罗格列酮对变应性鼻炎小鼠galectin-9、tim-3信号和炎性分子表达的影响

目的研究PPAR-γ激动剂罗格列酮(ROS)对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜半乳糖凝集素-9(galectin-9)和T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(tim-3)表达的影响。方法应用卵清蛋白(OVA)致敏建立小鼠变应性鼻炎模型,应用免疫组化及Real Time-PCR方法检测ROS对小鼠鼻黏膜中galectin-9和tim-3表达影响,应用ELISA法检测小鼠血清中IL-4、IL-5、IFN-γ含量。结果变应性鼻炎(AR)小鼠鼻黏膜中galectin-9和tim-3表达较正常对照组明显增高,罗格列酮及地塞米松治疗后galectin-9和tim-3的表达降低。与正常对照组比较,变应性鼻炎小鼠血清IL-4、IL-5含量明显升高,而IFN-γ含量明显减低;罗格列酮组和地塞米松组IL-4和IL-5含量较AR组降低,IFN-γ含量上调。结论罗格列酮抑制变应性鼻炎黏膜炎症反应,可能与降低鼻黏膜galectin-9和tim-3的表达相关。     

黄芪甲苷对变应性鼻炎小鼠线粒体动态平衡及NK 细胞分化影响的研究

目的：探讨黄芪甲苷对变应性鼻炎（AR）小鼠NK细胞分化的影响及机制。方法：C57/BL6小鼠随机分为空白组、AR模型组、黄芪甲苷组。观察各组小鼠行为学表现、鼻黏膜炎症反应;ELISA法测定血清IL-4、IL-5、IFN-γ水平;免疫荧光法检测各组NK细胞IL-4、IFN-γ表达;透射电镜等技术观察小鼠线粒体形态。结果：与AR模型组比较,黄芪甲苷组小鼠鼻过敏症状、鼻黏膜炎症明显改善,血清IL-4、IL-5水平降低。黄芪甲苷干预后,OVA致敏小鼠NKp46细胞IL-4、p-Drp1(Ser616)阳性比率降低。同时,黄芪甲苷组小鼠鼻黏膜NK细胞线粒体管状形态较AR模型组有所恢复,线粒体长度明显增加。结论：黄芪甲苷可能通过调节Drp1活性,恢复线粒体动态平衡,抑制NK细胞的NK2分化偏移,发挥改善AR的效应。     

NF-κB在变应性鼻炎发病中的调节作用

目的探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)病理过程中TLR-NF-κB信号传导通路的调节机制及核因子-κB(NF-κB)对嗜酸性粒细胞聚集的调节作用。方法 50只大鼠随机分成A组(对照组)、B组(AR组)、C组(AR+PGN)、D组(AR+PGN+Pam3CSK4)、E组(AR+PGN+BEL),应用卵清蛋白建造AR模型,HE染色观察鼻黏膜形态改变并计数炎症细胞浸润数,ELISA法检测鼻腔清洗液IFN-γ、IL-4、嗜酸性粒细胞主要碱性蛋白(MBP)及IgE的含量,Real-Time PCR及Western blot法检测Toll样受体2(TLR2)、NF-κB的表达情况。结果 B组变应性损伤明显,鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润数多于其他组,IL-4、MBP及IgE的表达较A组增高(P0.05);C组鼻黏膜以中性粒细胞浸润为主,IFN-γ、TLR2及NF-κB的表达较B组增高(P0.05);D、E组炎症细胞浸润数、IL-4、MBP及IgE的表达较B组降低(P0.05)。结论调控TLR-NF-κB传导通路的表达即抑制NF-κB的过度表达,有利于调节变应性鼻炎病理过程中嗜酸性粒细胞的增值聚集。     

MicroRNA Let-7a在小鼠变应性鼻炎中的作用

目的探讨micro RNA Let-7a在小鼠变应性鼻炎中的作用。方法选取32只8周龄成熟雌性C57BL/6小鼠随机分成4组:Let-7a组、Let-7a对照组、OVA组和PBS组,每组8只。Let-7a组、Let-7a对照组及OVA组采用卵清蛋白(OVA)致敏激发,建立小鼠变应性鼻炎模型。Let-7a组于第1、2、3次激发前半小时给予Let-7a和脂质体2000混合物,而Let-7a对照组给予Let-7a对照和脂质体2000混合物。PBS组以PBS代替OVA。造模成功后计数小鼠搔鼻次数、鼻腔灌洗液中炎性细胞情况,取小鼠鼻腔黏膜固定后染色评估鼻黏膜杯状细胞增生病理学变化,检测小鼠鼻腔灌洗液中IL-4、IL-13及IFN-γ水平。结果与Let-7a对照组小鼠相比,Let-7a组小鼠搔鼻次数明显增加,鼻腔黏膜嗜酸性粒细胞浸润及杯状细胞增生显著,具有明显统计学差异(P0.05),鼻黏膜中IL-4及IL-13显著增高(P0.05),而IFN-γ无明显差异(P0.05)。结论 Let-7a促进变应性鼻炎的发生及发展。     

Toll样受体9配体CpG-ODN鼻内应用对变应性联合气道疾病炎性反应的影响

目的:探讨免疫刺激序列Cp G寡聚脱氧核苷酸(Cp G-ODN)鼻内应用与皮下注射对变应性联合气道疾病(ACAD)模型小鼠下气道炎性反应的影响。方法:30只清洁级雌性BALB/c鼠随机分为正常对照组(control组)、变应性鼻炎组(AR组)、变应性联合气道疾病组(ACAD组)、变应性联合气道疾病Cp G-ODN鼻内滴入组(Cp G i.n.组)和变应性联合气道疾病Cp G-ODN皮下注射组(Cp G i.d.组)。实验组动物依次进行腹腔卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝凝胶基础致敏和3次鼻腔激发,此后OVA或生理盐水(NS)雾化气道激发,正常对照组则给予NS。Cp G i.n.组和Cp G i.d.组分别给予10.0μg Cp G-ODN滴鼻和皮下注射,其它组给予NS滴鼻或皮下注射。观察Cp GODN干预后对鼻腔及下气道病理变化及评分,并对支气管肺泡灌洗液(BALF)行白细胞分类及嗜酸性粒细胞计数,ELISA法测定BALF和脾脏中细胞因子IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ,以及血清OVA特异性Ig E。结果:炎症细胞浸润评分示ACAD组小鼠肺部的病理改变程度高于control组和AR组(P0.01);Cp G i.n.组炎症评分较ACAD组下降,差异有统计学显著性(P0.05),而Cp G i.d.组炎症评分较ACAD组略有下降,但差异无统计学意义。Cp G i.n.组BALF中的白细胞总数、EOS绝对值计数、EOS百分比、BALF和脾脏淋巴细胞上清液中Th2细胞因子较ACAD组降低,差异具有统计学显著性(P0.01)。Cp G i.d.组上述指标略低于ACAD组,但差异无统计学显著性。Cp G i.n.组血清的OVA特异性Ig E较ACAD组下降,差异有统计学显著性(P0.05),而Cp G i.d.组与ACAD组比较有所下降,但差异无统计学显著性。结论:Cp G-ODN可通过抑制变应性鼻炎而抑制变应性联合气道疾病小鼠的下气道炎性反应,鼻内应用可能较皮下注射更有效。     

IL-17A抗体抑制变应性鼻炎鼠模型中IL-17A及RORγt并升高Foxp3 mRNA表达

目的：探讨IL-17A抗体对小鼠变应性鼻炎鼻黏膜中IL-17A、RORγt、Foxp3 mRNA水平的影响及意义。方法：以卵清蛋白致敏的Balb/c小鼠变应性鼻炎模型作为实验组,同期以生理盐水替代作为对照组,使用IL-17A抗体治疗作为治疗组。实时定量PCR方法检测三组小鼠鼻黏膜中IL-17A、RORγt、Foxp3mRNA的含量。结果：实验组中RORγt以及IL-17AmRNA水平均较对照组升高(P<0.05),治疗组中RORγt以及IL-17AmRNA的含量均低于实验组(P<0.05)。而实验组中Foxp3 mRNA水平较对照组下降(P<0.05),治疗组中Foxp3 mRNA的含量高于实验组(P<0.05)。结论：IL-17A抗体抑制变应性鼻炎鼠模型中IL-17A及RORγt mRNA水平并升高Foxp3 mRNA表达水平。     

AcCystatin减轻卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎病变和促炎细胞因子分泌

目的 观察广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(AcCystatin)对卵清蛋白(OVA)诱导的变应性鼻炎小鼠的影响.方法 将24只8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、OVA变应性鼻炎致敏组和AcCystatin治疗组.OVA组以OVA为变应原,氢氧化铝为佐剂进行腹腔注射,第15天后OVA滴鼻建立小鼠AR模型;A...     

白介素17单克隆抗体对变应性鼻炎小鼠气道炎症的作用

目的 探讨白介素17单克隆抗体（IL-17mAb）的不同给予剂量及方式在变应性鼻炎小鼠气道炎症中的作用。方法 将48只小鼠采用随机数字表法分为A、 B、 C、 D、 E、 F组,每组8只。分别于第0、 7、 14 d将20 μg卵清蛋白（OVA）加2 mg铝佐剂腹腔注射处理A、C、D、E及F组小鼠,间隔7 d,第22天开始进行鼻腔激发,每天每侧鼻孔各给予OVA 10 μl（共500 μg）滴鼻,连续7 d。A、C、D、E组小鼠于每次OVA鼻腔激发前1 h分别给予生理盐水、100 ng IL-17mAb、500 ng IL-17mAb、5 μg IL-17mAb滴鼻,F组小鼠于每次OVA鼻腔激发前4 h给予5 μg IL-17mAb腹腔注射,B组小鼠于相同时间点给予等量生理盐水腹腔注射及滴鼻。所有小鼠于最后1次激发后评估鼻部症状学变化,Diff-Quik染色观察鼻腔灌洗液（NLF）中嗜酸性粒细胞浸润情况,ELISA方法检测血清及NLF中IL-6、IL-10水平,鼻黏膜组织行甲苯胺蓝染色观察肥大细胞。结果 ４周末A组所有小鼠症状学评分均＞5分,提示造模成功。F组小鼠的挠鼻及喷嚏次数均少于A组（P＜0.05）;F组小鼠NLF中嗜酸性粒细胞数、血清IL-6水平低于A组,血清及NLF中IL-10水平均高于A组（P＜0.05）;E组小鼠血清中IL-10水平高于A组（P＜0.05）;A组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数多于B组,统计学意义显著（P＜0.01）;F组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数少于A组,但差异无统计学意义（P＞0.05）;F组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数与B组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 高剂量的（5 μg）IL-17mAb腹腔注射处于激发阶段的变应性鼻炎小鼠促使小鼠变应性鼻炎症状明显减轻,鼻腔灌洗液嗜酸性粒细胞减少。促使变应性鼻炎小鼠血清中IL-6表达降低,血清中及鼻腔灌洗液中IL-10表达升高,因此推测这些细胞因子的变化可能抑制Th17/促进Treg的分化,进而对变态反应产生抑制作用。     

鼻炎清颗粒治疗变应性鼻炎的免疫机制研究

目的:观察鼻炎清颗粒治疗大鼠变应性鼻炎(AR)后,细胞因子、血清特异性IgE和嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)的水平,了解该药治疗AR的部分免疫学机制.方法:用卵清蛋白(OVA)、氢氧化铝、百白破疫苗联合致敏大鼠建立变应性鼻炎动物模型,鼻炎清颗粒灌胃给药2周后,观察鼻黏膜组织学变化,ELISA法检测血清细胞因子IL-4、 IFN-γ、 IgE 和ECP的水平.结果:光镜观察发现,模型组鼻黏膜上皮细胞脱落、水肿、血管扩张、腺体增生,固有层内可见大量嗜酸性粒细胞、肥大细胞浸润,治疗组大剂量和中剂量组及阴性对照组则无上述改变.治疗组大、中剂量组血清IL-4水平分别为(10.30±4.41) ng/L 和(12.42±6.55) ng/L,明显低于模型组(17.62±6.10) ng/L,有统计学差异(P＜0.01或P＜0.05);而IFN-γ水平分别为(34.19±6.16) ng/L和(27.92±6.47) ng/L,明显高于模型组(19.33±5.63) ng/L(P＜0.01);3种剂量组的血清IgE水平分别为(26.46±6.12) μg/L、 (49.11±4.48) μg/L和(70.68±7.59) μg/L,与阳性模型组(81.03±7.54) μg/L,相比较有统计学差异(P＜0.01或P＜0.05);血清ECP水平分别为(1.48±0.25) μg/L,(2.30±0.56) μg/L和(3.05±1.27) μg/L,与阳性模型组(4.23±1.20) μg/L比较,大、中剂量组有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05),小剂量组无统计学意义.结论:鼻炎清颗粒通过调节Th1和Th2细胞因子的表达,纠正失衡的Th1/Th2的细胞因子网络,降低血清特异性IgE和ECP水平和抑制炎症细胞在鼻黏膜的聚集,防止其脱颗粒,对变应性鼻炎产生治疗作用.     

新生期卡介苗和乙肝疫苗联合接种对哮喘小鼠IFN-γ、IL-4和IL-17A表达的影响

目的:观察新生期卡介苗(BCG)和乙肝疫苗(HepB)联合接种对哮喘小鼠干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素17A(IL-17A)表达的影响,探讨BCG和HepB联合接种对气道炎症的影响及可能机制。方法:BALB/c小鼠随机分为BCG和HepB联合接种造模[卵清蛋白(OVA)所致哮喘模型]组(B/H/O组)、BCG接种造模组(B/O组)、HepB接种造模组(H/O组)、BCG和HepB联合接种组(B/H组)、造模组(OVA组)、BCG组、HepB组和生理盐水对照(NS)组,每组6只。B/H/O组和B/H组于第0、7和14天分3次皮下注射1×105CFU的BCG,同时第0和28天分2次下肢腿部肌肉注射HepB 1.5μg,其它组单独接种BCG或HepB。OVA致敏和雾化吸入激发建立哮喘模型;末次激发24 h后取肺组织HE染色;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞总数计数和嗜酸性粒细胞(EOS)计数;ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4及肺组织匀浆IL-17A的水平。结果:肺组织病理观察发现,OVA组、B/O组、B/H/O组和H/O组支气管周围大量炎症细胞浸润,气道上皮细胞增生肥大,B/H/O组和H/O组的炎症程度较OVA组重,B/O组则较OVA组轻。B/H/O组、B/O组和H/O组BALF细胞总数与OVA组比较均下降(P0.05);EOS计数在B/H/O组比B/H组上升(P0.05),B/O组比BCG组上升(P0.05),H/O组比HepB组上升(P0.05)。分别与H/O组、OVA组和NS组比较,HepB组的血清IFN-γ/IL-4比值均升高(P0.05);分别与B/H/O组、B/O组、OVA组和NS组比较,B/H组的血清IFN-γ/IL-4比值均升高(P0.05)。与OVA组比较,B/H/O组和B/O组的肺组织匀浆IL-17A水平均下降(P0.05);与B/O组比较,B/H/O组的肺组织匀浆IL-17A水平进一步下降(P0.05)。结论:卡介苗和乙肝疫苗联合接种有助于减轻哮喘模型小鼠肺部的炎症反应,其机制可能与降低IL-4分泌、提高IFN-γ/IL-4水平和抑制IL-17A的表达有关。     

γ-维生素E对变应性鼻炎大鼠炎症因子表达的影响

目的探讨γ-维生素E对变应性鼻炎大鼠(AR)Th1型和Th2型主要炎症因子的表达影响。方法 SD大鼠30只,随机分为γ-维生素E组、AR模型组和阴性对照组,每组10只。AR组和γ-维生素E采用卵白蛋白(OVA)联合A1(OH)_3致敏法建立AR大鼠模型,对照组采用生理盐水,γ-维生素E组于激发21d后,给予OVA的同时口服2.5mgγ-维生素E,连续7d;各组于给药后30min内观察各组大鼠临床表现,于最后一次激发后48h,取大鼠鼻腔分泌物,用ELISA试剂盒和Western-blot法检测IFN-γ、IL-17、IL-4和IL-5含量变化。结果 AR组大鼠均表现出打喷嚏、鼻痒和流鼻涕等AR的临床表现,而γ-维生素E组表现明显减轻。ELISA和Western-blot结果显示AR组鼻腔分泌物中IFN-γ、IL-17、IL-4和IL-5含量和表达水平明显高于对照组(P0.05),经γ-维生素E干预后,其含量明显降低(P0.05)。结论γ-维生素E减轻AR的临床表现可能与降低AR鼻腔分泌物中IFN-γ、IL-17、IL-4和IL-5的表达水平相关。     

RAI1脱敏干预影响变应性鼻炎大鼠模型ECP表达和Th1-Th2分化的机制

目的探究探针RAI1脱敏干预影响变应性鼻炎大鼠模型ECP表达和Th1-Th2分化的机制方法卵白蛋白(OVA)诱导雌性Sprague-dawley大鼠构建过敏性鼻炎(AR)模型。并进行构建沉默RAI1 mRNA质粒载体,脑内注射至AR模型大鼠体内。通过蛋白质印迹法检测Th1-Th2相关因子的蛋白表达情况;通过q RT-PCR分析各组大鼠中维甲酸诱导蛋白RAI1的m RNA表达情况;通过记录大鼠鼻炎行为评估变应性鼻炎症状;通过酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中ECP、IgE含量。结果大鼠搔鼻挠嘴、打喷嚏行为AR模型组较对照组、RAI1干预组频繁(P0.05),说明AR模型建立成功。RAI1干预组(1.02±0.01)较AR模型组(2.85±0.25)、对照组(2.69±0.11)相比,RAI1mRNA表达降低(P0.05),说明病毒载体构建成功,RAI1蛋白表达受到抑制。Th1相关因子IL-2、IFN-γ的蛋白表达AR模型组较对照组、RAI1干预组低(P 0.05)。Th2相关因子IL-4、IL-5的蛋白表达AR模型组较对照组、RAI1干预组高(P0.05)。经酶联免疫吸附检测ECP、IgE含量,AR模型组(3.11±0.23、29.51±3.64)较对照组(1.62±0.18、13.72±2.68)、RAI1干预组(1.85±0.14、17.66±2.16)升高(P 0.05)。结论RAI1脱敏干预会降低ECP蛋白表达,平衡Th1-Th2生物功能,对变应性鼻炎具有治疗效果,减轻鼻炎症状。     

新疆维、汉人群变应性鼻炎患者血清IL-4和IFN-γ水平及其与鼻粘膜嗜酸性粒细胞浸润的相关性

目的:探讨新疆维、汉人群变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者血清白细胞介素4(Interleukin-4,IL-4)和干扰素γ(Interferon gamma,IFN-γ)水平与鼻粘膜嗜酸性粒细胞(Eosionphils,EOS)浸润的相关性。方法:采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)测定59例维吾尔族AR患者、50例汉族AR患者外周血清IL-4和IFN-γ水平,高倍显微镜下观察病理涂片并计数AR患者鼻粘膜EOS计数。结果:维、汉人群AR患者血清IL-4和IFN-γ水平均无显著差异(t值分别为1.304和1.408,P均>0.05);维、汉人群AR患者IL-4水平与鼻粘膜嗜酸性粒细胞计数均呈正相关(r分别为0.828和0.691,P均<0.01),IFN-γ水平与鼻粘膜EOS计数均呈负相关(r分别为-0.712和-0.764,P均<0.01)。结论:维、汉人群AR患者的血清IL-4和IFN-γ水平均无显著差异,AR患者鼻粘膜EOS增多与血清IL-4分泌过多而IFN-γ分泌受抑制有关。     

克鼻敏汤剂对实验性变应性鼻炎大鼠细胞因子水平的调节作用

研究中药复方克鼻敏汤剂对实验性变应性鼻炎大鼠的治疗作用,并初步探讨其机制。用卵清蛋白致敏大鼠制作变应性鼻炎动物模型,并经灌胃克鼻敏进行预防性治疗。观察变应性鼻炎大鼠行为学改变;组织病理学方法观察鼻黏膜改变;采用ELISA法检测血清总IgE、卵清蛋白特异性IgE和细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-5水平。结果发现与模型对照组比较,克鼻敏治疗组行为学积分、血清总IgE和特异性IgE含量,IL-4和IL-5水平均明显下降(P<0.01);血清IL-2和IFN-γ明显升高(P<0.01)。克鼻敏治疗组与药物对照组和正常对照组比较,IFN-γ、IL-4和IL-5水平均无显著性差异,但克鼻敏治疗组行为学积分、血清总IgE和特异性IgE含量及IL-2水平均高于药物对照组和正常对照组。克鼻敏治疗组与强的松治疗组比较各项观测指标均无显著性差异。研究结果提示中药复方克鼻敏汤剂可通过调节细胞因子表达,下调IgE的产生达到对实验性变应性鼻炎的治疗目的。     

OVA特异性免疫治疗对哮喘小鼠IL-23/Th17轴的影响及机制研究

目的腹部皮下注射大剂量卵白蛋白(OVA)建立小鼠哮喘免疫治疗模型,探讨IL-23/Th17轴在小鼠哮喘模型经皮免疫治疗过程中的作用。方法选择18只BALB/c小鼠为建模研究对象,按随机数字表法分为3组:空白对照组、哮喘对照组和哮喘免疫治疗组,每组6只小鼠。哮喘免疫治疗组予10μg OVA于0、7 d腹腔注射致敏,21~27 d持续1周予1 mg OVA腹部皮下注射诱导免疫耐受,35~41 d予1%OVA雾化激发;哮喘对照组在21~27 d OVA皮下注射等量生理盐水,其余处置同哮喘免疫治疗组;空白对照组采用等量生理盐水致敏及激发。50 d予10%OVA加强激发1次。末次激发24 h内检测气道反应性;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计数细胞总数及细胞分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性Ig E、BALF中IL-5、IFN-γ、IL-23、IL-10的表达;HE染色观察肺组织病理改变;流式细胞仪检测各组脾、肺组织Treg、Th17细胞比例;q-PCR检测肺组织转录因子。结果哮喘免疫治疗组气道反应性、BALF中嗜酸性粒细胞计数、IL-23水平及血清OVA特异性Ig E水平明显低于哮喘对照组,差异有统计学意义(P0.05);而BALF中IFN-γ水平与哮喘对照组比较差异无统计学意义(P0.05);同时HE染色发现哮喘免疫治疗组肺组织炎症较哮喘对照组明显减轻;流式细胞技术检测发现外周血Treg细胞百分比明显高于哮喘对照组,差异有统计学意义(P0.05);q-PCR检测肺组织转录因子表明免疫治疗组Foxp3明显高于哮喘对照组,而RORγt明显低于哮喘对照组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论大剂量OVA特异性免疫治疗能够减轻哮喘小鼠气道慢性炎症反应,同时引起Th17细胞下降伴随IL-23表达降低;其机制可能与纠正肺部IL-23/Th17轴有关。     

变应性鼻炎患者经特异性免疫治疗后体内IL-4、IFN-γ、SIgE的变化

随着对变应性鼻炎(AR)分子生物学和免疫学研究的日益重视，人们对AR有了更深刻的认识。但对AR特异性免疫治疗前、后IL-4、IFN-γ、SIgE的变化情况尚未见报道。我们自2001年1月至2024年3月对只有尘螨过敏的22例AR患者进行了特异性免疫治疗前、后血清和鼻灌洗液中IL-4、IFN-γ、SIgE、TIgE的测定并进行了比较分析及临床意义的探讨。     

MiR-155-5p介导Treg/Th17免疫失衡致变应性鼻炎机制研究

为探讨miR-155-5p异常表达对变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响及机制,将6周龄BALB/c小鼠随机平均分成6组:A.对照组(Control)、B.模型组(AR)、C.miR-155-5p空载对照组(AR+Vector)、D.miR-155-5p过表达组(AR+miR-155-5p)、E.miR-155-5p阴性对照组(AR+NC)、F.miR-155-5p沉默组(AR+抗miR-155-5p抗体)。采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)诱导建立AR小鼠模型,鼻腔内给予miR-155-5p过表达或沉默慢病毒进行干预。实验末对各组小鼠过敏症状进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织病理学变化,real-time PCR、Western blotting检测鼻黏膜组织中miR-155-5p、Foxp3、RORγt的表达水平,ELISA检测血清中IgE及炎性因子TGF-β1、IL-10、IL-17A、IL-6表达,流式细胞术检测外周血Treg和Th17百分比。结果发现,与对照组比较,模型组小鼠鼻炎症状评分明显增加,Foxp3、RORγt mRNA及蛋白表达水平明显升高,血清IgE、IL-17A、IL-6及Th17百分比显著上升,TGF-β1、IL-10及Treg百分比明显降低。MiR-155-5p过表达加重模型组小鼠鼻炎症状,同时促进IgE及Th17相关细胞因子的表达,抑制Treg相关细胞因子的表达,而miR-155-5p沉默后Treg/Th17免疫失衡得到缓解,小鼠鼻炎症状评分显著下降。MiR-155-5p可以显著加重AR小鼠的鼻炎症状,可能与影响Foxp3、RORγt表达,调节Treg/Th17免疫平衡有关。     

PLGA为佐剂的螨变应原纳米疫苗治疗小鼠过敏性鼻炎研究

目的探讨螨变应原Der p2经聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包载合成的纳米疫苗特异性免疫治疗小鼠过敏性鼻炎的疗效及机制。方法取雄性SPF级BALB/c小鼠30只,4~6周龄。随机分为5组,即正常组、模型组、空白PLGA治疗组、螨抗原纳米疫苗治疗组(PLGA-DP2治疗组)及螨重组蛋白Der p2治疗组,每组6只。按常规方法建立尘螨过敏性鼻炎小鼠动物模型。建模成功后,空白PLGA治疗组、PLGA-DP2治疗组和螨重组蛋白Der p2治疗组分别使用空PLGA、PLGA-Der p2纳米疫苗(含50μg Der p2蛋白)和50μg螨重组蛋白Der p2经小鼠腹部皮下注射进行免疫治疗,每隔3 d注射1次,共治疗5次。治疗结束后,取螨变应原粗浸液200μg分别滴鼻激发小鼠,激发结束后处死小鼠。在小鼠激发后的30 min内,观察并记录各组小鼠鼻部症状(喷嚏次数、搔鼻及鼻分泌物量)评分情况;检测血清中过敏原特异性抗体(Ig E)及细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10和γ干扰素(INF-γ)]水平;观察鼻黏膜组织形态学变化。结果螨抗原纳米疫苗PLGA-DP2载药量13.6%,包封率88.4%;纳米粒直径为200~400 nm。治疗后小鼠鼻部症状评分,PLGA-DP2治疗组鼻痒(0.67±0.52)分,喷嚏(1.00±0.63)分,清涕(1.67±0.41)分;螨重组蛋白Der p2治疗组分别为(0.83±0.41)分、(1.50±0.55)分、(0.83±0.75)分。明显低于模型组,且PLGA-DP2治疗组降低更明显(P0.05)。PLGA-DP2治疗组和螨重组蛋白Der p2治疗组与模型组比较,血清特异性Ig E及IL-4水平方面均明显降低,PLGADP2治疗组降低更显著(P0.05);而IL-2、IL-10和INF-γ水平显著增加,PLGA-DP2治疗组增加更显著(P0.05)。PLGA-DP2治疗组小鼠鼻黏膜病理表现,上皮细胞基本排列整齐,组织结构清晰,相对模型组黏膜下层嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等炎性细胞减少,鼻黏膜纤毛结构相对比较完整,黏膜基层肿大程度减轻;基本与正常组一致。结论尘螨变应原纳米疫苗加以PLGA为佐剂可有效地抑制小鼠过敏性鼻炎的炎症反应,极大地提高了过敏原疫苗的疗效。     

IL-23 在变应性鼻炎小鼠模型中的作用及机制的研究

目的:探讨IL-23 在变应性鼻炎小鼠模型中的作用及机制的研究。方法:应用卵清蛋白(OVA)致敏建立小鼠变应性鼻炎模型,给予抗IL-23p19 单克隆抗体干预,计量抗原激发后小鼠搔鼻数量。应用HE 染色方法检测IL-23 对小鼠鼻黏膜炎症影响,应用ELISA 法检测小鼠灌洗液中IL-4、IFN-β及IL-17A 含量。应用PCR 方法检测鼻黏膜中FOXP3 的含量。结果:治疗后抗IL-23p19 抗体组小鼠搔鼻症状相对于抗体对照组明显减轻(P<0.05),与PBS 组比较,OVA 组小鼠鼻黏膜炎症细胞浸润明显(P<0.01),鼻腔灌洗液中嗜酸性粒细胞数明显升高(P<0.05);抗IL-23p19 抗体治疗后,小鼠鼻黏膜炎症细胞浸润显著降低(P<0.05),鼻腔灌洗液中嗜酸性粒细胞数明显降低(P<0.05);抗IL-23p19 抗体治疗后,IL-4 及IL-17A 含量较IgG 抗体对照组降低(P<0.05),IFN-β含量不变(P>0.05)。抗IL-23p19 抗体治疗后,FOXP3 含量较IgG 抗体对照组增高(P<0.05)。结论:抗IL-23p19 抗体可有效治疗小鼠变应性鼻炎,其机制可能是抑制Th17 细胞的增殖并且促进调节性T 细胞的功能。     

Th17细胞在小鼠变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及意义

目的：探讨T辅助细胞17(Th17)在小鼠变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及意义。方法：以卵清蛋白致敏的Balb/c小鼠变应性鼻炎模型作为实验组,同期以生理盐水替代作为对照组。取两组小鼠鼻黏膜,制成单细胞悬液,使用流式细胞仪检测两组小鼠鼻黏膜中Th17细胞比例。结果：两组小鼠鼻黏膜中均存在Th17细胞,并且实验组中Th17比例[(1.27±0.138)%与(0.771±0.088)%]高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：明确变应性鼻炎鼻黏膜中Th17细胞比例,为变应性鼻炎的治疗提供理论依据以及新思路。