包裹细胞和组织的移植

包裹技术已应用于移植外科，植入包裹的细胞和组织可隔绝免疫抑制机制，避免了应用免疫抑制剂的并发症。这一技术已从实验研究走向临床试用，异种细胞也可应用，由此扩大了供体来源。     

微胶囊技术及其在骨科领域的应用

目的 对微胶囊技术及其在骨科疾病方面的应用进行综述。方法 广泛查阅近年相关文献，介绍微胶囊技术的基础知识及其在骨科疾病上的应用。结果 较全面地对微胶囊技术的材料、制备方法、性能评价、缓释性能、免疫隔离和可包裹的细胞系进行了回顾，分析了其作为骨科药物和转基因细胞的载体，用于促进骨愈合，基因治疗骨肿瘤、骨感染和骨软骨再生的作用。结论 微胶囊可以作为骨科药物和转基因细胞的载体，治疗骨科相关疾病。     

微囊新生猪胰岛细胞体外培养的研究

用胶原酶消化和体外培养的方法成功地获得了大量有活性和较纯的新生猪胰岛细胞，用微囊包膜技术包裹胰岛细胞，并进行培养。由放射免疫药盒对培养液中胰岛素的含量测定，胰岛素释放试验和组织学检查等体外实验所得的数据，证实了微囊和非微囊的新生猪胰岛的活性和分泌功能的差异不显著，说明本包膜材料和一步法制囊新技术对胰岛细胞无损伤，微囊包膜后胰岛细胞的活性和分泌功能良好。     

血管组织工程种子细胞研究现状

组织工程化血管构建过程中种子细胞的选取是关键步骤之一.成熟的血管壁细胞及可分化为该类细胞或改善其性能的前体细胞、成体干细胞、胚胎干细胞和基因修饰细胞等,都已作为种子细胞得到研究应用.目前广为采用的还是成熟血管壁细胞,对其分离方法、培养环境等进行改进已使之相对较为适用于组织工程化血管的构建;在体外实验及临床应用中均已证实骨髓基质细胞可分化形成血管壁细胞,但其具体机制仍待阐明;基因转染技术及干细胞的诱导分化也在探索之中.该文对这些种子细胞的研究及应用情况作了综述.     

肝/肝干细胞移植研究中的若干问题探讨

肝细胞移植以其移植技术简单、可重复进行、对受体影响小以及一肝多用、免疫排斥反应弱等优点为肝脏衰竭的治疗提供了一种全新的治疗策略，尤其是近年来肝干细胞的研究进展为这一技术由实验室过渡到临床提供了新的研究思路。本文以笔者实验室自1998年至今的连续的研究工作为基础，回顾了其发展历史，并围绕移植细胞的来源、细胞移植技术、细胞移植机制、移植细胞的示踪等四个方面问题，结合文献进行讨论。移植细胞的来源主要讨论了肝细胞和肝干细胞；细胞移植技术主要为脾内移植技术；在细胞移植机制方面，主要探讨受体肝卵圆细胞的作用；移植细胞的示踪方面主要是应用磁探针标记和磁共振技术进行肝干细胞的示踪。     

生物细胞的永生化和去永生化在细胞镇痛中的应用进展

慢性疼痛和晚期癌痛的治疗研究一直是生命科学的重要课题之一，传统的药物止痛有着诸多不可避免的缺陷。目前，细胞镇痛住动物实验研究方面获得了大量的资料和经验，虽然生物细胞的永生化可暂时解决镇痛细胞的来源和存活等问题，但因其潜在的致瘤性，限制了其推广应用。迄今，随着可诱导的Cre-LoxP重组酶系统在细胞去永生化中的应用，在镇痛细胞的来源、存活和安全性等方面取得了突破性进展，为细胞镇痛的临床应用奠定了基础。     

应用“细胞外科”技术进行神经修复后的早期冰冻切片观察

以大鼠骨神经为模型，分别对应用常规神经外膜修剪缝合法和应用“细胞外科”技术“施行神经修复进行了早期连续冰冻片观察，实验发现，应用“细胞外科”技术可使神经断端对位即刻得以改善，因此我们认为，应用“细胞外科”技术进行经修复是一种较为理想的神经修复方法。     

显微外科与血管化组织工程组织的构建

血运重建是组织再生的基础，要获得组织工程化组织必须保证植入体内的种子细胞尤其是材料内部的种子细胞能够获得及时充分的营养。因此血供的重建就成为组织工程由基础向临床应用的关键性环节。血液供应的重建方法主要有：利用血管内皮细胞生长因子促进血管生长，采用血管内皮细胞与成骨细胞联合移植的方法，或应用显微外科技术。利用显微外科技术，可通过带蒂筋膜瓣包裹、带血供肌瓣包裹或血管束植入的方法，在构建组织工程化组织的同时建立其血液供应。组织工程化组织在临床应用时，如果修复邻近的缺损，只需在原位进行血管化；但在缺损局部软组织条件差、常常无法找到可供利用的筋膜瓣、肌瓣或血管束的情况下，可异位构建血管化的组织工程组织，二期采用显微外科方法通过带血管的组织移植修复缺损。     

人胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定研究

目的：研究人胚胎神经干细胞的培养条件及体外分化情况。方法：从12周龄人胚胎脑皮质分离细胞，采用无血清培养技术，协同应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(ECF)和重组人白血病抑制因子(rhLIF)进行培养；5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记检测细胞的增殖能力，间接免疫荧光化学法检测细胞的分化情况。结果：培养得到的大量半悬浮生长的神经干细胞球能够传代培养；BrdU标记阳性，可诱导分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论：人胚胎脑皮质分离细胞培养得到的细胞群具有神经干细胞的基本特征，可进一步用于基础及临床研究。     

背根神经节与医用可降解材料聚乙醇酸纤维联合培养的实验研究

目的 探索医用可降解材料聚乙醇酸纤维与周围神经组织的生物相容性,观察许旺细胞在聚乙醇酸纤维上迁移、包裹的细胞行为。方法 取新生大鼠背根神经节与医用可降解材料聚乙醇酸纤维联合培养２周,免疫细胞化学染色等形态学观察其变化。结果 许旺细胞能在聚乙醇酸个迁移包裹,并引导神经轴索向远方延伸。结论 许旺细胞和神经轴索可贴附在聚乙醇酸纤维上生长迁移,提示聚乙醇酸纤维和周围神经组织具有良好的生物相容性。     

用无细胞真皮基质包裹全部假体治疗包膜挛缩：一项新技术

背景与目的包膜挛缩是乳房再造术的常见并发症，其受累患者比例为2．8％～15．9％。已有应用无细胞真皮基质治疗包膜挛缩的报道，其复发率为6．3％，但这个比例仅限于假体局部覆盖者。笔者报道一种应用无细胞真皮基质完整覆盖假体来治疗及预防包膜挛缩的新的手术技术。方法将乳房假体以无细胞真皮基质完全包裹并置入，手术由同一医师施行，对此类患者进行图表评估鉴定。记录患者的人口统计学信息、放射治疗或包膜挛缩病史、治疗前及治疗后并发症。结果对11例患者（16只乳房）进行鉴定。患者平均年龄（52．3±6．9）岁，平均体质量指数（23．6±4．4）kg／m。4例患者（5只乳房）有包膜挛缩病史，之前经包囊切除术及更换假体治疗。10例患者为新出现的Ⅲ级（n=2）和Ⅳ级（n=8）包膜挛缩的矫治，l例患者为预防包膜挛缩。无细胞真皮基质的平均尺寸为144～256eIll，平均（229．8±46．5）cm。随访2．4～18．8个月，平均9．2个月。1例患者（1只乳房）出现感染而需要取出假体。无一例患者出现包膜挛缩复发。结论通过无细胞真皮基质包裹可成功治疗包膜挛缩。该技术可作为当前治疗顽固性包膜挛缩（标准疗法下的早期复发或顽固复发）有用的附加技术。（循证医学证据等级：疗法，Ⅳ级）     

脂肪间充质干细胞在组织工程中的研究进展

组织工程的兴起和迅猛发展为组织或器官缺损的修复重建带来了新的治疗途径，并已逐渐成为目前最有前景的生理性修复技术。应用组织工程的方法再造组织与器官所用的各类细胞称为种子细胞。种子细胞研究的目的在于获取足够数量的接种细胞．防止细胞老化并同时保持细胞增殖、合成基质等生物功能。理想组织工程种子细胞应具备①取材容易，对机体损伤小；②增殖能力强；③在诱导因子作用下具有定向分化能力；     

细胞移植示踪技术的研究进展

细胞移植替代疗法已成为现代医学中发展最为迅速的领域之一，移植细胞在宿主体内的存活、增殖、迁移和分布也自然受到人们的极大关注。目前移植细胞的示踪方法可归纳为5类：（1）利用荧光染料标记细胞，     

组织工程学材料替代输尿管缺损的动物实验及临床应用

目的　寻求理想的输尿管替代材料。　方法　将２０ 只兔双侧输尿管脱细胞处理后制成输尿管细胞外基质（ＥＣＭ） ；另６０ 只兔分为３ 组：输尿管ＥＣＭ 移植组（ 实验组） ，对照组１ 及对照组２ 。　结果　实验组术后组织学检查显示１ 周时ＥＣＭ 边缘部腔内面已见移行上皮细胞，管壁有肌细胞长入。６ 周时取材ＥＣＭ 区已修复近正常输尿管组织结构。１２ 、２４ 周时ＩＶＵ 检查；输尿管显影良好，通畅。对照组１ 术后７ ～１０ 天，移植的异体输尿管均坏死。对照组２ 输尿管缺损区６ 周时均被纤维包裹而明显增粗。在实验取得满意结果的基础上成功应用于临床。　结论　异体脱细胞输尿管细胞外基质为理想的输尿管替代材料。     

同种异体脱细胞真皮替代同种异体巩膜在眼窝填充中的实验研究

目的 ①了解同种异体脱细胞真皮植入兔眼窝后的组织相容性。②比较两种不同材料包裹羟基磷灰石(hydmxyapatite，HA)植入的结果，包裹材料及HA的血管化进程。方法 随机将24只新西兰大白兔平均分为两组，于球后间隙内分别植入以同种异体巩膜、同种异体脱细胞真皮作为包裹材料的HA，观察大体情况并分别于植入后1、4、8、12周取出，光镜及电镜检查组织学改变。结果 大体显示同种异体脱细胞真皮组植入后无一例出现排斥，但其血管化速度较同种异体巩膜组缓慢。结论 同种异体脱细胞真皮作为包裹材料有较好的组织相容性。并能逐渐引导被包裹材料的血管化。     

国际细胞治疗学会第十次年会纪要--细胞治疗研究进展

[目的]本文对国际细胞治疗学会（International Society of Cell Therapy，ISCT）第10次年会的会议内容进行综述。本次年会中不同的学者报告了干细胞的分离、纯化和扩增方法，以及干细胞多分化潜能定向调控、免疫调节、归巢募集机理的最新进展。细胞治疗已在肌肉骨骼相关疾病、神经系统疾病、癌症或肿瘤、免疫系统疾病、糖尿病等多种临床学科得到应用，展现了广阔的基础与临床研究应用前景。细胞类型涉及胚胎干细胞、问充质干细胞、造血干细胞和神经干细胞等。这些干细胞可特异性归巢于病损部位，直接参与病损组织或器官的再生和修复，成为多种组织损伤修复的细胞源或基因治疗的细胞载体，其分泌的多种生长因子和细胞因子也直接参与损伤修复反应。有关细胞治疗的基础、临床与药物研发的多方面研究，将进一步提高临床细胞治疗的安全性和有效性。     

生长抑素类似物对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨生长抑素类似物SMS201－995（SMS）对人胆管癌细胞体外增殖和凋亡的调控作用。方法：采用人胆管癌细胞系SK-ChA-1，应用生长曲线，流式细胞仪，片段DNA琼脂糖凝胶电泳，ANNEXIN,V－FITC技术及流式细胞仪间接免疫荧光技术等方法进行检测和观察。结果：在SMS作用下，SK－ChA-1细胞生长受到抑制，短时使细胞阻滞于G0／G1期，SMS处理SK－ChA-1细胞后，Annexin V-FITC标记的凋亡细胞增多，DNA凝胶电泳显示典型的凋亡梯状图谱，同时SMS可使细胞bcl-2蛋白表达下降，使bax蛋白表达升高，结论：SMS可明显抑制SK－ChA-1细胞生长，并能诱导该细胞凋亡，该细胞凋亡机理可能与凋亡调控基因bax和bcl-2的表达有关。     

金雀异黄素对血小板源生长因子刺激下大鼠系膜细胞周期调节蛋白的影响

金雀异黄素（genistein）可影响多种细胞尤其肿瘤细胞的细胞周期调节蛋白的表达而调控细胞的增殖与凋亡，并通过调节细胞外基质（ECM）降解系统酶的活性影响基质的积聚。我们的前期实验已证实血小板源生长因子（PDGF—BB）可诱导体外培养的大鼠系膜细胞（MC）增殖，金雀异黄素可呈浓度依赖性抑制其增殖。既然细胞增殖的调控是在细胞周期水平上进行，而细胞周期又由细胞周期调节蛋白来调控，本实验我们拟研究金雀异黄素如何影响细胞周期调节蛋白的表达最终达到抑制细胞增殖的效应，为金雀异黄素在肾病中的应用提供实验依据。     

主编寄语

自体脂肪颗粒或自体脂肪细胞疗法／移植技术是美容整形外科中应用多年的临床技术。其移植后的成活率是影响移植疗效的重要因素。自2003年日本的吉村浩太郎提出辅助细胞脂肪移植（cell—assistedlipotransfer，CAL）技术以来，多篇文献报道了该技术可提高移植成活率。     

HOE 077对胰岛细胞微囊外纤维化反应及其活力的影响

目的　研究抗肝纤维化药物HOE 0 77对胰岛微囊外纤维化反应及细胞活力的影响。方法　猪胰岛分离后包裹在海藻酸钡微囊内 ,移植于Balb/c小鼠肝内。术后HOE 0 77通过溶解于饮用水中给药 ,对照组饮水中不含HOE 0 77。 1个月后处死动物 ,病理检查观察包囊外的纤维化反应程度 ,评价囊内细胞的存活情况。结果　对照组显示了明显的纤维化反应 ,纤维包裹层厚度平均为(6 2 .12± 3.84) μm ,细胞活力为 (15 .16± 2 .32 ) % ;而HOE 0 77治疗组纤维包裹厚度为 (4 1.44±2 .45 ) μm ,活力为 (2 3 .0 8± 2 .45 ) %。统计学分析表明 ,两组在囊外纤维包裹层的厚度及细胞活力上差异均有显著性 (P <0 .0 0 0 1和P <0 .0 1)。结论　抗肝纤维化药物HOE 0 77的应用为减轻微包囊的纤维化反应提供了一个新的途径