AG490对大鼠脑液压冲击伤后脑水肿及水通道蛋白4表达的影响

目的研究AG490对大鼠脑液压冲击伤后继发性脑水肿及水通道蛋白4(AQP-4)表达的影响。方法取健康成年雄性SD大鼠104只,按照随机数字表法分为假手术组8只,对照组48只,AG490组48只,对照组及AG490组随机各分为6个亚组分别对应伤后各时间点3h、6h、12h、24h、48h、72h。对照组及AG490组给予液压冲击打击,制作大脑损伤模型;假手术组仅给予颅骨钻孔术不给予液压冲击。AG490组于伤后1小时按照5mg/kg给予腹腔注射AG490,对照组接受等量生理盐水。干湿重法测定脑组织含水量,免疫组织化学法测定脑组织AQP-4蛋白的表达,HE染色后光镜下观察细胞形态学改变。结果 (1)和假手术组比,对照组及AG490组脑组织含水量均升高(P<0.05)。AG490组各时间段均比对照组脑组织含水量少(P<0.05)。(2)AQP-4表达阳性细胞镜下呈棕黄色空泡状。AG490组各时间亚组AQP-4表达水平均较对照组减低(P<0.05)。(3)光镜下见AG490组各时间点均较对照组病理损伤轻。结论脑损伤后急性期应用AG490可以明显减轻创伤后脑水肿,其作用可能与抑制AQP-4在损伤脑组织中的表达有关。     

奥拉西坦对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后AQP-4表达的影响

目的:探讨奥拉西坦对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后AQP-4表达及脑水肿的影响.方法:将120只Wistar大鼠采用随机分组的方法分为假手术组,HIBD组和奥拉西坦干预组.除假手术组以外的两组大鼠均需制备缺氧缺血模型.每组再根据标本采集时间的不同随机分为6h组、12h组、24h组、3d组和5d组,每亚组8只.各组给药情况如下:将奥拉西坦用生理盐水稀释成0.3mg/mL,干预组于HIBD后即刻给予腹腔注射奥拉西坦2mg/kg,每24h给药一次,假手术组及HIBD组不做处理.在各时间点取样测定各组大俗的脑组织含水量和AQP-4的表达情况.结果:三组大鼠在各个时间点的脑组织含水量均表现为假手术组最低,HIBD组最高,奥拉西坦干预组居中,与HIBD组相比奥拉西坦干预组在各采样时间点AQP-4免疫阳性细胞的平均灰度值均明显偏高(P＜0.01).结论:奥拉西坦可在一定程度缓解脑水肿,提高AQP-4的表达量,提示其缓解脑水肿的机制可能为通过促进AQP-4蛋白的表达实现.此外本次研究还发现AQP-4表达与脑组织含水量呈正相关.     

依达拉奉对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用及其机制研究

目的探讨分析采用依达拉奉药物对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用机制。方法对12只大鼠,随机平分为假手术组、脑缺血再灌注组以及依达拉奉组,分别于再灌注后3 d、7 d,测定与对比丙二醛(MDA)含量、脑组织含水量、水通道蛋白4(AQP-4)的表达水平以及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果再灌注后3 d脑缺血再灌注组MDA含量、脑组织含水量、AQP-4的表达水平与NOS活性,均高于假手术组,差异具有统计学意义(均P<0.05),而依达拉奉组与脑缺血再灌注组相比,差异具有统计学意义(均P<0.05);再灌注后7 d,三组在MDA含量、脑组织含水量与NOS活性等指标对比,差异无统计学意义(均P>0.05),而依达拉奉组AQP-4的表达水平显著低于脑缺血再灌注组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论依达拉奉药物能够降低脑缺血-再灌注大鼠NOS活性、MDA含量、脑组织含水量,抑制AQP-4的表达,从而起到减轻脑水肿,保护大鼠神经的作用。     

凉血通瘀方对大鼠脑出血脑组织含水量及AQP-4表达的影响

目的探讨凉血通瘀方对脑出血后脑水肿组织含水量及AQP-4表达的影响。方法采用自体尾状核内注射方法制备大鼠脑出血模型。大鼠分为凉血通瘀方治疗组、脑出血模型组和假手术组。凉血通瘀方治疗组采用凉血通瘀方灌胃,其余组采用生理盐水灌胃。分别观察脑出血后12 h、1 d、2 d、3 d、5 d神经功能缺损评分、脑组织含水量。免疫荧光法及聚合酶链反应监测脑水肿组织AQP-4蛋白、AQP-4 mRNA表达水平。结果凉血通瘀方治疗组和脑出血组在不同时间段内神经功能缺损均高于对照组,其脑组织含水量也高于对照组(P<0.05)。与脑出血组相比较,凉血通瘀方治疗组在脑出血后2、3、5 d时,AQP-4表达显著降低,在3、5 d后,大鼠AQP-4 mRNA表达显著降低。结论凉血通瘀方能够降低脑水肿组织AQP-4的表达,从而减轻脑水肿。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤AQP-4表达及依达拉奉治疗效果的研究

目的：探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）后脑组织水通道蛋白-4（AQP-4）的表达变化及依达拉奉（edaravone）对其治疗效果的影响。方法：将7日龄Wistar大鼠120只随机分为3组：假手术组、缺氧缺血模型组（HIBD组）及依达拉奉治疗组,每组各40只。每组根据处死的时间不同又分5个亚组：6、24h、3、5、7d组,每亚组各8只,各组分别于不同时间点处死动物,测脑组织含水量,并采用免疫组化方法检测AQP-4的表达。结果：AQP-4在缺氧缺血6h即增强,3d达高峰,5～7d逐渐降低（P〈0.01）;治疗组各时间点AQP-4表达水平较HIBD组明显降低（P〈0.01）。结论：AQP-4参与了HIBD脑水肿的发生发展过程,依达拉奉可降低AQP-4的表达,从而减轻脑水肿,这可能是其脑保护作用机制之一。     

花椒毒酚对重症急性胰腺炎大鼠脑损伤保护作用及NF-κB/iNOS通路的影响

目的探讨花椒毒酚对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠脑损伤的保护作用及对核因子-κB/诱导型一氧化氮合酶(NF-κB/iNOS)通路的影响。方法将64只Wistar大鼠随机分为8组:正常对照3 h组、12 h组,模型3 h组、12 h组,花椒毒酚低剂量(5 mg/kg)3 h组、12 h组,花椒毒酚高剂量(10 mg/kg)3 h组、12 h组,每组8只;采用5%牛黄胆酸钠(2 mL/kg)注入胰胆管进行SAP造模,正常对照组为假手术组。于术后3、12 h收集各组大鼠腹主动脉血、胰腺组织和脑组织,观察各组大鼠胰腺组织和脑组织HE染色评分;检测各组大鼠血浆淀粉酶、NO、NF-κB p65水平及脑组织含水量、神经功能评分、NF-κB p65、iNOS蛋白相对表达量。结果模型组大鼠术后3、12 h胰腺组织HE染色评分、血浆淀粉酶均较对照组明显升高(P<0.05),花椒毒酚高、低剂量组胰腺组织HE染色评分、血浆淀粉酶均较模型组明显降低(P<0.05),且高剂量组各指标均明显低于低剂量组(P<0.05);模型组大鼠术后3、12 h脑组织HE染色评分、脑组织含水量、神经功能评分均较对照组明显升高(P<0.05),花椒毒酚高低剂量组胰腺组织、脑组织HE染色评分、脑组织含水量、神经功能评分均较模型组明显降低(P<0.05),且高剂量组各指标均明显低于低剂量组(P<0.05);模型组大鼠术后3、12 h血清NO、NF-κB p65水平及脑组织NF-κB p65、iNOS水平均明显高于对照组(P<0.05),花椒毒酚高、低剂量组各指标均较模型组明显降低(P<0.05),且高剂量组各指标下降幅度尤为明显(P<0.05)。结论花椒毒酚能够通过降低SAP大鼠脑组织NF-κB、iNOS蛋白表达,发挥对大鼠脑损伤的保护作用。     

槲皮素对缺血性脑卒中大鼠血脑屏障的保护作用

目的探讨槲皮素对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障的保护作用及相关机制的研究。方法 Wistar大鼠90只,随机等分为5组,每组18只,分别为假手术组、模型组、低剂量槲皮素(10 mg·kg~(-1))治疗组、中剂量槲皮素(10 mg·kg~(-1))治疗组、高剂量槲皮素(100 mg·kg~(-1))治疗组。采用TTC染色法检测各组大鼠脑组织梗死体积、干湿重法比较各组大鼠脑组织含水量、分光光度计法检测各组大鼠脑组织伊文氏蓝含量,并使用免疫印记法分别检测各组大鼠脑组织闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-5(Claudin-5)、闭锁连接蛋白-1(ZO-1)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白的表达水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠脑梗死体积、含水量、神经功能损伤程度、血脑屏障通透性显著增高(P<0.05);与模型组相比,槲皮素治疗组的脑梗塞体积、神经功能缺损程度、脑含水量、血脑屏障通透性均比对照组明显降低(P<0.05)。免疫印迹结果发现,与假手术组相比,模型组血脑屏障相关蛋白表达显著下降(P<0.05);与模型组相比,槲皮素治疗组的闭合蛋白、紧密连接蛋白-5、ZO-1及HO-1蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论槲皮素能够上调闭合蛋白、紧密连接蛋白-5、ZO-1蛋白的表达,对脑缺血再灌注大鼠的血脑屏障具有保护作用,并且槲皮素可以上调HO-1蛋白的表达,通过氧化应激反应起到保护血脑屏障的作用。     

大鼠颅脑损伤急性期脑组织NF-κB、TNF-α的表达及丙泊酚的干预效应

目的:探讨大鼠颅脑损伤急性期脑组织损伤区NF-κB、TN-α表达及丙泊酚于预的影响.方法:参照改良Feeney自由落体脑损伤装置制备大鼠中度脑损伤模型,将54只大鼠随机分为假手术组、手术对照组、丙泊酚干预组,每组分别于伤后6 h、12 h、24h处死实验动物,检测各时点各组脑组织NF-κB、TNF-α的表达.结果:大鼠脑组织NF-κB、TNF-α伤后6 h、12 h、24h均明显升高,各时间点与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05).脑组织内NF-κB和TNF-α之间呈直线相关(r=0.716,P<0.01).丙泊酚干预组脑损伤后,大鼠脑组织NF-κB和TNF-αNF各时点上升幅度均明显低于手术对照组,与手术对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:丙泊酚可在一定程度上抑制NF-κB的活化和TNF-α的高度表达,阻止炎症级联反应的进一步扩大,对颅脑损伤急性期脑组织有一定的保护作用.     

水通道蛋白-4在兔脑爆炸伤后脑组织中的表达

目的通过建立兔脑爆炸伤模型,研究爆炸后脑组织水通道蛋白-4(AQP-4)的表达情况,探讨爆炸伤后脑水肿的形成机制。方法将新西兰大白兔80只,随机分为对照组和外伤组,其中对照组10只。用纸雷管爆炸制作兔脑爆炸伤模型。外伤组分别随机分为伤后1 h、6 h、12 h、24 h、72 h、7 d、14 d 7组,每组10只。采用免疫组织化学及Western blotting检测AQP-4的表达。结果各组致伤动物脑组织皮层均有不同程度AQP-4表达,广泛分布于星形胶质细胞膜及周围突起,随着伤后时间的推移,AQP-4阳性表达逐渐增强,3 d后表达最明显,7 d后开始下调,14 d仍有较明显表达,各组对比,差异有统计学意义(P<0.05);外伤组与对照组对比各时相点AQP-4阳性表达,均高于对照组(P<0.05)。结论 AQP-4的表达与爆炸性脑损伤引起的继发性脑水肿密切相关。     

补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及Nrf2/HO-1信号途径的影响

目的观察补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号途径的影响。方法 120只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,各组给予相应处理。在d 1、3、7三个时间点取脑组织进行检测,免疫组织化学法检测血浆Ⅷ因子相关抗原(v WF),测定微血管密度(MVD)。采用Real-time PCR和Western blot法检测大鼠脑组织中Nrf2、HO-1基因及蛋白表达。结果 1与假手术组比,模型组v WF阳性表达微血管在d 3时表达明显升高(P<0.05),给药组d 7与模型组比较差异有显著性(P<0.05);2假手术组Nrf2、HO-1mRNA及蛋白呈少量表达,模型组Nrf2蛋白表达水平d 3与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01),各给药组能上调Nrf2mRNA及蛋白表达,其中Nrf2mRNA在d 7,Nrf2蛋白表达在d 1及d 7上调最明显,与同时间点模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。模型组HO-1mRNA及蛋白在d 7与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),各给药组HO-1mRNA在d 3,HO-1蛋白在d 3及d 7上调最明显,与同时段模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论补阳还五汤精简方促进脑缺血后血管新生,这一作用可能与调控Nrf2/HO-1信号途径的表达有关。     

大鼠颅脑损伤急性期水通道蛋白4表达变化的研究

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在大鼠重型颅脑损伤时的表达变化及其与脑水肿间的关系。方法98只成年雄性Wistar大鼠,随机分为对照组及实验组(伤后0.5、2、6、12、24、48、72 h共7组,对照组不打击)。制作大鼠液压冲击颅脑损伤模型,分别于伤后0.5、2、6、12、24、48、72 h采用干湿比重法测脑组织含水量,半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑组织AQP4 mRNA表达及其变化。结果脑组织AQP4 mRNA在伤后0.5 h开始表达上调,2、6、12 h依次增高,24 h达到峰值(P<0.05),72 h时仍维持较高水平。脑组织含水量与AQP4 mRNA表达变化一致。经相关性分析,AQP4 mRNA的表达与脑组织含水量呈正相关(r=0.095,P<0.05)。结论重型脑损伤急性期,AQP4 mRNA表达变化与颅脑损伤后脑水肿的形成和发展密切相关。AQP4可能参与重型脑损伤后脑水肿的形成并起重要作用。     

水通道蛋白4mRNA在大鼠蛛网膜下腔出血后脑水肿中的表达及尼莫地平对其表达的影响

目的：研究大鼠蛛网膜下腔出血后脑组织AQP4mRNA的表达及脑含水量的变化以及应用尼莫地平对AQP4mRNA表达的影响。方法：健康成年大鼠60只,随机分为对照组、假手术组、SAH组、尼莫地平组,建立蛛网膜下腔出血模型,分别在6h、1d、3d、5d、7d个时间点断头取脑,测定脑含水量,并用RT-PCR法检测AQP4mRNA表达。结果：SAH组脑含水量及脑组织内AQP4在6h后即增加,随时相递增,3d达到高峰,较假手术组及尼莫地平组明显增高（P＜0.05）。结论：大鼠蛛网膜下腔出血后脑水肿的程度与AQP4的表达成正比,这表明AQP4在蛛网膜下腔出血性脑水肿的病理生理中起着非常重要的作用。尼莫地平可以下调AQP4mRNA的表达,从而减轻脑水肿的程度。     

塞来昔布对颅脑创伤后学习记忆功能及Caspase-3蛋白表达的影响

目的 在分子生物学水平进一步研究颅脑创伤后炎症反应变化,探讨选择性环氧合酶(COX-2)抑制剂塞来昔布对大鼠重型颅脑创伤后学习记忆功能及Caspase-3蛋白表达的影响。方法 采用Marmarou 的方法建立大鼠重型闭合性颅脑创伤模型, 将成年Wistar 大鼠48 只随机分为脑创伤组、塞来昔布治疗组、假手术组、正常对照组,各组均在相应的时间点处死取材,应用免疫印迹Western blot方法及免疫组化法检测COX-2及Caspase- 3蛋白表达。再取 24 只大鼠随机分为脑创伤组、塞来昔布治疗组、假手术组及正常对照组,进行水迷宫测试。结果 脑创伤后大鼠脑内COX-2及Caspase- 3蛋白表达增加,塞来昔布治疗组COX-2 及Caspase- 3蛋白表达高峰明显下调,与脑创伤组相比有统计学意义（p＜0.05）,伤后第9、10天水迷宫测试的潜伏期明显缩短,与脑创伤组相比有统计学意义（p＜0.01）。结论 COX-2 抑制剂塞来昔布对大鼠重型颅脑创伤有脑保护作用,降低COX-2、caspase-3的表达,抑制脑损伤后的炎症反应和细胞凋亡,能够改善其伤后学习记忆障碍。     

创伤性脑损伤后孕酮促进神经功能的实验研究

目的观察孕酮对大鼠脑损伤后COX-2和IL-6表达及对神经功能的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为假手术组、脑损伤组和孕酮治疗组,按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型。孕酮治疗组伤后1、6 h腹腔注射孕酮16 mg/kg。各组于伤后24 h取材。用ELISA法检测COX-2和IL-6含量,用干湿重法测量脑组织含水量,用mNSS评分检测神经功能。结果孕酮治疗组与脑损伤组比较,COX-2和IL-6表达和脑水肿明显减少(P<0.05),神经功能明显改善(P<0.05)。结论孕酮可能通过降低COX-2和IL-6的表达,进而降低脑水肿,改善神经功能,发挥脑损伤保护作用。     

小牛血清去蛋白注射液对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响及机制分析

目的:探讨小牛血清去蛋白注射液(DCSI)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响及其可能机制。方法:76只SD大鼠随机分为假手术组(SH)、模型组和DCSI高、低剂量组(DCSI-H、DCSI-L组:60、30mg·kg-1)4组,每组19只,给予相应药物10d后,后3组采用血管内栓线阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。于脑缺血2h再灌注24h后测定各组大鼠脑组织水含量、伊文思蓝(EB)含量,电镜观察血脑屏障超微结构的改变,并用Westernblot法观察大鼠脑组织细胞间黏附分子(ICAM)-1、基质金属蛋白(MMP)-9的蛋白表达情况。结果:与模型组比较,DCSI组脑组织水含量、EB含量、ICAM-1和MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01);血脑屏障的破坏程度明显减轻。结论:DCSI可能通过降低ICAM-1、MMP-9的蛋白表达发挥其血脑屏障的保护作用。     

复方黄金香提取液对创伤性脑水肿大鼠AQP4表达的影响初探

目的通过观察复方黄金香提取液对水通蛋白4（aquaporin4,AQP4）表达的影响,探讨其治疗创伤性脑水肿的相关机制。方法SD大鼠40只．参照Feeney法制作脑损伤模型（TBE模型）．随机分组：祛瘀通腑汤组大鼠（10只）致伤后20min予以祛瘀通腑汤10mL·kg^-1灌胃,复方黄金香提取液组大鼠（10只）致伤后20min予以复方黄金香提取液10mL·kg^-1灌胃．对照组（10只）和创伤组（10只）同时同法给予相同剂量生理盐水。按12、24、72h分别处死大鼠．取标本分析AQP4表达的影响．并作HE染色。结果“复方黄金香提取液”与“祛瘀通腑汤”相比明显减轻脑水肿．其AQP4表达水平显著下调。病理学证实,“复方黄金香提取液”使脑组织水肿明显减轻．神经元坏死数目明显较少。结论早期应用“复方黄金香提取液”可明显减轻脑水肿程度;下调AQP4表达是其作用机制之一.     

注射用阿魏酸钠对胶原酶致大鼠脑出血模型的治疗作用及机制研究

目的：探讨注射用阿魏酸钠注射液治疗急性脑出血大鼠的效果及其治疗机制。方法：108只健康雄性SD大鼠随机均分为假手术组、急性脑出血（ICH）模型组及阿魏酸钠干预组3组,每组按ICH造模后或假手术后不同时间又均分为2、6、24、487、2 h、1周,6个亚组。阿魏酸钠干预组每天生理盐水3 mL稀释注射用阿魏酸钠,按100 mg/kg剂量腹腔注射,模型组只注射生理盐水。连续注射7 d。观察大鼠神经行为学变化、检测脑含水量,RT-PCR半定量检测水通道蛋白-4（AQP4）mRNA表达,测定血浆内皮素（ET）含量变化。结果：治疗前,ICH模型组及阿魏酸钠干预组Longa评分均较假手术组显著升高,在6~48 h间,阿魏酸钠干预组动物的评分比模型组显著降低（P〈0.05）;自造模后6 h起至1周,阿魏酸钠干预组动物的肢体对称试验评分比模型组显著降低（P〈0.05）;在24 h~1周间,阿魏酸钠干预组动物的平衡木评分比模型组显著降低（P〈0.05）;阿魏酸干预组能够明显抑制48和72 h时动物脑水肿程度（P〈0.05）;注射用阿魏酸钠干预组在造模后72 h的mRNA表达较模型组降低的趋势,但差异无统计学意义（P〉0.05）;注射用阿魏酸钠干预组能显著降低造模后6~72 h的血浆ET水平（P〈0.05）。结论：阿魏酸钠治疗脑出血具有较好的改善神经行为学及对抗脑水肿的作用,其机制与降低ET的生成有关。     

MMP-9和咬合蛋白在弥漫性脑损伤大鼠皮层的表达变化及与脑水肿的关系

目的：观察弥漫性脑损伤大鼠脑水肿及损伤区皮层MMP-9和咬合蛋白表达的变化。方法成年健康SD雄性大鼠160只,按随机数字表法分为对照组（ n ＝60）和模型组（ n ＝100）。应用Marmarou’s法建立弥漫性脑损伤大鼠模型。2组分别于术后3、12、24、72、144 h行干湿重法检测2组大鼠脑组织含水量变化,行免疫组化和Western blot检测损伤区周围皮层MMP-9和咬合蛋白表达水平。对各结果进行相关性分析。结果与对照组比较,模型组各时间点大鼠脑组织含水量明显增加,脑组织损伤区周围皮层MMP-9表达明显增高（ P ＜0．05）,咬合蛋白表达明显降低（ P ＜0．05）。脑组织含水量变化与MMP-9表达变化呈正相关（ P ＜0．05）,脑组织含水量变化与咬合蛋白表达变化呈负相关（ P ＜0．05）,MMP-9蛋白表达变化与咬合蛋白表达变化呈负相关（ P ＜0．05）。结论弥漫性脑损伤发生后损伤区皮层MMP-9蛋白表达明显增加,咬合蛋白表达明显降低,脑水肿形成。 MMP-9表达的增加,导致了咬合蛋白破坏,脑水肿形成。