蝎毒纤溶活性肽预处理对缺氧血管内皮细胞抗凝和纤溶功能的影响

目的 应用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧模型,探讨蝎毒纤溶活性肽(SVFAP)对缺氧损伤内皮细胞的保护作用.方法 对培养的HUVECs传代并分组:对照组常规培养;缺氧组将其放入含95% N2、5% CO2混合气体的缺氧环境中培养12 h,制备HUVECs缺氧损伤模型;药物干预组分别将终浓度为2,4,8 mg/L的SVFAP加入细胞培养液中进行培养,1 h后进行缺氧模型复制.观察各组细胞培养上清液中漂浮细胞数、抗凝、纤溶指标等变化.结果 与对照组相比,模型组培养液中的漂浮细胞数显著增高,前列环素(6-keto-PGF1α)和NO水平显著下降,组织型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)活性增高,组织型纤溶酶原激活物(t-PA)活性显著降低; 蝎毒纤溶活性肽在较高剂量组能显著提高6-keto-PGF1α和NO水平、调节PAI-1和t-PA活性.结论 实验制备的HUVECs缺氧损伤模型存在着内皮细胞(EC)受损, 纤溶、抗凝功能失调; 蝎毒纤溶活性肽对缺氧环境下受损EC具有保护作用.     

全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞纤溶活性的影响

目的观察不同浓度全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞（VEC）释放组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）活性的影响。方法以凝血酶和不同剂量的全蝎纯化液同时作用于培养的人脐静脉内皮细胞（VEC-340）,12h后收集细胞液测定t-PA和PAI活性。结果与空白组比较,凝血酶组t-PA活性降低,PAI活性增高,差异有统计学意义（P〈0.01）,与凝血酶组比较,全蝎大剂量、中剂量、小剂量组t-PA活性均增高,PAI活性降低,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凝血酶对VEC-340细胞具有损伤作用,可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。全蝎纯化液可促进血管内皮细胞释放t-PA,抑制PAI分泌,对纤溶平衡具有调节作用。提示这可能与全蝎纯化液增加血管内皮细胞抗血栓能力有关。     

心病血瘀证与纤溶系统活性的相关性

目的:从纤溶系统活性探讨心病血瘀证及其不同证型的病理机制。方法:随机选择72例心病血瘀证患者、20例心病非血瘀证患者与20例健康人,采用ELISA法检测血浆组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及抑制物(PAI-1)。结果:①心病血瘀证组的t-PA显著低于健康对照组和心病非血瘀证组(P<0.01),PAI-1、PAI-1/t-PA显著高于健康对照组和心病非血瘀证组(P<0.01)。②心病血瘀证不同证型组的t-PA均较健康对照组显著降低(P<0.01),PAI-1、PAI-1/t-PA均较健康对照组显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论:纤溶系统活性降低是心病血瘀证形成的重要因素。综合分析t-PA、PAI-1、PAI-1/t-PA的水平对心病血瘀证的诊断有一定意义。     

不同条件下香烟提取物对血管内皮细胞纤溶平衡的影响

目的研究不同条件下香烟提取物（CSE）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）组织型纤溶酶原激活物（t—PA）和纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）含量的影响。方法选用第4代～6代HUVECs，接种于24孔培养板中，分为3组：①对照组；②不同浓度（5％、10％、20％）同一时间点CSE组：6h后收集各组细胞上清液；③同一浓度不同时间点CSE组：5％CSE刺激HUVECs，于不同时间点（4h、6h、8h、12h、24h）分别收集细胞上清液，采用酶联免疫吸附双抗体夹心分析（ELISA）法测定各组上清液中t—PA和PAI-1的抗原浓度。结果与对照组相比，不同浓度（5％、10％、20％）同一时间点CSE组中，6h后各浓度CSE组PAI-1含量均显著增高（P〈0．05），但各组间差异无统计学意义，10％与20％CSE组t—PA含量变化明显降低，而5%CSE组t—PA含量变化无统计学意义。同一浓度不同时间点CSE组中，5％CSE组PAI-1含量较对照组升高，且呈时间依赖性；t—PA含量变化无统计学意义。结论CSE可直接损伤血管内皮细胞，并抑制其纤溶活性，从而增加血栓痛的发生。     

大黄蟅虫九对血瘀模型大鼠纤溶活性及血小板内环核苷酸含量的影响

以高分子右旋糖苷尾静脉注射造成大鼠急性血瘀模型后，以比色法测定大鼠血浆组织型纤溶酶原激活剂（Ｔｉｓｓｕｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ，ｔ－ＰＡ）活性及其抑制物（ＰｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒＰＡＩ）活性，并观察大黄　虫丸对其影响。结果表明，造型后大鼠血浆ｔ－ＰＡ活性低于空白对照组，而ＰＡＩ活性显著升高。给大黄　虫丸２．５ｇ／ｋｇ一周后．ｔ－ＰＡ活性显著增高，ＰＡＩ活性与模型组比较无显著变化。大黄　虫丸还能提高大鼠洗涤血小板内ｃＡＭＰ含量，对ｃＧＭＰ的水平无影响。     

常通口服液对实验性肠粘连兔纤溶活性的影响

目的:观察常通口服液(CTOL)对实验性肠粘连兔纤溶活性的影响。方法:仿 Thomas and Rhoads方法制作兔肠粘连模型,并以CTOL连续预防给药灌服7天后,兔耳静脉采血检测t-PA和PAI活性的变化,并肉眼观察兔肠粘连的情况。结果:CTOL各剂量组对兔术后肠粘连有明显的预防作用,并使其血中t-PA活性增高,PAI显著下降。结论:CTOL可能是通过调节机体的纤溶系统以达到防治术后肠粘连的作用。     

急性脑梗死纤溶系统活性与CRP的临床研究

目的 通过观察急性脑梗死患者血浆t-PA、PAI-1和血清CRP水平变化,探讨CRP与急性脑梗死纤溶系统活性的关系,明确急性脑梗死纤溶系统异常与炎症反应有关. 方法 选择急性脑梗死患者87例,用双抗体夹心固相酶联免疫吸附法测定血浆t-PA和PAI-1含量,用免疫速率比浊法测定血清CRP含量,并以健康者30例为正常对照组.所有数据处理采用统计学软件进行分析. 结果 急性脑梗死患者血浆t-PA、PAI-1及血清CRP水平均明显升高;t-PA/PAI-1比值明显降低. 结论 急性脑梗死纤溶系统活性降低与炎症反应程度升高有一定相关性,血清CRP可反映急性脑梗死纤溶系统活性异常的程度.     

健康老年人血瘀证的调查及血浆t－PA、PAI活性的研究

通过对７７例健康老年人进行血瘀证的调查，并与３５例健康青年人作对照，结果发现５１．７９％的健康人群有血瘀证出现，不同年龄组血瘀证检出率有非常显著性差异（Ｐ＜０．００５）。同时随年龄增长，血瘀证检出率呈递增变化规律。采用发色底物分析法检测血浆组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）及其抑制物（ＰＡＩ）的活性及Ｐ／ｔ比值。结果显示：老年前期及老年期血浆ｔ－ＰＡ活性均明显高于青年人（Ｐ均＜０．０１）。而ＰＡＩ活性各年龄组均无显著差异，Ｐ／ｔ比值老年人显著下降（Ｐ＜０．０５）。实为老年机体对抗高凝状态的生理代偿反应，对促使老年人维持生理平衡有极其重要的意义。     

青心酮对人血管内皮细胞tPA和PAI生成的影响

以发色底物分解产色法检测了青心酮对培养的人脐静脉内皮细胞tPA和PAI活性的影响。结果显示青心酮具有调节PAI和tPA平衡的作用，由于对PAI的抑制作用明显强于对tPA的作用．PAI／tPA比值明显下降。此调节作用并呈现一定的量效关系。因此，DHAP改善器官如子宫胎盘的微循环可能与其调节血管内皮细胞PAI／tPA活性平衡的作用有关。     

从痰论治非酒精性脂肪性肝炎痰瘀证对纤溶状态的影响

目的 观察从痰论治非酒精性脂肪性肝炎（Non—alcoholic steatohepatitis,NASH）痰瘀证的临床疗效。方法 62例NASH痰瘀证患者随机分为两组,治疗组34例,给予化痰利湿、舒肝利胆、活血化瘀中药（组成：青黛10g明矾3g草决明15g生山楂15g醋柴胡10g郁金10g丹参12g泽兰12g六一散15g）每日1剂,水煎分两次口服;对照组28例,予熊去氧胆酸片口服,每次150mg,每日3次。两组共治疗12周,并分别于治疗前后评价肝功能（ALT、AST、ALP）、胰岛素抵抗指标（HOMA—IR、Ins）、组织纤溶酶原激活物（t-PA）、1型纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）及主要症状、体征改善情况。结果 （1）治疗组治疗后ALT、AST、HOMA-IR、t—PA、PAI-1及主要症状均较治疗前改善（P〈0．05或P〈0．01）;（2）与对照组治疗后比较,ALP、HOMA-IR、t-PA、PAI-1差异有显著性（P〈0．05或P〈0．01）;（3）熊去氧胆酸片对肝功能指标的改善以谷丙转氨酶、t—PA显著（P〈0．01）,HOMA-IR、Ins、PAI-1及症状亦有所改善。结论 从痰论治NASH痰瘀证能有效改善肝功能及纤溶状态,且优于熊去氧胆酸片。     

全蝎纯化液对实验性动脉血栓形成t-PA、PAI-1的影响

目的观察全蝎纯化液对新西兰白兔颈总动脉血栓形成组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原活化物抑制剂（PAI-1）、血小板计数（Pt）的变化。方法将50只健康新西兰白兔随机分成5组：空白组、模型组、全蝎纯化液大剂量组（20mg/kg）、全蝎纯化液中剂量组（10mg/kg）和全蝎纯化液小剂量组（5mg/kg）。耳缘静脉注射药物（空白组、模型组注射同等体积的生理盐水）后,采用H2O2损伤新西兰白兔颈总动脉制备血栓模型,造模2h后,采血并取血栓,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血浆t-PA、PAI-1的含量。结果与空白组比较,模型组t-PA明显降低,PAI-1明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组相比,全蝎纯化液各剂量组能明显抑制PAI-1活性,增加t-PA活性,差异均有统计学意义（P〈0.01）,而各组的血小板计数差异无统计学意义（P〉0.05）。结论全蝎纯化液各剂量组可明显促进血浆t-PA的分泌,抑制血浆PAI-1活性,提示全蝎纯化液抗血栓作用机制可能与其促纤溶作用有关。     

补阳还五汤有效组分对血管内皮细胞抗血栓功能及蛋白激酶C的影响

目的探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱、苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗血栓功能改变及蛋白激酶C(PKC)活化的影响。方法以凝血酶(10 U/mL)作用于培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304),同时加入药物,24 h后测定上清液中组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平、细胞组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、凝血酶调节蛋白(TM)mRNA表达及PKCα蛋白表达。结果凝血酶作用内皮细胞后,tPA释放增加(P<0.01),TF、TFPI mRNA表达增强(P<0.05),而PAI-1释放及TM mRNA表达无显著性变化(P>0.05);PKCα表达增强(P<0.05)。补阳还五汤可抑制凝血酶诱导的tPA释放增加(P<0.01),生物碱对tPA释放增加无显著影响(P>0.05);苷(1.25 mg/mL)可使凝血酶诱导的tPA分泌增加(P<0.05);原方、生物碱(2 mg/mL)和苷(5 mg/mL)均可抑制内皮细胞分泌PAI-1(P<0.01)。原方、生物碱(1,2 mg/mL)和苷均可抑制凝血酶诱导的TF mRNA表达增强;生物碱(0.5和1 mg/mL)可抑制TFPI mRNA表达(P<0.05);各药对TM mRNA表达无显著影响;原方、生物碱和苷均可抑制凝血酶诱导的内皮细胞PKCα表达的增强(P<0.01)。PKC激活剂佛波酯(PMA)刺激内皮细胞后,PKCα被激活(P<0.01);PKC抑制剂H7作用于PMA刺激的内皮细胞后,PKCα表达增强不明显,PAR-1受体抑制剂CATG作用于凝血酶刺激的ECV304细胞后,PKCα表达显著抑制(P<0.05)。结论凝血酶可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。补阳还五汤原方、生物碱和苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗凝、纤溶功能的改变具有调节作用,使血管内皮细胞的抗凝、纤溶作用趋于正常,其作用可能主要是通过抑制凝血酶诱导的PKCα的激活而介导的。生物碱和苷类有效组分可能为该方抗血栓作用的药效物质基础。     

3种他汀药物调控纤溶活性抑制人血管平滑肌细胞增殖与迁移

 目的 探讨3种常用他汀药物(普伐他汀、辛伐他汀和氟伐他汀)介导纤溶酶原激活物及其抑制剂对体外培养人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。方法 采用四唑盐(MTT)比色法测定VSMC增殖活性,刮伤实验和改良Transwell chamber装置测定细胞迁移能力;用RT-PCR分析细胞tPA,uPA和PAI-1 mRNA表达;采用发光底物法测定细胞分泌tPA和PAI-1蛋白含量。结果 辛伐他汀和氟伐他汀可通过下调细胞PAI-1 mRNA表达和上调tPA mRNA表达,抑制10％胎牛血清诱导VSMC增殖和迁移,不同他汀药物对纤溶活性的调控时相不尽相同。普伐他汀在指定时间对基因转录活性无影响,随培养时间延长对tPA和PAI-1蛋白分泌伴有轻度增加和抑制。结论　他汀类药物抑制VSMC增殖和迁移可能与非调脂性抗动脉粥样硬化作用机制有关,辛伐他汀和氟伐他汀通过上调tPA mRNA和下调PAI-1 mRNA基因转录活性,而普伐他汀可能与tPA和PAI-1通过翻译后修饰或与辅助因子相互作用而调控纤溶酶及其抑制物活性,进而促进纤溶,抑制细胞增殖和移行。     

Effects of baicalein isolated from roots of Scutellaria baicalensis Georgi on interleukin 1β- and tumour necrosis factor α-induced tissue-type plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor-1 production in cultured human umbilical vein endothelial cells

The effects were examined of baicalein on tissue-type plasminogen activator (t-PA) and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) production stimulated by interleukin-1α (IL-1β) and tumour necrosis factor-α (TNF-α) in cultured human vein umbilical endothelial cells (HUVECs). IL-1β and TNF-α increased PAI-1 production, but they decreased t-PA production. Baicalein isolated from the roots of Scutellaria baicalensis Georgi, inhibited the PAI-1 production stimulated by IL-1β and TNF-α, but it had no effect on the t-PA. In addition, protein kinase C (PKC) inhibitors such as H7 and sphingosine decreased the reduction of t-PA and the increase of PAI-1 by IL-1β and TNF-α. On the other hand, dibutryl cAMP and forskolin had no effect on the t-PA reduction and PAI-1 increase by IL-1β and TNF-α. Moreover, IL-1β and TNF-α did not cause [Ca²⁺] elevation. These results suggest that the inhibitory action of baicalein on the PAI-1 production by both cytokines might be directly mediated through PKC inhibition. © 1997 John Wiley & Sons, Ltd.     

丹酚酸B对糖尿病动脉粥样硬化斑块内血栓相关因子的影响

[目的]观察丹酚酸B对抗糖尿病动脉粥样硬化斑块血栓形成的作用及可能的发生机制。[方法]选取50只8周龄雌性ApoE-/-小鼠,腹腔注射链尿佐菌素200 mg/kg联合高脂饲料喂养12周,将血糖水平11.1 mol/L 40只ApoE-/-小鼠作为糖尿病动脉粥样硬化模型小鼠,随机分为模型组(MOD)、丹酚酸B高剂量组(SalBH)、丹酚酸B中剂量组(SalBM)与洛伐他汀组(LVT)4组,每组10只。各组均连续灌胃8周。实验期满后,测定空腹血糖水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清I型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的浓度。免疫组织化学染色检测斑块内组织因子(TF)的表达,利用Image-Pro Plus Version 6.0(IPP)图像分析系统计算结果。[结果]与MOD组比较,各治疗组TF平均光密度值明显降低(P0.05);与MOD组比较,SalBM组PAI-1浓度明显降低(P0.05)[。结论]丹酚酸B能够降低糖尿病动脉粥样硬化斑块内TF的表达和血清PAI-1含量,提示丹酚酸B可能是通过以上机制来减少粥样硬化斑块内的血栓形成。     

中药全蝎醇提取物体外抑制猪囊尾蚴活性的作用

将全蝎醇提取物置于15%猪胆汁常水溶液中在37℃进行体外培养,并以化学药物丙硫咪唑作对照,首次证实了全蝎体外具有显著的杀灭猪囊尾蚴的作用,其不同的加工品和药用部位的灭囊活性无显著差异。     

金芪降糖片对高脂胰岛素抵抗鼠PAI-1和t-PA活性的影响

【目的】观察金芪降糖片对高脂胰岛素抵抗鼠血浆纤溶酶原抑制剂(PAI-1)、组织纤溶酶原激活物(t-PA)活性的影响。【方法】采用高脂饮食饲养大鼠使其产生胰岛素抵抗模型，观察金芪降糖片干预后高脂胰岛素抵抗鼠胰岛素敏感性、血浆PAI-1、t-PA活性的变化。【结果】高脂饲养大鼠8周后。高脂饲养组胰岛素敏感指数较正常饲养组明显减低，确立胰岛素抵抗模型。饲养14周后大鼠血浆PAI-1测定，模型组比正常组明显增高，金芪降糖片用药组较模型组明显下降；血浆t-PA测定，模型组较正常组明显降低，用药组明显高于模型组。【结论】金芪降糖片可改善胰岛素抵抗，并使大鼠血浆PAI-1水平降低、t-PA水平升高，改善纤溶活性。     

加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏组织PAI-1基因表达的影响

目的：探讨加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏组织PAI-1 mRNA表达的影响。方法：造模大鼠随机分成正常组、模型组、加减抵当汤高、中、低剂量组、罗格列酮组,用RT-PCR方法检测加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏组织PAI-1 mRNA表达的影响。结果：加减抵当汤高、中剂量组能明显下调胰岛素抵抗大鼠PAI-1 mRNA的表达（P〈0.05和P〈0.01）。结论：加减抵当汤能下调PAI-1 mRNA的表达,可能是其改善胰岛素抵抗的机理之一。