针刺对ApoE~(-/-)小鼠主动脉窦斑块病理变化因素的影响

目的观察针刺干预ApoE-/-小鼠后主动脉窦斑块的形态和斑块部位PPARγ蛋白的表达变化以及各组小鼠间血清氧化低密度脂蛋白和载脂蛋白B含量的差异,探讨针刺改善ApoE-/-小鼠主动脉窦斑块病理因素的影响机制。方法将6周龄34只ApoE-/-小鼠喂食高脂饲料14周后,随机处死4只,取主动脉窦,苏木精-伊红(HE)染色光镜下观察,判断动脉粥样硬化(AS)造模是否成功,其余30只小鼠被随机分为10只模型对照组、10只药物对照组、10只针灸治疗组,另将喂食普通饲料的4只C57BL/6J雄性小鼠作为空白组。药物治疗组辛伐他汀灌胃治疗,40mg/(kg·d),针灸治疗组针刺"内关、神门、后三里(足三里)、三阴交"治疗。治疗11周后,采血检测氧化低密度脂蛋白和载脂蛋白B含量,并取小鼠主动脉窦行HE染色和免疫组化染色,观察比较各组小鼠间血清氧化低密度脂蛋白和载脂蛋白B含量的差异以及主动脉窦斑块的形态和斑块部位PPARγ表达的变化。结果针刺治疗能保护血管内膜,明显抑制斑块的发展,疗效好于药物治疗。结论针刺治疗能通过调节脂质和能量代谢、抗氧化等途径达到抑制斑块的发展,起到健脾益气,化痰逐瘀的功效。     

炎症诱导SCAP功能失调促进ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的分子机制

目的 探讨炎症诱导胆固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein,SCAP)功能失调促进ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的分子机制.方法 24只8周龄雄性ApoE-/-小鼠(C57BL/6遗传背景,体质量18～24 g)随机分组为高胆固醇饮食组(n=12,对照组)和高胆固醇饮食+炎症组(n=12,炎症组).炎症组小鼠给予隔日皮下注射10％酪蛋白,非炎症组小鼠给予隔日皮下注射生理盐水,共14周.双抗夹心ELISA法检测ApoE-/-小鼠血清炎症指标(serum amyloid A,SAA)和TNF-α水平,HE染色观察ApoE-/-小鼠主动脉结构及局部炎症细胞浸润情况,油红O染色观察ApoE-/-小鼠主动脉斑块形成情况,Real-time PCR法与免疫组织化学法检测ApoE-/-小鼠主动脉LDLr、SREBP2、SCAP、α-甘露糖苷酶Ⅰ及α-甘露糖苷酶ⅡmRNA与蛋白表达.结果 炎症组小鼠血清SAA[(529 ±23)ng/mL]与TNF-α[(37 900 ±3 100)ng/mL]水平显著高于对照组小鼠血清SAA[(248±27) ng/mL]与TNF-α[(1 789±219) ng/mL]水平(P＜0.01),表明ApoE-/-小鼠炎症模型建立成功.炎症组小鼠较对照组小鼠主动脉粥样硬化性病变更为严重(P＜0.01),其LDLr、SCAP及α-甘露糖苷酶ⅡmRNA及蛋白表达、细胞核内NSREBP2水平明显高于对照组(P＜0.05).结论 炎症通过增加血管壁细胞内胆固醇敏感器SCAP的表达,并通过增强高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ对SCAP的糖基化修饰,促进ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的发生和发展.     

黄连解毒汤通过调节性T细胞产生抗动脉粥样硬化作用

目的 观察黄连解毒汤（HLJDD）对ApoE-/-小鼠斑块、炎症因子及调节性T细胞（Tregs）的影响;方法 高脂饲料喂养雄性ApoE-/-小鼠建立动脉粥样硬化（Atherosclerosis, AS）模型,40只雄性ApoE-/-小鼠随机分为：模型组、辛伐他汀组、HLJDD高、中、低剂量组（n=8）,HLJDD灌胃剂量依次为：3.5、7.0、14.0 g-1穔g-1穌-1,辛伐他汀灌胃剂量为5 mg穔g-1穌-1,另设8只同龄雄性C57BL/6J小鼠为对照组,喂以普通饲料,连续给药16周后处死小鼠。检测血脂水平,观察主动脉斑块形成情况;ELISA法检测血清炎症因子水平;流式细胞术检测Tregs数量;RT-PCR法检测Foxp3 mRNA水平;结果 与对照组相比,模型组中主动脉斑块明显,TC、TG与LDL-C浓度显著升高,促炎因子超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素-6（IL-6）与肿瘤坏死因子-α （TNF-α）水平显著升高,而HDL-C、白介素-10（IL-10）、生长转化因子-β（TGF-β）、Foxp3 mRNA水平显著降低,Tregs数量减少,二者差异有统计学意义（P<0.01）;HLJDD能显著缩小主动脉斑块面积,降低血清TC、TG与LDL-C,并降低IL-6、hs-CRP与TNF-α水平,增加血清HDL-C、IL-10、TGF-β及Foxp3 mRNA水平,并增加Tregs数量,与模型组相比差异显著（P<0.01）;结论 HLJDD可显著减轻ApoE-/-小鼠主动脉斑块损伤,可能与增加Tregs数量,从而降低血清炎症因子水平有关。     

电针对ApoE-/-小鼠肝脏PPARα与TNF-α蛋白表达的影响

目的 探讨电针对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠肝脏过氧化物酶体增殖剂激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha, PPARα)、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha, TNF-α）蛋白表达的影响。方法 将30只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、药物组及电针组,每组10只。采用高脂饲料喂养14周的方法复制高脂血症模型。电针组小鼠接受单侧神门、内关、足三里、三阴交电针,药物组小鼠每日接受40 mg/kg辛伐他汀灌胃。免疫组织化学法检测肝脏中PPARα、TNF-α的表达,采用Western blot检测肝脏PPARα的蛋白表达。结果 电针组小鼠肝脏中PPARα的蛋白表达水平高于模型组,但差异无统计学意义（P>0.05）,肝脏TNF-α表达水平显著低于模型组（P<0.05）。与模型组比较,电针组小鼠肝细胞内小颗粒脂滴减少,肝细胞凋亡和坏死减少,且肝细胞保存相对完整。结论 电针通过抑制炎性因子的表达而减少脂质沉积,治疗动脉硬化。     

定心方调控巨噬细胞极化防治动脉粥样硬化的机制研究

目的：通过定心方（DXR）对巨噬细胞极化的调控,探讨DXR抗动脉粥样硬化（AS）可能机制。方法：ApoE-/-小鼠50只随机分为5组：AS模型组,辛伐他汀组[辛伐他汀药液灌胃5 mg/（kg·d）],DXR低、中、高剂量组[分别给予DXR药液灌胃9.3、18.6、37.2 g/（kg·d）]。10只C57BL/6J小鼠设为空白对照组。16周后HE染色测定小鼠主动脉AS斑块形态学;生化检测血清脂质水平;ELISA检测血清炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及巨噬细胞极化标记物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶-1(Arg-1)水平;Western blot检测主动脉iNOS、Arg-1蛋白表达。结果：与空白对照组比较,AS模型组小鼠主动脉可见明显的脂质斑块;血清TC、TG、LDL-C水平显著增高,HDL-C水平显著降低;血清IL-6、TNF-α水平显著增高;血清iNOS水平及主动脉iNOS蛋白表达显著增高,血清Arg-1水平及主动脉Arg-1蛋白表达显著降低（P<0.05）。与AS模型组小鼠比较,DXR可显著减小小鼠主动脉AS斑块面积;降低小鼠血...     

PM2.5通过激活巨噬细胞内质网应激进而影响ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块

探讨细颗粒物（PM2.5）通过激活巨噬细胞内质网应激促进巨噬细胞细胞质内Ca2+的积累,进而影响ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的形成。方法 体内实验 ：8周龄ApoE-/-小鼠共计24只,随机分为对照组和PM2.5组,每组12只。采用高脂饲料喂养8周后,对照组小鼠气管内滴注生理盐水,PM2.5组小鼠气管内滴注PM2.5的生理盐水混悬液（30 mg/kg/d）。8周后主动脉根部石蜡切片行movat染色、DHE法检测氧自由基（ROS）水平;采用TUNEL法对斑块内细胞凋亡情况进行检测;Western Blot法检测内质网应激下游炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白的表达量。体外实验：分离培养小鼠原代腹腔巨噬细胞后,将细胞分为对照组（无刺激）、LPS组（模型组,LPS 100ng/mL,24 h）、LPS+PM2.5组（24 h）。采用钙离子荧光探针Fura-2 AM检测巨噬细胞内Ca2+ 的积累量,Western Blot法检测巨噬细胞内IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白的表达量。结果 体内实验 PM2.5组小鼠AS斑块面积明显增大,ROS水平显著增高(P＜0.001);斑块内坏死凋亡细胞数量明显增多,内质网应激下游炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白表达量升高(P＜0.001);体外实验 LPS+PM2.5组与LPS组比较,细胞内Ca2+ 积累量明显增多(P＜0.001);IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白的表达量均升高(P＜0.001)。结论 经PM2.5处理的高脂饲养的ApoE-/-小鼠,PM2.5可作用于巨噬细胞,激活其内质网应激,导致巨噬细胞细胞质中Ca2+ 积累增加,使氧自由基的产生与斑块内细胞坏死凋亡数量增加,对动脉粥样硬化斑块的发生发展起到促进作用     

高表达CYP2C8基因对动脉粥样硬化小鼠肿瘤坏死因子-α的影响

目的研究血管内皮高表达CYP2C8基因对动脉粥样硬化小鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法以20周龄APOEKO＋/-CYP2C8Tg＋/-和CYP2C8Tg＋/-基因（血管内皮转CYP2C8＋/-基因）的小鼠为研究对象,相同基因背景和周龄的同窝APOEKO＋/-和C57BL/6小鼠设为对照。采用PCR技术鉴定小鼠CYP2C8＋/-基因;油红O染色检测APOEKO＋/-CYP2C8Tg＋/-、CYP2C8Tg＋/-、APOEKO＋/-和C57BL/6小鼠主动脉斑块形成面积;用Real-time PCR法检测各组小鼠的主动脉TNF-α基因表达水平;Western blot法分析各组小鼠主动脉TNF-α蛋白的表达情况;用ELISA法检测各组小鼠的血浆TNF-α水平。结果 APOEKO＋/-CYP2C8Tg＋/-和CYP2C8Tg＋/-小鼠主动脉斑块形成面积明显减少。Real-time PCR分析显示,高表达CYP2C8在主动脉中明显下调TNF-α基因的表达;Western blot分析结果显示,高表达CYP2C8在主动脉中明显下调TNF-α蛋白活性。在血清学上,高表达CYP2C8明显下调TNF-α水平。结论高表达CYP2C8基因能够降低动脉粥样硬化小鼠的TNF-α的活性。     

电针环跳、委中穴对兔腰椎间盘突出症的影响

目的 观察电针环跳、委中穴对腰椎间盘突出症(lumbar intervertebral disc protrusion,LIDP)家兔步态功能髓核组织中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)含量的影响.方法 将40只健康新西兰兔随机分为4组,即空白组、LIDP模型组、电针穴位组和电针非穴对照组.自制的LIDP家兔病理模型造模器造家兔LIDP病理模型,采用Siegal法记录步态功能,酶联免疫吸附法测定髓核组织中TNF-α、IL-6含量.结果 电针穴位组可改善家兔的步态功能,降低LIDP家兔髓核组织中TNF-α、IL-6的含量,与LIDP模型组、电针非穴对照组比较有显著性差异(P＜0.01).结论 通过降低髓核组织中TNF-α、IL-6等炎症因子含量减轻炎症反应可能是电针环跳、委中穴治疗LIDP的作用机制之一.     

芍药苷对ApoE~(-/-)小鼠血脂及主动脉斑块的影响

[目的]观察芍药苷对ApoE-/-小鼠血脂及主动脉斑块形成的影响。[方法]6周龄ApoE-/-雄性小鼠经普通饲料饲养4周,髙脂饲料饲养12周后,随机分为ApoE-/-模型组及芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg剂量组,相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠作为空白对照组。药物干预12周后,检测血脂的变化,并测量主动脉弓部、胸段、腹段斑块面积。[结果]ApoE-/-模型组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著高于C57BL/6J组(P0.01),芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg组的血脂水平显著低于ApoE-/-模型组(P0.05,P0.01),并且不同程度减小主动脉各段斑块的面积。[结论]芍药苷具有降脂和抑制主动脉斑块形成的作用,表明芍药苷具有抗动脉粥样硬化作用。     

可可粉抑制雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块的形成

目的研究可可粉对雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法以雌性ApoE-/-小鼠为研究对象,按照随机对照表将小鼠（45只）随机分为3组:对照组（高脂高胆固醇饮食）、低剂量组（高脂高胆固醇+0.2%可可粉饲喂）、高剂量组（高脂高胆固醇+2%可可粉饲喂）,每组各15只。相应饮食饲喂小鼠12周,观察各组小鼠体重、肝脏重量、肝脏重量/体重;检测小鼠血浆血脂指标（TG、TC、LDL-C和HDL-C）的水平;HE和油红O染色分析小鼠主动脉的病理变化及斑块面积。结果 3组小鼠的体重、肝脏重量、肝脏重量/体重、TG、TC和主动脉根部斑块面积差异均无统计学意义（P>0.05）;与对照组比较,低、高剂量组的HDL-C水平显著升高,LDL-C水平显著降低,主动脉斑块面积显著减少。结论可可粉能够有效抑制雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉硬化斑块形成,这可能与其改善机体血脂水平有关。     

加味二陈汤对ApoE~(-/-)小鼠炎症标志物IL-6和TNF-α的调节作用

目的研究加味二陈汤对Apo E-/-小鼠血清、主动脉壁及瓣膜的IL-6、TNF-α表达的影响。方法40只Apo E-/-小鼠中10只为空白对照组,30只以高脂饲喂养4周构建动脉粥样硬化(As)小鼠模型,均分成模型组、辛伐他汀组、加味二陈汤组,分别用生理盐水、辛伐他汀及加味二陈汤对小鼠灌胃给药,8周后处死小鼠,Elisa法检测血清中IL-6、TNF-α的含量;免疫组化法检测IL-6、TNF-α在主动脉壁及瓣膜的表达。结果辛伐他汀组血清IL-6和TNF-α分别为392.06±37.70 pg/m L、189.1±50.4 pg/m L,与模型组相比表达下降(P<0.05);加味二陈汤组血清IL-6、TNF-α分别为442.41±172.26 pg/m L、47.2±13.3 pg/m L,与模型组相比表达下降(P<0.05),与辛伐他汀组相比,表达下降(P<0.05);免疫组化结果显示加味二陈汤可降低IL-6、TNF-α在主动脉壁内的表达。结论加味二陈汤可降低血清和主动脉壁及瓣膜的IL-6、TNF-α的表达。     

金丝桃苷通过TLR4/NF-κB信号通路对动脉粥样硬化小鼠的干预作用

目的 探讨金丝桃苷通过Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对动脉粥样硬化小鼠的干预作用。方法 将50只雄性小鼠随机分为正常组、模型组、金丝桃苷低剂量组、金丝桃苷高剂量组、辛伐他汀组，各10只。除正常组小鼠外，其余各组建立动脉粥样硬化小鼠模型。建模完成后，分别给予金丝桃苷低剂量组、金丝桃苷高剂量组、辛伐他汀组小鼠灌胃30 mg/(kg·d)金丝桃苷、60 mg/(kg·d)金丝桃苷、辛伐他汀，给予正常组、模型组小鼠灌胃等量生理盐水，连续干预4周。采用HE染色观察各组小鼠主动脉组织病理学变化。除正常组外，检测其余小鼠斑块成分占比、斑块易损指数、斑块内新生血管密度。检测各组小鼠血清三酰甘油、总胆固醇、HDL-C、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-8、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、活性氧簇、超氧化物歧化酶(SOD)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素1水平，以及主动脉组织TLR4、NF-κB蛋白表达量。结果 相比于正常组，模型组小鼠主动脉内有斑块形成，动脉壁不均匀增厚并发生局部钙化，有大量巨噬细胞和淋巴细胞浸润，且血清VEGF、...     

基于CD40/NF- κB通路丹皮酚调控miR- 145抑制小鼠动脉粥样硬化泡沫细胞炎症反应

目的 观察丹皮酚基于白细胞分化抗原CD40/核转录因子- κB（clusters of differentitation 40/nuclear factor kappa- B,CD40/NF- κB）通路调控miR- 145抑制小鼠动脉粥样硬化血管巨噬细胞源性泡沫细胞炎症反应的作用机制。方法 高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠20周复制动脉粥样硬化模型,模型复制成功后,给予丹皮酚灌胃,分为正常对照组,模型组,丹皮酚中、高剂量组（200、300 mg/kg）;油红O染色观察主动脉斑块病理形态;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素- 1（interleukin- 1,IL- 1）、白细胞介素- 6（interleukin- 6,IL- 6）、肿瘤坏死因子- α（tumor necrosis factor- α,TNF- α）水平;激光共聚焦显微镜检测主动脉蛋白CD40与CD36共定位;实时荧光定量PCR检测主动脉miR- 145表达情况。氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein,ox- LDL）刺激RAW264.7细胞建立巨噬细胞源性泡沫细胞炎症模型,将miR- 145模拟剂、miR- 145抑制剂转染入细胞,分为空白组、模型组、丹皮酚（60 μmol/L,Pae）组、miR- 145模拟剂组、miR- 145模拟剂＋Pae组、miR- 145抑制剂组、miR- 145抑制剂＋Pae组。油红O染色观察细胞荷脂情况,Western blot法检测蛋白CD40和核因子- κB（nuclear factor κB,NF- κB）磷酸化水平,ELISA检测TNF- α、IL- 1、IL- 6水平。结果 丹皮酚能显著缩小小鼠主动脉斑块面积,降低血清IL- 1、IL- 6、TNF- α水平,下调主动脉CD40蛋白的表达水平,上调主动脉miR- 145的表达水平。丹皮酚能上调泡沫细胞miR- 145的表达水平,抑制CD40、p- p65蛋白的表达,降低细胞分泌的IL- 1、IL- 6、TNF- α水平。结论 丹皮酚通过上调小鼠miR- 145的表达水平,抑制CD40/NF- κB通路,从而减轻动脉粥样硬化小鼠血管泡沫细胞的炎症反应,发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

电针大肠俞对腹泻型肠易激综合征小鼠肠道炎性因子的影响

目的观察电针大肠俞穴调节腹泻型肠易激综合征(D-IBS)小鼠结肠组织中相关炎性因子的表达及对内脏痛敏的缓解效应。方法 C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、电针组、假电针组,采用慢性束缚应激加番泻叶灌服法建立D-IBS模型,选取"大肠俞"进行电针治疗。观察各组内脏痛敏评分,ELISA法检测近端结肠肠道炎性因子肿瘤坏死因子-(TNF-)、白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果与正常组相比,模型组小鼠的内脏痛敏评分和TNF-、IL-6含量均增高(P0.05);与模型组相比,电针组内脏痛敏评分和TNF-、IL-6含量明显降低(P0.05),假电针组降低不明显,且与电针组差异显著(P0.05)。结论电针大肠俞能有效改善D-IBS小鼠内脏痛敏,并有效改善D-IBS小鼠肠道炎性因子含量,其镇痛效应可能与炎性因子相关。     

四环素对高胆固醇喂养兔细胞因子和主动脉斑块面积的影响

目的观察四环素对高胆固醇喂养兔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内皮素-1(ET-1)和主动脉斑块面积比的影响,以探讨其可能抗动脉粥样硬化斑块的作用及机制.方法36只雄性日本大耳兔随机分对照组、高胆固醇组和四环素组,测定饲养前、后血浆TNF-α、ET-1的含量和饲养后的主动脉全长斑块面积比.结果饲养前各实验组间血浆TNF-α和ET-1的含量差别均无显著性意义(P＞0.05),饲养后高胆固醇组血浆TNF-α和ET-1含量明显高于对照组和四环素组(均P＜0.05),而后两者差别无显著性意义(P＞0.05);饲养后高胆固醇组动脉斑块面积比明显大于对照组和四环素组(P＞0.05);而四环素组与对照组相比差别无显著性意义(P＞0.05).结论TNF-α和ET-1参与高胆固醇性动脉粥样硬化的形成.四环素能降低高胆固醇喂养兔的TNF-α、ET-1含量和动脉粥样硬化斑块面积,可能具有一定抗动脉粥样硬化的作用并与降低TNF-α、ET-1有关.     

牙龈卟啉单胞菌感染对载脂蛋白e基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的: 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P. gingivalis)引起的炎症和氧化应激反应对动脉粥样硬化的影响及作用机制。方法: 采用8周龄载脂蛋白e基因敲除(ApoE knockout,ApoE-/-)小鼠建立动脉粥样硬化动物模型,将小鼠随机分为两组:(1)磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)健康对照组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+PBS鼠尾静脉注射;(2)P. gingivalis感染组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+P. gingivalis鼠尾静脉注射。1周3次,隔天1次,共10次。4周后处死,取心脏组织进行油红O染色,血清进行酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),主动脉进行实时荧光定量PCR以及Western blot检测。结果: P. gingivalis 感染组较PBS健康对照组可以显著加重ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成,增加血清中炎症介质,如白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及氧化应激介质8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHDG)表达,增加主动脉组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NADPH 氧化酶(NADPH oxidase,NOX)-2和NOX-4基因的mRNA水平。P. gingivalis感染后在主动脉组织中观察到核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达有增高趋势。结论: P.gingivalis感染会加速ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,诱导氧化应激和炎症反应;NF-κB信号通路可能是P. gingivalis加速动脉粥样硬化形成的重要作用机制。     

牙龈卟啉单胞菌感染对载脂蛋白e基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的: 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P. gingivalis)引起的炎症和氧化应激反应对动脉粥样硬化的影响及作用机制。方法: 采用8周龄载脂蛋白e基因敲除(ApoE knockout,ApoE-/-)小鼠建立动脉粥样硬化动物模型,将小鼠随机分为两组:(1)磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)健康对照组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+PBS鼠尾静脉注射;(2)P. gingivalis感染组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+P. gingivalis鼠尾静脉注射。1周3次,隔天1次,共10次。4周后处死,取心脏组织进行油红O染色,血清进行酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),主动脉进行实时荧光定量PCR以及Western blot检测。结果: P. gingivalis 感染组较PBS健康对照组可以显著加重ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成,增加血清中炎症介质,如白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及氧化应激介质8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHDG)表达,增加主动脉组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NADPH 氧化酶(NADPH oxidase,NOX)-2和NOX-4基因的mRNA水平。P. gingivalis感染后在主动脉组织中观察到核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达有增高趋势。结论: P.gingivalis感染会加速ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,诱导氧化应激和炎症反应;NF-κB信号通路可能是P. gingivalis加速动脉粥样硬化形成的重要作用机制。     

麝香保心丸对小鼠动脉粥样硬化的作用及机制研究

目的探究麝香保心丸在载脂蛋白E(ApoE)敲除小鼠中的抗动脉粥样硬化作用及其作用机制。方法2019年9月—2020年8月于武汉科技大学实验动物中心进行实验。ApoE基因敲除雄性小鼠60只,按照随机数字表法分为2组,各30只。干预组小鼠予麝香保心丸(25 mg/kg)研沫+生理盐水灌胃,对照组予生理盐水(与干预组等体积)灌胃。2组小鼠均高脂饲养20周后处死,取主动脉树及主动脉窦染色,比较2组小鼠主动脉树及主动脉窦部斑块面积,取血液检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,免疫荧光法及PCR法检测小鼠主动脉组织白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,PCR及Western-blot法检测小鼠主动脉组织肝细胞X受体-α(LXRα)、LXRβ、ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ABCG1表达水平。结果干预组小鼠主动脉树及主动脉窦部斑块面积均低于对照组(t/P=3.021/0.019、3.238/0.001);血清TG、TC、LDL-C水平均低于对照组(t=5.074、6.327、4.492,P均<0.001),而HDL-C水平高于对照组(t/P=3.138/0.001)。干预组小鼠主动脉组织IL-6及TNF-αmRNA水平明显低于对照组(t/P=3.027/0.017、2.478/0.019),主动脉组织LXRα、LXRβ、ABCA1、ABCG1 mRNA均高于对照组(t=5.276、6.137、4.565、5.136,P均<0.01)。结论麝香保心丸通过抑制炎性反应和促进胆固醇流出,可达到抗动脉粥样硬化的目的。     

冠心康对ApoE^（-/-）动脉粥样硬化小鼠PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路的影响

目的：观察中药复方冠心康对载脂蛋白E（apolipoprotein E,ApoE）基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）小鼠三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ATP-binding cassette transporterA1,ABCA1）通路的影响。方法：70只ApoE-/-小鼠用高脂饲料喂养建立小鼠AS模型。14只C57BL/6J小鼠为正常对照组,给予普通饲料。70只ApoE-/-小鼠造模成功后随机分为5组,即模型组、高剂量冠心康组（生药浓度为3.456g/mL）、中剂量冠心康组（1.728g/mL）、低剂量冠心康组（0.864g/mL）和西药辛伐他汀组[3mg/（kg·d）]。每只小鼠灌胃0.5mL,每天1次。连续灌胃8周后取材,分离肝脏及主动脉。运用蛋白质印迹法检测各组小鼠过氧化物酶体增殖物激活型受体γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）、肝X受体α（liver X receptor α,LXRα）和ABCA1蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组小鼠主动脉、肝脏PPARγ、LXRα和ABCA1mRNA的表达。结果：与C57BL/6J小鼠比较,ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1mRNA的表达明显增高;与模型组小鼠比较,高、中剂量冠心康与辛伐他汀在不同程度上下调了主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1mRNA的表达（P〈0.05）,而以高剂量冠心康的作用最为突出。低剂量组无明显改变（P〉0.05）。与C57BL/6J小鼠比较,ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达明显增高;与模型组小鼠比较,各用药组主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达量下降（P〈0.05）,而以冠心康高剂量组作用最为突出。结论：PPARγ-LXRα-ABCA1通路在ApoE-/-小鼠脂质代谢紊乱、炎症反应方面扮演重要角色。复方冠心康能改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化过程中的脂质代谢紊乱,抑制炎症反应的进展,可能与调控ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白的表达有关。     

慢性肾功能衰竭患者血浆白细胞介素18水平与微炎症反应及动脉粥样硬化的关系

[目的]探讨白细胞介素18(IL-18)与微炎症反应及动脉粥样硬化的关系.[方法]取84例慢性肾功能衰竭患者(CRF组,其中非血透组43例,血透组41例)和32例健康对照组外周血,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆白细胞介素(IL)-18、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平,应用高分辨率B超术测定颈动脉内膜-中膜厚度(IMT)及粥样斑块发生率.[结果]慢性肾功能衰竭患者血浆IL-18、hs-CRP、IL-6、TNF-α水平,IMT厚度和粥样斑块发生率高于健康对照组,且血液透析患者高于非透析患者.直线相关分析显示,IL-18与hs-CRP、IL-6、TNF-α及IMT、斑块阳性率呈正相关性(P＜0.05).多因素逐步回归分析显示,影响hs-CRP的因素有IL-18、IL-6、TNF-α、血浆白蛋白,R2=0.644(P＜0.05);影响颈动脉IMT的危险因素有IL-18、hs-CRP、TNF-α、血胆固醇,R2=0.448(P＜0.05).[结论]IL-18参与慢性肾功能衰竭微炎症反应过程,是炎症状态是一个标志物;IL-18与微炎症反应相互作用,参与CRF患者动脉粥样硬化的形成和发展,CRF患者血浆IL-18升高可能预示心血管事件的发生.