黄芪皂苷注射液指纹图谱的研究

目的：建立黄芪皂苷类成分注射液(包括药材、中间体及注射液制剂)的HPLC-ELSD指纹图谱质量控制方法。方法：Agilent Zorbax SB-C₁₈柱,流动相为A水-B乙腈,二元梯度洗脱：15%～60%B（0～65 min）,流速0.8 mL·min^-1,蒸发光散射检测器,漂移管温度105 ℃,载气流速2.7 L·min^-1。结果：药材、中间体、注射液制剂中标定的各共有峰相对保留时间的RSD值均小于1.0%,单峰面积大于或等于10%峰的峰面积比值也比较稳定,三者的图谱间具有很好的相关性,10批样品间具有很高的相似度。结论：本方法可作为黄芪皂苷注射液质量控制的依据。     

人参总皂苷提取物指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法建立人参总皂苷提取物的指纹图谱。方法:色谱柱Hypersil C₁₈(4.6mm×250mm,5μm),流动相:A为乙腈,B为0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱0～30min19%A,30～35min19%～24%A,35～60min24%～40%A。柱温:35℃,检测波长:203nm,流速:1.3mL·min^-1。结果:人参总皂苷提取物指纹图谱共检出10个峰,峰面积之和大于总峰面积的90%,其精密度、稳定性、重复性均良好。结论:该方法可作为控制人参总皂苷提取物内在质量的标准。     

人血浆中盐酸二甲双胍HPLC测定法

 目的建立人血浆中盐酸二甲双胍高效液相色谱测定方法。方法取200μL血浆,加入雷尼替丁(ranitidine)为内标,以400μL乙腈沉淀蛋白,上清液与二氯甲烷混合离心后,取上层水相进样分析。流动相:乙腈-0.05 mol·L^-1NaH₂PO₄-0.05 mol·L^-1Na₂HPO₄(75∶25∶5);流速1.0 mL·min^-1,紫外检测波长236 nm,室温操作。结果二甲双胍与内标分离良好,保留时间分别为12.5和11.6 min。标准曲线范围0.025～4.0 mg·L^-1,线性良好(r=0.999 5,n=5),批间RSD为2.46%～4.96%(n=5),批内RSD为1.85%～3.97%(n=10),最低检测限为0.01 mg·L^-1`。二甲双胍在检测过程中保持稳定。结论本方法取样量小,操作快速简便,专一性强,灵敏度高,可满足药动学研究需要。     

山麦冬和麦冬皂苷类成分的HPLC/ESI-MS图谱研究

 目的鉴定山麦冬和麦冬中的皂苷成分,并建立其特征图谱。方法用甲醇提取山麦冬和麦冬对照药材,并用C₁₈SPE固相萃取柱除去提取液中的多糖成分制备供试液;用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱(HPLE/ESI-ITMS)研究供试液中的总皂苷成分并建立相应的特征图谱。实验条件为:AICHROM^TMRelizSilC₁₈(2.1mm×150mm,5μm)分析柱,流动相为10mmol·L^-1醋酸铵和乙腈(60min内乙腈浓度变化为25%～60%),流速为0.2mL·min^-1,自动进样后色谱分离、质谱检测。结果山麦冬、麦冬对照药材中分别有17个和14个特征色谱峰,根据各色谱峰的二级质谱碎片信息并参考有关文献,对其中的一些皂苷成分进行了初步定性分析。结论所测山麦冬与麦冬样品两者HPIE/ESI-ITMS的图谱特征性强,差异明显。     

葛根药材及其提取物HPLC指纹图谱研究

 目的研究建立葛根色谱指纹图谱,提供较完整的质量信息,更有效地监控质量。方法采用RP-HPLC,色谱柱:Shim-pack C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A-乙腈;B-水(0.05%醋酸),梯度洗脱,0～20 min,90%～90%B;20～60 min,90%～60%B;流速为1.0 mL·min^-1,柱温为40℃,检测波长为254 nm,进行了葛根药材以及提取物指纹图谱研究。结果运用梯度洗脱法得到的色谱图各色谱峰分离较好,达到指纹图谱要求。结论采用该法可为控制葛根药材、提取物以及其制剂的内在质量提供依据。     

反相高效液相色谱法测定血清中来氟米特活性代谢物A771726的浓度

 目的：建立反相高效液相测定人血清中来氟米特（leflunomide,Lef）活性代谢物A₇₇₁₇₂₆浓度的方法。方法：采用VP-ODS C₁₈柱,0.01 mmol·L^-1醋酸盐缓冲液(pH4.6)-乙腈(67∶33)为流动相,紫外检测波长为288 nm,流速1.0 mL·min^-1,血清样品用乙酸乙酯提取。结果：A₇₇₁₇₂₆在血清中得到很好的分离,没有明显的干扰峰,出峰时间为6.4 min。线性范围0.39～50 mg·L^-1（r=0.9996）,最低检测限为0.098 mg·L^-1,血清中日内和日间RSD均小于7%,回收率为89.4%～95.3%。结论：本法简便灵敏,符合生物制品分析要求。     

丹参酮微乳制剂的HPLC指纹图谱研究

目的 :建立丹参酮微乳的HPLC指纹图谱。方法 :采用HPLC ,HypersilC₁₈色谱柱 (4.6mm× 250mm ,5μm) ;流动相 0.5%磷酸溶液 (A)、乙腈 (B)和梯度洗脱 ,B的体积分数在 60min内由 10 %线性增长到 80 % ;检测波长270nm ;分析时间 60min ;流速 1.0mL·min^-1。结果 :标示出丹参酮微乳制剂 7个共有峰。结论 :本方法建立的丹参酮微乳HPLC指纹图谱方法简便、可靠、专属性强 ,为丹参酮微乳质量标准的制定提供了理论依据。     

RP-HPLC同时测定人血浆丙泊酚和利多卡因

 目的建立反相高效液相色谱同时测定人血浆丙泊酚(异丙酚)和利多卡因的方法。方法以麝香草酚和布比卡因分别为异丙酚和利多卡因的内标,样品用环己烷提取。氮气吹干有机层,残留物用流动相重新溶解后,用Hypersil BDS C₁₈柱分析,流动相为乙腈-甲醇-水(10∶60∶30),内含正丁胺0.14%和冰醋酸0.1%,流速为1 mL·min^-1,检测波长：1～7 min用220 nm,7～16 min用273 nm。结果异丙酚和利多卡因的血药浓度与峰面积比在0.1～25.6μg·mL^-1的范围内呈线性关系（r=0.998,r=0.9995）,检测限分别为0.1和0.05μg·mL^-1,日内和日间偏差小于5%(n=5), 其相应的平均回收率分别为：93.33%,99.4%和90%,95.67%。结论此方法简便,结果准确,适合用于异丙酚和利多卡因的临床药动学和药效动力学研究。     

HPLC测定片仔癀中4种成分的含量

 目的建立测定片仔癀中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁及牛磺胆酸钠的含量。方法采用Hypersil BDSC₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.5%磷酸溶液(B)梯度洗脱:0～40 min(20%A～40%A),40～90 min(40%A～90%A),90～100 min(90%A);柱温:30℃;流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:203 nm。结果测得三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁及牛磺胆酸钠的回收率分别为100.3%,101.6%,103.3%,100.6%。线性范围分别是:三七皂苷R₁ 0.346 4～8.66μg(r=0.9963),人参皂苷Rg₁ 0.432 2～10.805μg(r=0.9964),人参皂苷Rb10.4224～10.56μg(r=0.9999),牛磺胆酸钠0.448～11.2μg(r=0.999 6)。结论采用高效液相色谱梯度洗脱能将片仔癀中的皂苷及胆汁酸较好的分离检测,方法准确可靠,重复性好,结果稳定,可作为该产品质量控制的方法。     

RP-HPLC测定人血浆中盐酸依匹斯汀浓度及其药动学

 目的建立RP-HPLC测定人血浆中盐酸依匹斯汀浓度。方法采用Agilent 1100系列高效液相色谱仪。色谱柱Kro—masil^TM C₁₈(4.6 mm×150 mm,7μm);固定进样环50μL;流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(0.05 mol·L^-1KH₂PO₄用H₃PO₄调pH至3.5)(30:70),流速1.0 mL·min^-1;紫外检测波长:210 nm;柱温:室温;内标为替硝唑。结果盐酸依匹斯汀血药浓度线性范围为1.062 5～34.0000 ng·mL^-1,最低检测浓度1.062 5 ng·mL^-1;方法回收率为94.02%～106.46%;日内、日间RSD分别为2.54%～8.09%和4.90%～9.09% 结论本法灵敏、准确,可用于盐酸依匹斯汀进一步的临床研究。     

正交试验优选蛇黄凝胶提取工艺

目的： 优选蛇黄凝胶的提取工艺。方法： 采用L₉（3⁴）正交试验设计,以三羽新月蕨苷A、大黄素和干膏得率为评价指标,在单因素试验基础上,通过综合评分优选蛇黄凝胶的提取工艺。采用HPLC测定三羽新月蕨苷A、大黄素含量,流动相乙腈（A）-0.1%磷酸水（B）-水（C）梯度洗脱（0~40 min,10%~70% A,10% B,80%~20%C）,检测波长226 nm。结果： 最佳提取工艺条件为加14倍量70%乙醇提取3次,每次30 min;大黄素、三羽新月蕨苷A平均提取量依次为0.37,0.76 mg·g^-1。结论： 优选的提取工艺稳定可行,对蛇黄凝胶的生产工艺具有一定的指导和参考意义。     

正交试验优选复方肠泰颗粒提取工艺

目的:优选复方肠泰颗粒的提取工艺,为该制剂的工业化生产提供参考。方法:以浸出物、人参皂苷Rb1及常春藤皂苷元得率为综合评价指标,采用L9(34)正交试验考察加水量、提取时间和煎煮次数对提取效果的影响。采用HPLC测定人参皂苷Rb1和常春藤皂苷元含量,流动相分别为流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~5 min,10%~30%A;5~20 min,30%~45%A;20~22 min,45%~10%A)和乙腈-0.1%甲酸水溶液(70∶30)。结果:最佳提取工艺为分别加10,8,8倍量水提取3次,每次1 h。人参皂苷Rb1和常春藤皂苷元质量分数分别为2.48,10.50 mg·g-1,浸出物得率16.72%。结论:优选的提取工艺重复性好、稳定可行,适用于复方肠泰颗粒的工业化生产。     

茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱分析

目的:建立茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱并测定苍术苷A含量,为该药材的质量控制与资源开发提供参考。方法:利用HPLC建立茅苍术的指纹图谱并测定苍术苷A含量,流动相乙腈(A)-0.25%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~17min,2%~5%A;17~25 min,5%~12%A;25~35 min,12%A;35~50 min,12%~17%A;50~70 min,17%~34%A;70~80min,34%~40%A),检测波长221 nm,流速0.6 m L·min-1。采用外标法测定苍术苷A在10批茅苍术药材中含量。结果:建立了茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱,检出共有峰18个,精密度、稳定性、重复性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均<3%。10批茅苍术水提物中苍术苷A含量较稳定,平均质量分数2.775 mg·g-1。结论:HPLC指纹图谱方法与苍术苷A的含量测定方法准确、稳定、简便,可有效控制茅苍术药材的内在质量。     

LC-UV和LC-MS在山楂叶多元酚类成分分析中的应用比较

目的:对LC-UV和LC-MS在山楂叶多元酚类成分分析中的应用进行方法学比较。方法:采用高效液相色谱并联双检测器(VWD和MSD)法。色谱柱为Lichrospher C18(250×4.6 mm I.D.,5μm);流动相A为乙腈,B为0.5%甲酸溶液,梯度洗脱,0-12 min A由11%-17%,12-30 min A由17%-18%,30-45 min A由18%-40%,45-60 minA由40%-100%;流速为1ml/min,三向分流阀分流进入MSD和VWD进行检测;柱温30℃;进样量10μl。结果:LC-MS灵敏度比HPLC法高10倍以上,在检测样品中微量成分时具有很大的优势;另外,LC-MS是根据tR和m/z两项指标来确定成分的类型,对于某些用LC-UV方法不能得到良好分离的组分或在LC-UV图谱上保留时间与对照品相近的其它成分,可以选用选择性离子检测(SIM)进行分析,能避免这些成分的干扰,因而具有高度的选择性和专属性。而LC-UV法操作简便,成本低,流动相选择面较广,因而分离度往往比LC-MS高,在检测样品中具有较好的紫外吸收、较好的分离度以及含量较高的成分时,LC-UV法以其高精密度和高稳定性完全可以达到LC-MS同样的检测结果。结论:LC-MS和LC-UV在山楂叶多元酚类成分的定量分析方面各有特色,可根据不同的检测指标选用不同的检测器。     

茜草饮片HPLC指纹图谱研究

目的:利用高效液相色谱法,建立茜草饮片的指纹图谱.方法:色谱条件,Hanbon Kromasil C18柱(4.6 mm× 250mm,5 μm);流动相A为乙腈,B为0.1％三氟乙酸;洗脱方法(0～ 30 min,10％～25％A;30 ～ 35 min,25％ ～50％A;35～55min,50％～65％A;55 ～ 70 min,65％ ～95％ A;70 ～75 min,95％ ～ 10％A).体积流量1.0 mL·min-1;柱温30℃;检测波长240nm;进样量10μL.结果:对10批茜草饮片进行测定,标定出15个共有峰,采用《中药色谱指纹图谱相识度评价系统2004A版》软件计算出其相似度范围在0.824 ～0.989,并得出了茜草饮片的对照指纹图谱.结论:该法准确,重复性好,可作为茜草饮片质量控制方法.     

多指标正交试验优选桂枝甘草汤提取工艺

目的:优选桂枝甘草汤的提取工艺。方法:采用HPLC测定甘草苷、肉桂酸、桂皮醛及甘草酸含量,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~10 min,5%~20%A;10~15 min,20%~23%A;15~30 min,23%~32%A;30~40min,32%~35%A;40~50 min,35%~40%A;50~60 min,40%~50%A),检测波长254 nm。以甘草苷、肉桂酸、桂皮醛、甘草酸和浸出物提取量的综合评分为指标,采用正交试验考察加水量,提取次数,提取时间对提取工艺的影响。结果:桂枝甘草汤的最佳提取条件为加12倍量水回流提取3次,每次1 h;甘草苷、肉桂酸、桂皮醛、甘草酸及浸出物提取量分别为5.93,11.73,12.25,12.34,172.86 mg·g-1。结论:多指标综合加权法能较为合理地反映桂枝甘草汤的整体药效,为该方的临床应用与开发提供实验依据。     

药用胶囊中合成着色剂的含量测定

 目的检测药用胶囊中合成着色剂含量。方法高效液相色谱梯度洗脱法,流动相A为乙腈,B为0.02 mol·L^-1乙酸铵,洗脱程序:0～5 min,A相浓度8%～18%,B相浓度92%～82%;5～12 min,A相浓度18%～74%,B相浓度82%～26%;12～15 min,A相浓度74%～74%,B相浓度26%～26%。流动相流速为1.0 mL·min^-1,紫外检测波长254 nm,柱温25℃,进样量:10μL。结果药用胶囊中的合成着色剂回收率达93.2%～98.5%,精密度RSD在0.8%～3.0%,浓度范围在5～60 mg·L^-1时有良好的线性关系。结论应用此方法可使合成着色剂得到很好分离,测定结果满意。     

异长春花苷内酰胺大孔树脂纯化研究

目的:研究大孔树脂吸附分离纯化异长春花苷内酰胺的工艺,为异长春花苷内酰胺的工业化生产提供参考.方法:采用静态吸附-解吸方法,从10种大孔吸附树脂筛选出最佳树脂,另外采用单因素影响试验,对吸附量、水洗脱体积、乙醇洗脱浓度及体积进行了考察.结果:HPD400大孔树脂对异长春花苷内酰胺的吸附及解吸附效果最好,树脂的最佳吸附量为20.23mg·g-1,水及30%乙醇洗脱体积为6 BV,70%乙醇洗脱体积为4 BV.结论:该法简单可行,分离效果好,对大生产有一定指导作用.     

基于指纹图谱考察不同型号大孔树脂对莱菔子水提液的纯化效果

目的： 考察不同型号大孔吸附树脂对莱菔子水提液的纯化效果。方法： 采用HPLC测定芥子碱硫氰酸盐含量,流动相乙腈（A）-0.1%磷酸（B）进行梯度洗脱（0~15 min,5%~10% A;15~17 min,10%~12.5% A;17~27 min,12.5%~14% A;27~55 min,14%~25% A;55~57 min,25%~70% A;57~70 min,70%~100% A）,检测波长225 nm。以芥子碱硫氰酸盐洗脱率和HPLC指纹图谱共有峰的总有效成分洗脱率为指标,比较各型号树脂纯化效果,筛选最佳型号大孔树脂。结果： 各树脂对芥子碱硫氰酸盐洗脱率的影响顺序为AB-8>NKA-9>HPD100C>HPD400>X-5>HPD750>HPD722>D101>DM130,对总有效成分洗脱率的影响顺序则为HPD400>HPD100C>HPD722>AB-8>NKA-9>HPD750>DM-130>D101>X-5。AB-8型树脂对芥子碱硫氰酸盐的洗脱率达96.39%,对总有效成分的洗脱率70.03%。结论： 采用AB-8型大孔吸附树脂纯化莱菔子水提取液有效成分是可行的。