艾灸对乳腺增生模型大鼠的干预效果及作用机制研究

目的:观察艾灸对乳腺增生(MGH)模型大鼠的干预效果,以及对MGH模型大鼠血清雌二醇(E_2)、孕激素(P)水平和乳腺组织雌激素受体α(ERα)、孕激素受体(PR)蛋白表达的影响。方法:将40只雌性成熟未孕SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组和电针组,每组10只。对模型组、艾灸组和电针组大鼠进行造模,造模成功后,艾灸组和电针组分别进行艾灸和电针干预,空白组和模型组不进行干预。艾灸和电针穴位相同,均分为甲、乙两组,甲组为天宗、肝俞、足三里,乙组为合谷、屋翳、膻中。甲乙两组穴位隔日交替干预,干预5 d,休息2 d为1个疗程,连续干预4个疗程。干预结束后,测量各组大鼠乳头高度和直径,观察各组大鼠乳腺组织形态,并用高通量液相芯片技术检测各组大鼠血清E_2、P水平,免疫印迹法检测各组大鼠乳腺组织ERα、PR蛋白表达。结果:干预后,艾灸组和电针组大鼠乳头高度明显低于模型组,乳头直径明显小于模型组(P0.05);乳腺导管直径均显著缩小,乳腺导管管腔形态相对规则,管腔内脱落组织和分泌物显著减少或消失,乳腺导管上皮细胞数目减少且排列相对规则,乳腺腺泡及乳腺小叶数量均明显减少;血清E_2水平明显低于模型组,血清P水平明显高于模型组,乳腺组织ERα、PR蛋白表达明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)。艾灸组和电针组大鼠上述指标比较,差异无统计学意义(P 0.05)。结论:艾灸治疗乳腺增生模型大鼠疗效较好,其机制可能与调节大鼠血清E_2、P水平及ERα、PR蛋白表达有关。     

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证大鼠下丘脑和海马雌激素受体α,β mRNA表达的影响

目的:研究中药复方经前舒颗粒对经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑和海马中雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)mRNA表达的影响.方法:以情志刺激多因素法复制PMS肝气郁证大鼠模型,使用中药复方经前舒颗粒进行干预治疗,采用RT-PCR法检测大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达变化.结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达量高于正常组(P＜0.05);与模型组大鼠相比,经前舒颗粒给药组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达量则显著降低(P＜0.05),与正常组无差异.结论:经前舒颗粒可下调下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达水平,这可能是其治疗PMS肝气郁证的作用机制之一.     

健乳灵对乳腺增生大鼠GnRH及其受体mRNA表达的影响

目的观察乳腺增生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及垂体促性腺激素释放激素受体(GnRHR)mRNA表达与正常大鼠的差异,并观察治疗乳腺增生症的中药制剂健乳灵对其的影响,探寻乳腺增生症的内分泌机制及健乳灵治疗乳腺增生症的内分泌环节。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、治疗组,后两组制成乳腺增生大鼠模型,空白组和模型组大鼠予生理盐水灌胃,治疗组大鼠予健乳灵药液灌胃;治疗60d,采用RT-PCR法检测GnRH及GnRHR基因表达。结果模型组与空白组比较,GnRH及GnRHRmRNA表达水平均明显上调;治疗组与模型组比较,GnRHRmRNA表达水平均明显下调;治疗组与空白组比较,GnRHmRNA表达水平明显上调,GnRHRmRNA表达水平无明显差异。结论乳腺增生症的内分泌发生机制可能与下丘脑GnRH及垂体GnRH受体表达增加有关;健乳灵对乳腺增生的治疗机理可能与调节下丘脑GnRH及垂体GnRH受体表达减少有关。     

柴金散结方对乳腺增生大鼠的药效作用及机制

目的:考察柴金散结方对大鼠乳腺增生的药效及机制,为中药新药研发提供实验依据。方法:外源性肌注雌、孕激素制备乳腺增生SD大鼠模型,造模成功后,大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、柴金散结方(柴金)低、中、高剂量(3. 13,6. 26,12. 52 g·kg~(-1))组及乳癖消(0. 517 g·kg~(-1))组,每组9只。给药28 d,放射免疫法测定雌二醇(E_2),孕酮(P)及泌乳素(PRL),计算子宫、卵巢系数,观察乳头直径、乳腺组织病理,免疫组化法测定乳腺组织中雌激素受体-α(ER-α)表达量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定下丘脑、垂体促性腺激素释放激素(GnRH),促性腺激素释放激素受体(GnRH-R) mRNA表达; ICR小鼠按体质量随机分为正常组、柴金低、中、高剂量组(5. 2,10. 4,20. 8 g·kg~(-1))与罗通定组(0. 038 6 g·kg~(-1)),每组12只,给药7 d,末次给药30 min后腹腔注射0. 6%乙酸,观察15 min内扭体次数。结果:与正常组比较,模型组乳头直径增宽,血清E_2显著升高(P 0. 01),乳腺组织增生,ER-α表达增加;与模型组比较,柴金高剂量组乳头直径显著下降(P 0. 05);柴金各剂量组E_2均有下降;柴金中、高剂量组可降低乳腺增生病理积分;柴金各剂量组均能降低下丘脑中GnRH mRNA表达;柴金高剂量组小鼠扭体次数减少(P 0. 05)。结论:柴金散结方可改善乳腺增生病变情况,作用机制可能与调节下丘脑GnRH mRNA表达及降低雌激素受体表达有关。     

香舒丸抗大鼠乳腺增生作用及对性激素的调节机制研究

目的观察香舒丸对乳腺增生大鼠的改善作用,探讨其治疗作用的性激素调节机制。方法将雌性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、他莫昔芬组(3 mg·kg~(-1))及香舒丸低、中、高(2.26、4.52、9.04 g·kg~(-1))剂量组,每组10只。肌肉注射苯甲酸雌二醇与黄体酮复制乳腺增生大鼠模型。大鼠灌胃给药,每天1次,连续90 d。以游标卡尺测量大鼠第2对乳头的高度、直径;HE染色观察乳腺组织病理形态学变化;ELISA法检测血清中雌二醇(E_2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)含量;免疫组化法及Western Blot法检测乳腺组织中雌激素受体(ERα+β)、孕激素受体(PR)表达情况。结果与空白对照组比较,模型组大鼠乳房直径和乳头高度明显增加(P 0.01);乳腺小叶体积增大,小叶内腺泡数量增多,导管扩张,腺上皮增厚;血清中E_2、PRL含量明显升高(P 0.01),P含量明显降低(P 0.01);乳腺组织中ERα、PR蛋白表达明显上调(P 0.01),ERβ蛋白表达明显下调(P 0.01)。与模型组比较,香舒丸各剂量组大鼠乳头高度和直径均明显下降(P 0.01);乳腺小叶腺泡数减少,导管直径明显减小;血清中E_2与PRL含量明显降低(P 0.01),P含量明显升高(P 0.01);乳腺组织中ERα、PR蛋白表达明显下调(P 0.05,P 0.01),ERβ蛋白表达明显上调(P 0.01)。结论香舒丸可能通过调节性激素水平和乳腺组织中雌、孕激素受体的表达,从而发挥抗大鼠乳腺增生的作用。     

经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑ERα、ERβ mRNA表达的研究

目的：检测经前期综合征（PMS）肝气逆证模型大鼠下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达,观察经前平颗粒对PMS肝气逆证的干预作用。方法：以情志刺激多因素法复制PMS肝气逆大鼠模型,以经前平颗粒干预治疗,采用RT-PCR法检测模型大鼠下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达。结果：与正常组相比,PMS肝气逆证组下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达降低,PMS肝气逆给药组下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达无差异。结论：肝气逆证模型下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达显著性升高,经前平颗粒对PMS肝气逆证的异常变化具有调节作用。     

循经通络推拿结合药物对乳腺增生大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

目的 观察循经通络推拿手法结合药物治疗与单纯手法、单纯药物治疗对乳腺增生(MGH)大鼠的疗效差异及对下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、手法组、药物组、药物加手法组,每组10只。采用孕雌激素联合造模法制备乳腺增生症模型。手法组予以循经通络推拿手法治疗,药物组灌胃给予三苯氧胺,药物加手法组同时给予循经通络推拿和药物灌胃。治疗结束后测量大鼠乳头直径和乳头高度,HE染色观察乳腺组织病理学变化,ELISA法检测血清中卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平,Western-blot及RT-RCR检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)的蛋白和 mRNA 表达。结果 与模型组比较,各治疗组大鼠乳头直径、乳头高度显著减小(P<0.05);药物加手法组大鼠乳腺组织病理形态明显改善,手法组和药物组大鼠乳腺组织形态改善不明显;药物组、药物加手法组血清FSH水平明显降低,LH水平显著升高(P<0.05),手法组大鼠血清FSH、LH水平变化不明显(P>0.05);药物加手法组大鼠GnRH、GnRH-R的...     

针药结合对乳腺增生大鼠乳腺组织及雌激素受体亚型表达的影响

目的:研究针药结合对大鼠乳腺增生病模型的抑制作用及作用机制。方法:复制乳腺增生病模型,造模后随机分为针刺组、中药组、针药组、对照组、模型组,除正常组、模型组外,其他治疗组分别行针刺、中药、针药结合及西药三苯氧胺治疗。每日治疗1次,9次一疗程,治疗3个疗程(30天)。观察乳腺组织的形态变化,测定腺泡腔直径及面积,免疫组化检测雌激素受体亚型(ERα、ERβ)的表达。结果:模型组腺泡腔直径及面积均较正常组增大(均P<0.01);治疗组腺泡腔直径及面积均较模型组减小(P<0.05,P<0.01);针刺和中药可上调ERβ、下调ERα表达。结论:针刺和中药均对大鼠乳腺增生有抑制作用,针药结合的抑制作用最强,基本接近三苯氧胺水平,其治疗机制可能与上调ERβ、下调ERα表达有关。     

二仙汤及其核心组方仙茅-仙灵脾对乳腺增生症大鼠雌孕激素受体通路的影响

目的观察二仙汤及其核心组方仙茅-仙灵脾对乳腺增生症大鼠的治疗作用,并探讨可能机制。方法采用肌注苯甲酸雌二醇及黄体酮的方法制备乳腺增生症SD大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、他莫昔芬组、二仙汤中剂量组、二仙汤高剂量组、仙茅-仙灵脾中剂量组、仙茅-仙灵脾高剂量组,每组8只,给药28天。小动物超声测量乳头体积;酶联免疫吸附实验测定血清雌二醇(estradiol,E_2),孕酮(progesterone,P)水平;HE染色法观察乳腺组织病理改变;免疫组化法测定乳腺组织增殖细胞核相关抗原Ki-67表达;免疫蛋白印记法测定乳腺组织雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα),雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及类固醇受体辅助活化因子SRC-1及CBP/P300的表达。结果与模型组相比,各治疗组乳头体积均显著下降(P0.01);乳腺小叶及腺泡数量减少,分泌现象减弱,导管上皮复层缓解;各治疗组乳腺组织内增殖细胞核抗原Ki-67阳性细胞比例均显著下降(P0.01);血清雌、孕激素水平均无显著差异(P0.05)。免疫蛋白印迹法结果显示:与模型组相比,他莫昔芬组、二仙汤高剂量组、仙茅-仙灵脾中剂量组、仙茅-仙灵脾高剂量组乳腺组织ERα表达显著减少(P0.01);与模型组相比,二仙汤中剂量组、二仙汤高剂量组、仙茅-仙灵脾中剂量组、仙茅-仙灵脾高剂量组乳腺组织ERβ表达显著增多(P0.05);与模型组相比,各治疗组乳腺组织PR蛋白表达均显著减少(P0.05),各治疗组乳腺组织SRC-1表达均显著减少(P0.01);与模型组相比,他莫昔芬组、二仙汤高剂量组、仙茅-仙灵脾高剂量组乳腺组织CBP/P300表达显著减少(P0.01)。结论二仙汤及其核心组方仙茅-仙灵脾能通过调节乳腺组织雌、孕激素受体及受体辅助活化因子SRC-1、CBP/P300的表达,改善大鼠乳腺增生症病变状态。     

电针对产后抑郁大鼠脑组织ER表达的干预作用

目的:探讨产后抑郁(postpartum depression,PPD)模型大鼠前额叶皮质、海马、下丘脑雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达分布和变化规律以及电针对ER的影响。方法:选用雌性5～6月龄SD大鼠,随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组、西药组,每组均设2、4、6周观察时点。采用免疫组化法测定大鼠前额叶皮质、海马、下丘脑ERα与ERβ阳性细胞表达数。结果:模型组大鼠第2、4、6周前额皮质、海马、下丘脑ERα表达较正常组、假手术组减少,差异有统计学意义(P0.05);电针组、西药组第2、4、6周前额皮质、海马、下丘脑ERα表达均较模型组增加,差异有统计学意义(P0.05);模型组第2周前额皮质,第4、6周前额皮质、海马、下丘脑ERβ表达较正常组、假手术组减少,差异有统计学意义(P0.05),第2周海马、下丘脑ERβ表达较正常组、假手术组增加,差异有统计学意义(P0.05);电针组第6周前额叶皮质,第2、4、6周海马,第4、6周下丘脑,西药组第4、6周前额叶皮质,第2、4、6周海马,第4、6周下丘脑ERβ表达较模型组增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论:前额叶皮质、海马、下丘脑ERα与ERβ表达水平的改变可能是PPD模型大鼠PPD发生发展的生物学基础之一,电针对产后抑郁模型大鼠脑组织内ERα和ERβ表达量的调节可能是电针治疗PPD的重要作用机制之一。     

荔枝核皂苷对乳腺增生大鼠雌激素受体ERα、ERβ及ERK、VEGF表达的影响

目的:探讨荔枝核皂苷对乳腺增生大鼠雌激素受体ERα、ERβ及ERK通路的影响。方法:取未孕雌性SD大鼠,除留正常对照组8只外,其他动物均进行造模,成模动物随机分为模型组、荔枝核皂苷低剂量组(0.1 g/kg)、荔枝核皂苷高剂量组(0.2 g/kg)和他莫昔芬阳性对照组(4 mg/kg),每组8只。以上各组分别灌胃给药30 d后,采用免疫组化方法检测乳腺组织ERα、ERβ、细胞外信号调节激酶(ERK)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:与模型组比较,荔枝核皂苷高剂量组大鼠乳腺组织ERα、ERK、VEGF的表达显著降低(P0.05);低剂量组大鼠乳腺组织ERα、ERK的表达显著降低(P0.05)。结论:荔枝核皂苷可降低乳腺增生大鼠乳腺组织中ERα、ERK、VEGF的表达。     

凋膜止崩液宫腔靶向给药对ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1、TIMP-1、ER及亚型表达的影响

目的 探讨凋膜止崩液宫腔靶向给药治疗无排卵功血( ADUB)子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗ADUB提供一种新方法.方法 卵巢去势后利用雌激素负荷法建立ADUB子宫内膜增生症大鼠模型,凋膜止崩液宫腔内给药后处死,留取子宫标本,采用RT-PCR检测法测定各组大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因表达水平的变化;采用免疫组化技术检测各组大鼠子宫内膜组织中雌激素受体( estrogenreceptor,ER)、ERα、β亚型的表达变化.结果 ①模型对照组与空白组比较,MMP-1mRNA表达明显升高,TIMP-1 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).实验大、小剂量组与模型对照组比较,MMP-1 mRNA表达降低,TIMP-1 mRNA表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而大小剂量组间比较无显著性差异(P＞0.05).②模型对照组与空白组比较,ER、ERα、β表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).实验大、小剂量组与模型对照组比较,ER、ERα、β表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05),而实验大、小剂量组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论 凋膜止崩液宫腔靶向给药后ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1mRNA表达下降,TIMP-1 mRNA表达升高,ER、ERα、β表达下调,可能是其治疗子宫内膜增生症的机制.     

基于下丘脑-垂体-卵巢轴探讨藏药二十五味鬼臼丸对绝经后骨质疏松症大鼠的干预作用

目的基于下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamus-pituitary-ovary axis,HPOA)探讨藏药二十五味鬼臼丸对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法将40只SD雌性未孕大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、二十五味鬼臼丸组,每组10只。除假手术组仅摘取卵巢旁同样大小的脂肪块,其余3组大鼠均摘除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)大鼠模型。手术1周后开始给药处理,雌二醇组ig0.1mg/kg戊酸雌二醇,二十五味鬼臼丸组ig441mg/kg二十五味鬼臼丸,假手术组和模型组ig等体积蒸馏水,1次/d,连续12周后,ELISA法检测血清雌二醇、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)水平;RT-PCR检测下丘脑、垂体、左侧股骨远端雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)m RNA表达;免疫荧光染色法检测下丘脑、垂体和右侧股骨远端ERα、ERβ蛋白表达;HE染色法观察大鼠右侧股骨远端组织形态变化;Micro-CT检测右侧股骨远端微结构的改变。结果藏药二十五味鬼臼丸能显著降低大鼠体内血清LH、FSH、GnRH水平(P0.05、0.01),并在HPOA轴中显著性上调下丘脑及垂体ERαm RNA及蛋白表达(P0.01),同时显著性上调股骨ERβm RNA及蛋白表达(P0.01),并能显著回调大鼠股骨密度及骨微结构参数(P0.01)。结论藏药二十五味鬼臼丸可有效防治PMOP,其机制可能与药物直接作用骨组织雌激素受体或作用HPOA轴靶器官相关雌激素受体后,通过改变体内性激素的水平间接调控骨代谢有关。     

消瘀通络散对乳腺增生大鼠乳头高度、直径、E2、ER蛋白表达水平及病理组织形态的影响

目的:观察自拟消瘀通络散对乳腺增生大鼠乳头高度、直径、血清雌二醇(E2)、ER蛋白表达水平及病理组织形态的影响,探讨其治疗乳腺增生的作用机制.方法:将40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药组和西药组4组.采用乙烯雌酚联合黄体酮肌注的方法进行造模.中药组予自拟消瘀通络散50 mg/d,西药组予三苯氧胺1.8 mg/kg,均灌胃治疗,1次/d,共30 d.于治疗前后测量各组大鼠第2对乳头直径、高度,于治疗后测定血清E2水平,取大鼠第2对乳房常规HE染色,光镜下观察组织形态表现及ER蛋白表达水平.结果:治疗后乳头直径、高度比较:中药组和西药组均低于模型组(P＜0.05);两组之间比较,中药组低于西药组(P＜0.05).E2含量比较:中药组和西药组均低于模型组(P＜0.05),中药组和西药组比较差异无显著性(P＞0.05).ER蛋白表达水平比较:中药组和西药组均低于模型组(P＜0.05);中药组低于西药组(P＜0.05).病理学比较:中药组和西药组大鼠乳腺组织的病理表现相似,较模型组改善明显,与正常组相近.结论:自拟消瘀通络散具有缩小模型大鼠乳头直径、高度,降低血清中E2和改善ER蛋白表达水平、乳腺组织病理形态的作用.     

围刺配合电针对乳腺增生大鼠乳头大小、乳腺病理变化、血清性激素含量和雌激素受体表达的影响

目的:探讨围刺配合电针治疗乳腺增生的作用机制。方法:将40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组和药物组。采用己烯雌酚联合黄体酮肌肉注射的方法建立乳腺增生模型。针刺组在大鼠第2对左右乳房进行围刺后,电针30min,并针刺"膻中"穴,留针30min,1次/d,共治疗30d;药物组每日予以三苯氧胺(1.8mg/kg)灌胃。于治疗前,治疗10、20、30d测量各组大鼠第2对乳头高度、直径;于末次治疗后采用放射免疫法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)含量;取大鼠第2对乳房常规H.E.染色,光镜下观察组织形态表现;运用免疫组化法观察乳腺组织雌激素受体(ER)表达情况。结果:模型组乳头高度、直径均高于正常组(P<0.05),治疗后针刺组和药物组乳头高度、直径均低于模型组(P<0.05)。模型组E2、PRL、T含量明显高于正常组(P<0.05),针刺组和药物组E2、PRL、T含量均低于模型组(P<0.05);模型组P含量低于正常组(P<0.05),针刺组和药物组P含量高于模型组(P<0.05)。模型组与正常组乳腺组织形态比较,乳腺小叶、腺泡、腺导管数目明显较多,腺泡腔和腺导管明显扩张;针刺组和药物组与模型组比较,乳腺小叶、腺泡、腺导管数均减少,腺泡腔及腺导管萎缩。模型组乳腺组织ER阳性细胞表达与正常组相比明显增高(P<0.05),针刺组和药物组大鼠乳腺组织ER阳性细胞表达与模型组比较明显降低(P<0.05)。结论:围刺配合电针能够改善大鼠乳腺组织病理形态,其作用与调节血清性激素含量及降低乳腺组织ER表达有关。     

双金散结颗粒治疗乳腺增生的药效及物质基础

目的:利用乳腺增生SD大鼠模型及超高效液相色谱-高分辨质谱联用(UHPLC-LTQ-Orbitrap MS)技术探讨双金散结颗粒治疗乳腺增生的药效及物质基础。方法:将乳腺增生SD大鼠模型动物分组给药,测量乳头高度及直径,检测血清中雌二醇(E2),孕酮(P)及催乳素(PRL)含量,病理学检测乳腺组织增生情况,免疫组化检测雌激素受体α(ERα),雄激素受体(AR),孕酮受体(PR),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等蛋白表达,最后用UHPLC-LTQ-Orbitrap MS技术检测双金散结颗粒主要化学成分,与药效结合分析药效物质基础。结果:动物实验结果显示,与正常组比较,模型组乳头高度增加,直径增宽(P0. 01);血清E2显著升高(P0. 01);病理学检测表明乳腺组织异常增生;ERα,AR,PR,TNF-α蛋白表达增加(P0. 01);与模型组比较,双金散结颗粒组乳头高度降低,直径减小(P0. 01);血清E2显著下降(P0. 01);病理学检测表明乳腺组织异常增生减弱;ERα,AR,PR,TNF-α蛋白表达显著降低(P0. 01)。物质基础研究结果显示,从双金散结颗粒中共鉴定出85个化学成分,其中16种化学成分为生物碱类化合物,7种成分为黄酮类化合物,15种为萜类化合物,9种为酚酸类化合物,3种香豆素类化合物,10种酯类及内酯类化合物,7种脂肪酸类化合物,4种氨基酸类化合物和14种其他类成分,其中生物碱类及萜类成分可能与药效作用密切相关。结论:双金散结颗粒可有效改善乳腺增生病变情况,其药效物质基础可能是柴胡皂苷a,d;贝母素甲、乙等成分。     

乳康胶囊对乳腺增生大鼠激素及细胞凋亡水平的影响

目的:观察乳康胶囊对乳腺增生症(Hyperplasia of mammary gland,HMG)大鼠血清激素、细胞凋亡的影响及治疗作用。方法:采用注射苯甲酸雌二醇、黄体酮建立大鼠HMG模型,将造模成功的大鼠随机分为6组,即正常组、模型组、阳性药组和乳康胶囊低、中、高剂量组,给药30天后,测量各组大鼠同侧第2对乳头的高度及直径;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清雌二醇(Estradiol 2,E_2)、孕酮(Progesterone,P)和促乳素(Prolactin,PRL)的含量;用免疫组化法检测各组大鼠乳腺组织B淋巴细胞瘤相关蛋白质(B-cell lymphoma-associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠乳头直径、乳头高度增加(P 0.05);与模型组比较,各给药组乳房直径、乳头高度降低(P 0.05);血清E_2、PRL含量降低,P含量升高(P 0.05);乳康胶囊高剂量组乳腺组织Bax表达升高,Bcl-2表达降低(P 0.05);与阳性药组比较,乳康胶囊高剂量组乳房直径减小(P 0.05),乳康胶囊各剂量组E2、PRL、P含量及Bax、Bcl-2表达差异无统计学意义。结论:乳康胶囊能减轻HMG发展,其作用与降低大鼠血清E_2、PRL以及升高P含量有关,可能与通过调节Bax、Bcl-2途径促进细胞凋亡有关。     

乳康胶囊对乳腺增生大鼠乳腺组织及相关受体表达的影响

目的:观察乳康胶囊对大鼠乳腺增生组织及雌孕激素受体表达的影响。方法:48只雌性健康未孕大鼠,随机抽取8只作为正常对照组,其余40只大鼠采用注射苯甲酸雌二醇及黄体酮建立大鼠乳腺增生模型,将造模成功的大鼠随机分为5组,即模型组,阳性对照组,乳康胶囊小、中、大剂量组。各组大鼠给予相应药物干预后HE染色观察各组大鼠乳腺组织变化,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠乳腺组织血管内皮生长因子(VEGF)含量,采用免疫组化法测定各组大鼠乳腺组织血管内皮生长因子(VEGF)、乳腺雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PR)表达。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠乳腺组织中腺泡数目增多,腺泡和导管增生、扩张,细胞排列紊乱,表现出典型的乳腺增生症状,其乳腺组织VEGF、ERα和PR表达水平升高(P0.05);与模型组相比,乳康胶囊各剂量组大鼠乳腺增生小叶和腺泡数量减少,同时乳腺组织VEGF、ERα和PR表达降低。结论:乳康胶囊对大鼠乳腺增生具有抑制作用,其治疗机制可能与下调VEGF、ERα和PR的表达有关。     

武权生教授周期疗法对乳腺增生病模型大鼠ER、PR、ERK的影响

目的:探讨武权生教授周期疗法对乳腺增生病模型大鼠雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)表达的影响。方法:将90只大鼠随机分为空白组、模型组、逍遥丸组、三苯氧胺组及中药低、中、高剂量组,除空白组外其余各组均进行乳腺增生造模。造模成功后空白组和模型组给予生理盐水0.2 mL/(kg·d)灌胃,其余5组分别给予逍遥丸、三苯氧胺、中药(Ⅰ号方及Ⅱ号方低、中、高剂量)灌胃,共30天。结果:造模后,各造模组大鼠的乳头直径与空白组比较差异有统计学意义(P0.05)。灌服Ⅰ号方后各用药组大鼠乳头直径缩小,但仍大于空白组(P0.05)。灌服Ⅱ号方后大鼠的乳头直径进一步缩小,且小于模型组(P0.05),除中药高剂量组外其余各组乳头直径大于空白组(P0.05);各组ER、PR、ERK积分低于模型组(P0.05),中药高剂量组ERK积分低于三苯氧胺组(P0.05)。结论:武权生应用中药周期疗法可使乳腺增生模型大鼠增生乳头缩小,ER、PR、ERK积分降低。     

合募配穴对应激性胃溃疡大鼠下丘脑促性腺激素释放激素和P物质mRNA表达的影响

目的:探讨下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、P物质(SP) mRNA表达在合募配穴针刺防治应激性胃溃疡中的作用机制,并探讨合募配穴和单穴针刺的效应差异.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、捆绑组、中脘组、足三里组和合募配穴组,每组10只.利用捆绑加水浸应激法复制胃溃疡大鼠模型.足三里组取“足三里”穴针刺,中脘组取“中脘”穴针刺,合募配穴组取“足三里”加“中脘”穴针刺,每日1次,共治疗2次.利用RT-PCR技术观察针刺合募配穴对下丘脑GnRH mRNA、SP mRNA表达的影响.结果:捆绑组、模型组大鼠同正常组比较,溃疡指数显著升高(P＜0.01);中脘组、足三里组、合募配穴组同模型组比较,溃疡指数明显下降(P＜0.05,P＜0.01),且以合募配穴效果更佳.捆绑组、模型组大鼠同正常组比较,下丘脑组织GnRH mRNA表达显著增加(P＜0.05,P＜0.01);各针刺组和模型组相比,GnRHmRNA表达均显著下降(P＜0.01);各针刺组之间的差异无统计学意义(P＞0.05).捆绑组、模型组和正常组相比,下丘脑组织SP mRNA表达的差异无统计学意义(P＞0.05);足三里组、合募配穴组同模型组相比,SP mRNA表达显著增加(P＜0.01);合募配穴组表达的增加较足三里组更明显(P＜0.05).结论:针刺可能是通过抑制下丘脑GnRH mRNA的表达,促进下丘脑SP mRNA的表达来防治应激性胃溃疡的发生,合募配穴具有一定的特异性.