黑龙江蜱传斑点热研究进展

斑点热群立克次本 (SpottedFeverGroupRickettsiae ,SF GR)是引起斑点热的病原体 ,该病原体是立克次体目中最复杂的一群。 1984年版《Bergey’s鉴定细菌手册 )中收录了 8种SFGR ,其中 5种对人有致病性 ,另外 3种对人的致病性尚未证实。近年在世界各地又陆续发现了 10余种SFGR新种及其引致的斑点热。我国科研工作者经过 4 0余年的不懈努力 ,经病原学证实共发现 4种SFGR ,除国际上已知而在我国发现的引致北亚热的西伯利亚立克次体 (Rickettsiasibiri ca ,R .s)外 ,还发现了黑龙江立克次体 (R .heilongjiangii,R .hei)、内蒙古立克次…     

广东连平县存在新的蜱传斑点热立克次体

目的对采自广东省连平县的3种硬蜱进行蜱传斑点热立克次体检测分析。方法斑点热立克次体的ompA基因片段扩增并测定扩增片段的DNA序列。结果20只蜱分为17组,其中15组PCR检测阳性。对4个测序成功的标本进行聚类分析,证实其中3个序列单独聚为一类,与引起Flinders岛蜱传斑点热的弗诺立克次体(R.honei)、非洲蜱咬热的非洲立克次体(R.africa)、未定名斑点热的斯洛伐克立克次体(R.slovaca)以及西伯利亚立克次体BJ-90株等亲缘关系较近,另一序列与我国长白山地区检测到的JL-02具有较高的同源性。结论本研究提示该地区除了已证实的西伯利亚斑点热外,还存在新的蜱传斑点热。     

我国部分地区蜱传斑点热分子流行病学调查研究

目的 进一步了解我国斑点热群立克次体存在的多样性,发现可能存在的斑点热群立克次体新成员、潜在媒介和动物宿主。方法 建立了扩增斑点热群立克次体190kDa rOmpA基因片段的PCR检测、鉴定方法,并用此方法检测了采用福建省和内蒙古自治区的蜱、动物和人血液标本。对扩增于越原血蜱、森林革蜱和FNH97未鉴定菌株的PCR产物采用PHYLIP软件包进行了序列分析。同时,为了寻找特异的斑点热群立克次体分类检测方法,建立了针对四种斑点热群立克次体的半巢式PCR方法,并对斑点热立克次体阳性标本进行了分类检测。结果 采用190kDa rOmpA.701/70p引物可以从7株斑点热群立克次体中的6株扩增出外膜蛋白A基因片段（小蛛立克次体除外）。并从采自福建省和内蒙古自治区的多种蜱及野生动物、人血液标本中扩增出了斑点热立克次体DNA片段,其中越原血蜱、卵形硬蜱、中华硬蜱、豪猪血蜱、森林革蜱、野鼠血块和人群血块的阳性率分别为15．69％、56．94％、8．70％、7．70％、43．56％、82．51％和0．98％。对来自越原血蜱和森林革蜱以及FNH97菌株的斑点热立克次体190kDa外膜蛋白A630bp左右核苷酸片段序列分析和推测的氨基酸序列分析结果表明：福建越原血蜱立克次体（福建立克次体）核苷酸序列与日本立克次体的该序列同源性最高（94％）。推测氨基酸序列同源性也与该立克次体最高（94％）。推测氨基酸序列同源性也与该立克次体最高（89％）;内蒙古森林革蜱立克次体（森林革蜱立克次体）核苷酸序列与扇头蜱立克次的该序列同源性最高（97％）,测氨基酸序列的同源性也最高（95％）。遗传发育分析,这两种立克次体分别与日本立克次体和扇头蜱立克次体均为同一个分支。序列中限制性核酸内切酶的位点也显示了对应的相似性。但是它们的核苷酸和推测的氨基酸序列与康氏立克次体和西伯利亚立克次体以及内蒙古立克次体（HA－91）差别较大。提示,这两种蜱携带的立克次体可能是我国尚未发现的斑点热群立克次体新成员。用初步分类引物对蜱标本、血液标本检测结果显示,以“福建立克次体”序列设计的引物检测越原血蜱阳性率为8．49％,卵形硬蜱阳性率为20．83％,中华硬蜱阳性率为4．35％,豪猪血蜱为阴性;以西伯利亚立克次体序列设计的引物检测卵形硬蜱阳性率24．39％,越原血蜱阳性率为5．56％,中华硬蜱和豪猪血蜱均为阴性。以内蒙革蜱立克次体序列设计的引物扩增森林革蜱阳性率为43．56%。结论 通过本次研究,在以下方面获得了新的认识：越原血蜱、卵形硬蜱、豪猪血蜱和中华硬蜱是福建南方蜱传斑点热立克次体的媒介或潜在媒介,其中卵形硬蜱、豪猪血蜱和中华硬蜱为我国首次证实的携带斑点热立克次体;福建的越原血蜱和内蒙古的森林革蜱分别携带一种未知斑点热群立克次体,并分别与日本立克次体和扇头蜱立克次体近缘;取自斑点热立克次体rOmpA基因的引物用于PCR,作为一种快速简便手段可直接用于斑点热立克次体初步分类和分子流行病学调查;我国可能存在斑点热群立克次体的多个成员及其自然疫源地。     

黑龙江立克次体054株单克隆抗体对斑点热群立克次体抗原…

本文利用三株黑龙江立克次体０５４株（ＨＬＪ－０５４）单克隆抗体对四株斑点热群立克交体西伯利亚种（Ｒ．ｓ．）２４６株，清河株（ＪＨ－７４），立氏立克次体（Ｒ．ｒ．）Ｒ株及ＨＬＪ－０５４株进行了血清学分析，对其蛋白组成及单抗结合抗原特性等方面进行了研究，结果表明：ＪＨ－７４株与２４６株在上述三个方面完全一致，不同于ＨＬＪ－０５４及Ｒ．ｒ．Ｒ株；ＨＬＪ－０５４株与Ｒ．ｒ．Ｒ株与三株单抗血清学反应高度交叉     

蜱传斑点热群立克次体研究进展

斑点热（spotted fever）是蜱螨叮咬传播由斑点热群立克次体（Spotted fever group rickettsia,SFGR）所引起的一组疾病的总称。它近年来随着诊断技术和研究手段的快速发展,蜱传斑点热的流行病学、病原学、实验诊断和分子生物学方面都有显著进展。     

黑龙江逊克地区森林革蜱斑点热立克次体DNA的检测

目的 调查黑龙江逊克地区蜱传斑点热自然疫源地,发现该地区蜱携带斑点热立克次体的种类。方法 采用斑点热立克次体ompA和gltA基因特异的PCR,检测该地区森林革蜱的DNA样本,并对扩得阳性产物进行测序和聚类分析。结果 从60只森林革蜱中检测有14只扩得斑点热立克次体ompA和gltA基因片段,阳性率为23.33%。随机选择2只蜱的阳性片段进行测序,二者同源性为100%,ompA基因序列与Rickettsia sp.JL-02同源性为99.30%, 与Rickettsia raoultii为99.18%。结论 黑龙江省逊克地区森林革蜱携带与Rickettsia sp.JL-02株亲缘关系相近的斑点热群立克次体。     

四川石渠县牦牛源蜱感染斑点热群立克次体分子流行病学调查

目的 了解四川省石渠县牦牛体表寄生蜱的种类及其斑点热群立克次体的感染情况。方法 采集牦牛体表的蜱,经形态学初步鉴定后,提取蜱总DNA,PCR扩增蜱16S rRNA基因及斑点热群立克次体ompA、ompB基因,并对扩得阳性产物进行测序和构建进化树分析,从而确定蜱及其携带斑点热群立克次体的种类。结果 在石渠县4个乡共采集到蜱818只,其中西藏革蜱占78.97%(646/818)、青海血蜱占21.03%(172/818)。在818只蜱中有408只扩得斑点热群立克次体ompA、ompB基因,总阳性率为49.8%。经比对分析, ompA基因总共得到4条序列(uncultured Rickettsia sp.shiqu1、R.raoultii.shiqu2、R.raoultii.shiqu3和R.raoultii.shiqu4),ompB基因也得到4条序列(uncultured Rickettsia sp.shiqu1、R.raoultii.shiqu2、R.raoultii.shiqu3和R.raoultii.shiqu4)。经遗传进化分析显示ompA基因的uncultured Rickettsia sp.shiqu1与我国青海未定种的Uncultured Rickettsia sp.(MG228270)亲缘关系最近;ompB基因的uncultured Rickettsia sp.shiqu1与韩国未定种的Rickettsia sp.(KC888953)和Candidatus Rickettsia longicornii(MG906675)亲缘关系最近;ompA和ompB基因的R.raoultii.shiqu2-4与对人有致病性的劳氏立克次体(R.raoultii)的亲缘关系最近。结论 首次在牦牛体表寄生的西藏革蜱中检出劳氏立克次体。石渠县存在西藏革蜱和青海血蜱,蜱传劳氏立克次体感染率较高并且具有感染人的风险。     

北亚蜱传斑点热一例

患者男,32岁,林业工人。10d前左侧腋下曾被硬蝉叮咬,次日发现后自行拔除。6月24日出现发热,体温在39℃～40℃之间,同时伴剧烈头痛,恶心,周身肌肉酸痛。于2001年6月29日入院。初诊为:森林脑炎。因治疗无效转入我院。体检:T     

内蒙通辽市北亚蜱传斑点热病例及病因学证实

我们于1988年4月在通辽市收治1例疑似北亚蜱传斑点热(北亚热)患者,经中国预防医科院流研所协助检测,其血清学和病原学结果判定为北亚热,为我国城市发现该病的首例报道,现介绍如下。 一、病例报告 患者男,47岁,蒙族,久居通辽市区,但常去乡间走访。以发热、畏寒、咽痛、全身乏力、关节、肌肉疼痛(以下肢为重)3天,于1988年4月 19日求治本院。住院后体温波动在 37℃～38.4℃之间,持续不退。按上呼吸道感染,用青霉素、病毒灵     

我国南方媒介蜱中首次检出黑龙江立克次体(R.heilongjiangii)及马赛立克次体(R.massilliae)近缘菌

目的研究我国南方媒介蜱斑点热群立克次体带菌状况。方法采用斑点热群立克次体外膜蛋白ompA基因特异引物,对我国广东省连平县采集的长角血蜱进行检测分析。结果15组蜱标本中,14组检测阳性,阳性率为93.3%。通过测序分析,发现当地长角血蜱携带黑龙江立克次体及马赛立克次体近缘菌。结论我国南方地区除已证实的北亚蜱传斑点热外,还应加强当地其他斑点热的监测及临床鉴别诊断。     

内蒙阿盟斑点热群立克次体Ha—91株的分离与鉴定

我们于1991年从内蒙阿盟亚东璃眼蜱分离到一株斑点热群(SFG)立克次体,命名为Ha-91株。免疫荧光法及蛋白免疫印迹分析表明Ha-91株立克次体与西伯利亚立克次体抗原性相近,但不完全相同;明显不同于其它种班点热群立克次体。这是首次证实亚东璃眼蜱为SFG立克次体的贮存宿主,也是首次从内蒙发现抗原性与西伯利亚立克次体不完全相同的SFG立克次体。     

海南岛斑点热立克次体病的血清学和病原学调查研究

斑点热群（ＳＦＧ）立克次体是立克次体属中最复杂的一群,分布在世界各地。１９８６年日本内田孝宏在四国地区分离出一株日本红斑热立克次体［１］,为ＳＦＧ的一个新种,而海南岛的自然景观与四国相似,是否也有日本红斑热立克次体感染存在？我们于１９９０年在海南岛各...     

黑龙江立克次体054株单克隆抗体对斑点热群立克次体抗原结合位点及特性的分析

本文利用三株黑龙江立克欢你054株（HLJ－054）的单克隆抗体对四株斑点热群立克次体西伯利亚种（R．s．）246株、精河株（JH－74）,立氏立克次体（R.r．）R株及HLJ-054株进行了血清学反应,对其蛋白组成及单抗结合抗原特性等方面进行了研究。结果表明：JH-74林与246株在上述三个方面完全一致,不同于HLJ－054及R．r．R株;HLJ－054株与R．r．R株与三株单抗血清学反应高度交叉．但二者在蛋白组成及与单抗反应的抗原组成上均存在差异。该结果支持黑龙江立克次体054株为斑点热群立党次作的一个新成员。单抗F7针对的抗原结合表位为蛋白多肽;而单抗2E1、4G2结合的抗原表位可能为精蛋白。     

斑点热群立克次体内蒙W-88蛛89102抗原的蛋白免疫印迹分析

蛋白免疫印迹试验表明从内蒙通辽病人旺某血标本分离的斑点热群立克次体W-88株与西伯利亚立克次体(232株及246株)的蛋白图谱完全相同,具有2个分子量为130KD及181KD的主要抗原性多肽及1个反应较弱的分子量为110KD的抗原性多肽,此与其它斑点热群立克次体不同。说明W-88株为西伯利亚立克次体。斑点热群立克次体中西伯利亚立克次体、立氏立克次体、康氏立克次体及派氏立克次体相互间抗原有较强的交叉反应。小蛛立克次体、澳大利亚立克次体与上述立克次体仅有微弱的交叉反应。说明斑点热群立克次体主要抗原分子有相同的决定簇。     

海南部分地区不明热患者斑点热立克次体血清学和病原学调查

斑点热是由斑点热群立克次体引起的蟀媒传染病。近年来调研资料表明,海南岛存在该病的自然疫源地[1,2]。由于该病多无特征性临床病征,临床上易误诊为不明原因发热。为了解海南岛斑点热的流行病学特征,探明“不明热”的病因,我们在lgu年4－8月间在海南琼中、三亚等收集了诊为不明原因发热的患者血液切份,应用R3UII：I？liP方法检测斑点群立克次体特异性核酸,结果报告如下。1材料与方法1．1标本的采集lop年4－8月间,在海南琼中大丰农场、新进农场及长征农场职工医院及三亚市人民医院收取诊为不明热的血液标本81份,液氮保存。1．2…     

斑点热群立克次体新种——虎林—93株的分离和鉴定

本文用鸡胚卵黄囊培养法及实验动物感染法从黑龙江省虎林县境内采集的嗜群血蜱中分离到一株立克体次。命名为ＨＬ－９３株立克次体。经形态学及血清学试验证实为斑点热群立克次体。分别用微量免疫荧光法、十二烷基硫酸钠－聚丙烯胺凝胶不连续电泳法、单克隆抗体免疫酶斑点法、单克隆和多克隆抗体免疫印迹法、聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析法对该分离株进行鉴定并同已知国际标准株、国际及国内参考株进行比较。结果表明：Ｈ     

斑点热群立克次体中国分离株HL-93和HLJ-054亲缘关系的研究

目的　通过斑点热群立克次体 (spottedfevergrouprickettsiae ,SFGR)rOmpA基因片段的序列分析对HL 93和HLJ 0 5 4的亲缘关系进行研究。方法　用PCR分段扩增rOmpA基因重复区后 1 9kb片段 ,PCR产物直接测序 ,用WinstarDNA分析软件包进行同源性比较、进化树分析及酶切位点的分析。　结果　HL 93株和HLJ 0 5 4株核苷酸及推定氨基酸的同源性均在 99%以上 ,在树形图上单独聚为一类。常用酶的酶切位点完全一致。结论　HL 93株和HLJ 0 5 4株为同一种SFGR ,建议均命名为黑龙江立克次体 ,但可能存在株间差异性。     

应用PCR技术检测斑点热群立克次体特异性DNA

作者对不明热患者血液,立克次体细胞培养物,疫区的微小牛蜱,野鼠脾脏等标本,应用Ｒｒ．１９０．７０ｐ和Ｒｒ．１９０．６０２ｎ引物对,进行ＰＣＲ扩增,检测斑点热群立克次体特异性ＤＮＡ。检测结果１．２０份不明热患者或疑似立克次体病患者血液标本,检出阳性结果的有７份（７／２０阳性）。２．２７份不明热患者或疑似立克次体病患者血液标本的细胞分离培养物,检出阳性结果的有１４份（１４／２７阳性）。３．７组微小牛蜱有２组检出阳性结果（２／７阳性）。４．４７组野鼠脾脏８组检出阳性（８／４７阳性）。     

吉林省桦甸市首次发现斑点热群立克次体的感染

我们对桦甸市人及不同动物进行斑点热群立克次体的血清流行病学调查 ,现将调查结果报告如下。调查对象及血清来源 :从桦甸市红石林业局三道沟林场采集林业工人血 10 5份 ,桦甸市红石镇农民血 10 0份 ,桦甸市城区服务人员血 10 0份 ,桦甸市城区中学生血 10 0份 ,小学生血 10 5份