蟾酥注射液对HL60/ADM细胞多药耐药的逆转作用研究

目的:研究蟾酥注射液对人耐阿霉素(ADM)的急性髓性白血病细胞HL60/ADM多药耐药(MDR)的逆转作用。方法:采用MTT法分别考察蟾酥注射液对HL60/ADM细胞增殖能力和对ADM敏感性的变化,并采用高效液相色谱法考察HL60/ADM细胞对ADM的摄取能力。结果:蟾酥注射液能抑制细胞增殖;非细胞毒剂量蟾酥注射液预作用后,ADM对HL60/ADM细胞的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01),HL60/ADM细胞对ADM摄取能力显著增加(P<0.01)。结论:蟾酥注射液可部分逆转HL60/ADM细胞对ADM的耐药性。     

姜黄素逆转人白血病多药耐药细胞株HL—60／ADR的多药耐药性

目的 研究姜黄素与阿霉素联合应用对人白血病多药耐药细胞系HL-60／ADR耐药性的逆转作用。方法 采用MTT法测定药物的体外杀伤作用，应用金氏公式进行联合用药效果分析。应用流式细胞术分析细胞周期和测定细胞内药物浓度。结果 姜黄素2．00μmol／L～16．001μmol／L，阿霉素0．801μmol／L～6．401μmol／L同时给药对HL-60／ADR细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果，对HL-60／ADR细胞周期的影响也有协同作用，HL-60／ADR细胞内ADR积聚增加是其原因之一。序贯给药法中先给姜黄素后给阿霉素结果为协同作用，先给阿霉素后给姜黄素为拮抗作用。结论 姜黄素与阿霉素同时联合用药可产生协同作用，有效逆转多药耐药。序贯联合用药仅产生单向协同作用。     

毛兰素诱导人白血病HL—60细胞的凋亡

目的：研究毛兰素对HL－60细胞增殖的抑制作用,探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法：用MTT比色法测定了毛兰素对HL－60细胞增殖的抑制作用：应用荧光显微镜、透射电镜、DNA电泳及流式细胞仪观察了药物对细胞凋亡的诱导作用,并用免疫组化的方法从基因水平阐述了凋亡的发生。结果：毛兰素20－81．9nmol/L在72h内显著抑制HL－60细胞增殖,作用24h后,对HL－60细胞的IC50为38nmol/L,而阳性对照药长春新碱对HL－60细胞的IC50为101nmol/L,前者明显优于后者;形态学观察可见凋亡的特征性改变;琼脂糖电泳出现典型的DNA“ladder”;流式细胞仪结果表明细胞被阻滞于G2／M期;免疫组化可见bcl-2表达下降,bax表达升高。结论：毛兰素显著抑制HL－60细胞的生长,该抑制作用可能是通过诱导细胞凋亡和改变HL－60细胞bcl-2和bax基因的表达而实现的。     

急性白血病的多药耐药及逆转

多药耐药或多药抗性（MDR）系指肿瘤细胞或白血病细胞对结构和作用靶位不同的多种化疗药物有交叉耐药性,为化疗失败主要原因之一。按MDR发生机制有以下几点:（1）细胞膜上能量外排泵介导的 MDR,以 mdr-1/Pgp、MRP为代表;（2）胞质酶介导的MDR,以GST为代表;（3）胞核核孔蛋白介导的MDR,     

黄连素逆转结肠癌细胞株HCT-8/VCR多药耐药及其与P-gp功能变化相关性的探索性研究

目的观察黄连素对结肠癌细胞株HCT-8/VCR耐药性的逆转作用,并从P-gp功能变化的角度分析黄连素逆转细胞耐药性的机制。方法以人结肠癌细胞株HCT-8/VCR为观察对象,选用无干预措施、不同浓度黄连素处理(实验组)、维拉帕米处理组(阳性对照组)3种处理方法,采用MTT法测定不同浓度的长春新碱对3组细胞的抑制率,并计算耐药逆转倍数。采用微孔板荧光分光广度计测定3种处理方法细胞种罗丹明123的荧光强度,分析黄连素对于P-gp转运功能的影响。结果 MTT实验结果显示,不同浓度的长春新碱对于肿瘤细胞的具有抑制作用,且这种抑制作用与药物浓度呈正相关,药物对于细胞IC50为(18.31±0.57)μg/mL。加入黄连素处理细胞后,细胞对于药物的敏感性增加,黄连素的逆转倍数为3.57。罗丹明123排出实验结果显示,细胞对于罗丹明123的排出能力随着黄连素浓度的升高而增加。细胞酶联免疫吸附实验结果显示不同浓度的黄连素处理24h后,细胞的P-gp表达量均呈现明显降低。结论黄连素能够提升结肠癌细胞对化疗药物的敏感性,且这种机制可以通过抑制P-gp的表达而实验降低药物的外排而实现。     

人白血病HL60细胞的分化状态对细胞凋亡的影响

用细胞培养和流式细胞术等方法,研究人白血病HL60细胞诱导分化后,对三尖杉酯碱(Har)和喜树碱(Cam)诱导细胞凋亡的影响。结果表明,12-豆蔻酰及13-乙酸佛波酯以16nmol·L^-1浓度处理HL60细胞24h,细胞向单核/巨噬细胞方向分化,阻断于G_{1期;分化细胞抗Har和Cam诱导的细胞凋亡,但其c-myc基因的表达无变化。1.4%二甲基亚砜处理HL60细胞48h,细胞向粒细胞方向分化,阻断于G1期;分化细胞抗Cam,而不抗Har诱导的细胞凋亡;分化细胞的c-myc基因表达明显下降。结果提示,人白血病HL60细胞的分化状态,明显影响三尖杉酯碱和喜树碱诱导的细胞凋亡,但可能与c-myc基因的表达变化无关。}     

苦参碱诱导白血病细胞株HL—60分化的实验研究

目的 观察苦参碱对HL-60细胞的诱导分化作用。方法 采用体外细胞培养技术，从细胞增殖、形态学变化、NBT还原能力测定、非特异性酯酶染色及细胞表面分化抗原测定等方面观察。结果 苦参碱在12.5μg/ml-50μg/ml浓度范围内能明显抑制HL-60细胞的增殖，细胞向成熟粒系方向分化，NBT还原反应能力增强，α-NAE染色呈阴性，CD15、CD11b阳性率表达上升而CD33阳性率表达降低，CD14阳性率处理前后无变化。结论 苦参碱可能是一种良好的白血病细胞分化诱导剂，具有潜在的抗白血病作用。     

8-氯腺苷对未分化HL-60细胞增殖的影响

目的　 8 氯腺苷对HL 6 0细胞增殖抑制作用及其机制的探讨。方法　采用MTT和SRB方法检测了 8 氯腺苷对不同种类人肿瘤细胞增殖的作用 ;通过扫描电镜和透射电镜观察了HL 6 0细胞表面和核的变化 ;利用NBT还原和酸性磷酸酶分析诱导HL 6 0细胞分化 ;用流式细胞仪分析了 8 氯腺苷对HL 6 0细胞周期的影响。结果　 8 氯腺苷对七种人肿瘤细胞的增殖有抑制作用 ,其IC50 值为KB ( 0 0 5 μmol·L- 1 ) 相似文献   

PI3K／AKT信号通路特异性抑制剂LY294002对Tea8113细胞增殖活性的影响

目的探讨PI3K／AKT通路特异性抑制剂LY294002对人舌鳞癌Tea8113细胞株增殖活性的影响。方法用不同药物浓度的LY294002（5μmol／L,10μmol／L,20μmol／L,40μmol／L）处理Tea8113细胞,MTT法检测对照组和实验组在不同的作用时间（24h、48h、72h、96h）下,Tca8113细胞的OD值,计算增殖抑制率,绘制Tea8113细胞浓度-抑制率曲线及时间-抑制率曲线。结果随药物浓度的增加及作用时间的延长,Tea8113细胞的OD值逐渐减小,增殖抑制率逐渐增大（P〈0．01）。结论LY294002对体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞增殖有抑制作用,其抑制作用与LY294002的药物浓度及作用时间呈正相关。     

PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002对Tca8113细胞增殖活性的影响

目的探讨PI3K/AKT通路特异性抑制剂LY294002对人舌鳞癌Tca8113细胞株增殖活性的影响。方法用不同药物浓度的LY294002(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L)处理Tca8113细胞,MTT法检测对照组和实验组在不同的作用时间(24h、48h、72h、96h)下,Tca8113细胞的OD值,计算增殖抑制率,绘制Tca8113细胞浓度-抑制率曲线及时间-抑制率曲线。结果随药物浓度的增加及作用时间的延长,Tca8113细胞的OD值逐渐减小,增殖抑制率逐渐增大(P<0.01)。结论LY294002对体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞增殖有抑制作用,其抑制作用与LY294002的药物浓度及作用时间呈正相关。     

熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究

目的探讨熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化。结果 MTT法证实熊果酸对HL60细胞具有增殖抑制和杀伤效应,并呈浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于G0/G1期。结论熊果酸在体外可抑制急性早幼粒白血病HL60细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

含左氧氟沙星方案治疗耐多药肺结核疗效分析

目的:评价左氧氟沙星(LVFX)对耐多药肺结核(MDR PTB)的疗效.方法:122例MDR PTB随机分为两组,治疗组用LVFX＋3HThEK(C)/6HThE方案治疗,对照组用3HThEPK(C)/6HThEP方案治疗.结果:疗程结束时治疗组痰菌阴转率和病灶吸收率分别为88.5%,80.3%,明显高于对照组63.9%,59.0%(P＜0.05);治疗组病灶显著吸收率、空洞缩小率和症状好转率均优于对照组.结论:左氧氟沙星是氟喹诺酮类中治疗耐多药肺结核的有效药物.     

全反式维甲酸对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响

摘要目的观察全反式维甲酸（ATRA）对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响,探讨其抑制肿瘤生长的作用方式。方法建立急性前髓性白血病细胞HL60的裸鼠皮下实体瘤模型,经尾静脉隔日给予ATRA,第14天测量肿瘤大小;体外实验中,用免疫荧光法检测分化相关抗原CD11b的表达,观察ATRA对HL60分化水平的影响,用碘化丙啶（PI）染色法观察ATRA对HL60的细胞周期的影响。结果ATRA治疗14 d后,ATRA组瘤体体积为（0.5±0.6） cm3,对照组为（1.9±1.7） cm3（P＜0.05）;体外实验中,ATRA处理HL60细胞72 h后,细胞分化相关抗原CD11b的表达为（27.3±3.2）%,对照组（5.1±3.2）%（P＜0.01）;ATRA处理HL60细胞24 h后,检测细胞周期分布比例,ATRA处理组静止期（G0/G1期）细胞比例为（57.6±1.5）%,对照组（43.0±2.0）%（P＜0.01）。结论ATRA能够有效抑制HL60实体瘤的生长;体外实验证实,ATRA抑制HL60生长的作用机制是诱导细胞G0/G1期阻滞,诱导细胞分化。     

染料木素对人宫颈癌Siha细胞增殖凋亡和周期的影响

［摘要］目的探讨染料木素对人宫颈癌Siha细胞增殖、凋亡和周期的影响及机制。方法50 mol&#8226;mL 1染料木素处理Siha细胞,用噻唑蓝（MTT）法检测细胞生长抑制率,用流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡、周期及周期蛋白cyclin A和cyclin B表达的变化。结果染料木素作用于Siha细胞后,增殖抑制率比对照组明显升高（P＜0.05）;染料木素处理48 h后,实验组凋亡率较对照组升高,分别为（67.45±1.54）%和（45.37±1.65）%（P＜0.01）。染料木素处理后的Siha细胞G2/M期的细胞比例显著上升,由（9.55±0.71）%升至（79.54±1.09）%（P＜0.01）;cyclin A和cyclin B表达上调,分别由（1.84±0.11）%升至（37.38±0.71）%（P＜0.01）,由（69.44±1.84）%升至（97.70±1.20）%（P＜0.01）。结论染料木素在体外可有效抑制人宫颈癌细胞生长,其抗肿瘤机制可能是上调cyclin A和cyclin B蛋白表达和引起G2/M期细胞周期阻滞。     

Inhibitory actions of the phosphatidylinositol 3-kinase inhibitor LY294002 on the human Kv1.5 channel

Background and purpose:

Kv1.5 channels conduct the ultra-rapid delayed rectifier potassium current (I_Kur), and in humans, Kv1.5 channels are highly expressed in cardiac atria but are scarce in ventricles. Pharmacological blockade of human Kv1.5 (hKv1.5) has been regarded as effective for prevention and treatment of re-entry-based atrial tachyarrhythmias. Here we examined blockade of hKv1.5 channels by {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002, a well-known inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K).

Experimental approach:

hKv1.5 channels were heterologously expressed in Chinese hamster ovary cells. Effects of {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002 on wild-type and mutant (T462C, H463C, T480A, R487V, A501V, I502A, I508A, L510A and V516A) hKv1.5 channels were examined by using the whole-cell patch-clamp method.

Key results:

{"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002 rapidly and reversibly inhibited hKv1.5 current in a concentration-dependent manner (IC₅₀ of 7.9 µmol·L⁻¹). In contrast, wortmannin, a structurally distinct inhibitor of PI3K, had little inhibitory effect on hKv1.5 current. {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002 block of hKv1.5 current developed with time during depolarizing voltage-clamp steps, and this blockade was also voltage-dependent with a steep increase over the voltage range for channel openings. The apparent binding (k₊₁) and unbinding (k₋₁) rate constants were calculated to be 1.6 µmol·L⁻¹⁻¹·s⁻¹ and 5.7 s⁻¹ respectively. Inhibition by {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002 was significantly reduced in several hKv1.5 mutant channels: T480A, R487V, I502A, I508A, L510A and V516A.

Conclusions and implications:

{"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002 acts directly on hKv1.5 currents as an open channel blocker, independently of its effects on PI3K activity. Amino acid residues located in the pore region (Thr480, Arg487) and the S6 segment (Ile502, Ile508, Leu510, Val516) appear to constitute potential binding sites for {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002.     

P糖蛋白与细胞凋亡及肿瘤多药耐药的关系

综述P糖蛋白与细胞凋亡及肿瘤多药耐药的内在联系及其可能机制。许多抗肿瘤药物可通过诱导细胞凋亡，杀伤肿瘤细胞，而细胞膜上P糖蛋白具有多重生理功能，可通过其药物外排功能和直接或间接参与细胞凋亡的调控，导致多药耐药性的产生。