;对照组:注射、雾化方法同哮喘组,以9g/L盐水替代OVA和氢氧化铝致敏液及雾化液.各组于最后1次雾化激发后取其外周血涂片染色,计数其外周血嗜酸性粒细胞(EOS)百分比;收集其肺泡灌洗液(BALF),计数其炎性细胞总数;制作肺组织石蜡切片,HE染色计数其呼吸道周围EOS数目;用免疫增强浊度法检测其血清IgE水平;用流式细胞术检测其外周血CD4 CD25 Tr水平.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 哮喘组外周血CD4 CD25 Tr/CD4 T细胞值与呼吸道周围EOS细胞数呈高度负相关(r=-0.73 P<0.05),与BALF细胞总数亦呈高度负相关(r=-0.78 P<0.05),与血清IgE水平未见显著相关.CD4 CD25 Tr/CD4 T细胞值哮喘组显著高于其他各组(Pa<0.01),其他3组比较,差异无统计学意义(Pa>0.05).MT组呼吸道周围EOS计数、外周血EOS比例、BALF细胞总数及IgE水平显著低于哮喘组(Pa<0.01).结论 CD4 CD25 Tr参与哮喘的发病.MT能显著降低哮喘大鼠CD4 CD25 Tr的数目,对哮喘大鼠CD4 CD25 Tr的调节作用与地塞米松相当,可有效减轻哮喘大鼠呼吸道炎性反应和血清IgE上升水平.     

阿奇霉素对支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞功能的影响

目的 探讨阿奇霉素对支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2功能的影响.方法 选取24例支气管哮喘发作期患儿为支气管哮喘组,20例健康儿童为健康对照组.二组均在无菌条件下获取外周血单个核细胞(PBMC)悬液,哮喘组予不同质量浓度(0.2、0.1、0.05、0mg/L)阿奇霉素治疗,健康对照组未予阿奇霉素干预,均体外培养48h.酶联免疫吸附(ELISA)法检测培养上清液中干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4及IL-10水平变化.采用SPSS ll.5软件进行统计学分析.结果 l.支气管哮喘组患儿PBMC产生IL-4水平明显高于健康对照组(P<0.05),IFN-γ/IL-4比值明显低于健康对照组(P<0.05),IFN-γ和IL-10水平与健康对照组比较无显著性差异(Pa>0.05);2.支气管哮喘组患儿PBMC在阿奇霉素0.1mg/L水平条件下,IL-4分泌水平明显高于0.2mg/L和0.05mg/L组(Pa<0.05)及空白对照组(P<0.01),各组间PBMC分泌IFN-γ水平和IFN-γIL-4比值均无显著性差异(Pa>0.05);3.阿奇霉素0.2mg/L和0.1 mg/L组PBMC产生IL-10水平均明显高于空白对照组(P<0.01,0.05),0.2mg/L组明显高于0.05 mg/L组(P<0.05),其他各组间均无显著性差异(Pa>0.05).结论 常规质量浓度阿奇霉素(0.1mg/L)对支气管哮喘患儿外周血Th1/Th2平衡无明显影响,但可通过上调PBMC产生IL-10水平,而间接发挥其免疫调节作用.     

小儿外科脓毒症患儿Th1/Th2细胞免疫应答状况

目的 探讨外科治疗中严重腹腔感染脓毒症患儿Th1/Th2细胞免疫应答的变化规律.方法 选择本院收治的30例严重腹腔感染患儿为脓毒症组.同期门诊查体的30例健康儿童为健康对照组.脓毒症组(于术前和术后第1、5天)及健康对照组抽取空腹静脉血2 mL,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组儿童血清IFN-γ和IL-4水平,计算IFN-γ/IL-4比值.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 脓毒症组血清IFN-γ水平术前与健康对照组、术后第5天与术前、术后第5天与健康对照组比较,均无显著性差异(Pa>0.05);术后第1天与术前比较下降(t=6.083 P<0.01).脓毒症组血清IL-4水平术前与健康对照组、术后第1天比较均升高(t=11.65,1.996 Pa<0.01),与术后第5天比较下降(t=8.275 P<0.01),术后第5天与健康对照组比较仍高,未恢复至正常水平(t=3.453 P<0.01).脓毒症组IFN-γ/IL-4比值术前与健康对照组、术后第1天比较均明显降低(t=10.98,3.072 Pa<0.05),术后第5天与术前比较明显升高(t=6.417 P<0.01),但与健康对照组比较末恢复至正常水平(t=3.482 P<0.01).结论 严重腹腔感染脓毒症患儿Th1细胞应答减弱,Th2细胞应答增强,存在免疫抑制状态,手术打击加重Th1细胞向Th2细胞偏移,经手术干预、合理治疗,免疫功能可逐渐恢复.     

槐杞黄对哮喘大鼠Th1/Th2/Th17细胞因子及肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

目的：研究卵清蛋白（OVA）致敏哮喘大鼠Th1/Th2/Th17细胞因子及肺泡巨噬细胞吞噬功能的变化以及槐杞黄的治疗效应。方法：40只4~6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成正常对照组、哮喘组、布地奈德组、槐杞黄组和布地奈德+槐杞黄组（n=8）。OVA致敏和激发建立哮喘模型。酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定血浆和支气管肺泡灌洗液（BALF）IL-4、IFN-γ、IL-17水平;分离、纯化BALF的肺泡巨噬细胞,测定肺泡巨噬细胞的吞噬功能。结果：与正常对照组比较,哮喘组血浆和BALF中IL-4和IL-17升高,IFN-γ降低。与哮喘组相比,槐杞黄组IFN-γ升高。布地奈德+槐杞黄组IFN-γ升高及IL-17降低较布地奈德组和槐杞黄组更显著。肺泡巨噬细胞的吞噬功能：哮喘组较正常对照组降低,槐杞黄组和布地奈德+槐杞黄组较正常对照组、哮喘组和布地奈德组均升高。血浆和BALF IFN-γ水平与肺泡巨噬细胞的吞噬功能呈正相关。结论：哮喘大鼠血浆和BALF IL-4和IL-17表达升高、IFN-γ表达降低,肺泡巨噬细胞吞噬功能下降。槐杞黄能明显提高哮喘大鼠血浆和BALF IFN-γ表达和肺泡巨噬细胞的吞噬能力,且与吸入性糖皮质激素合用有协同作用。     

黄芪对实验性IgA肾病大鼠Th1/Th2免疫失衡与核因子-κB表达的影响

目的探讨核因子-κB(NF-κB)和Th1/Th2免疫失衡在IgA肾病(IgAN)发病中的作用及黄芪防治IgAN的机制。方法32只SD大鼠分为模型组、干预组和对照组。模型组和干预组复制IgAN模型,干预组予黄芪颗粒剂混悬液口服,并以正常SD大鼠作为对照组。检测各组大鼠蛋白尿、血尿及肾脏病理改变,采用免疫组织化学技术检测各组大鼠肾组织NF-κB、转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达;ELISA法检测其血清中Th1类细胞因子INF-γ和Th2类细胞因子IL-4水平。结果1.模型组大鼠尿红细胞、尿蛋白水平较对照组明显增高,差异有统计学意义(Pa<0.01);2.模型组大鼠肾组织NF-κB、MCP-1、TGF-β1的表达与干预组、对照组比较均明显增高,差异均有统计学意义(Pa<0.01);3.模型组大鼠血清INF-γ水平与干预组、对照组比较均显著下降(Pa<0.05),IL-4水平与干预组、对照组比较均显著升高(Pa<0.01);4.模型组大鼠肾小球系膜区、肾小管、肾间质病理损害较干预组和对照组加重。结论黄芪能降低IgAN大鼠尿红细胞数、尿蛋白水平,并减轻IgAN模型大鼠肾脏病...     

肺炎支原体感染对BALB/c小鼠肺泡灌洗液中干扰素-γ、白细胞介素-4及白细胞介素-5含量的影响

目的 探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)感染对小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中干扰素(interferon,IFN)-γ、白细胞介素(interleukin,IL)-4及IL-5含量的影响,研究MP感染是否通过对Th1/Th2免疫应答的影响参与哮喘发病机制.方法 按照随机分组的原则将40只BALB/c小鼠分为正常对照组20只,MP感染组20只;MP感染组分别于MP感染第3、7、14、21天取BALF,每次5只.采用ELISA方法检测小鼠BALF中IFN-γ、IL-4及IL-5的含量.结果 MP感染组的BALF中IFN-γ、IL-4及IL-5含量较正常对照组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).在MP感染第7天小鼠BALF中IFN-γ、IL-4及IL-5含量达到高峰.MP感染组小鼠BALF中IFN-γ/IL-4比值较正常对照组降低,且在第7天达到低谷,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MP感染可使小鼠BALF中IFN-γ、IL-4及IL-5含量升高,且在第7天达到最高峰,MP感染可以增加Th1、Th2细胞因子的释放,诱导Th1向Th2的免疫应答失衡,且可能通过此途径参与哮喘气道炎症的形成.     

多聚肌苷酸在支气管哮喘防治中的价值

目的研究多聚肌苷酸[polyinosinic:polycytidylic acid,Poly(I:C)]在支气管哮喘防治中的意义。方法将健康雌性Balb/c 6周龄小鼠80只,随机分为对照组、致敏组、激发前干预组、激发时干预组,每组20只。除对照组外,其余3组小鼠用OVA致敏建立哮喘模型,其中激发前干预组在OVA激发前给予Poly(I:C)干预;激发时干预组在OVA激发同时给予Poly(I:C)干预。通过乙酰胆碱量测定评定气道反应性,ELISA测定血浆IgE水平;测定肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数Eos计数;IL-4和IFN-γ浓度;肺组织切片测定IL-4和IFN-γmRNA浓度。结果致敏组、激发前干预组、激发时干预组小鼠对乙酰胆碱的反应性明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);3组哮喘小鼠之间的差异无统计学意义(P>0.05)。3组哮喘小鼠的血浆IgE水平、BALF中的细胞总数和Eos计数、IL-4和IFN-γ浓度、肺组织中IL-4和IFN-γmRNA水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且3组哮喘小鼠之间的差异也有统计学意义(P<0.05)。结论在OVA激发前、激发时给予Poly(I:C),均不能改变哮喘小鼠对乙酰胆碱的气道反应性;在OVA激发前给予Poly(I:C)干预可减轻炎症反应,但在OVA激发哮喘时给予Poly(I:C)干预则可加重炎症反应。     

肺炎支原体肺炎患儿Th1/Th2免疫应答的状况

目的研究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿Th1/Th2免疫应答状况。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)测定26例MPP急性期患儿和其中9例恢复期及12例健康儿童的血清IFN-γ、IL-4水平.计算IFN/IL-4比值。结果急性期MPP患儿IFN-γ水平明显高于对照组(P<0.01);IL-4水平低于对照组,但无显著差异(P>0.05);IFN-γ/IL-4比值明显高于对照组(P<0.01)。恢复期患儿IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4比值均高于急性期患儿.但无显著差异(P均>0.05)。结论MPP患儿存在Th1细胞免疫应答增强.Th2细胞免疫应答减弱,且恢复期持续存在。     

槐杞黄对哮喘大鼠模型的作用及其机制研究

目的 探索槐杞黄在哮喘大鼠模型中的作用及相关机制。方法 将40只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、布地奈德组和槐杞黄组（n=10）。通过卵白蛋白致敏并激发建立哮喘大鼠模型,布地奈德组在每次激发前以布地奈德2 mg雾化,槐杞黄组在每次激发前以槐杞黄4 g/kg溶于水中灌胃。苏木精-伊红染色观察各组大鼠肺组织病理变化;计数肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞比例;ELISA法检测各组BALF中细胞因子IL-3、IL-4、IL-5、IL-10、INF-γ及IgE浓度;流式细胞术检测外周血及脾脏中Th1/Th2细胞比例;RT-PCR法检测肺组织中T-bet、GATA-3 mRNA表达;应用Western bolt检测肺组织中T-bet、GATA-3蛋白表达。结果 与对照组相比,哮喘组大鼠气道炎症程度明显增加;BALF中嗜酸性粒细胞比例显著升高;IL-3、IL-4、IL-5、IgE浓度显著升高,而IL-10、INF-γ浓度明显下降;外周血及脾脏Th1细胞比例明显降低,Th2细胞比例明显升高;肺组织T-bet mRNA及其蛋白表达水平明显降低,GATA-3 mRNA及其蛋白表达水平明显升高（P < 0.05）。槐杞黄及布地奈德均能明显改善哮喘大鼠气道炎症及上述指标水平（P < 0.05）,且效果相当;但与对照组比较,差异仍有统计学意义（P < 0.05）。结论 槐杞黄能改善哮喘大鼠气道炎症,缓解哮喘症状,其机制可能与调节相关细胞因子水平及Th1/Th2比例有关,这一作用可能经T-bet和GATA-3通路进行调控。     

血管活性肠肽对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响

目的探讨血管活性肠肽(VIP)对哮喘小鼠气道炎症的影响,以及对Th17细胞/调节性T细胞(Treg)失衡的调控作用。方法将30只BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组、VIP组,每组10只。利用卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作急性哮喘小鼠模型;对照组致敏和激发阶段均以生理盐水代替OVA;VIP组每次OVA激发前,先以VIP溶液(20μg/m L)雾化吸入30 min。留取各组小鼠支气管肺泡灌洗液、肺组织等标本。利用苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化;ELISA法检测肺泡灌洗液中Th17/Treg相关细胞因子水平;免疫组化及Real-time PCR检测肺组织中Th17细胞特异性转录因子RORγt及Treg特异性转录因子Foxp3表达情况。结果病理组织学结果显示VIP组小鼠肺组织气道炎症表现较哮喘组减轻。哮喘组小鼠BALF中IL-17浓度高于对照组(P0.01),VIP组IL-17浓度较哮喘组降低(P0.01),但仍高于对照组(P0.01)。哮喘组BALF中IL-10浓度低于对照组(P0.01),VIP组IL-10浓度较哮喘组升高(P0.01),但仍低于对照组(P0.01)。哮喘组小鼠肺组织RORγt mRNA及蛋白表达高于对照组(P0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达低于对照组(P0.01);VIP组肺组织RORγt mRNA及蛋白表达水平低于哮喘组(P0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达水平高于哮喘组(P0.05)。结论哮喘小鼠存在Th17/Treg免疫失衡,VIP可通过调控Th17/Treg免疫失衡而改善哮喘小鼠气道炎症。     

重症肺炎支原体肺炎患儿肺泡灌洗液中Th1/Th2细胞免疫应答状况的研究

目的：检测重症肺炎支原体肺炎（MPP）患儿肺泡灌洗液(BALF)和血清中干扰素-γ（IFN-γ)、白细胞介素-4（IL-4）,研究Th1/Th2细胞免疫应答的状况及意义,并评价BALF中细胞因子检测在MPP诊治中的临床价值。方法：采用双抗体夹心ELISA检测25例重症MPP患儿BALF和血清中IL-4及IFN-γ的浓度,并设支气管异物组（25例）和MPP轻症组（25例）作为对照。结果：重症MPP患儿BALF中IL-4和IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值明显高于支气管异物对照组,差异有统计学意义(P<0.01或0.05)。重症MPP患儿血清中IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值明显高于支气管异物组和MPP轻症组,差异有统计学意义(P<0.01或0.05)。重症MPP患儿BALF中IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值高于血清标本,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：重症MPP患儿存在Th1/Th2失衡, 以Th2反应占优势;BALF中细胞因子的检测较之血清更为敏感,在MPP诊治中具有较高价值。