二巯基丙磺酸钠体内外抗肿瘤作用研究

目的观察含有两个巯基的化合物-二巯基丙磺酸钠(DMPS)在体内外的抗肿瘤作用。方法在体外培养的人肺腺癌A549细胞株中,通过MTT实验,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞生长繁殖的抑制作用;通过荧光显微镜和细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。在体内小鼠S180肉瘤模型中,观察不同浓度的DMPS对肿瘤生长的抑制作用。结果体外实验中,终浓度为8 mmol/L和16 mmol/L的DMPS应用48h(P<0.01)和72h(P<0.01)后,显著地抑制肿瘤细胞的生长繁殖;终浓度为8 mmol/L和16 mmol/L的DMPS应用6h和9h后,肿瘤细胞凋亡数量显著地增多(P<0.05,P<0.01)。体内实验中,1.5%DMPS以0.2ml/10g体重腹腔注射,1次/d,连续2周,可显著地降低瘤体重量(P<0.05)。结论高浓度的DMPS显著地抑制体外A549细胞系、体内S180细胞系的生长繁殖。     

桑黄多糖对S180的直接抑制作用

目的研究桑黄多糖对肿瘤S180细胞的直接抑制作用。方法用MTT比色法检测用有无桑黄多糖的培养基培养的肿瘤细胞S180的增殖活性,用流氏细胞仪检测其作用机制是否与凋亡有关及用药后细胞周期的变化。结果与对照组相比,桑黄多糖能直接抑制S180增殖,流式细胞计量术分析显示,桑黄多糖主要通过促进肿瘤细胞凋亡,使瘤细胞增殖周期停滞于G2/M期来抑制肿瘤细胞增殖。结论桑黄多糖能直接诱导肿瘤细胞S180凋亡发挥直接抑制肿瘤作用。     

三氧化二砷抑制小鼠S180肉瘤细胞生长的实验研究

目的 观察三氧化二砷(As2O3)对S180肉瘤细胞生长的作用并探讨其作用机制。方法 对小鼠S180肉瘤细胞进行细胞培养，并建立S180移植瘤动物模型，体内体外观察As2O3对S180踟肉瘤的作用，同时检测细胞及肿瘤组织内超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的改变。结果 体内体外实验结果显示As2O3可以抑制小鼠S180肉瘤细胞生长并具有浓度依赖性，在一定浓度下其作用强于化疗药物阿霉素(ADM)；肿瘤细胞内及肿瘤组织内的SOD含量下降，IDH含量上升。结论 As2O3作用后引起的SOD下降在促进肿瘤细胞坏死和诱导肿瘤细胞凋亡过程中具有一定的作用。     

理气药对荷瘤小鼠免疫功能的影响

实验中发现理气药有一定的抑制小鼠肿瘤（S180，Lewis肺癌）生长的作用。当小鼠接种S180和Lewis肺癌后，其免疫功能降低，白细胞介素Ⅱ（IL－2）活性低下，T细胞亚群比例失调，Th／TS＜1。经理气药治疗，明显抑制了IL－2活性的降低，与对照组比较，差别有显著意义（P＜0．05），并能提高T辅助细胞，调整T细胞亚群的比例，使Th／TS＞1。表明理气药能提高荷瘤机体的免疫功能，以达到抗肿瘤效应。     

海星总皂苷抗肿瘤作用的实验研究

目的：对从南海海星Craspidastet hesperus Muller et troschel中分离提取的总苷进行抗肿瘤活性研究。方法：采用体外肿瘤细胞培养和体内抗肿瘤实验方法。测定海星总皂苷的体外和体内抗肿瘤作用。结果：海星总皂苷对体外培养的小鼠移植性肿瘤肉瘤S180、肝癌H22细胞有直接的细胞毒作用;能明显的抑制小鼠生肉瘤S180的生长,延长H22腹水小鼠的生存时间。结论：海星总皂苷具有明显的抗肿瘤活性,可望用于恶性肿瘤的治疗。     

应用流式细胞光度计研究人参单体Rh_1和Rh_2对小鼠S180肉瘤细胞周期移行的影响

人参皂甙单体Rh_1和Rh_2给予接种S180肉瘤细胞3天后的载瘤小鼠腹腔注射,50mg/kg.d,连续7天。应用FACS 420荧光细胞激活器对肿瘤细胞进行周期分析发现,在短期内Rh_1对肿瘤细胞周期影响不大;Rh_2可阻断S_(180)肉瘤细胞从S期向G_2期过度(P<0.005),抑制肿瘤细胞生长。     

眼镜蛇毒细胞毒素对S180荷瘤小鼠抗肿瘤作用的研究

目的:探讨眼镜蛇毒细胞毒素(Cytotoxin,CTX)对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:采用昆明小鼠S180实体瘤模型,通过腹腔注射CTX,观察CTX对S180小鼠的肿瘤重量、亚显微结构、凋亡率和pro-caspase-3表达量的变化。结果:CTX对S180肿瘤细胞的生长表现出明显抑制作用。0.2、0.4、0.8mg/kgCTX剂量组的抑瘤率分别为23.8%、54.1%、63.2%;透射电子显微镜和流式细胞仪检测显示S180肿瘤细胞发生凋亡;免疫印迹结果显示pro-caspase-3蛋白表达降低,提示caspase-3被激活。结论:CTX通过诱导细胞凋亡来抑制S180肿瘤细胞的生长。     

胎盘免疫调节肽抑瘤效应的研究

目的探讨胎盘免疫调节肽对小鼠的直接抑瘤效应．方法小鼠接种Ｓ１８０或ＦＣ瘤细胞后，注射胎盘免疫调节肽治疗１０～１２ｄ，观察其肿瘤的重量或转移灶结节数．通过胎盘免疫调节肽对肿瘤细胞的直接作用，研究胎盘免疫调节肽的抑瘤效应．结果小鼠体内实验结果表明：腹腔注射胎盘免疫调节肽对小鼠Ｓ１８０肉瘤进行防治和治疗，胎盘免疫调节肽可明显抑制肿瘤细胞的生长，其抑瘤率分别达５５％和４５％．对小鼠自发肺转移实验证明，胎盘免疫调节肽可明显抑制肿瘤细胞的转移．结论胎盘免疫调节肽可明显地抑制Ｓ１８０细胞的生长和ＦＣ细胞的转移．     

4-硒硫酸酯多糖体外抗瘤作用及机制的研究

目的研究4-硒硫酸酯多糖体外给药的抗瘤作用及可能的机制。方法采用体外生长抑制实验,台盼蓝排染法计数活细胞,计算抑制百分率;同位素掺入实验,观察药物对肿瘤细胞DNA合成的影响;流式细胞仪分析其对细胞周期的影响。结果4-硒硫酸酯多糖对肿瘤细胞有直接细胞毒作用,可抑制肿瘤细胞DNA的合成,使G1期细胞减少,停留在S期。结论4-硒硫酸酯多糖体外给药对瘤细胞有明显的抑制作用,其机制可能与抑制瘤细胞DNA合成有关。     

中华扁桃提取液抗肿瘤作用的实验研究

目的研究中华扁桃的抗肿瘤作用。方法用甘肃黄土地扁桃科技开发公司引种的中华扁桃制成水提液,对荷瘤小鼠灌胃,观察其对移植性肿瘤HepA和S180荷瘤的生长抑制作用;以胃癌7901细胞系及白血病K562细胞系为靶细胞,观察中华扁桃对培养的肿瘤细胞的抑制作用。结果结果表明,施以0．5g／kg和1．0g／kg的扁桃提取液可明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,对HepA和S180的最大抑制率分别为11．2％和19．1％;对胃癌7901细胞系及白血病K562细胞系的抑制率分别达到22．9％和15．8％结论提示中华扁桃具有明显抑制肿瘤的作用.     

白藜芦醇对鼠纤维肉瘤S180细胞周期影响及其机制研究

目的:研究白藜芦醇对鼠纤维肉瘤S180细胞的抗肿瘤作用,并探讨其分子机制.方法:用MTT法检测白藜芦醇对鼠纤维肉瘤细胞系S180增殖的影响;PI单标流式细胞术检测白藜芦醇对S180细胞周期分布的影响;Western blot方法检测白藜芦醇对S180细胞 cyclinD1,P21Cip1蛋白表达的影响.结果:白藜芦醇对S180细胞增殖呈双相作用:低浓度促进细胞增殖;高浓度抑制细胞增殖,其抑制作用呈时效和量效关系.白藜芦醇治疗组S180细胞周期发生变化,细胞周期被阻滞于 G0/G1期.白藜芦醇以时间依赖方式下调周期蛋白 cyclinD1 的表达.上调白藜芦醇P21Cip1蛋白表达.结论:白藜芦醇低浓度促进S180细胞增殖,高浓度抑制细胞增殖.白藜芦醇可通过凋节细胞周期蛋白 cyclinD1,p21Cip1的表达调控细胞周期进程,抑制细胞增殖.     

悬饮宁方对SPC-A-1细胞浸润及S180腹水瘤小鼠腹膜病理形态的影响

目的:观察中药悬饮宁方抑制人肺腺癌细胞SPC-A-1浸润的作用及对S180腹水瘤小鼠腹膜病理形态学变化的影响.方法:在进行小鼠腹膜间皮细胞分离培养的基础上,将SPC-A-1人肺腺癌细胞调整加入复层培养,观察形成的克隆数.取出S180腹水瘤小鼠腹膜,用透射电镜观察悬饮宁方各剂量组小鼠腹膜病理形态学的变化.结果:体外实验显示加入含有悬饮宁生药的培养液(50 μg/ml)后,SPC-A-1在琼脂培养皿背面形成的癌细胞克隆数明显减少.用悬饮宁治疗S180腹水瘤小鼠后,取出腹膜,在电镜下可观察到,从低剂量开始即可见小鼠腹膜间皮细胞排列整齐,随着剂量的递增这种现象更明显,间皮细胞排列更加整齐,增厚;而生理盐水组小鼠腹膜间皮细胞排列疏松,坏死.结论:中药悬饮宁方有抑制SPC-A-1细胞浸润的作用,悬饮宁还可以改变S180腹水瘤小鼠排列疏松的腹膜间皮细胞,从而控制腹水瘤小鼠癌性积液生长.     

均强磁场对S180实体瘤及带瘤小白鼠影响的实验研究

本文利用汝铁硼磁片形成均强磁场,观察在0.37T强磁场中S180实体瘤及其带瘤小白鼠的生长状态。结果提示其肿瘤生长受到明显抑制,与对照组比较差异显著P<0.05)。并且观察到0.37TGS强磁场对小白鼠心、肝、肾脏无明显损害。     

YAC-1细胞冻存方法的研究

目的研究YAC-1细胞保种的冻存方法。方法用3种不同的冻存方法对YAC-1细胞进行冷冻保存,在冻存1年内不同时间段对细胞存活率及复苏24小时后细胞的生长状况进行比较。结果用不同的冻存方法冻存YAC-1细胞,不同时间段复苏后细胞存活率不同,3种方法无显著性差异,生长状况均良好,为实验室选择适合的冻存方法提供了依据。     

黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的抑制作用

目的：研究黄芩总黄酮对S₁₈₀、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞增殖及S₁₈₀和Hep-A-22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。 方法：将S₁₈₀、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞分别加入终浓度为12.5、25.0、50.0及100.0 mg•L^-1的黄芩总黄酮,采用四氮唑盐衍生物(XTT)、MTT法测定细胞增殖抑制率;将S₁₈₀和Hep-A-22荷瘤小鼠分为空白对照组、环磷酰胺（CTX）阳性药对照组(30 mg•kg^-1,隔日给药)、黄芩总黄酮大（200 mg•kg^-1•d ^-1）、中（100 mg•kg^-1•d^-1）和小剂量组（50 mg•kg^-1•d^-1）,连续给药15 d后剥离肿瘤,称取瘤重,计算其 肿瘤生长的抑制率。观察各给药组Hep-A-22荷瘤小鼠连续用药10 d后生命延长率。结果：黄芩总黄酮对S₁₈₀、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的抑制率随给药浓度的增加而显著升高, 其IC₅₀值分别为16.04、17.74和9.05 mg•L^-1;与空白对照组比较,黄芩总黄酮大、中、小剂量组S₁₈₀、Hep-A-22荷瘤小鼠的肿瘤重量均明显低于空白对照组（P<0.05或P<0.01）,随给药剂量的增加,其肿瘤抑制率增加（P<0.05或P<0.01）。黄芩总黄酮大、中、小剂量组的Hep-A-22荷瘤小鼠的平均生存天数均显著高于空白对照组（P<0.01）,其生命延长率较空白对照组显著增加（P<0.01）。结论：黄芩总黄酮对S₁₈₀、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的增殖及S₁₈₀和Hep-A-22荷瘤小鼠肿瘤生长均具有抑制作用。     

壳寡糖对S180肉瘤细胞凋亡、细胞周期以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

目的探讨壳寡糖对S180肉瘤细胞的生物学效应，为其治疗肿瘤提供新的理论基础。方法体外实验：用流式细胞仪测壳寡糖作用下S180肉瘤细胞周期、细胞凋亡情况。体内实验：建立S180肉瘤小鼠皮下移植瘤模型，给予壳寡糖后，测瘤体积，并用免疫组化法测瘤组织Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果体外实验：高浓度壳寡糖作用后S180肉瘤细胞阻滞于G0/G1期，同时S180肉瘤细胞凋亡增加。体内实验：壳寡糖对小鼠S180肉瘤有明显的抑制作用并能提高促凋亡基因Bax的表达，降低抑凋亡基因Bcl-2的表达。结论壳寡糖可抑制S180肉瘤细胞的生长，使S180细胞阻滞于G0／G1期并诱导其发生凋亡，其机制可能与Bcl-2蛋白下调而Bax蛋白上调有关。     

EFFECT OF HUMAN AMNIOTIC MEMBRANE ON CORNEAL EPITHELIUM AND YAC-1 CELL

Objective To study the effect of the amniotic membrane on enhancing the proliferation ofcorneal epithelia and YAC-1 cell. Methods After the primary culture of the rabbit's corneal epithelia and YAC-1 cells, they were seeded on the upper surface or stromal matrix side of amniotic membrane respectively. The proliferation results were observed by MTT test. Results The amniotic membrane was found significantly enhancing the proliferation of corneal epithelia on the d1 ,d3 , and d5 after culture. The proliferation rate was 28.93% ,23.32% ,23.41 % (P<0 .05) respectively, but the d7 proliferation rate was 20.72% (P> 0.05). On the dl , d3 , d7 after culture , the YAC-1 cells proliferation rate was 34 .87% ,36 .28% ,33 .86% (P< 0.01) respectively. Conclusion Our results demonstrated that the amniotic membrane could enhance the proliferation of both corneal epithelia and YAC-1 cells significantly. Although amniotic membrane has been suggested as an ideal material for reconstruction of ocular surface, special atte     

SF2523对人源脑胶质瘤干细胞TS576增殖的抑制作用及其机制

目的：探讨PI3K和BRD4双重抑制剂SF2523对人源脑胶质瘤干细胞TS576增殖的抑制作用,并初步阐明其作用机制。方法：培养人源脑胶质瘤干细胞TS576,将其分为对照组和0.25、0.50、1.00、2.00 μmol·L^-1 SF2523组。采用CCK-8法检测各组TS576细胞存活率;将TS576细胞分为对照组和2 μmol·L^-1 SF2523组,利用细胞生长计数法检测各组TS576细胞数;将TS576细胞分为对照组和1及2 μmol·L^-1 SF2523组,采用流式细胞术检测各组不同细胞周期TS576细胞百分比;将TS576细胞分为对照组和1及2 μmol·L^-1 SF2523组,利用Annexin Ⅴ/PI染色法检测各组TS576细胞凋亡率;将TS576细胞分为对照组和1及2 μmol·L^-1 SF2523组,采用Western blotting法检测各组TS576细胞中B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和cyclinD1蛋白表达水平。结果：CCK-8检测,作用24、48和72 h时,与对照组比较,0.25、0.50、1.00和2.00 μmol·L^-1 SF2523组TS576细胞存活率均明显降低（P<0.01）。细胞生长计数法检测,与对照组比较,2 μmol·L^-1 SF2523组细胞数明显减少（P<0.05或P<0.01）。流式细胞术检测,作用72 h时,与对照组比较,1和2 μmol·L^-1 SF2523组G₁期TS576细胞百分比升高（P<0.05）,S期TS576细胞百分比降低（P<0.05）。Annexin Ⅴ/PI染色检测,作用72 h时,与对照组比较,1和2 μmol·L^-1 SF2523组细胞凋亡率均明显升高（P<0.01）。Western blotting法检测,作用72 h时,与对照组比较,1和2 μmol·L^-1SF2523组TS576细胞中Bax蛋白表达水平升高（P<0.01）,Bcl-2和cyclinD1蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,Bax/Bcl-2比值升高（P<0.01）。结论：SF2523通过下调cyclinD1表达引起TS576细胞G₁期阻滞,通过上调Bax表达、下调Bcl-2表达促进TS576细胞凋亡,从而抑制TS576细胞增殖。     

Chitosan/pshRNA plasmid nanoparticles targeting MDR1 gene reverse paclitaxel resistance in ovarian cancer cells

In order to investigate the effect of chitosan/pshRNA plasmid nanoparticles targeting MDR1 genes on the resistance of A2780/TS cells to paclitaxel, chitosan/pshRNA plasmid nanoparti- cles were synthesized by means of a complex coacervation technique and transfected into A2780/TS cells. The cells transfected with MDRl-targeted chitosan/pshRNA plasmid nanoparticles were experimental cells and the cells transfected with chitosan/pGPU6/GFP/Neo no-load plasmid nanoparticles served as negative control cells. Morphological features of the nanoparticles were observed under transmission electron microscope （TEM）. MDR1 mRNA expression was assessed by RT-PCR. Half-inhibitory concentration （IC50） ofpaclitaxel for A2780/TS cells was determined by MTT method. TEM showed that the nanoparticles were round-shaped, smooth in surface and the diameters varied from 80 to 120 nm. The MDR1 mRNA in the transfected cells was significantly decreased by 17.6%, 27.8% and 52.6% on the post-transfection day 2, 4 and 7 when compared with that in A2780/TS cells control （P〈0.05）. MTT assay revealed that the relative reversal efficiency was increased over time and was 29.6%, 51.2% and 61.3% respectively in the transfected cells 2, 4, 7 days after transfection and IC_50 （0.197±0.003, 0.144±0.001, 0.120±0.004） were decreased with difference being significant when compared with that in A2780/TS （0.269±0.003） cells control （P〈0.05）. It was concluded that chitosan/pshRNA plasmid nanoparticles targeting MDR1 can effectively reverse the paclitaxel resistance in A2780/TS cells in a time-dependent manner.     

正常鼠和免疫鼠CD3AK细胞和LAK细胞杀伤活性的比较研究

实验取正常鼠和Ｐ８１５肿瘤细胞致敏的免疫鼠脾细胞，经抗ＣＤ３抗体与低剂量ＩＬ－２或高剂量ＩＬ－２分别诱生为ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞，用改良的乳酸脱氢酶释放法以Ｐ８１５细胞和ＹＡＣ－１细胞为靶细胞，测定ＣＤ３ＡＫ和ＬＡＫ细胞的杀伤活性。结果表明：正常鼠ＣＤ３ＡＫ细胞对Ｐ８１５细胞的杀伤活性高于ＬＡＫ细胞，对ＹＡＣ－１细胞的杀伤活性低于ＬＡＫ细胞。免疫鼠ＬＡＫ细胞对Ｐ８１５细胞的杀伤活性明显增高，高