光化性角化病转化生长因子β1/Smads调控p53表达的研究

目的 通过光化性角化病(AK)皮肤组织块干扰模型探讨转化生长因子( TGF) β1/Smads对p53的调控作用.方法 培养人AK组织块,分为5个组,第1组对照组,第2组TGF β1培养24 h组,第3组SB431542培养24 h组,第4组TGFβ1培养48 h组,第5组SB431542培养48 h组,取材后实时PCR和Western印迹分别检测p53 mRNA和蛋白表达及Smad2磷酸化水平.结果 在TGFβ1培养24 h后,与对照相比,p53 mRNA表达增加(13.4968±0.9903,P＜ 0.05),Smad2磷酸化增多(0.700±0.023,P＜0.05);培养48 h后,p53 mRNA为13.3882±1.6772,蛋白为1.009±0.001,均增加(P＜0.05),Smad2磷酸化增多(0.646±0.120,P＜0.05);TGFβ1培养24 h和48 h相比,p53蛋白由0.634±0.040增加至1.009±0.001(P＜0.05);在SB431542培养24 h后,与对照相比Smad2磷酸化变化不明显,当SB431542培养48 h后,与对照相比Smad2磷酸化水平明显减少(0.116±0.003,P＜0.05),其余没有明显变化.结论 人AK皮肤组织块培养可作为一种信号通路的干扰模型,TGFβ1在AK中可通过Smads通路调控p53表达.     

黄芪甲苷对光老化小鼠皮肤中转化生长因子-β信号通路的影响北大核心CSCD

目的探讨黄芪甲苷对皮肤光老化的保护机制。方法BALB／c小鼠分为模型组、模型＋基质组、模型＋黄芪甲苷组、正常对照组。RT—PCR测定转化生长因子β受体Ⅱ（TGF—βRⅡ）、Smad7的mRNA表达水平,免疫组化观察TGF-βRⅡ、Smad7在小鼠皮肤组织中的蛋白表达情况。结果正常对照组中,TGF-βRⅡ、Smad7的灰度值比值分别为0．5688±0．0439、0．5900±0．0585,阳性表达率分别为（53．00±4．72）％、（47．50±3．81）％;模型组中,TGF-βRⅡ、Smad7的灰度值比值分别为0．2588±0．0283、0．8637±0．0514,阳性表达率分别为（28．20±5．24）％、（82．06±2．18）％;模型＋基质组中,TGF-βRⅡ、Smad7的灰度值比值分别为0．2653±0．0456、0．8553±0．0575,阳性表达率分别为（28．74±2．28）％、（82．62±4．02）％;模型＋黄芪甲苷组中TGF-βRⅡ、Smad7的灰度值比值分别为O．3767±0．0374、0．7131±0．0410,阳性表达率分别为：（41．64±2．59）％、（64．36±2．62）％。皮肤组织中TGF-βRⅡ和Smad灰度值比值4组小鼠间比较,F值分别为80．98和736．80,TGF-βRⅡ和Smad7的阳性表达率4组小鼠间比较,F值分别为45．36和132．25,P值均〈0．01。与正常对照组相比,模型组TGF-βRⅡmRNA和蛋白表达明显降低,Smad7mRNA和蛋白表达显著升高（P值均〈0．01）。与模型组和模型＋基质组比较,模型＋黄芪甲苷组TGF-βRⅡmRNA和蛋白表达明显升高,Smad7mRNA和蛋白表达显著下调（P值均〈0．01）。模型＋基质组TGF-βRⅡ、Smad7的mRNA和蛋白表达与模型组相比差异无统计学意义（P值均〉0．01）。结论黄芪甲苷可以通过上调TGF-βRⅡ表达和下调Smad7表达而改变TGF—β通路的信号转导参与抗光老化。     

TGF-β/Smad信号转导通路对紫外线致人工皮肤光损伤中MMP-1、pro—collagen Ⅰ mRNA表达影响的初步研究

目的探讨人工皮肤光损伤中TGF—β／Smad信号转导通路与基质金属蛋白酶1及Ⅰ型前胶原蛋白的相互作用。方法以紫外线照射人工皮肤后,通过Real—Time RT—PCR法（荧光染料掺入法）检测其中基质金属蛋白酶1、Ⅰ型前胶原蛋白、TGFβR I及TGFβRⅡmRNA的表达量.结果紫外线使人工皮肤中基质金属蛋白酶1（MMP-1）的mRNA表达量明显增加,而Ⅰ型前胶原蛋白mRNA的表达下调（P〈0．05）,TGFβRⅡmRNA表达显著下调（P〈0．01）;加入TGF—β1后MMP-1表达显著下调（P〈0．01）,Ⅰ型前胶原蛋白及TGFβRⅡ mRNA表达显著增高（P〈0．01）;而UV照射后8小时加入TGF—β1,MMP—1表达量较对照组高（P〈0．05）,Ⅰ型前胶原蛋白及TGFβRⅡ mRNA表达量均较对照组低（P〈0．05）。结论UV可以抑制人工皮肤中Ⅰ型前胶原mRNA的表达、上调MMP-1的表达,而这种调控作用可能与TGF-βR Ⅱ的表达受抑制,TGF-β／Smad信号传导通路被削弱有关。     

血管生成素抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白表达的研究

目的 探讨血管生成素抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白表达的作用及可能机制。方法 分离培养雄激素性秃发区毛乳头细胞,实时定量荧光PCR检测雄激素受体mRNA在不同传代次数毛乳头细胞中的相对表达量,CCK8法检测0、10、20、40、80、160 μg/L血管生成素对含或不含0.1 nmol/L二氢睾酮培养基培养的毛乳头细胞增殖的影响。取生长融合的第1代毛乳头细胞传代后分为3组：对照组（不用二氢睾酮或血管生成素处理）、0.1 nmol/L二氢睾酮组、0.1 nmol/L二氢睾酮 + 80 μg/L血管生成素组。作用48 h后,用实时荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原基因、纤维连接蛋白和转化生长因子β1（TGF?β1）mRNA的表达,Western印迹检测Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、TGF?β1、p?Smad2和p?Smad3蛋白的表达。实验数据采用单因素方差分析、LSD检验和独立样本t检验进行分析。结果 体外培养的雄激素性秃发区毛乳头细胞随着传代次数增加,雄激素受体mRNA相对表达量明显降低（P < 0.05）。细胞增殖实验发现,20 ~ 160 μg/L血管生成素明显拮抗0.1 nmol/L二氢睾酮对毛乳头细胞增殖的抑制作用（均P < 0.05）。与对照组相比,二氢睾酮组Ⅰ型胶原基因、纤维连接蛋白和TGF?β1 mRNA显著升高,但二氢睾酮 + 血管生成素组较二氢睾酮组Ⅰ型胶原基因mRNA（1.563 ± 0.143比4.329 ± 0.165）、纤维连接蛋白mRNA（1.290 ± 0.063比2.156 ± 0.115）和TGF?β1 mRNA（1.136 ± 0.098比1.707 ± 0.100）显著降低（均P < 0.05）。而且,血管生成素还能明显抑制由二氢睾酮诱导的毛乳头细胞中Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、TGF?β1、p?Smad2和p?Smad3蛋白的表达（均P < 0.05）。结论 血管生成素在体外能够抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中细胞外基质成分Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白的表达,其机制可能与其下调TGF?β1表达及抑制TGF?β1/Smad信号通路的活化有关。     

人参皂苷Rb1对紫外线损伤的保护作用及其机制研究北大核心CSCD

目的观察人参皂苷Rb1对中波紫外线（UVB）照射诱导小鼠表皮细胞、培养的HaCaT细胞产生与清除环丁烷嘧啶二聚体（CPD）的影响及对核苷酸切除修复蛋白XPC、ERCC1表达的影响。方法42只去毛BALB／c小鼠分为4组：未处理组（6只）,UVB组（12只）,UVB＋小剂量Rb1组（12只）,UVB＋大剂量Rb1组（12只）。后2组照射前2h在背部按100μl／cm2分别外用含0．5g／L、2g／L人参皂苷Rb1的丙酮溶液,而前2组予以相应丙酮溶液。UVB剂量均为180mJ／cm2,于照射后0．5、16h分别处死半数小鼠,利用免疫组化法检测表皮CPD水平。培养的HaCaT细胞用含人参皂苷Rb1（5、20、50mg／L）的培养基孵育4h,部分细胞于UVB照射（15、30mJ／cm2）后0．5、12h终止培养并提取基因组DNA,通过斑点杂交法检测CPD。其余细胞照射（30mJ／cm2）后0、0.5、2、4、12h终止培养,提取细胞总蛋白,通过免疫印迹法分析XPC、ERCC1蛋白的表达。结果UVB照射小鼠0．5h后,各照光组表皮均产生大量CPD,但组间差异无统计学意义;在照射后16h,UVB＋小剂量Rb1组、UVB＋大剂量Rb1组表皮CPD分别为32．1±8．5、14．6±4．1,均较UVB组（67．3±11.2）显著减少,且大剂量组更为明显（P值均〈0．01）。HaCaT细胞在UVB照射后0．5h,各组CPD总量差异无统计学意义,但照射后12h,给药组CPD水平明显降低。UVB组HaCaT细胞XPC、ERCC1蛋白的表达均随着时间延长不断下降,在照射后即刻、0．5、2、4、12h,XPC／GAPDH蛋白灰度比值分别为0．68±0．11、0．47±0．09（与照射后即刻比较,P〈0．05,下同）、0．45±0．08（P〈0．05）、0．37±0．06（P〈0．01）、0．18±0．03（e〈0．01）,ERCC1／GAPDH分别为0．28±0．03、0．25±0．03（P〉0．05）、0．21±0．02（P〈0．05）、0．14±0．02（P〈0．01）、0．11±0．01（P〈0．01）;加入50mg／L Rb1干预后,XPC、ERCC1蛋白的表达不断增加,XPC／GAPDH分男别为0．56±0．07、0．48±0．14、0．68±0．15、0．97±0．20（P〈0．01）、0．79±0．12（P〈0．05）,ERCC1／GAPDH分别为0．27±0．04、0．24±0．04、0．29±0．05、0．35±0．05（P〈0．05）、0．39±0．05（P〈0．01）。结论人参皂苷Rb1对UVB诱导的CPD的产生无明显影响,但可显著加速其清除,这可能与其上调XPC、ERCC1蛋白的表达有关。     

动脉血气分析对早期脓毒性休克的评价意义：对经过盲肠结扎剪切建立的大鼠模型的观察

目的探讨动脉血气分析对早期脓毒性休克的评价意义。方法30只SD大鼠随机分成2组：假实验组（6只）,接受假手术;肓肠结扎剪切（CLI）组（24只）,接受CLI以建立早期脓毒性休克模型。分别在术后第12h和第24h测量其动脉血气分析,然后处死大鼠,切开腹腔进行病理学观察。结果术后第12hCLI组大鼠pH值为（7．25±0．07）,碱剩余（BE值）为（-3．63±3．18）mEq／L,均显著低于假实验组[（7．39±0．03）和（1．33±1．21）mEq／L,均P〈0．05）];乳酸值为（2．28±0．54）mmol／L,显著高于假实验组[（1．05±0．21）mmol／L,P〈0．05]。CLI组第24h的pH值为（7．18±0．06）,显著低于第12h（P〈0．05）;乳酸值为（2．88±0．7）mmol／L,显著高于第12h（P〈0．05）;而第24h的BE值与第12h相比,尤显著性差异（P〉0．05）。结论肓肠结扎剪切方式能有效地建立脓毒性休克模型,动脉血气分析能客观地反映组织气体交换和酸碱状况,并对早期脓毒性休克进行及时的评价。     

强脉冲光对皮肤成纤维细胞 TGF-β／Smads信号传导通路表达的影响

目的：探讨强脉冲光对皮肤成纤维细胞TGF-β／Smads信号传导通路表达的影响。方法：将原代培养人正常皮肤成纤维细胞分为2组,即强脉冲光（ IPL）照射组和未用 IPL照射的对照组。采用Western blot和RT-PCR法分别检测2组细胞的TGFβ受体Ⅱ、Smad4、Smad7蛋白和mRNA水平,并比较两组的差异性。结果：IPL照射后皮肤成纤维细胞的TGFβ受体Ⅱ、Smad4蛋白和mRNA表达水平均升高,Smad7蛋白和mRNA表达水平降低,与对照组比较差异均有统计学意义（ P值均＜0.05）。结论：IPL照射人皮肤成纤维细胞后,TGF-β／Smads信号传导通路活性增强,其在IPL非剥脱性嫩肤机制中占有重要地位。     

银屑病患者皮损间充质干细胞对T细胞增殖的抑制能力减弱北大核心CSCD

目的探讨银屑病患者皮损间充质干细胞（MSC）对T淋巴细胞增殖的抑制能力。方法寻常性银屑病患者15例,进行期7例,静止期8例。健康对照组15例,取自我院泌尿外科和整形外科手术切除的正常皮肤。分离、培养患者皮损与健康人皮肤MSC,流式细胞仪及多向分化法进行细胞鉴定;将第3代皮肤MSC与健康人外周血T细胞共培养,用细胞计数法及MTI＂法观察其对T细胞增殖的影响;ELISA法检测皮肤MSC培养上清液中白介素6（IL-6）、白介素11（IL-11）、肝细胞生长因子（HGF）和转化生长因子B1（TGF—p1）的浓度。患者组和对照组T淋巴细胞增殖比较采用单因素方差分析及SNK检验,细胞因子水平比较采用两独立样本均数比较的t检验。结果倒置显微镜下,银屑病组与健康对照组皮肤MSC的细胞形态和多向分化能力相似,细胞表面均表达CD29、CD44、CD73、CD90、CDl05,而CD34、CD45及HLA—DR表达阴性。健康人外周血T细胞与银屑病患者及健康对照皮肤MSC共培养,T淋巴细胞计数健康对照组为（1．044-0．29）×105／ml,银屑病患者组为（1．674-0．34）X105／ml,两组比较,P〈0．01;M1Tr检测细胞增殖结果（A值）分别为0．275±0．007和0．317±0．021,两组比较,P〈0．01。培养上清液中,患者组MSC分泌IL-11水平（181．37±31．74ng／L高于健康对照组（130．07±29．20ng／L）,两组比较,t=5．32,P〈0．01;患者组MSC分泌IL-6（61．67±17．53ng／L）和HGF（319．24±41．03ng／L）水平低于健康对照组（分别为76．74±18．96ng／L和352．35±51．47ng／L）,两组比较,t值分别为2．61和2．25,均P〈0．05）;TGF—β1两组差异无统计学意义。结论银屑病患者皮损MSC对T细胞增殖的抑制能力减弱,可能是银屑病的发病机制之-。     

烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系产生肿瘤坏死因子α、活化信号分子p38丝裂原活化蛋白激酶的影响

目的 探讨烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子α（TNF-α）和细胞内信号分子p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激活的影响。方法 106、107 CFU/ml烟曲霉悬液（106和107 CFU/ml烟曲霉组）、100 mg/L阳性刺激物β-葡聚糖（β-葡聚糖组）及培养基（空白对照组）分别与2 × 105/ml THP-1细胞共孵育1、3、6 h,实时荧光定量PCR分析各组THP-1细胞TNF-α mRNA表达水平。107 CFU/ml烟曲霉悬液（烟曲霉组）、β-葡聚糖（β-葡聚糖组）及培养基分别作用THP-1细胞24 h,酶联免疫吸附法检测各组培养上清液中TNF-α含量。Western印迹法检测107 CFU/ml烟曲霉体外作用THP-1细胞后15、30、60 min p38MAPK和磷酸化p38MAPK水平。采用20 μmol/L SB203580预先与THP-1细胞共培养2 h后,再用107 CFU/ml烟曲霉、β-葡聚糖或培养基作用6 h,检测各组THP-1细胞TNF-α mRNA表达水平变化。结果 106、107 CFU/ml烟曲霉组、100 mg/L β-葡聚糖组及空白对照组TNF-α mRNA表达水平差异有统计学意义（F = 110.983,P < 0.001）,且随培养时间延长,THP-1细胞TNF-α mRNA水平增高（F = 701.680,P < 0.001）。107 CFU/ml烟曲霉刺激THP-1细胞24 h后,TNF-α蛋白水平（6 236.30 ± 437.12 ng/L）较空白对照组（132.10 ± 0.61 ng/L）明显升高（P < 0.01）。107 CFU/ml烟曲霉作用THP-1细胞30 min后磷酸化p38MAPK蛋白水平明显升高,60 min时开始减弱。SB203580阻断的烟曲霉组TNF-α mRNA表达水平（3.83 ± 0.62）较未阻断的烟曲霉组（187.23 ± 21.62）明显降低。结论 人THP-1细胞体外与烟曲霉作用后激活信号分子p38MAPK并分泌TNF-α,表明单核细胞可能参与抗烟曲霉感染固有免疫反应。     

尖锐湿疣中转化生长因子β受体、受体活化Smad和共有Smad的表达

目的 探讨尖锐湿疣中转化生长因子β（TGF-β）信号转导途径TGFβ受体（TGFβR）、受体活化Smad和共有Smad蛋白的表达情况。方法 采用EliVisionTMplus免疫组织化学技术分别检测20例尖锐湿疣和15例正常人对照皮肤中TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）和Smad4的表达。结果 TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4在对照正常人皮肤的表皮中均有表达。尖锐湿疣表皮中TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4的免疫组化染色强度均明显低于对照正常人皮肤的表皮（P < 0.05或P < 0.01）。结论 尖锐湿疣表皮中存在着TGFβR、受体活化Smad和共有Smad蛋白的表达下调或缺失，可干扰TGFβ信号向下游的转导。失去TGFβ抑制作用的表皮角质形成细胞可出现异常增殖，导致尖锐湿疣表皮过度增殖病理改变的形成。     

血清S100蛋白质、神经元特异性烯醇化酶在判断心肺复苏后脑损伤严重程度中的意义

目的探讨心搏骤停（CA）患者心肺复苏（CPR）后血清S100蛋白质、神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平在判断心肺复苏后脑损伤严重程度中的临床价值。方法28例心搏骤停（CA）后CPR成功的患者按格拉斯哥预后评分（GOS）分为A组（19例,GOS1-2分）和B组（9例,GOS3-5分）。健康志愿者12例为对照组（C组）。自主循环恢复（ROSC）后2、12、24、48、和72h测定血清S100蛋白质、NSE水平,入ICU后24h内完成急性生理及慢性健康评价（APACHE）Ⅱ和APACHEⅢ评分,计算存活概率（Ps）。分析ROSC时间与各时间点S100、NSE水平是否相关。结果A组的心搏骤停至复苏开始时间,开始通气时间,ROSC时间,机械通气时间均显著长于B组（均P〈0．05）,A组的APACHEⅡ、APACHEⅢ评分显著高于B组（均P〈0．01）,而Ps显著低于B组CP〈0．01）;A组的ROSC后2、12、24、48、72h血清S100水平显著高于B组、C组（均P〈0．05）;B组在72h时点的S100水平与C组无显著性差异（P〉0．05）;A组的ROSC后12、24、48、72h血清NSE水平均显著高于B组和C组（均P〈0．05）,ROSC后2h时A组和B组的S100水平并无显著差异（P〉0．05）,但均显著高于C组（均P〈0．05）。B组在ROSC后24h内NSE水平均显著高于C组（均P〈0．05）。所有患者的ROSC后2、12hS100水平与ROSC时间均呈显著正相关（均P〈0．051,而12、24、48h时患者血清NSE水平与ROSC时间均呈显著正相关（均P〈0．05）。结论血清S100、NSE可以作为判断CPR后缺氧性脑损伤严重程度的生化标志物,且S100可能更为敏感。     

脓毒性休克大量晶体液复苏与腹腔间隔室综合征的关系

目的探讨脓毒性休克患者大量输注晶体液与并发腹腔间隔室综合征（ACS）的关系。方法50例脓毒性休克患者,男36例,女14例;平均年龄（48．20±13．62）岁,接受晶体液输注,发病48h内晶体液入量〉15L组19例,〈15L组31例。50例中13例并发腹腔高压（IAH）但没有达到腹腔问隔室综合征（ACS）的标准,8例并发ACS,余29例作为对照组。分析休克后48h内晶体液输入量与IAH（包含ACS）发病率的关系。结果休克后48h内晶体液输入量ACS组为（11．77±3．68）L,显著高于IAH组[（8．25±2．43）L,t=2．68,P〈0．05]和对照[（5．59±2．71）L,t=-2．75,P〈0．05]。而IAH组的48h内品体液输入量亦显著高于对照组（t=2．62,P〈0．05）。晶体液入量〉15L组的IAH（包含ACS）发病率为68．42％（13／19）,显著高于晶体液入量〈15L组（25．81％,8／31,P〈0．05）。结论大量晶体液的输入与脓毒性休克患者并发LAH与ACS呈正相关。     

窄谱中波紫外线对HaCaT细胞增殖及Gadd45α表达的影响北大核心CSCD

目的探讨窄谱中波紫外线（NB-UYB）对HaCaT细胞表达Gadd45α及对细胞增殖、周期的影响。方法分别以100、200、400mJ／cm^2NB-UVB照射HaCaT细胞后,于6、12、24h收集细胞,采用RT-PCR和Western印迹检测Gadd45amRNA和蛋白水平的变化;CCK8法检测照射后对HaCaT细胞增殖的影响;流式细胞术检测照射后对HaCaT细胞周期的影响。结果HaCaT细胞表达Gadd45α,分别经100、200、400mJ／cm^2NB-UVB照射后,Gadd45α mRNA及蛋白表达水平均在6h升高,12h升高明显,24h表达下降,与未照射组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。三个剂量组照射后12h,Gadd45α mRNA相对A值分别为1．4360±0．6551、1．8633±0．0979、1．9266±0．1724,均高于对照组（0．6000±0．1276）（P〈0．05）;Gadd45α蛋白A值分别为0．0773±0．0005、0．1936±0．0015、0．2373±0．0015,较对照组（0．0290±0．0010）增高（P〈0．05）。NB-UVB照射对HaCaT细胞有抑制作用,其抑制增殖作用呈量效及时效关系;三组照射后HaCaT细胞周期发生改变,G2期细胞比例依次为13．53±1．03、17．77±2．25、30．03±4．29,较对照组（9．24±0．97）显著增高（P〈0．05）,细胞周期被阻滞于G2期。结论NB-UVB照射后HaCaT细胞上调Gadd45α表达;Gadd45α可能参与了紫外线照射后HaCaT细胞增殖抑制、周期阻滞过程。     

口服补液对失血性休克犬肺组织含水量和血管通透性的影响

目的研究口服补液对失血性休克犬肺组织含水量和血管通透性的影响。方法成年Beagle犬20只,先期无菌手术行颈动、静脉置管,24h后按全身血容量的40％放血制作失血性休克模型。随机分为不补液组（n=8）、口服补液组（n=6）和静脉补液组（n=6）。失血后第1个24hTF补液组无治疗,口服补液组和静脉补液组分别从胃内或静脉输入3倍失血量的葡萄糖一电解质溶液。失血后24h起3组均给予静脉补液。于失血前和失血后第2、4、8、24、48和72小时测定动物非麻醉状态下的平均动脉压（MAP）、动脉氧分压（PaO2）、血管外肺水指数（ELWI）和肺血管通透性指数（PVPI）,于失血后72h或濒死前处死动物,测定肺组织含水率。结果不补液组失血后72h死亡率为5／8（62．5％）,口服补液组为2／6（33．3％）,静脉补液组为0。不补液组ELWI和PVP失血后8h分别比失血前增加31．4％和78．8％,PaO2降低22．4％。口服补液组失血后8h ELWI[（148．4±10．3）m1]和PVPI（4．7±0．4）显著低于不补液组[（168．8±12．1）ml]和[（5．9±0．6）ml,P〈0．05],但高于静脉补液组[（132．1±8．0）ml和（4．7±0．5）ml,均P〈0．05]。口服补液组PaO2[（102．5±3．0）mmHg],显著高于不补液组[（86．3±2．9）mmHg,P〈0．05）],与静脉补液组[（99．9±3．2）mmHg]无显著差别。肺组织含水率在口服补液组与静脉补液组之间无统计学差别[（78．3±1．19）％vs．（76．8±0．91）％,P〉0．05）],但均显著低于不补液组[（80．6±0．68）％,P〈0．05]。结论早期口服补液对肺的保护作用虽然不如静脉补液,但与不补液组相比,能显著改善失血性休克期肺血管通透性和肺水肿,减轻肺脏并发症。     

急性肺损伤对大鼠肺表面活性物质蛋白C合成的影响

目的探讨急性肺损伤对肺泡Ⅱ型上皮细胞合成肺表面活性物质蛋白C（SP—C）蛋白的影响。方法48只SD大鼠腹腔注射内毒素-脂多糖（LPS，5mg／kg）建立急性肺损伤（AU）模型，对照组48只注射等量生理盐水。LPS注射12、24、36、48h后处死大鼠，以光学显微镜观察肺组织病理变化，测量肺系数及支气管-肺泡灌洗液（BALF）总蛋白质变化，采用Western印迹、流式细胞术（FCM）检测肺组织SP—C蛋白质的表达情况。结果ALI组光镜观察可见肺泡间隔增宽，肺泡腔出现渗出物，部分肺泡萎陷。肺系数及总蛋白检测结果显示ALI各组与对照组相比差异均有统计学意义。Western印迹检测发现ALI组SP-C蛋白质相对表达量均较相应对照组降低，36h、48h组差异有统计学意义（P〈0．05）。FCM检测结果显示ALI36h、48h组SP—C含量分别为0．79±0．10、0．67±0．09，明显低于相应对照组的0．96±0．11、0．97±0．13（P〈0．05）。结论急性肺损伤导致肺组织SP—C合成减少。     

绞股蓝皂苷对光损伤小鼠皮肤中核因子κB、p38MAPK的影响北大核心CSCD

目的观察绞股蓝皂苷（GP）对光损伤Balb／C小鼠皮肤中核转录因子kappa—B（NF—KB）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）的影响,进一步探讨GP抗皮肤光损伤的可能机制。方法将80只雌性Balb／C小鼠随机分为8组,每组10只。①空白对照组：不做任何处理;@uvB模型组：UVB照射60S;③GP乳膏I组;@GP乳膏Ⅱ组;⑤维生素E乳膏I组;⑥维生素E乳膏Ⅱ组;⑦基质I组;⑧基质Ⅱ组。I组均先外涂相应的乳膏或基质,30min后照射UVB60s;1／组均先用UVB照射60S,30min后外涂相应的乳膏或基质。采用隔日UVB照射7次Balb／C小鼠建立皮肤光损伤动物模型,应用Western印迹法检测小鼠皮肤中NF—KB抑制蛋白（IKB蛋白）、KB抑制蛋白激酶（IKK蛋白）及p38MAPK、磷酸化p38MAPK（pp38）的表达。结果空白对照组小鼠表皮中IKB、IKK蛋白未见表达。UVB模型组小鼠表皮中IKB蛋白水平为0．40±0．07,IKK蛋白为2．01±1．75。GP乳膏I组与Ⅱ组IKB蛋白表达（分别为1．63±0．85和0．90±0．40）明显高于UVB模型组（P值均〈0．05）,IKK蛋白表达（分别为0．23±0．12和0．45±0．29）明显低于UVB模型组（P值均〈0．05）,与维生素E组小鼠皮肤中IKB蛋白、IKK蛋白的表达结果相似。各组p38MAPK表达量没有明显差异。GP乳膏I组与Ⅱ组磷酸化p38MAPK表达水平（分别为0．425±0．054和0．571±0．090）明显低于UVB模型组（0．835±0．049）,与维生素E组相似。结论UVB照射能促使NF-KB活化,激活磷酸化p38MAPK;1．5％GP乳膏能抑制UVB诱导的NF—KB通路及p38MAPK的激活,可能是其抗炎、抗光损伤的作用机理之一。     

集束化治疗策略救治MODS患者的临床效果评价

目的研究ICU集束化治疗在多器官功能障碍综合征（MODS）患者救治中的效果，探讨MODS的有效救治方法。方法回顾分析71例MODS患者的临床资料，根据治疗手段将其分为集束化治疗组（B组）与常规治疗组（A组），以MODS患者住院病死率、机械通气时间、ICU治疗时间、院内感染发生率为观察指标，探讨集束化治疗对MODS患者的临床效果，及其对MODS患者转归的影响。结果B组住院病死率37．21％，明显低于A组（53．57％，P〈0．05）；A组住院病死率与该组的死亡风险率[（56．39±18．51）％]差异无统计学意义（P〉0．05），而B组住院病死率低于该组的预计死亡风险率（49．42±21．10，P〈0．05）；B组患者院内感染发生率为19．43％，明显低于较A组（26．23％，P〈0．05）：B组患者ICU治疗时间为（16．30±6．24）d，与A组差异无统计学意义[（15．32±7．57）d，P〉0．05]；而B组患者机械通气时间为（71．88±61．4）h，显著低于A组[（147．06±111．83）h,P〈0．05]。结论MODS的集束化治疗较常规的治疗方法临床疗效更佳，对改善MODS预后有重要意义。     

热处理对体外人黑素细胞及HaCaT细胞分泌a黑素细胞刺激素的影响北大核心CSCD

目的探讨热处理后体外培养的人表皮黑素细胞和人角质形成细胞（HaCaT细胞）分泌d黑素细胞刺激素（a-MSH）的变化。方法将体外培养的黑素细胞及HaCaT细胞分别给予热处理（42℃,每天60min,连续3d）,实时荧光定量PCR法（RT—PCR）及酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测两种细胞分泌的a-MSH的变化。结果黑素细胞热处理组（1．5862±0．3262）与对照组（1．0000±0．2715）相比,Ⅱ-MSHmRNA表达均明显增加（P〈0．05）;HaCaT细胞热处理组（1．8013±0．1216）与对照组（1．0000±0．2532）相比,mRNA水平也有明显增加（P〈0．05）。ELISA结果：黑素细胞热处理组（0．3142±0．0469）蛋白表达水平明显高于对照组（0．2557±0．0330,P〈0．05）;HaCaT细胞热处理组（0．4632±0．0345）蛋白水平也明显高于对照组（0．4389±0．0399,P〈0．05）。结论热处理可促进人黑素细胞及HaCaT细胞d—MSH分泌。     

乌司他丁在保护心肺复苏患者重要脏器中的意义：131例临床分析

目的研究乌司他丁在保护接受心肺复苏患者的重要脏器中的作用。方法131例CPR患者随机分为3组：A组（n=41）,在开始心肺复苏同时开始应用乌司他丁（20万单位溶于20ml生理盐水中静脉注射,1次／12h,共8次）;B组（n=46）,心搏恢复后立即开始应用乌司他丁（20万单位溶于20ml生理盐水中静脉注射,1次／12h,共9次）;C组（n=44）,在心肺复苏时和以后均不用乌司他丁。观察各组的存活率,住院时间,全身炎症综合征（SIRS）发生率。存活≥24h的患者于24h抽取外周血测定白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、肌酸激酶（CK）,天门冬氨酸转氨酶（AST）,丙氨酸转氨酶（ALT）和肌酐（Cr）。30例正常人作为对照组,检查血液内的上述因子水平。结果3组患者外周血IL-6、TNF—α的水平均高于对照组（均P〈0．05）。A组患者IL-6、TNF-α的水平,以及CK、AST、AIJrr、和Cr值均明显低于B,C组（均P〈0．05）,B组的上述指标亦显著低于C组（均P〈0．05）。A组的SIRS发生率为33％,显著低于B和C组（47％和68％,均P〈0．05）,A组的住院时间为（10．60±6．67）d,显著短于B和C组f（15．62±9．47）d和（2t．33±9．77）d,均P〈0．05）,A组患者的24h后死亡率为12％,显著低于B和C组（28％和47％,均P〈0．05）;B组的上述指标亦均显著低于C组（均P〈0．05）。24h内死亡率在3组之间无显著性差异（均P〉0．05）。结论乌司他丁能有效地抑制CPR时机体炎症反应并保护患者重要脏器的功能,提高心肺复苏的成功率,尤其是在心肺复苏时同时应用乌司他丁时。     

紫外线对光化性角化病和正常皮肤p53、基质金属蛋白酶2、9表达的影响

目的 探讨不同剂量紫外线对光化性角化病（AK）与正常皮肤组织中增殖与凋亡、及p53、基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP9表达的影响。方法 AK与正常皮肤组织分别分为4个组,对照组（照射剂量为0 J/cm2）、5 J/cm2组、10 J/cm2组、20 J/cm2组。每块组织连续照射4 d,继续培养24 h后取材。TUNEL检测细胞凋亡、Ki-67检测细胞增殖情况,定量PCR及免疫组化法检测p53、MMP2及MMP9表达。 结果 紫外线照射后,与对照组相比,凋亡细胞百分比在正常皮肤组织 10、20 J/cm2组（46.8 ± 2.1,56.7 ± 2.4）增加,在AK 20 J/cm2（43.5 ± 1.5）组增加,正常皮肤组织10、20 J/cm2组比AK同剂量组增加（P < 0.05）;Ki-67阳性细胞百分比在正常皮肤组织20 J/cm2组（3.34 ± 0.76）表达减少（P < 0.05）,在AK中无明显变化（P > 0.05）;p53 mRNA（5 J/cm2：1.106 ± 0.025;10 J/cm2：1.259 ± 0.045;20 J/cm2：1.425 ± 0.053）及蛋白（10 J/cm2：0.1169 ± 0.0032;20 J/cm2：0.1454 ± 0.0047）在正常皮肤组织中表达增加,在AK中,mRNA（10 J/cm2：0.611 ± 0.050;20 J/cm2：0.578 ± 0.070）及蛋白（20 J/cm2：0.0404 ± 0.0027）表达减少（P < 0.05）;正常皮肤组织中MMP2 mRNA及蛋白（10 J/cm2：1.086 ± 0.013,0.0843 ± 0.0024;20 J/cm2：1.417 ± 0.036,0.1236 ± 0.0042）、MMP9 mRNA及蛋白（20 J/cm2：1.395 ± 0.026,0.3065 ± 0.0162）表达增加,AK中MMP2 mRNA及蛋白（20 J/cm2：1.296 ± 0.028,0.0744 ± 0.0032）、MMP9 mRNA及蛋白（10 J/cm2：1.298 ± 0.035,0.0992 ± 0.0053;20 J/cm2：1.286 ± 0.032,0.1010 ± 0.0063）表达增加（P < 0.05）。结论 紫外线促进AK进展可能与其下调p53表达,上调MMP2和MMP9有关。