Th17细胞在骨髓增生异常综合征骨髓组织中的表达及意义

目的了解骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓Th17细胞、调节性T细胞(Treg)的表达量,以探讨MDS的免疫学机制。方法流式细胞术检测65例MDS患者和18例健康对照骨髓细胞Th17细胞及Treg细胞表达量。ELISA方法分析骨髓血浆细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平。结果 MDS患者骨髓Th17细胞及Treg细胞数量均高于健康对照组(P均<0.01)。在MDS亚型中Th17细胞及Treg细胞数量从RA/RAS、RAEB-Ⅰ到RAEB-Ⅱ逐渐增高(P均<0.05)。骨髓细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平较对照组显著增高(P均<0.01),在MDS亚型中细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平从RA/RAS、RAEB-Ⅰ到RAEB-Ⅱ也逐渐增高(P均<0.05)。结论 MDS骨髓微环境中Th17细胞、Treg细胞表达量均增多,可能促进了MDS病程进展。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用

目的本研究通过检测骨髓增生异常综合征-难治性贫血(MDS-RA)及难治性贫血伴原始细胞增多(MDS-RAEB)患者骨髓间充质干细胞(MSC)转化生长因子(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)的表达,探讨MSC的免疫抑制作用在MDS发病中的意义。方法分离、培养23例MDS患者(MDS-RA组14例,MDS-RAEB组9例)及对照组12例的骨髓间充质干细胞,比较3组MSC的形态,采用实时定量PCR的方法检测骨髓MSC内转化生长因子(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)mRNA的表达水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测骨髓MSC分泌的TGF-β1、HGF的浓度。结果 3组MSC的形态无明显差异,MDS-RA组和MDS-RAEB组MSC表达和分泌TGF-β1、HGF水平明显低于对照组(P均<0.05),MDS-RA组和MDS-RAEB组MSC表达和分泌TGF-β1、HGF无明显差异(P均>0.05)。结论 MDS-RA与MDS-RAEB表达TGF-β1、HGF mRNA的水平及分泌TGF-β1、HGF的浓度水平均较正常减低,导致MSC免疫抑制能力减低,可能与MDS免疫监视低下,出现异常单克隆造血相关。     

AXL基因在骨髓增生异常综合征外周血单个核细胞中的表达

目的 探讨AXL基因在正常人、骨髓增生异常综合征(MDS)及其他血液病患者外周血单个核细胞中的表达情况。方法 采用RT—PCR法。结果 ①AXL基因在10例正常人外周血单个核细胞中不表达，正常骨髓单个核细胞中有表达。②50例MDS患者的外周血单个核细胞中有41例(82％)A)比基因阳性。FAB亚型与AXL表达关系：35例难治性贫血(RA)者中27例阳性，3例环形铁粒幼细胞性难治性贫血(RAS)阳性；9例难治性贫血伴过多母细胞(RAEB)者中8例阳性，3例难治性贫血伴过多母细胞伴有转化(RAEB-T)患者均阳性。6例实验时临床不能确诊为MDS者AXL基因阳性，经随访骨髓转为MDS；3例骨髓疑为MDS或诊为MDS者AXL基因阴性，经随访确诊为其他疾病。②12例再生障碍性贫血(AA)、1例缺铁性贫血(IA)、1例溶血性贫血、2例夜间阵发性血红蛋白尿(PNH)、3例特发性血小板减少性紫瘸(ITP)患者的A)比均阴性。结论 AXL基因在MDS外周血中有较高表达。     

髓源性抑制细胞在骨髓增生异常综合征中的表达

目的 探讨不同危险度分层骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓血髓源性抑制细胞(MDSCs)、外周血T淋巴细胞各亚群及相关免疫抑制因子的表达变化,阐明其在MDS疾病进展中的作用。方法 应用流式细胞术检测60例初治MDS患者(MDS组)和20例缺铁性贫血患者(对照组)骨髓血MDSCs,外周血CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、颗粒酶B及调节性T细胞(Tregs)的表达水平,ELISA法检测免疫抑制因子白介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的表达水平,同时根据修订的国际预后积分系统(IPSS-R)将MDS患者分为较低危组(L-MDS组)和较高危组(H-MDS组),分析不同分组患者中MDSCs、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、颗粒酶B及Tregs,免疫抑制因子IL-10及TGF-β的表达差异。结果 与对照组相比,MDS患者MDSCs及Tregs的表达量增高,CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、颗粒酶B表达量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。...     

53例骨髓增生异常综合征患者WT1基因表达与临床相关性研究

目的：探讨WT1基因与骨髓增生异常综合征（MDS）发病和病情进展的关系及临床意义。方法：应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法，检测53例MDS患者和10例正常人骨髓中WT1mRNA表达，并进行半定量分析。结果：MDS患者WT1mRNA表达阳性率和表达水平均高于正常对照组。WT1mRNA表达阳性率在MDS-RA和MDS-RAS组，明显低于MDS-RAEB和MDS-RAEB-t组，其表达水平从MDS-RA和MDS-RAS组向MDS-RAEB组和MDS-RAEB-t组逐渐升高。结论：WT1基因表达与MDS病情发展有关。WT1基因与疾病进展关系密切，是临床上对MDS病情的高危评估、预测病情变化和动态监测治疗效果及判断预后的重要指标。     

低增生骨髓增生异常综合征的由来和转归

据《中华内科杂志》1999年6月38卷第6期报道 为探讨低增生骨髓增生异常综合征(MDS)的由来和发展,北京协和医院陈书长等对协和医院10年中确诊的25例低增生MDS进行了系统分析,对其中17例患者进行长期追访。结果:(1)低增生MDS占同期确诊为MDS     

骨髓小粒对MDS诊断及与非典型再障、增生性贫血的鉴别诊断意义

目的 探讨骨髓小粒在对骨髓增生异常综合征(MDS)诊断及MDS与非典型再生障碍性贫血(AA)、增生性贫血(简称增贫)的鉴别诊断价值.方法 对10例AA、5例MDS、10例增贫及10例正常人的骨髓小粒进行研究.结果 AA患者的骨髓小粒中非造血细胞所占比例明显高于MDS、增贫和正常人,有显著性差异.MDS患者的骨髓小粒中的原粒+早幼粒比例明显高于其他3组,并出现多个系统的病态造血.增生性贫血患者的骨髓小粒仅表现为红系的增生和红系的病态造血.结论 骨髓小粒的分析对MDS的诊断及与不典型AA、增贫的鉴别诊断有着重要的意义.     

细胞遗传学检测对少儿MDS患者诊治的影响

目的探讨细胞遗传学检测对少儿骨髓增生异常综合征（MDS）患者诊治的影响。方法通过回顾性分析21例少儿MDS患者的MDS-FISH结果,探讨其对确诊时限及诊治预后的影响。结果在2011年后诊断的21例少儿MDS患者中有10例被检测染色体异常,占47.62%,其中,无病态造血完全靠细胞遗传学诊断7例。结论对表现为骨髓衰竭的少儿MDS患者,需要常规进行骨髓活检和细胞遗传学检测,有利于部分少儿MDS患者的及时诊断和治疗。     

骨髓增生异常综合征与再生障碍性贫血患者骨髓细胞免疫表型比较分析

目的探讨骨髓细胞免疫表型对骨髓增生异常综合征(MDS)与再生障碍性贫血(AA)的临床鉴别诊断价值。方法采用单克隆抗体-生物素-亲和素酶标法对本院4年内初诊未治疗的23例AA患者、19例MDS患者及50例缺铁性贫血患者(对照组)骨髓细胞免疫表型进行检测,统计分析CD3、CD5、CD10、CD13、CD19和CD33抗原在三种疾病中表达差异。结果 AA患者骨髓细胞CD3和CD5抗原表达率明显高于对照组和MDS组(P<0.05),CD10、CD13和CD33抗原表达在AA组与对照组间无差异(P>0.05)。MDS患者骨髓细胞CD13和CD33抗原表达率均明显比对照组和AA组高(P<0.05),CD19表达低于AA组和对照组,CD3抗原表达在MDS组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论骨髓细胞免疫表型对于AA与MDS的鉴别有一定参考价值。     

磷脂酶Cε1在结肠癌组织中的表达及意义

目的 通过检测结肠癌组织及其癌旁组织中磷酸肌醇特异性的磷脂酶Cε1 (PI-PLCε1)的表达情况,探讨PI-PLCε1在结肠癌发病过程中的临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,qRT-PCR）及免疫组化的方法检测42例结肠癌组织及其相对应的癌旁组织中PI-PLCε1的表达情况,并分析肿瘤分化程度及肿瘤部位对于结肠癌组织中PI-PLCε1表达情况的影响。结果 qRT-PCR结果显示,结肠癌组织中PI-PLCε1基因的表达低于其癌旁组织（ P<0.05）,不同肿瘤分化程度及肿瘤部位结肠癌组织中PI-PLCε1基因的表达差异没有统计学意义（ P>0.05）。免疫组化结果显示,结肠癌组织中PI-PLCε1蛋白的阳性表达率低于其癌旁组织（ P<0.05）。不同肿瘤分化程度结肠癌组织中PI-PLCε1蛋白的阳性表达率差异没有统计学意义（ P>0.05）,但不同肿瘤部位中PI-PLCε1蛋白的阳性表达率差异有统计学意义（ P<0.05)。结论 PI-PLCε1在结肠癌组织中的表达显著减少,且与肿瘤分化程度无关。     

骨髓增生异常综合征恶性转化过程中c-myc和MMP-9表达的变化及其意义

目的探讨c-myc和MMP-9在骨髓增生异常综合征（MDS）恶性转化中的意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测c-mycmRNA和MMP-9 mRNA在MDS低危（RA,RARS）、高危（RAEB,RAEB-t）及MDS-AML变组患者骨髓单个核细胞中的表达,并与10例正常对照进行比较。结果MDS高危组、MDS-AML变组c-myc表达高于MDS低危组及正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,高表达c-myc的MDS患者易转化成急性白血病。MMP-9在MDS中的表达与正常对照差异无统计学意义（P〉0．05）,但3例骨髓原始细胞数在70％以上的MDS-AML变患者骨髓仍高水平表达MMP-9。结论c-my在MDS的发展、转化过程中起重要作用,并对判断预后有一定的临床意义;MMP-9在MDS恶性转化中的作用有待进一步研究。     

骨髓增生异常综合征患者血清sICAM-1、TGF-β1和白血病抑制因子的检测水平

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）、转化生长因子β1（TGF-β1）和白血病抑制因子（LIF）水平及其在MDS免疫发病机制中的作用。方法采用酶联免疫夹心（ELISA）法检测25例MDS患者和20例正常人血清sICAM-1、TGF-β1、和LIF水平。结果与正常组比较,MDS患者sICAM-1水平明显升高（P〈0.01）;TGF-β1水平明显降低（P〈0.01）;LIF水平有下降趋势,但无统计学意义（P〉0.05）。结论sICAM-1、TGF-β1和LIF三种细胞因子与MDS免疫发病机制密切相关。     

凋亡抑制因子Survivin在急性白血病和骨髓增生异常综合征患者中的表达

目的研究凋亡抑制因子survivin在急性白血病（AL）和骨髓增生异常综合征（MDS）患者中的表达及其临床意义.方法以23例初发的AL患者和27例初发的MDS患者为研究对象,10名健康成年人为对照.应用RT-PCR的方法检测survivin mRNA 的表达.结果 AL患者survivin mRNA的表达阳性率为78.26%,在MDS患者中的表达率为74%,均明显高于对照组.结论 survivin广泛表达于AL患者和MDS患者,提示其过度表达与AL及MDS有关.     

CIP2A在骨髓增生异常综合症中的意义探讨

目的探讨CIP2A在骨髓增生异常综合症（MDS）中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法对31例MDS患者、19例急性髓系白血病（AML）患者（包括4例由MDS转变而来）和20例对照组骨髓单个核细胞中CIP2A蛋白质水平进行检测。结果 MDS组CIP2A蛋白的表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。MDS高危组CIP2A蛋白的表达水平显著高于MDS低危组（P〈0.05）,AML组CIP2A蛋白的表达水平显著高于MDS高危组（P〈0.05）。结论 CIP2A在MDS骨髓单个核细胞中高表达可能与MDS的疾病发展有关。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓p15基因的表达缺失与启动子甲基化

目的检测骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓p15基因的表达水平及其启动子区甲基化情况,探讨p15基因异常甲基化在MDS发生、发展中的作用。方法应用甲基化特异性PCR（MS PCR）、逆转录PCR（RT PCR）检测32例MDS患者骨髓p15基因mRNA表达水平及启动子区甲基化状态。结果32例MDS患者骨髓有14例检测到p15基因启动子甲基化（阳性率为43.8%）,且多为高危患者。32例MDS患者中22例骨髓p15mRNA表达水平明显降低（P＜0.05）。MDS患者p15基因启动子甲基化与p15mRNA表达缺失具有明显相关性（P＜0.05）。结论MDS患者骨髓p15基因启动子异常甲基化与基因表达失活密切相关,p15基因启动子区异常甲基化可能与MDS的发生、发展有关。     

骨髓增生异常综合征患者外周血单个核细胞中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1的表达

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血单个核细胞(PBMC)中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1(RIZ1)的表达及其临床意义。方法选取2012年7月至2015年7月于新乡医学院第一附属医院收治的MDS患者86例为研究对象(MDS组),并选取同期体检健康者90例作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测PBMC中RIZ1蛋白及其mRNA表达水平,并分析RIZ1表达与MDS患者临床病理特征的关系。结果对照组和MDS组受试者PBMC中RIZ1 mRNA表达水平分别为1.73±0.41和0.47±0.18,MDS组患者PBMC中RIZ1 mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05)。对照组和MDS组受试者PBMC中RIZ1蛋白表达水平分别为1.32±0.36和0.35±0.22,MDS组患者PBMC中RIZ1蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05)。RIZ1蛋白表达与MDS患者的年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白水平及血小板计数无关(P>0.05),而与骨髓原始细胞比例、世界卫生组织(WHO)分型及染色体核型有关(P<0.05)。结论 RIZ1在MDS患者PBMC中呈低水平表达,并与患者的骨髓原始细胞比例、WHO分型及染色体核型显著相关,这为MDS的早期诊断和靶向治疗提供了新的思路。     

骨髓增生异常综合征和急性髓细胞白血病患者血清转化生长因子-β1的检测

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓细胞白血病(AML)患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)水平及意义。方法:采用定量双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MDS 32例、AML 21例及16例正常对照者血清中TGF-β1水平。结果:初诊AML患者与MDS患者血清TGF-β1水平均显著低于正常对照组(均P<0.01)。AML患者达完全缓解时TGF-β1水平恢复正常,未缓解和复发患者TGF-β1水平与初诊患者无显著性差异(P﹥0.05)。MDS低危型患者血清TGF-β1水平与高危型及初治AML患者相比为高,但三者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:检测AML和MDS患者血清TGF-β1水平变化有助于判断病情,评价疗效,估计预后。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞的免疫表型分析

目的　了解骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞的分化抗原的表达情况。方法　采用流式细胞术的CD45 -侧向散射光 (SS)设门的方法 ,检测 14例骨髓增生异常综合征患者 ,16例急性髓系白血病 (AML)和 5例骨髓形态学正常的非血液病患者的骨髓和干 /祖系分化抗原。结果　MDS患者原始细胞群所占比例为 (11 2± 7 3 ) % ,明显高于对照组而低于AML组。该群细胞的髓系和干 /祖系分化抗原 ,MDS及AML组均存在较高的阳性表达 ;71 4%的MDS患者低SS表达的粒细胞群明显增加 ;2 8 6%的MDS患者髓系细胞群的部分细胞表达淋系抗原CD7。结论　MDS患者骨髓细胞存在复杂异常的分化抗原表达 ,通过免疫表型分析有助于MDS的诊断。     

骨髓异常增生综合征患者FLT3基因的表达及意义

目的  研究骨髓异常增生综合征(MDS)患者FLT3基因表达水平及FLT3基因长度突变(FLT3-LM),以探讨其对MDS的临床意义。方法  收集38例诊断明确的MDS及10例非恶性血液病患者骨髓并提取单个核细胞,应用基因组DNA 聚合酶链反应(PCR)技术检测FLT3基因表达水平和FLT3-LM。结果  38例MDS患者骨髓单个核细胞有11例检测到FLT3受体的表达,阳性率为28.9%,10例对照组均无FLT3受体的表达,两者差异有统计学意义(P<0.05)。11例FLT3受体表达阳性患者中有2例检测到FLT3-LM,阳性率为18.2%,10例正常对照均无FLT3-LM。两者差异有统计学意义(P<0.05)。FLT3/ITD(+)和FLT3/ITD(-)患者在年龄、外周血血红蛋白水平、血小板计数、白细胞计数、外周血原始细胞比例之间无相关性。FLT3/ITD(+)患者倾向于有较高的骨髓原始细胞比例(P=0.102)。结论  MDS患者中存在FLT3-LM, FLT3-LM与疾病危重程度相关,可能有助于MDS诊断、预后判断和靶向治疗。     

骨髓增生异常综合征患者RASSF1A基因启动子区甲基化及基因表达的缺失

目的 检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓RASSF1A基因的表达水平及其启动子区甲基化状态,探讨RASSF1A基因异常甲基化在MDS发生发展中的作用,为去甲基化药物治疗MDS提供新靶点.方法 选取30例MDS患者为实验组,非恶性血液病患者15例为对照组,按MDS国际IPSS评分标准对实验组进行分组.应用甲基化特异性聚合酶链反应(MS PCR)、逆转录PCR(RTPCR)法检测两组患者骨髓RASSF1A基因mRNA表达水平及启动子区甲基化状态,对比地西他滨治疗前后的MDS患者RASSF1A基因的甲基化情况.结果 实验组RASSF1A基因甲基化率(73.33％)明显高于对照组(P＜0.05),且中高危MDS患者骨髓RASSF1A基因甲基化率(81.8％)明显高于低危MDS患者(18.2％)(P＜0.05);实验组RASSF1A基因mRNA表达水平明显低于对照组(P＜0.05);经地西他滨治疗后,MDS患者RASSF1A基因的甲基化程度较初诊时降低.结论 MDS患者骨髓RASSF1A基因的异常甲基化与该基因的表达失活紧密相关,可能是MDS发生发展的机制之一;地西他滨能够逆转RASSF1A基因的甲基化,为地西他滨治疗MDS提供新的理论依据.