联合VEGF-AON和PDGF-TFO对大鼠脑胶质瘤增殖和细胞凋亡的作用效果

目的观察PDGFB链基因的TFO和VEGF的反义寡核苷酸AON对荷瘤大鼠脑胶质瘤增殖和细胞凋亡的影响。方法所有大鼠均在立体定向导引下行右尾状核区微量灌注20μL生理盐水中含1×106C6胶质瘤细胞。在细胞接种后第8天,实验Ⅰ组原位注射含TFO1·0mg的20μL生理盐水,实验Ⅱ和Ⅲ组则分别原位注射含TFO1·0mg AON0·125mg和TFO1·0mg AON0·250mg的20μL生理盐水。以后每隔72h原位注射相同剂量的药物,共注射3次。对照组仅在相同时间原位注射20μL生理盐水。实验3周时处死所有的大鼠,观察肿瘤的生长情况,流式细胞仪观察PDGFB链基因(PDGF-B)、VEGF、PCNA及细胞凋亡的变化。结果实验Ⅰ组的成瘤抑制率为53·1%,实验Ⅱ组为81·4%,实验Ⅲ组为93·1%,三组肿瘤体积比较差异有统计学意义,P<0·01。TFO对胶质瘤细胞PDGF-B、VEGF和PCNA表达有明显的抑制作用;TFO能使胶质瘤细胞凋亡增加。联合应用TFO和AON能更好地抑制PDGF-B、VEGF和PC-NA的表达,使胶质瘤细胞增殖能力进一步降低,细胞凋亡进一步增加。结论联合应用TFO和AON能更有效地抑制肿瘤生长和细胞增殖,促进胶质瘤细胞凋亡。     

PDGF-B链基因的TFO对大鼠脑胶质瘤细胞增殖和凋亡影响

目的观察原位注射血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)B链基因的三链形成寡核苷酸(Triplex forming oligonucleotide,TFO)对荷瘤大鼠胶质瘤细胞增殖和凋亡影响.方法所有大鼠均在立体定向导引下右尾状核区微量灌注1×106C6胶质瘤细胞,其中实验Ⅰ和Ⅱ组在细胞接种后的第8天开始分别在肿瘤部位注射TFO 1.5 mg/20 μL和3.0 mg/20μL的生理盐水,以后每隔72 h原位注射相同剂量的TFO,共注射3次.对照组仅在相同时间原位注射20 μL生理盐水.实验至3周时处死所有的大鼠,观察肿瘤的生长情况,定性和定量观察肿瘤PDGF-B的表达、PCNA表达及细胞凋亡.结果实验Ⅰ组的成瘤抑制率为66.1%,实验Ⅱ组为91.8%.TFO对C6胶质瘤细胞PDGF-B、PCNA表达有明显的抑制作用;TFO能使C6胶质瘤细胞凋亡增加,以上作用均存在浓度依赖性.结论原位应用TFO能抑制PDGF-B表达,使胶质瘤细胞增殖降低、细胞凋亡增加,TFO能取得很好的抗胶质瘤生长的治疗效果.     

激光共聚焦显微镜对反义VEGF寡核苷酸转染TE-1及SKOV3细胞系的荧光检测

[目的]应用激光共聚焦显微镜检测转染至食管癌TE-1细胞及卵巢癌SKOV3细胞内反义VEGF寡核苷酸上荧光物质含量及转染对细胞凋亡的影响。[方法]传代培养食管癌TE-1细胞及卵巢癌SKOV3细胞,取VEGF反义寡核苷酸,按0.1μmol/L组、0.3μmol/L组及0.5μmol/L组转染两种细胞,正义寡核苷酸0.3μmol/L同时转染作为对照。激光共聚焦显微镜观察VEGF寡核苷酸转染荧光图像,比较反义VEGF寡核苷酸的不同浓度在两种细胞摄入情况。流式细胞术检测不同浓度转染两组细胞的凋亡差异。[结果]食管癌TE-1细胞及卵巢癌SKOV3细胞不同浓度寡核苷酸转染24h荧光强度分别为32.69±2.94、51.48±5.76、56.62±1.2和72.56±2.01、96.42±3.21、98.54±2.07,两组荧光强度与对照组相比均有显著性差异（P〈0.01）,TE-1细胞及SKOV3细胞0.3μmol/L组及0.5μmol/L组之间荧光强度无显著性差异。TE-1细胞各浓度组凋亡指数较对照组有显著差异,而SKOV3细胞中凋亡指数较对照组无显著性差异。[结论]激光共聚焦显微成像技术能进行活细胞水平转染效率的定量检测,对选择合适转染浓度有帮助,提示不同癌细胞使用相同浓度抗血管生成药物可能效果有差异。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对体外及裸鼠体内前列腺癌细胞PC3生物学特性影响的研究

 目的　探讨血管内皮生长因子（VEGF）反义寡核苷酸对前列腺癌细胞PC3在体外和裸鼠体内生长特性的影响,以及局部注射反义寡核苷酸治疗裸鼠皮下移植肿瘤的疗效。方法　采用Oligofectamine携带VEGF反义寡核苷酸转染前列腺癌细胞PC3,实验分为反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组和对照组。软琼脂糖凝胶实验和细胞侵袭实验检测转染反义寡核苷酸的肿瘤细胞成瘤性和侵袭性。裸鼠成瘤实验观察VEGF反义寡核苷酸对体内PC3细胞增殖的影响。建立裸鼠前列腺癌种植瘤模型,局部注射VEGF反义核酸治疗,测定体内抑瘤率。结果　对照组、正义寡核苷酸组和反义寡核苷酸组的PC3细胞每组阳性克隆数分别为53.67±5.86、52.33±6.43和26±4.58（F＝13.73,P＜0.01）,反义组体外形成克隆数显著减少;三组细胞侵袭至下室的细胞数分别为45.60±5.53、42.35±6.21和18.37±3.52（F＝14.18,P＜0.01）;转染VEGF反义核酸的细胞移植瘤生长较慢,接种28 d后三组的肿瘤体积分别为（1330.32±81.38）、（1267.64±120.26）和（641.83±58.34）mm3（F＝17.26,P＜0.01）;局部注射治疗4周后,三组肿瘤质量分别为（1.25±0.08）g、（1.17±0.06）g和（0.41±0.05）g,与对照组比较,正义组和反义组肿瘤抑制率分别为6.4 %和67.2 %,差异有统计学意义（χ2＝17.72,P＜0.005）。结论　VEGF反义寡核苷酸可以抑制前列腺癌细胞PC3 VEGF的表达,进而促进细胞凋亡,降低其成瘤性,抑制侵袭能力。转染VEGF反义寡核苷酸的前列腺癌细胞PC3移植瘤在裸鼠体内生长受抑制,局部注射反义核酸可显著抑制移植瘤的生长。     

端粒酶反义寡核苷酸及顺铂对恶性脑胶质瘤治疗的协同作用

目的观察端粒酶反义寡核苷酸(ODN)及顺铂对恶性脑胶质瘤治疗的协同作用.方法用15例Ⅲ、Ⅳ级端粒酶活性阳性表达的脑恶性胶质瘤制备单细胞悬液并原代培养,以5μmol/L端粒酶反义ODN抑制恶性胶质瘤细胞端粒酶活性后,用不同浓度顺铂处理细胞.流式细胞仪检测处理前后胶质瘤细胞PCNA、TUNEL阳性百分率变化情况.结果端粒酶反义ODN作用于恶性胶质瘤细胞72h后,TRAP法检测端粒酶活性转为阴性,此时0.3μg/mL顺铂即可对胶质瘤细胞有明显抑制增殖、促进凋亡作用.结论端粒酶反义ODN能抑制端粒酶活性,增加恶性胶质瘤细胞对顺铂的敏感性,与顺铂在治疗恶性胶质瘤细胞过程中有协同作用.     

脂质体介导VEGF反义寡核苷酸对肺癌微血管密度及VEGF表达的抑制作用

背景与目的血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在肿瘤的血管形成和瘤细胞浸润等生物学行为中发挥了重要作用。本研究的目的是探讨脂质体介导的VEGF反义硫代寡核苷酸对C57BL/6小鼠Lewis肺癌微血管密度及VEGF表达的抑制作用。方法40只C57BL/6小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌细胞后,随机分为4组:VEGF反义寡核苷酸组(ASODN)、VEGF正义寡核苷酸组(SODN)、VEGF错义寡核苷酸组(MODN)及对照组,前三组分别皮下注射经脂质体包裹的ASODN、SODN及MODN进行治疗,对照组只注射脂质体,每周2次,连续4周。观察各组小鼠肿瘤的生长情况,测量肿瘤体积。光学显微镜和电子显微镜下观察肿瘤组织形态学改变及超微结构变化。免疫组化及RT-PCR法检测微血管密度、VEGF蛋白及VEGFmRNA表达水平。结果对照组瘤重为(7.83±0.78)g,ASODN组瘤重为(4.49±0.43)g(P<0.01);SODN组瘤重为(7.73±0.69)g,MODN组为(7.78±0.75)g,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。ASODN组、SODN组、MODN组抑瘤率分别为42.6%、5.1%、3.2%。ASODN组VEGF蛋白、VEGFmRNA表达水平和MVD均明显低于对照组、SODN组及MODN组(P<0.01)。结论肿瘤原位注射反义VEGF硫代寡核苷酸能降低肺癌微血管密度及VEGF的表达,进而抑制肿瘤的生长。     

肝癌细胞中血管内皮生长因子的自分泌及其意义

目的 研究人肝癌细胞中血管内皮生长因子(VEGF)的自分泌及其意义。方法：反转录PCR(RTPCR)检测体外培养的人肝细胞肝癌细胞系SMMC7721、HHCC和HepG2中VEGF受体的表达。采用人工合成的反义寡核苷酸(ODN)抑制肝癌细胞VEGF的表达后，分别检测肝癌细胞增殖活性和超微结构的变化，流式细胞仪分析肝癌细胞周期以及VEGF’受体蛋白表达的变化。结果：VEGF受体1(Flt-1)在SMMC7721细胞中有表达，而HHCC和HepG2细胞则表达VEGF受体2(KDR)。反义ODN对HHCC细胞的增殖有抑制作用，且与ODN的作用浓度呈线性关系，浓度为2．5μmol／L、5 μmol／L和10μmol/L时细胞增殖抑制率分别为26％、41％和50％。反义ODN对SMMC7721细胞则无此作用，而正义ODN对上述2种细胞均无作用。反义ODN作用后，HHCC细胞出现S期比率下降，并且在细胞周期曲线中出现凋亡前期峰，而SMMC7721细胞无上述变化。反义0DN能降低HHCC细胞膜表面KDR的表达(阳性率分别为：反义组19.2％，正义组29.8％，对照组31.2％)，对于SMMC7721细胞Flt-1的膜表面表达则无明显影响。结论：人肝癌细胞中存在VEGF的自分泌途径，其机制可能为通过诱导肝癌细胞膜表面KDR的表达及其信号转导作用，从而调节肝癌细胞的分裂增殖。     

VEGF反义寡核苷酸对Lewis肺癌细胞的抑制作用

目的:〖HT5"SS〗 探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）反义寡核苷酸对C57BL/6小鼠肺癌细胞的抑制作用。〖HT5W〗方法:〖HT5"SS〗 制作C57BL/6小鼠皮下肺癌模型40只,分为VEGF反义寡核苷酸（ASODN）治疗组、VEGF正义寡核苷酸(SODN)治疗组、VEGF错义寡核苷酸（MODN）治疗组及对照组。接种Lewis肺癌细胞后24 h内,用ASODN、SODN及MODN皮下注射进行治疗,对照组只注射生理盐水,观察小鼠肿瘤的生长情况以及组织形态学改变,标本常规石蜡切片,HE染色,用免疫组化方法检测VEGF蛋白表达。〖HT5W〗结果:〖HT5"SS〗 对照组、ASODN组、SODN组、MODN组平均瘤重分别为（7.33±0.71）g、（4.56±0.38）g、(7.59±0.32)g和（7.62±0.39）g,ASODN组、SODN组、MODN组抑瘤率分别为43.8%、5.5%、3.1%。光镜下观察, VEGFASODN 能明显抑制肿瘤细胞生长,降低增殖活性。 免疫组化结果表明,ASODN组VEGF的表达水平明显低于SODN组、MODN组及对照组（P<0.05）。CD34免疫组化结果表明,ASODN组MVD为8.25±2.12,与对照组(14.78±3.51)、SODN组(13.71±3.62)及MODN组(12.81±2.56)比较,ASODN组MVD明显减少（P<0.01）。〖HT5W〗结论: 〖HT5"SS〗原位注射VEGF反义寡核苷酸能抑制小鼠肺癌生长。     

VEGF反义寡核苷酸对C_6胶质瘤细胞VEGF表达和内皮细胞生长的抑制作用

目的　探讨VEGF反义寡核苷酸作为抗肿瘤血管生成治疗新药的可能性。方法　观察VEGF反义、正义、错义寡核苷酸制备的条件培养基对牛血管内皮细胞生长的抑制作用。应用免疫荧光流式细胞技术观察三者分别对C6胶质瘤细胞VEGF表达的影响。结果　反义寡核苷酸对C6胶质瘤细胞VEGF的表达和内皮细胞生长有明显抑制作用 ,而且抑制作用存在浓度依赖性。结论　反义VEGF寡核苷酸通过抑制C6胶质瘤细胞VEGF的表达 ,进而抑制内皮细胞的生长。     

反义VEGF寡核苷酸抑制小鼠肺癌作用的实验研究

目的:观察阳离子脂质体介导反义血管内皮生长因子(VEGF)寡核苷酸对肺癌小鼠移植瘤生长、转移的抑制作用.方法:取肺癌细胞悬液建立小鼠肺癌动物模型后,选择40只随机分成4组,分别为空白对照组、实验对照组、VEGF反义寡核苷酸(ASODN)治疗组和VEGF正义寡核苷酸(SODN)治疗组.治疗结束后行大体、HE染色观察,并观察小鼠营养状况和症状.结果:对照组、VEGF反义寡核苷酸治疗组和VEGF正义寡核苷酸治疗组平均瘤质量分别为(7.14±1.68)、(4.26±1.37)和(7.33±1.56)g,VEGF反义寡核苷酸治疗组、VEGF正义寡核苷酸治疗组抑瘤率分别为58.2%和7.4%,ASODN组与对照组及SODN组比较差异有统计学意义,x2分别为8.21和8.04,P值均<0.01.结论:阳离子脂质体介导反义VEGF寡核苷酸对小鼠肺癌的生长具有显著抑制作用,未发现明显的毒副反应,阳离子脂质体介导的基因转染技术有望成为治疗癌症的新方法.     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

裘法祖教授生平

Prof.Fazu Qiu,member of the Chinese Communist Party,surgery professor of Tongji Hospital,departed in Tongji Hospital,Wuhan,China,at fourteen to nine a.m,June 14,2008,after a disease.He turns 94 this year.He was the senior academician of the Academia Sinica,the illustrious medical scientist of China,and the Honorary Director of Tongji Medical College,as well as Huazhong University of Science & Technology.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

Dermatomycosis in Dogs

During the routine examination of dogs for cutaneous lesions, 205 dogs were screened for fungi other than dermatophytes. Twenty-two dogs (10.8%) revealed the presence of non-dermatophytic fungi suspicious for representing the etiologic agents of the skin lesions. The fungi isolated were Alternaria sp. (2.9%), Penicillium sp. (2.4%), Aspergillus fumigatus (2.0%), Mucor sp. (1.5%), Cladosporium sp. (1.5%) and Fusarium sp. (0.5%). No dermatophyte was isolated in association with these fungi. The incidence of these infections was found to be greater in warm and humid climate.     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.