肿瘤抑素抑制肝癌移植瘤生长的实验研究

目的 观察肿瘤抑素慢病毒载体对裸鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用,探讨其在肝癌基因治疗中的应用前景。方法 建立人肝癌细胞株SMCC-7721裸鼠皮下移植瘤模型,当肿瘤直径达到0.3～0.5cm时分别在瘤周及瘤体内多点注射100μl磷酸盐缓冲液（PBS组）、5×109 TU慢病毒绿色荧光蛋白（Lenti-GFP组）和5×109 TU 肿瘤抑素重组慢病毒（Lenti-Tum组）。观察3组的肿瘤体积变化,采用RT-PCR和Western blotting法分别检测3组肿瘤组织中肿瘤抑素的mRNA和蛋白水平,并采用Kaplan-Meier法进行生存分析。结果 注射21天后,Lenti-Tum组的肿瘤体积为（702.1±143.7）mm3,小于PBS组的（1622.2±253.8）mm3和Lenti-GFP组的（1538.5±284.9）mm3（P＜0.05）;Lenti-Tum组的抑瘤率为56.7％,显著高于Lenti-GFP组的5.2％（P＜0.05）;Lenti-Tum组中肿瘤抑素的mRNA和蛋白水平均高于其他两组。Lenti-Tum组小鼠的中位生存时间为100天,明显高于PBS组的58天和Lenti-GFP组的59天（P＜0.05）。结论 肿瘤抑素经慢病毒转染能够明显抑制肝癌移植瘤的生长,延长荷瘤裸鼠的生存时间。     

肿瘤抑素抗肿瘤活性肽的研究进展

肿瘤抑素因其具有强大的抗肿瘤血管生成活性和一定的抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡的活性而成为研究的热点,但其本身分子量大,且具有肺—肾出血综合征的抗原而使其应用受到一定的限制。近年来人们对其进行改造,获得多种分子量小、副作用少、抗肿瘤活性强的肿瘤抑素抗肿瘤活性小肽。全文主要介绍肿瘤抑素抗肿瘤活性肽的研究进展,对Tum-5、T7肽、T21肽、T19肽、T42肽的结构、抗肿瘤活性及作用机制进行详细的阐述。     

肿瘤抑素相关肽抗肿瘤活性研究

[目的]评价肿瘤抑素相关肽19肽和21肽抗肿瘤活性.[方法]已构建好的19肽和21肽重组质粒在大肠杆菌BL-21(DE3)中表达,经几丁质亲和层析柱纯化出19肽和21肽.用SDS-PAGE聚丙烯酰胺电泳对表达及纯化结果进行初步鉴定,进行19肽、21肽和19肽 21肽的腹水型转移型小鼠H22肝癌实体瘤模型大体抑瘤实验,并做组织病理学切片分析.[结果]经一步亲和层析可获得可溶性19肽和21肽.19肽,21肽,19肽 21肽联合用药组在小鼠抑瘤实验中抑瘤率分别达48.46%,42.86%,53.94%.组织病理学切片结果可见3种给药方式都可促进小鼠肿瘤组织坏死,血管数量减少.联合用药组抗肿瘤作用强于单独用药组.[结论]肿瘤抑素相关肽19肽和21肽,具有抗肿瘤活性.     

重组肿瘤抑素血管生成抑制相关肽对裸鼠移植性卵巢癌的抑制作用

目的 观察肿瘤抑素改造后所得血管生成抑制相关肽(21肽)的抗血管生成活性及对裸鼠移植卵巢癌的抑制作用.方法 用亲和层析法纯化21肽.观察接种SKOV3细胞系的裸鼠经21肽治疗后的肿瘤生长情况,检测21肽对肿瘤组织的微血管密度和免疫组织化学指标的影响.结果 经21 d的治疗后,21肽组平均抑瘤率可达53.17%.21肽组肿瘤组织微血管密度(CD34表达)为6.324±1.643,与对照组(16.127±2.535)比较明显降低(P＜0.05).21肽组肿瘤组织的增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)呈低表达(P＜0.01),而基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)呈高表达(P＜0.01).结论 21肽具有显著的抗血管生成活性,对卵巢癌具有较好的抑制作用,其抑制卵巢癌的作用机制可能与其降低新生血管形成和调解血管生成相关因子的表达有关.     

贝伐单抗与重组人血管内皮抑素对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长的影响

[目的]探讨贝伐单抗、重组人血管内皮抑素对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长的影响。[方法]建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、低剂量贝伐单抗组、高剂量贝伐单抗组、低剂量莺组人血管内皮抑素组、高剂量重组人血管内皮抑素组、低剂量联合组以及高剂量联合组,用药3周。检测裸鼠体重、移植瘤体积、移植瘤重量,计算抑瘤率。[结果]与对照组相比,低剂量贝伐单抗组、高剂量贝伐单抗组、低剂量联合组、高剂量联合组裸鼠移植瘤生长曲线较平缓,移植瘤重量明显下降（P〈0．01）,抑瘤率分别为67．69％、68．88％、78.32％和79．26％。低剂量联合组与低剂量贝伐单抗组移植瘤重量存在统计学差异（P〈0．05）。低剂量重组人血管内皮抑素组、高剂量重组人血管内皮抑素组移植瘤生长与对照组无统计学差异（P〉0．05）。[结论]贝伐单抗能抑制人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长,低剂量贝伐单抗联合重组人血管内皮抑素能进一步提高抗肿瘤作用。     

CK19在乳腺癌外周血中表达的意义

[目的]研究外周血中CK19与原发性乳腺癌病理特征和分期的相关性。[方法]用RT_PCR法检测32例乳腺癌患者外周血中CK19的表达。常规病理检查32例患者的脉管瘤栓状况、分期 ,用Fish精确检验法检验其差异。[结果]CK19与脉管瘤栓形成或软组织浸润具有明显相关性 (P<0.05) ,与分期呈正相关。[结论]采用RT_PCR检测乳腺癌患者外周血中肿瘤细胞具有高灵敏度 ,对乳腺癌的治疗具有重要应用价值。对乳腺癌血道微转移灵敏 ,可作为临床判断预后的参考指标。     

内皮抑素对小细胞肺癌移植瘤微血管生成的影响

[目的]探讨内皮抑素对小细胞肺癌裸鼠移植瘤微血管生成的影响。[方法]将人小细胞肺癌细胞株NCI—H446接种于裸鼠背部皮下．待移植肿瘤成形后．随机分为对照组、试验1组和试验2组,每日于肿瘤部位分别注射生理盐水200μl、内皮抑素20μg、内皮抑素40μg,观察三组小鼠移植瘤的生长情况．并检测各组肿瘤的微血管密度。[结果]不同剂量的内皮抑素对肿瘤生长的影响均呈现明显的时间-效应和剂量-效应关系：随着内皮抑素剂量升高．移植瘤中的微血管密度下降。[结论]内皮抑素通过阻断微血管生成而抑制小细胞肺癌移植肿瘤的生长．     

重组人血管内皮抑素抑制Namalwa淋巴瘤裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:探讨重组人血管内皮抑素对Namalwa淋巴瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法:建立Namalwa淋巴瘤裸鼠移植瘤模型.从Namalwa淋巴瘤细胞种植后第11天开始给予腹腔注射2.5、5和10 mg/kg重组人血管内皮抑素,以腹腔注射75 mg/kg环磷酰胺作为阳性对照组,腹腔注射0.9%氯化钠溶液作为阴性对照组.比较各组相对肿瘤体积(relative tumor volume,RTV),计算相对肿瘤增殖率.结果:药物干预8 d后,环磷酰胺组RTV小于阴性对照组;干预12 d后,5 mg/kg重组人血管内皮抑素组移植瘤RTV小于阴性对照组(P＜0.05),但大于环磷酰胺组(P＜0.05);而2.5 和10 mg/kg组与阴性对照组之间的差异无统计学意义.2.5、5和10 mg/kg重组人血管内皮抑素组和环磷酰胺组的肿瘤相对增殖率分别为87.4%、64.2%、85.9%和39.2%.结论:重组人血管内皮抑素可抑制Namalwa淋巴瘤裸鼠移植瘤生长,其抑瘤作用与合适的剂量和足够的疗程相关.     

重组人血管内皮抑素联合重组人P53腺病毒对裸鼠乳腺癌移植瘤的抑制

摘 要 目的: 探讨重组人血管内皮抑素（recombinant human endostatin,ES）联合重组人P53腺病毒（rAd/P53）对乳腺癌细胞MCF7裸鼠移植瘤的抑制作用。方法：建立裸鼠荷人乳腺癌模型，随机分为对照组、ES组、rAd/P53组和两药联合组,分别给予相应治疗；观察肿瘤生长，免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度（microvessel density，MVD）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的表达。结果：各治疗组均可明显抑制移植瘤生长， ES组、rAd/P53组和联合用药组的抑瘤率分别为51.67％、48.74％和75.54％，联合用药组抑瘤作用最为显著（P<0.05）。对照组、ES组、rAd/P53组与联合用药组的移植瘤组织MVD分别为31.17±2.48、20.33±4.84、22.33±3.88及12.50±2.74，VEGF 表达H评分分别为45.33±589、35.83±546、33.67±4.80及22.33±4.41，联合用药组的MVD和VEGF表达显著低于其余各组（P<0.01）。 结论：重组人ES联合rAd/P53治疗可显著抑制裸鼠乳腺癌移植瘤的生长及微血管生成。     

血管抑素和内皮抑素的研究进展

近年来,越来越多的学者对血管抑素和内皮抑素的结构、作用机制以及抗肿瘤作用做了深入的研究,认为它们极有可能成为未来抗肿瘤的主要药物,为肿瘤治疗提供新的有效手段.     

Patient-reported Outcomes of Patients With Breast Cancer During the COVID-19 Outbreak in the Epicenter of China: A Cross-sectional Survey Study

IntroductionWe aimed to analyze the psychological status in patients with breast cancer (BC) in the epicenter of the coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic.Patients and MethodsA total of 658 individuals were recruited from multiple BC centers in Hubei Province. Online questionnaires were conducted, and these included demographic information, clinical features, and 4 patient-reported outcome scales (Generalized Anxiety Disorder Questionnaire [GAD-7], Patient Health Questionnaire [PHQ-9], Insomnia Severity Index [ISI], and Impact of Events Scale-Revised [IES-R]). Multivariable logistic regression analysis was designed to identify potential factors on mental health outcomes.ResultsQuestionnaires were collected from February 16, 2020 to February 19, 2020, the peak time point of the COVID-19 outbreak in China. Of patients with BC, 46.2% had to modify planned necessary anti-cancer treatment during the outbreak. Severe anxiety and severe depression were reported by 8.9% and 9.3% of patients, respectively. Severe distress and insomnia were reported by 20.8% and 4.0% of patients, respectively. Multivariable logistic regression analysis demonstrated poor general condition, shorter duration after BC diagnosis, aggressive BC molecular subtypes, and close contact with patients with COVID-19 as independent factors associated with anxiety. Poor general condition and central venous catheter flushing delay were factors that were independently associated with depression. In terms of insomnia, poor generation condition was the only associated independent factor. Poor physical condition and treatment discontinuation were underlying risk factors for distress based on multivariable analysis.ConclusionHigh rates of anxiety, depression, distress, and insomnia were observed in patients with BC during the COVID-19 outbreak. Special attention should be paid to the psychological status of patients with BC, especially those with poor general condition, treatment discontinuation, aggressive molecular subtypes, and metastatic BC.     

外周血CK19 mRNA检测在判断乳腺癌微转移中的应用

目的 探讨CKl9mRNA检测对判断乳腺癌微转移的价值。方法 应用RT—PCR法检测66例乳腺癌患者术前和综合治疗6个月、1年后外周血中CKl9mRNA表达状况，并以30例乳腺良性疾病患者和30例正常使康女性作为对照。结果 66例乳腺癌和30例乳腺良性疾病患者CKl9mRNA的阳性率分别为90．9％(60／66)和3．3％(1／90)，30正常使康女性均阴性，相互比较有非常显著性差异(P＜0．01)。有淋巴结转移者和无淋巴结转移者阳性率分别为97．7％(43／44)和77．3％(1742)，相互比较有显著性差异(P＜0．05)。综合治疗6个月和1年后阳性率分别为28．8％(19／66)和33．3％(22／66)，与术前(90．9％，60／66)比较有非常显著性差异(P＜0．01)。结论 CKl9mRNA检测可以早期预测乳腺癌发生的血道微转移。     

环磷酰胺LDM联合MTD化疗对乳腺癌抗血管作用的实验研究

目的观察环磷酰胺最大耐受量联合低剂量节律化疗对裸鼠人乳腺癌皮下移植瘤的抗血管生成及促肿瘤细胞凋亡的作用。方法荷瘤裸鼠随机分成4组：LDM组、联合用药组（MTD联合LDM组）、MTD组和对照组。给药21天后,观察各组小鼠瘤质量、瘤体积、白细胞数量,采用免疫组织化学法检测移植瘤MVD、TSP-1表达情况,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况。结果联合用药组裸鼠肿瘤的生长速度较其他组明显减慢（P〈0.05）。联合用药组裸鼠的肿瘤重量为（0.35±0.03）g,明显轻于其他组（P〈0.05）。联合用药组MVD表达水平明显低于MTD组（P〈0.05）。联合用药组TSP-1表达水平明显高于MTD组（P〈0.05）。联合用药组肿瘤细胞凋亡率明显高于其他组（P〈0.05）。结论环磷酰胺MTD联合LDM节律化疗可以抑制乳腺肿瘤的生长速度、血管生成,并促进肿瘤细胞凋亡。     

应用RT-PCR检测乳腺癌患者外周血CEA mRNA和CK-19 mRNA的研究及意义

目的：检测乳腺癌患者外周血中CEA mRNA和CK-19 mRNA的表达，建立取材于外周血早期诊断乳腺癌微转移的方法。方法：65例乳腺癌和37例乳腺良性疾病患者的外周血，分离其有核细胞后进行细胞总RNA的抽提，运用果式RT-PCR技术进行CEA mRNA和CK-19 mRNA的检测。结果：以     

应用RT-PCR检测CK19表达提高乳腺癌前哨淋巴结微转移检出的研究

目的:评价乳腺癌前哨淋巴结活检的临床意义,应用细胞角蛋白cytokeratin19(CK19)RT-PCR检测法提高其的敏感性及准确率.方法:随机选取1999年10月至2003年3月住院的乳腺癌患者73例,其中2001年1月至2003年3月的29例,对前哨淋巴结(SLN)进行了CK19 RT-PCR检测.采用专利兰进行SLN识别.RT-PCR法检测CK19 mRNA表达.结果:SLN识别成功67例,成功率为91.8%(67/73).对上述67例的SLN转移的常规病理诊断的敏感度68.8%(22/32),准确率85.1%(57/67).在行CK19 RT-PCR的29例中,检测出常规病理未检出的微小转移病例8例.敏感度90.0%(18/20),准确率93.1%(27/29).结论:前哨淋巴结活检可有效判断乳腺癌腋淋巴结转移状态,应用CK19 RT-PCR检测SLN的微转移,可提高敏感度及准确率.     

乳腺癌CYP19基因多态性对芳香化酶抑制剂疗效影响的临床研究

目的:探讨CYP19基因多态性与芳香化酶抑制剂(Aromatase Inhibitors,AIs)疗效及不良反应的相关性.方法:刮取78例服用AIs出现复发转移乳腺癌患者的口腔黏膜,采用Real-time RT-PCR法检测CYP19基因rs4646、rs10046位点多态性,并分析其与临床病理特征,预后及不良反应的关系.结果:78例转移性乳腺癌中检测到CYP19 rs4646、rs10046突变型发生率分别为44.9％ (35/78)、52.6％(41/78).CYP19基因多态性与患者临床病理因素无关(P＞0.05).Kaplan-Meier生存分析显示,CYP19 rs4646及rs10046位点突变组平均DFS长于野生组,两组间差异有统计学意义(x2=24.96,P＜0.001;x2=14.00,P＜0.001).Cox回归分析显示,肿瘤分级(Ⅲ级vs Ⅰ级,HR =2.73,95％ CI:1.48 ～5.06,P=0.01)和rs10046突变(HR =2.54,95％ CI:1.02～6.31,P=0.04)均是延长无病生存时间的不利因素.rs4646突变(HR =0.13,95％ CI:0.05～0.35,P=0.01)是延长无病生存的有利因素.CYP19 rs4646突变型患者发热潮红和骨痛的发生率分别为22.9％及37.1％,明显高于野生型患者(11.6％vs.18.6％,P=0.03).结论:CYP19 rs4646及rs10046位点SNP与乳腺癌AIs的疗效及不良反应相关,服用AIs前均应推荐检测CTP19 rs4646及rs10046基因型.     

逆转录-聚合酶链反应联合检测乳腺癌腋窝淋巴结和骨髓的微转移

目的：检测原发性乳腺癌常规病理检查一淋巴结和骨髓中微转移琢与其它临床参考指标的关系。方法：利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）联合检测腋窝淋巴结和骨髓中细胞是白１９（ＣＫ－１９）基因表达。将乳腺癌细胞株（Ｔ４７Ｄ）与骨髓细胞按不同比例混合，比较ＲＴ－ＰＣＲ与免疫组化（ＩＨＣ）方法的检测敏感性。结果：３５例乳腺癌共１３７枚淋巴结有８例１１枚ＣＫ－１９表达阳性；３５份髓标本，其中８份ＣＫ－１９表达