四种含药血清对小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及酪氨酸酶活性的影响

目的研究传统医学文献中专治白癜风的常用药物诃子、余甘子、柴胡及药群组合(含木香、胡椒、干姜等)的药物血清对小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用"通法"制备上述药物高、低不同剂量的大鼠含药血清及不含药物的空白血清,以体外培养的小鼠B16黑素瘤细胞为模型,采用MTT法测定各组受试血清对B16细胞增殖活性的影响;NaOH细胞裂解法测定黑素合成量,L-DOPA氧化法测定对酪氨酸酶活性的影响。结果与正常对照组(含10%小牛血清)相比,除组合低剂量组外,其他受试血清均不影响小鼠B16细胞的增殖活性(P>0.05);与空白血清组相比,柴胡和药群组的高、低剂量组含药血清均对B16黑素瘤细胞黑素合成有促进作用(P<0.05,P<0.01),而诃子低剂量、牛柑子高剂量组含药血清具有促进黑素合成的作用(P<0.05,P<0.01);与空白血清组相比,四种受试药物的高低剂量组含药血清对小鼠B16细胞酪氨酸酶活性均有激活作用(P<0.05,P<0.01)。结论四种受试药物含药血清除组合低剂量组外,均在不影响小鼠B16细胞增殖活性的基础上,表现出不同程度的促进其黑素合成的作用,此作用与提高酪氨酸酶活性有一定关系。     

紫草素对人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响

目的探讨紫草素对人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响。方法采用MTT法测定紫草素对人A375黑素瘤细胞增殖的影响,NaOH裂解法测定黑素合成。并分成实验组（紫草素组）、对照组（空白组）和阳性对照组[甲氧沙林（8-MOP）组],对其结果进行比较分析。结果紫草素浓度在0.25～1μmol/L对人A375黑素瘤细胞增殖无影响（P〉0.05）,2μmol/L和4μmol/L的紫草素对于A375黑素瘤细胞的增殖有一定的抑制作用（P〈0.05或P〈0.01）。紫草素对于人A375黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性呈剂量依赖性激活作用。实验组与对照组比较,0.25、0.5及1μmol/L紫草素对人A375黑素瘤细胞酪氨酸酶活性有激活作用,差异有统计学意义（P〈0.01）;且阳性对照组紫草素作用优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;实验组浓度为0.25、0.5及1μmol/L紫草素溶液和阳性对照组与对照组比较,对于人A375黑素瘤细胞中黑素合成有激活作用,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论紫草素对于培养的人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素生成有较强的剂量相关性激活作用。     

养颜青娥丸对小鼠B-16黑素瘤细胞株黑素合成和酪氨酸酶的影响

目的：研究养颜青娥丸对小鼠B－16黑素瘤细胞株细胞增殖、黑素合成的影响及对细胞内酷氨酸酶的影响。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定养颜青娥丸对细胞增殖的影响；酶学方法研究养颜青娥丸对酷氨酸酶活性的作用；470nm比色法测定合成黑素含量A值。结果：研究发现养颜青娥丸对黑素细胞增殖及酷氨酸酶活性有抑制作用，对合成黑素含量有降低作用；组方单味药中杜仲、沙苑子、制首乌对黑素细胞增殖及酷氨酸酶活性有抑制作用，对合成黑素含量有降低作用；补骨脂、核桃肉对黑素细胞增殖及酷氨酸酶活性有促进作用，对合成黑素含量有增加作用。结论：养颜青娥丸对黄褐斑可能有一定的治疗作用，但治疗机制不能单纯用生化学、酶学改变来解释。     

高良姜总黄酮对B16细胞增殖和酪氨酸酶活性及黑素合成的影响

目的探讨高良姜总黄酮对B16小鼠黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖,比色法测定酪氨酸酶活性和黑素含量。结果在浓度为0.25～10.00μmol.L-1范围内,高良姜总黄酮均可显著促进B16细胞的增殖(P<0.01);浓度为0.5,1.0μmol.L-1时,高良姜总黄酮能够促进酪氨酸酶活性和黑素合成。结论高良姜总黄酮在一定浓度范围内能够促进B16细胞增殖、酪氨酸酶活性升高和黑素合成。     

鱿鱼皮胶原蛋白多肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的研究不同分子量鱿鱼皮胶原蛋白多肽SP1(Mr>10000u)、SP2(6000u相似文献   

驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及黑素生成的影响

目的研究维药复方驱白艾力勒思亚散(QBALLSYS)乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖、黑素合成以及酪氨酸酶活性的影响。方法以MTT法测定培养的B16黑素瘤细胞的增殖活性;氢氧化钠法测定黑素生成量;体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性。结果与空白对照组相比,驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对B16黑素瘤细胞的增殖活性、黑素生成量、酪氨酸酶活性均有显著性作用(P<0.05或P<0.01)。驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞的增殖活性有上调作用,对细胞黑素生成以及酪氨酸酶的活性均有不同程度的促进作用。结论驱白艾力勒思亚散的乙醇提取物具有促进黑素细胞增殖和合成黑素的作用。     

底物加料方式对氢化可的松发酵的影响

考察了甾体11β-羟基化过程中,底物17α,21-二羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯(2)投料时间、投料量及pH对细胞色素P-450(3)诱导和氢化可的松(1)产量的影响.在此基础上提出了生产1的诱导发酵改进方法:菌体生长至16h投入2 0.3g/L,培养至24h补加2 0.7g/L,培养至32h调至pH6.5,以后每12h调节一次.结果表明,在发酵周期不变(68h)的情况下,3蛋白量和1产量分别比一次投料法提高了11.2%和12.7%.     

氢化可的松对重度支气管哮喘肺功能的影响

目的　观察氢化可的松对重度支气管哮喘患儿肺功能的影响。方法　将 3 2例重度支气管哮喘患儿随机分为两组 ,在常规治疗的基础上 ,治疗组给予静脉滴注氢化可的松琥珀酸钠 全乐宁雾化吸入 ,对照组单纯雾化吸入全乐宁 ,监测患儿呼气峰流速 (PEF)的每日变异率及喘息缓解情况。结果　两组患儿 3d临床症状缓解率分别为 :68.7%,43 .7%(P <0 .0 1) ,5dPEF变异率分别为 ( 11.6±3 .47) %、( 15 .7± 4.5 6) %( P <0 .0 1) ,两组差异均具有显著性。结论　氢化可的松对重度支气管哮喘患者的症状及肺功能均有明显改善     

反相高效液相色谱法同时测定氯霉素氢化可的松滴耳液中氯霉素和氢化可的松含量的方法学研究

目的建立用反相高效液相色法同时测定氯霉素氢化可的松滴耳液中氯霉素和氢化可的松含量的方法.方法以Shim-pack VP-ODS柱(4.6mm×15cm,5μm)为色谱柱,甲醇-水(内含1.5%冰醋酸)(65:35)为流动相,流速1.0mL/min,进样量10μL.结果一次进样可同时测定两种组分的含量,氯霉素在154.5～1030.0μg/mL,氢化可的松在32.4～210.0μg/mL范围内,峰面积与其浓度均呈良好的线性关系,r值分别为0.999 9和0.999 6,日内精密度和日间精密度良好,平均回收率分别为100.1%,RSD=0.49%(n=9)和100.2%,RSD=0.42%(n=9)结论方法简单快速,结果准确,可作为该制剂的质控分析.     

甘草酸二铵对肝炎病人血清氢化可的松的影响

目的：观察甘草酸二铵对血清氧化可的松木水平的影响，方法：慢性肝病７０例，男性４９例，女性２１例，年龄３２±ｓ９ａ；分成３组，ＣＰＨ组１７例，ＣＡＨ组４１例，ＬＣ组１２例，均给甘草酸二铵１５０ｍｇ，加入１０％葡萄糖液２５０ｍＬ中ｉｖ，ｇｔｔ，ｑｄ，连续１５ｄ，并于使用前１ｄ及用药后ｄ１５晨８时抽血备测，另设正常对照组（健康男性１６例，女性９例，年龄２３±８ａ，不用药）２５例。结果：治疗前血清氢化的     

Effect of selenium compounds on murine B16 melanoma cells and pigmented cloned pB16 cells

The effects of selenium compounds such as sodium selenite, sodium selenate, seleno-Dl-cystine and seleno-Dl-methionine (100 μM and 10 μM) on B16 and pigmented cloned pB16 murine melanoma cells were investigated in vitro. At the tested concentrations, B16 cells showed a greater sensitivity to the toxic effects of sodium selenite and seleno-Dl-cystine than pB16 cells, whereas no decrease of B16 and pB16 cell number was observed after incubation with sodium selenate or seleno-Dl-methionine. Glutathione (GSH) percentages were strongly decreased only by selenite and seleno-Dl-cystine; it was marked more in B16 than in pB16 cells. The pretreatment of B16 cells with a GSH depleting agent (10 μM buthionine-[S,R]-sulfoximine) did not significantly influence the cytotoxic effects of selenite and seleno-Dl-cystine. On both cell populations, GSH preincubation (50 μM) enhanced the cytotoxicity of selenite whereas the survival of seleno-Dl-cystine treated cells was increased. Glutathione peroxidase (GSH-Px) activity in B16 cells was more sensitive than in pB16 cells to the activating effect of selenite, and particularly of seleno-Dl-cystine; however, cell-free controls indicated that activation was mainly due to glutathione reductase. The rate of⁷⁵Se (as sodium selenite) uptake in both cell populations was maximal within the first hour of incubation, with a preferential accumulation in the cytosol; after 24 h of incubation, the amount of⁷⁵Se in cytosol and pellet was approximately the same. Gel filtration chromatography of lysed cells after incubation for 6 h with 10 μM⁷⁵Se-selenite showed that the radioactivity was eluted as two peaks corresponding to low (4–9 kDa) and high (280–320 kDa) molecular weights. Possible toxicological mechanisms are discussed at molecular level. For selenite, a major involvement of GSH is proposed, with production of selenodiglutathione and selenopersulfide, which should be directly responsible of the decrease in cell number, thiol oxidation and protein synthesis inhibition. For selenocystine, an active selenol species (Cy-Se⁻) is also hypothesized as being responsible for thiol oxidation and mutagenic effects. For both compounds oxygen active species could also be formed; however, a relevant role of GSH-Px was not apparent. The minor sensitivity of pB16 cells to the toxic effects of selenite and seleno-Dl-cystine could be explained by the smaller depletion of GSH induced by those compounds in pB16 cells, a minor formation of selenium active species, the larger amount present of the oxyradical scavenger melanin, the secretion of some mitogenic factor by pB16 cells and/or a greater resistance to autocrine cytotoxic factors.     

南蛇勒蛋白对黑色素瘤细胞的抑制及分化作用

目的从南蛇勒中分离纯化具有抑制黑色素瘤作用的蛋白质———南蛇勒蛋白 (CMP) ,并对黑色素瘤细胞KI735M2增殖的抑制及细胞的分化进行研究。方法采用盐析、凝胶色谱的方法对CMP进行分离纯化 ,溴化四唑蓝法检测CMP对黑色素瘤细胞KI735M2增殖的抑制作用的量效和时效关系 ,形态学观察法检测细胞的分化。结果CMP相对分子质量为 1980 0 ,2 2 .0 μg/mlCMP抑制黑色素瘤细胞增殖 6 0 % (P <0 .0 5 ) ,使细胞增殖第 5天处于停顿 ,抑制率为 96 % (P <0 .0 5 ) ,不同浓度的CMP使黑色素瘤细胞形成具有分化特征的树突状结构。结论CMP对黑色素瘤细胞KI735M2的增殖具有抑制作用。     

特异性抗原致敏的DC-CIK细胞对B16黑色素瘤多途径抑瘤作用的研究

目的探讨特异性抗原致敏的树突状细胞(dentritic cells,DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)细胞对B16黑色素瘤的作用。方法采用特异性肿瘤抗原致敏的DC与CIK细胞共同培养,分析其免疫表型,计算抑瘤率;流式细胞(FCM)检测癌细胞增殖周期中G0/G1期、S期、G2/M期细胞比率和细胞凋亡指数(apoptosis Index,AI)、细胞增殖指数(proliferation Index,PI)的变化;透射电镜观察形态学变化;并用MTT法检测其对肿瘤细胞的杀伤力。结果特异性抗原致敏的DC-CIK细胞组抑瘤率高于DC-CIK组和CIK组;FCM检测G0/G1期细胞比率、AI显著升高,S期无明显变化,G2/M期细胞比率、PI显著下降;特异性抗原致敏的DC-CIK细胞组杀伤活性明显升高(P<0.05)。结论特异性抗原致敏的DC-CIK细胞对B16黑色素瘤的抑瘤作用明显高于DC-CIK细胞和单纯CIK细胞。     

HPLC法测定注射用氢化可的松琥珀酸钠中的有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定注射用氢化可的松琥珀酸钠的有关物质。方法:色谱柱采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(8mmol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液,用8mmol·L~(-1)磷酸氢二钾溶液调pH至5.0±0.1)(43∶57);流速为1.0mL·min~(-1),检测波长:242nm;柱温:35℃。结果:17-氢化可的松琥珀酸钠、21-氢化可的松琥珀酸钠、游离氢化可的松及其他有关物质均能得到较好分离,在测定范围内具有良好的线性及精密度;最低检测限为0.6ng。结论:该方法简便灵敏,快速准确,可用于注射用氢化可的松琥珀酸钠有关物质的测定。