白花丹素对涎腺腺样囊性癌细胞增殖、迁移、凋亡的干预作用及其机制

目的 观察白花丹素（PLB）对涎腺腺样囊性癌细胞增殖、迁移、凋亡的干预作用，并探讨其作用机制。方法 取涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞进行体外培养，将细胞分为0、12.5、25、50μmol/L PLB组，分别加入含0、12.5、25、50μmol/L PLB的DMSO培养基培养24 h。采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞毒性；CCK-8实验观察细胞增殖能力；Transwell试验观察细胞迁移能力；TUNEL染色法观察细胞凋亡情况；荧光探针法检测活性氧（ROS）水平，微量法检测丙二醛（MDA）含量；荧光探针法检测线粒体膜电位；Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、Caspase-3表达，计算Bcl-2/Bax、Cleaved Caspase-3/Caspase-3。结果 12.5、25、50μmol/L PLB组细胞LDH释放量均高于对照组，其中25、50μmol/L PLB组高于12.5μmol/L PLB组，50μmol/L PLB组高于25μmol/L PLB组（P均<0.05）。不同浓度PLB组细...     

吲哚乙酸联合辣根过氧化物酶对人SACC-2细胞的抑制作用

目的: 探讨吲哚乙酸(IAA)与辣根过氧化物酶(HRP)在体外共同作用对人涎腺腺样囊性癌细胞SACC-2生长抑制的影响.方法: 用不同浓度的IAA/HRP(IAA 20、40、60 、80、100 μmol/L+HRP 1.2 mg/L)与SACC-2细胞共同培养48 h后, 光镜下观察癌细胞的生长;CCK-8法测定细胞生长抑制率;半定量RT-PCR技术检测caspase-3 mRNA水平.结果: 与阴性对照组比较, 48 h后 SACC-2细胞皱缩, 变小变圆, 空泡明显;40、60、80、100μmol/L IAA组的细胞生长抑制率明显增高(31.8%, 38.71%, 60.57%, 80.18%, 均P <0.05);半定量RT-PCR结果显示, 60、100 μmol/LIAA与1.2 mg/L HRP联合作用可上调caspase-3mRNA水平(0.835±0.019, 1.667±0.022 vs0.242±0.025, 均P <0.01).结论: IAA/HRP对人涎腺腺样囊性癌细胞SACC-2生长有明显的抑制作用, 可通过激活caspase-3 mRNA的表达, 诱导凋亡.     

中华眼镜蛇蛇毒对人类小涎腺腺样囊性癌细胞株增殖周期及细胞凋亡的影响

目的观察中华眼镜蛇蛇毒（下称眼镜蛇毒）对人类小涎腺腺样囊性癌（NACC）细胞增殖及凋亡的影响。方法应用三磷酸腺苷—生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法（ATP-TCA法）测定眼镜蛇毒对NACC细胞的生长抑制作用,流式细胞仪（FCM）分析眼镜蛇毒对NACC细胞周期及凋亡率的影响。结果ATP-TCA实验显示眼镜蛇毒对NACC细胞生长有明显的抑制作用,与浓度和作用时间呈正比;FCM检测显示眼镜蛇毒阻滞NACC细胞生长于细胞周期的G_0/G_1期,细胞凋亡率明显增高且具有剂量依赖性。结论眼镜蛇毒具有体外抗癌活性。     

去甲斑蝥素聚乳酸—羟乙酸微球对胶质瘤C6 细胞生长的影响

[目的]观察去甲斑蝥素聚乳酸—羟乙酸(PLGA)微球对C6 细胞体外生长的影响.[方法]取对数生长期的胶质瘤C6 细胞,分别加入不同终浓度的去甲斑蝥素(A组)各10 μL和去甲斑蝥素PLGA微球(B组)各10μL.分别培养24、48、72 h.另设空白微球组(C组)和空白细胞对照组(对照组).采用MTT法测算各组各时点C6 细胞抑制率.[结果]去甲斑蝥素和去甲斑蝥素PLGA微球对C6 细胞生长均有抑制作用,并表现出明显的量效关系和时效关系(P均＜0.05);去甲斑蝥素对胶质瘤C6 细胞生长的抑制作用明显强于相同剂量的去甲斑蝥素PLGA微球,但随着去甲斑蝥素浓度的增高和作用时间的延长,二者差异呈减小趋势.高浓度(80 μg/mL)的去甲斑蝥素作用72 h,A、B组C6细胞生长抑制率相近(P＞0.05).[结论]去甲斑蝥素和去甲斑蝥素PLGA微球对C6 细胞的生长均有不同程度的抑制作用;去甲斑蝥素PLGA微球具有去甲斑蝥素缓释功能.     

姜黄素对人子宫肌瘤细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的观察姜黄素对人子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期的人子宫肌瘤细胞分为两组,观察组加入终浓度分别为10、50、100μmol/L的姜黄素,对照组加入1‰的二甲基亚砜(DM-SO),分别于培养12、24、48、72 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,用流式细胞术检测细胞凋亡率。将对数生长期的细胞随机分为3组,A组加入终浓度100μmol/L的姜黄素,B组加入100μmol/L的线粒体ATP敏感钾通道开放剂二氮嗪及100μmol/L的姜黄素,C组加500μmol/L的线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-羟基癸酸脱氢酶(5-HD)及100μmol/L的姜黄素;培养48 h后,分别采用MTT法和流式细胞仪测算细胞增殖抑制率和凋亡率。结果随着姜黄素浓度的增加和作用时间的延长,细胞增殖抑制率逐渐减低(P均<0.05),而细胞凋亡率逐渐增加(P均<0.05)。A组细胞增殖抑制率和凋亡率分别为75.65%±9.42%、41.82%±6.12%,B组分别为17.66%±2.45%、32.46%±6.71%,C组分别为40.67%±5.46%、74.42%±8.47%,B组与A、C组比较,P均<0.05。结论姜黄素可抑制人子宫肌瘤细胞增殖并促进其凋亡,该作用可能与姜黄素抑制线粒体ATP敏感钾通道有关。     

姜黄素抑制胃腺癌SGC7901细胞增殖和表皮生长因子受体表达的研究

背景：姜黄素是一种有价值的植物抗癌物。有研究报道其能抑制多种肿瘤细胞生长，诱导肿瘤细胞凋亡。目的：探讨姜黄素对胃癌细胞增殖的影响及其可能机制。方法：①胃腺癌SGC7901细胞经常规培养，给予不同浓度的姜黄素处理，观察细胞生长情况，采用甲基噻唑基四唑（MTT）比色法检测细胞增殖，计算抑制率。②以不同浓度的姜黄素处理胃腺癌SGC7901细胞，采用免疫荧光染色和流式细胞术（FCM）检测表皮生长因子受体（EGFR）表达的变化。③以低浓度姜黄素或转化生长因子（TGF）-α处理胃腺癌SGC7901细胞，或以低浓度姜黄素和TGF-α同时处理细胞，采用MTT比色法检测细胞增殖，计算抑制率。结果：①姜黄素可显著抑制胃腺癌SGC7901细胞增殖，并随其浓度的增加而作用增强（P均〈0．001）。当给予10、20、30μmol／L姜黄素作用72h时，抑制率分别为22．4％、46．9％和67．2％。②姜黄素使胃癌细胞EGFR表达显著下降。当给予10、20、30μmol／L姜黄素作用48h时，EGFR表达分别下降了10．5％、17．1％和30．0％。③当给予5I．μmol／L低浓度姜黄素处理细胞72h时，细胞增殖速度无明显变化；给予30μg/L TGF-α处理，细胞增殖速度加快；同时给予5μmol/L低浓度姜黄素和30μg/L TGF-α处理时，则TGF—α刺激的胃癌细胞增殖明显受抑制，抑制率为21．5％。结论：姜黄素能抑制胃腺癌SGC7901细胞增殖，并能抑制其EGFR的表达，进而抑制TGF—α的促细胞增殖作用。     

姜黄素对肝癌Hep1细胞增殖及凋亡的影响

目的进一步探讨姜黄素的抗肿瘤作用机制。方法CCK-8法检测不同浓度姜黄素作用不同时间肝癌Hepl细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测Hepl细胞凋亡率以及各周期时相变化。结果姜黄素作用后Hepl细胞增殖抑制率明显升高,呈时间剂量效应关系;15μmol／L作用后,C0＋G1期细胞显著增多,而G2＋M期细胞显著减少,细胞凋亡率增高（P均〈0．05）。结论姜黄素可有效抑制Hepl细胞的生长和增殖,且具有明显的量效关系;其机制可能为干扰细胞周期进程,促进细胞凋亡。     

姜黄素对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响及其机制

目的观察姜黄素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡及细胞内核因子κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法将对数生长期T24细胞分为两组,实验组加入10、20、50、100μmol/L姜黄素,对照组加入完全培养液。培养24、48、72 h时采用MTT比色法检测两组细胞增殖抑制率;培养24 h采用流式细胞术检测细胞凋亡率、Western blot法检测细胞内NF-κB蛋白表达情况。结果实验组细胞增殖抑制率明显高于对照组,且呈时间—剂量依赖性,P均<0.05;实验组24 h细胞凋亡率明显高于、NF-κB蛋白表达水平明显低于对照组,且呈剂量依赖性,P均<0.05。结论姜黄素能有效抑制人膀胱癌T24细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与下调NF-κB表达有关。     

涎腺腺样囊性癌组织中ESM-1 mRNA及其蛋白表达的关系

目的探讨内皮细胞特异性分子-1（ESM-1）mRNA及其蛋白在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及意义。方法采用地高辛标记eDNA探针原位杂交方法、免疫组织化学法,检测52例涎腺腺样囊性癌及11例癌旁正常涎腺组织中ESM-1 mRNA及其蛋白的表达。结果涎腺腺样囊性癌的ESM-1 mRNA及其蛋白高表达率显著高于癌旁正常涎腺组织（P〈0．01）,与患者性别、肿瘤组织学类型、有无淋巴结转移及侵犯神经无明显差异。涎腺腺样囊性癌组织和正常涎腺组织中ESM-1 mRNA和蛋白表达具有相关性。结论ESM-1分子与涎腺腺样囊性癌的发生可能有关。     

丝裂霉素联合尼美舒利对人膀胱癌EJ细胞增殖和Bcl-2、Bax表达的影响

目的观察丝裂霉素（MMC）联合尼美舒利（NIM）对人膀胱癌EJ细胞增殖和Bcl-2、Bax表达的影响。方法将EJ细胞分为四组,对照组加入不作处理的细胞培养液,MMC组加入MMC100μl（2 mg/L）,NIM组加入NIM100μl（300μmol/L）,联合组加入MMC和NIM（剂量同前）。采用MTT法观察各组细胞生长抑制率,免疫组化染色法检测各组Bcl-2及Bax的表达情况。结果联合组244、8、72 h细胞生长抑制率低于其余三组,MMC组和NIM组生长抑制率亦低于对照组,三组均呈时间依赖性;联合组Bax阳性表达率高于其余三组,MMC组和NIM组高于对照组;MMC组和NIM组Bcl-2阳性表达率高于对照组。结论 MMC联合NIM可增强二者各自对EJ细胞的促凋亡作用,其可能机制与Bcl-2蛋白下调及Bax蛋白上调表达有关。     

白藜芦醇对人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO生长抑制和凋亡的影响

目的观察白藜芦醇（Res）对人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO生长抑制和凋亡的影响,探讨其在抑制乳腺癌骨转移中的应用价值。方法将0、12.5、50、100、200μmo/L的Res分别与MDA-MB-231BO细胞作用24、48、72 h;用CCK-8法检测MDA-MB-231BO细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期并检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞形态。结果随Res浓度的增加及作用时间的延长,MDA-MB-231BO细胞的生长抑制率逐渐升高,S期细胞逐渐增多。Res浓度为200μmol/L、作用48 h,MDA-MB-231BO生长抑制率为82.17%±5.37%、早期凋亡率为4.48%±1.23%、晚期凋亡率为9.48%±2.30%,荧光显微镜下观察用药组随着Res浓度的增加,凋亡细胞逐渐增多。结论Res能抑制人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO细胞增殖,使MDA-MB-231BO细胞阻滞于S期,并可诱导该细胞凋亡。     

S-100蛋白新亚型在涎腺腺样囊性癌中的表达

目的观察S-100 A1,2,4,6,B,K8.12,KL1,Vimentin,GFAP和NSE在涎腺腺样囊性癌中的表达,探讨S100蛋白新亚型的分布规律和作用机制以及肿瘤性肌上皮细胞的生物学特性.方法正常涎腺23例和腺样囊性癌26例常规40 g·L-1甲醛固定,石蜡包埋并制成4μm厚的连续切片,行HE和免疫组化ABC法染色.结果将腺样囊性癌中的瘤细胞分为luminal tumor cells(LTCs)和nonluminal tumor cells(NLTCs),也即肿瘤性肌上皮细胞.前者主要呈S-100A、K8.12和KL1强阳性;后者主要表达S-100B,GFAP,NSE和vimentin.结论 S-100蛋白新亚型在涎腺腺样囊性癌中的表达结果与多形性腺瘤相似.但是,前者中的肿瘤性肌上皮细胞无或很少表达S-100新亚型,这是与良性肿瘤的鉴别点之一.此外,LTCs较NLTCs分化成熟些.     

TSA对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及FHIT表达的影响

目的观察曲古抑菌素A（TSA）的体外抗人肝癌HepG2细胞作用及机制。方法取人肝癌HepG2细胞培养至对数生长期后随机分为TSA组、对照组、空白组,TSA组加入TSA至终浓度分别为125、250、500、1 000、2 000nmol/L,对照组加入等量二甲基亚砜（DMSO）,空白组只加培养基、无细胞,每组设6个复孔,作用24~72 h后MTT比色法测定HepG2细胞增殖抑制率（IR）,倒置显微镜和电镜观察HepG2细胞形态变化,TUNEL法检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测脆性组氨酸三联体（FHIT）基因表达,Western blot检测FHIT蛋白表达。结果与对照组相比,TSA组IR随TSA浓度增加和作用时间延长而增加（P〈0.05）,透射电镜下TSA组HepG2细胞出现凋亡早期改变;与对照组比较,TSA组细胞凋亡率升高,FHIT mRNA及蛋白表达增强（P均〈0.01）。结论 TSA体外能有效抑制肝癌细胞株HepG2生长并促进其凋亡,机制可能为上调FHIT表达。     

三氧化二砷对慢性粒细胞白血病骨髓间质干细胞活性的影响

目的探讨三氧化二砷（ATO）体外对骨髓间质干细胞（BMMSCs）的作用及其对慢性粒细胞自血病（CML）的治疗作用。方法体外培养法分离CML患者BMMSCs,培养体系中加入ATO,ATO终浓度分别为0、1．0、2．5、5．0μmol/L,MTT法测定BMMSCs生长抑制率;裂解BMMSCs并提取总RNA,RealtimePCR法测定其干细胞因子（SCF）基因表达水平并进行方差分析比较。结果2．5、5．0μmol/L ATO浓度组抑制率大于1．0μmol/L ATO浓度组（P均〈0．05）,1．0、2．5μmol/L ATO浓度组SCF基因表达水平较空白对照组显著升高（P均〈0．01）,1．0、2．5μmol/L ATO浓度组SCF基因表达水平比较差异亦有统计学意义（P〈0．01）。结论ATO显著抑制BMMSCs生长活性,低浓度ATO促使BMMSCs高表达SCF,从而拮抗ATO的诱导凋亡作用;高浓度ATO使BMMSCs表达SCF降低,有利于细胞凋亡。     

姜黄素对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨姜黄素对肝癌细胞（QGY）细胞增殖和细胞周期的调控及细胞凋亡的影响。方法 采用MTT法测定姜黄素在不同浓度，不同时间对QGY的抑制作用，流式细胞仪分析细胞周期分布，透射电镜观察细胞的超微结构变化。结果 姜黄素可抑制QGY的抑制作用。流式细胞仪分析细胞周期分布，透射电镜观察细胞的超微结构变化。结果 姜黄素可抑制QGY细胞的生长，其抑瘤率与药物浓度和作用时间呈依赖关系，72h的中效浓度（IC50）为49.50μmol/L，流式细胞仪分析证实姜黄素能使QGY细胞聚积在S期，电镜观察发现姜黄素可导致细胞变性。坏死，诱导细胞凋亡。结论 姜黄素可干扰QGY细胞的周期分布，具有细胞毒作用。抗增殖，诱导细胞凋亡的作用。     

姜黄素抑制k562细胞生长并诱导凋亡机制的研究

目的探讨姜黄素抑制人类红白血病细胞（k562细胞）生长并诱导凋亡的机制及其对细胞凋亡相关基因BCL-XL和BAK表达的影响。方法把不同浓度姜黄素加入k562细胞,流式细胞仪检测其凋亡及其细胞周期的变化,RT-PCR方法检测BCL-XL和BAK mRNA的表达,免疫组化方法检测BCL—XL和BAK蛋白的表达。结果姜黄素可以对k562细胞有较明显的增殖抑制作用,且呈剂量依赖,流式细胞术结果显示姜黄素浓度在100μmol／L时作用24、48h后,凋亡率高于对照组（P〈0．05）;随着姜黄素浓度增加,作用于k562细胞后可以使其倍增时间明显延长,G1期细胞增多,S期细胞减少;RT-PCR结果显示姜黄素能下调k562细胞BCL-XL表达,上调BAK mRNA的表达（P〈0．05）,免疫组化法发现姜黄素可以降低BCL-XL表达,升高BAK的表达（P〈0．05）。结论姜黄素对k562细胞的生长有较明显的抑制作用,且呈一定时间与剂量关系,并促进k562细胞凋亡,可能和下调BCL—XL的表达和上调BAK的表达相关。     

姜黄素对直肠癌CD133~+肿瘤干细胞样细胞群放疗敏感性的影响

目的探讨姜黄素对直肠癌CD133+肿瘤干细胞样细胞群放疗敏感性的影响。方法应用免疫磁珠分选器、阳性分离柱分选出直肠癌CD133+肿瘤干细胞,随机分成姜黄素组、姜黄素联合放疗组、放疗组,应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测24、48、72 h各组细胞生长抑制情况;膜联蛋白V-异硫氨基荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染色检测细胞凋亡率。结果姜黄素组随着时间变化肿瘤细胞抑制率变化不大(P0.05);放疗组和姜黄素联合放疗组24、48、72 h细胞生长抑制率逐渐升高(P0.05);同期三组细胞生长抑制率均有统计学意义(P0.05),两两比较24 h细胞生长抑制率,姜黄素组与姜黄素联合放疗组和放疗组之间差异有统计学意义(P0.05),姜黄素联合放疗组与放疗组之间差异无统计学意义(P0.05);48、72 h抑制率两两之间差异均有统计学意义(P0.05);姜黄素组48 h与72 h之间细胞凋亡率差异无统计学意义(P0.05),姜黄素联合放疗组和放疗组48 h与72 h之间细胞凋亡率之间差异具有统计学意义(P0.05)。同期内不同组细胞凋亡率之间的差异有统计学意义(P0.05),两两比较细胞凋亡率之间差异具有统计学意义(P0.05)。结论姜黄素可以增加直肠癌CD133+肿瘤干细胞样细胞群放疗敏感性,抑制肿瘤细胞生长促进细胞凋亡。     

美洲大蠊提取物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及作用机制

目的 探讨美洲大蠊提取物对人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡的影响并探讨其相关机制.方法 取对数生长期状态良好的SMMC-7721细胞分为三组,观察组常规培养24h后加入美洲大蠊提取物,使终浓度分别为300、100、33.3 μg/mL,顺铂组加入顺铂20 μg/mL作用细胞48 h,对照组不做任何处理.采用MTT比色法检测细胞增殖抑制率;采用流式细胞仪分析细胞凋亡率;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化;分光光度法检测Caspase-3活性变化.结果 观察组和顺铂组细胞抑制率明显高于对照组,IC50为100 μg/mL,并呈现时间一剂量依赖关系(P＜0.05);观察组和顺铂组细胞凋亡率明显高于对照组,呈现剂量依赖性(P＜0.05).凋亡过程中线粒体膜电位下降,Caspase-3活性升高(P＜0.05).结论 美洲大蠊提取物具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖并诱导其凋亡作用,线粒体途径可能是其诱导肝癌细胞凋亡的主要机制之一.     

全反式维甲酸对人喉癌细胞株Hep-2体外增殖及Survivin表达的影响

目的 进一步探讨全反式维甲酸（ATRA）对人喉癌的治疗机制。方法取对数生长期人喉癌细胞株Hep-2,以1×10^5／ml细胞密度接种于96孔培养板,置于CO2培养箱中24h后随机分为观察组和对照组,观察组分别加入终浓度为10^-7、10^-6、10^-5mol／L的ATRA,对照组为空白对照。观察两组细胞增殖抑制率（IR）、细胞凋亡率、Survivin表达水平。结果观察组Hep-2细胞IR及细胞凋亡率均显著高于对照组,Survivin表达显著低于对照组,且呈时间和剂量依赖性。结论ATRA对人喉癌细胞株Hep-2生长有抑制作用,同时可诱导其凋亡,机制可能与Survivin基因表达下调有关。     

不同浓度姜黄素对脂肪变性L02细胞凋亡的影响

目的探讨不同浓度的姜黄素对肝脏细胞的影响。方法利用不同浓度的姜黄素诱导L02细胞检测细胞的活力,探索合适的有效姜黄素实验浓度。将脂肪变性的L02细胞分为24 h组和48 h组,分别用姜黄素不同实验浓度干预,流式检测脂肪变性的L02细胞的凋亡比例和caspase-3的活化情况。结果当姜黄素的浓度小于25μmol/L的时候,细胞的活力在80%以上,可以选择1、5、12.5、25μmol/L做为后续干预浓度。1μmol/L的姜黄素能显著降低脂肪变性L02细胞的凋亡比例。5μmol/L的姜黄素干预组对正常和脂肪变性的L02细胞凋亡和坏死均比例和对照组相当,而12.5、25μmol/L组对正常和脂肪变性L02细胞发生凋亡和坏死的比例显著升高。结论低浓度的姜黄素对脂肪变L02细胞有保护作用,而高浓度的姜黄素能激活L02细胞的凋亡途径,并且进一步引起脂肪变性的L02细胞的坏死,而不是发挥保护作用。这种诱导作用随着时间的延长而愈加明显。