益发复方对毛乳头细胞生长的影响

【目的】探讨中药益发复方含药血清对体外毛乳头细胞生长的影响。【方法】体外培养毛乳头细胞,将传4~6代的细胞用于实验;制备不同剂量的中药益发复方含药血清(低、中、高剂量分别为1.25、2.5、5 g/L),作用于对数生长期细胞,并设空白血清对照,采用噻唑兰(MTT)法绘制各组毛乳头细胞增殖曲线,扫描电镜观察各组毛乳头细胞生长情况,评价益发复方对毛乳头细胞生长的影响。【结果】高剂量组含药血清在对数生长期的吸光度(D)值明显高于空白血清组,而在生长停滞期低于空白血清组。中、高剂量含药血清可促进毛乳头细胞的凝集型及放射状生长。【结论】中药益发复方含药血清可促进毛乳头细胞的增殖,其治疗脂溢性脱发的疗效可能与之有关。     

肾康丸对体外大鼠系膜细胞增殖、细胞外基质分泌和细胞周期的影响

【目的】观察肾康丸对体外高糖培养的大鼠系膜细胞(MC)增殖、细胞外基质分泌(ECM)和细胞周期的影响。【方法】将16只Wistar雄性大鼠随机分为4组,即正常血清组,开博通组(剂量为5 mg/kg),肾康丸高、低剂量组(剂量分别为2.4、1.2 g/kg),灌服相应药物7 d,分离制备药物血清。将体外高糖(30 mmol/LGlu)培养的MC分为5组:高糖模型组(30 mmol/LGlu),正常血清组(体积分数5%正常血清),开博通组(体积分数5%开博通含药血清)及肾康丸高、低剂量组(体积分数5%肾康丸高、低剂量含药血清),另设低糖模型组(10 mmol/LGlu)。培养72 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各组细胞增殖,双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清纤维连接蛋白(FN)含量,流式细胞仪检测细胞周期。【结果】高糖培养的MC显著性增殖,上清FN含量显著性增加,并出现细胞周期异常,肾康丸能抑制MC增殖,减少FN分泌,并使G0/G1期细胞比例显著性增加,而S期及G2/M期细胞比例减少。【结论】肾康丸可通过调整MC细胞周期异常,进而抑制高糖诱导的MC增殖和ECM分泌。     

延肾口服液对人肾小球系膜细胞增殖及分泌FN、LN、Ⅳ-C的影响

【目的】观察中药复方制剂延肾口服液（YSH）对培养的人肾小球系膜细胞（huMsC）增殖及分泌细胞外基质（ECM）的影响,探讨其防治肾小球硬化的作用机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐法（MTT）比色法和双抗夹心ELISA法,检测灌服延肾大鼠不同浓度药物血清对培养的人肾小球系膜细胞的增殖及分泌纤维连接蛋白（FN）、层连蛋白（LN）和Ⅳ型胶原（Ⅳ-c）的影响。【结果】5％-20％YSH大鼠血清对原代培养的人肾小球系膜细胞增殖及产生FN、LN、Ⅳ-c有明显的抑制作用（P〈O．05或P〈0．01）,其抑制程度与药物浓度有-定的量效关系。【结论】延肾制剂对培养的人肾小球系膜细胞增殖及产生FN、LN、Ⅳ-C的抑制作用,是其防治肾小球硬化发生发展的重要作用机制之-。     

补肾健脾方体外抗乙型肝炎病毒作用的血清药理学研究

【目的】采用血清药理学方法探讨补肾健脾方体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。【方法】补肾健脾方低、中、高剂量(分别为30.2、60.4、120.8 g.kg-1)灌胃正常大鼠制备血清,将含药血清直接添加于体外培养的2.2.15细胞中,培养10 d,观察含药血清对2.2.15细胞HBV表面抗原(HBsAg)、HBV e抗原(HBeAg)分泌的影响。【结果】补肾健脾方经体内代谢后能抑制2.2.15细胞HBsAg、HBeAg的分泌,并呈一定的量效与时效关系。低剂量组服药后3 h 1:4稀释度含药血清的HBeAg抑制率最高,为97.91%;而中剂量组服药后3 h 1:2稀释度的含药血清则达到抑制HBsAg的饱和量,其抑制率为86.84%。【结论】补肾健脾方具有一定的体外抗HBV作用。     

中医药抑制系膜细胞增殖过程中对IL-6干预作用研究进展

系膜细胞（mesangial cell,MC）增殖是多种肾小球疾病发生、发展中的常见病理改变,且系膜细胞过度增殖是导致肾小球硬化、肾纤维化的核心病理环节。近年来很多研究表明,白介素-6（IL-6）在肾小球系膜细胞增殖过程中起着重要的作用。因此,抑制MC增殖与调控IL-6对MC的增殖具有重要的意义,但是单纯的通过拮抗IL-6干预MC增殖效果尚不理想,而中药能通过多成分、多途径、     

肾炎3号方对离体肾小球培养系膜细胞增殖及IL-1水平的影响

用不同药物喂家兔后取血清加入系膜细胞培养液中观察其增殖及产生IL 1的水平。结果 :肾炎 3号方可显著抑制正常及病理状态下肾小球系膜细胞增殖及其产生IL 1的水平 ,且抑制IL 1分泌活性强于雷公藤 (P <0 0 5)。提示肾炎 3号方可抑制肾小球系膜细胞增殖及其产生IL 1水平 ,打破以系膜细胞为中心的调节网络 ,对以系膜增生为主的慢性肾炎有很好的治疗作用     

祛风通络方对大鼠系膜细胞增殖及转化生长因子β1和白细胞介素6mRNA表达的影响

目的：观察祛风通络方对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cell，MC）增殖及其分泌的转化生长因子β1（transforming growth factor—betal，TGF—β1）和白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）mRNA表达的影响。方法：采用血清药理学方法，体外培养大鼠肾小球系膜细胞，分为正常对照组、模型组、蒙诺（福辛普利钠）组和祛风通络方组。并采用甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法检测大鼠MC增殖情况，逆转录聚合酶链反应法检测TGF—β1和IL-6mRNA的表达。结果：与正常对照组比较，模型组大鼠肾小球系膜细胞增殖升高（P〈0．05）；与模型组比较，祛风通络方组大鼠肾小球系膜细胞增殖受到抑制（P〈0．05），且祛风通络方作用优于蒙诺（P〈0．05）。模型组系膜细胞TGF-β1mRNA表达高于正常对照组（P〈0．01）；祛风通络方组和蒙诺组系膜细胞TGF—β1mRNA表达低于模型组（P〈0．01）；祛风通络方组与蒙诺组比较，TGF—β1mRNA的表达降低（P〈0．01）。LPS刺激后可提高大鼠系膜细胞内IL-6mRNA的表达，与正常对照组比较，模型组IL-6mRNA表达上升，差异有统计学意义（P〈0．01）；祛风通络方组、蒙诺组与模型组比较，IL-6mRNA表达下降（P〈0．01）；祛风通络方降低IL-6mRNA表达的作用亦优于阳性对照药蒙诺（P〈0．01）。结论：祛风通络方对大鼠MC增殖及其TGF—β1和IL-6mRNA表达均有明显的抑制作用。     

祛风通络方对大鼠系膜细胞增殖及转化生长因子β1和白细胞介素6 mRNA表达的影响

目的：观察祛风通络方对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cell，MC）增殖及其分泌的转化生长因子β1（transforming growth factor—betal，TGF—β1）和白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）mRNA表达的影响。方法：采用血清药理学方法，体外培养大鼠肾小球系膜细胞，分为正常对照组、模型组、蒙诺（福辛普利钠）组和祛风通络方组。并采用甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法检测大鼠MC增殖情况，逆转录聚合酶链反应法检测TGF—β1和IL-6mRNA的表达。结果：与正常对照组比较，模型组大鼠肾小球系膜细胞增殖升高（P〈0．05）；与模型组比较，祛风通络方组大鼠肾小球系膜细胞增殖受到抑制（P〈0．05），且祛风通络方作用优于蒙诺（P〈0．05）。模型组系膜细胞TGF-β1mRNA表达高于正常对照组（P〈0．01）；祛风通络方组和蒙诺组系膜细胞TGF—β1mRNA表达低于模型组（P〈0．01）；祛风通络方组与蒙诺组比较，TGF—β1mRNA的表达降低（P〈0．01）。LPS刺激后可提高大鼠系膜细胞内IL-6mRNA的表达，与正常对照组比较，模型组IL-6mRNA表达上升，差异有统计学意义（P〈0．01）；祛风通络方组、蒙诺组与模型组比较，IL-6mRNA表达下降（P〈0．01）；祛风通络方降低IL-6mRNA表达的作用亦优于阳性对照药蒙诺（P〈0．01）。结论：祛风通络方对大鼠MC增殖及其TGF—β1和IL-6mRNA表达均有明显的抑制作用。     

雷公藤对肾小球系膜细胞增殖及其分泌NO、NOS影响的实验研究

目的 :观察雷公藤含药血清对肾小球系膜细胞 (MC)增殖的影响 ,并初步探讨其作用机制。方法 :大鼠肾小球 MC体外培养技术及血清药理学方法。结果 :雷公藤血清能显著抑制脂多糖 (L PS)刺激的 MC增殖 ,并可降低 L PS刺激的 MC培养上清液中 NO、NOS(一氧化氮合酶 )的含量。结论 :雷公藤抑制 MC增殖的作用机制之一可能是通过抑制 NO、NOS分泌     

消渴颗粒剂对大鼠系膜细胞增殖和TGF-β1表达的影响

目的观察消渴颗粒剂对高糖刺激后系膜细胞增殖和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法培养正常大鼠系膜细胞,高浓度葡萄糖刺激系膜细胞,加入中药含药血清后,用MTT法和激光共聚焦显微镜分别观察系膜细胞增殖和TGF-β1的表达。结果消渴颗粒剂含药血清在48h可抑制高糖对大鼠系膜细胞的促增殖作用,在72、96 h可对抗高糖对系膜细胞增殖的抑制作用,96 h最为明显(P<0.05)。高糖刺激后TGF-β1在肾小球系膜细胞内表达增多,消渴颗粒剂明显减少系膜细胞内TGF-β1表达(P<0.05)。结论消渴颗粒剂可降低高糖致系膜细胞增殖,抑制高糖引起的TGF-β1过度表达,这可能是其防治糖尿病肾病的作用机制。     

芪苓柴虎汤提取物抗乙型肝炎病毒的细胞实验研究

[目的]探计芪苓柴虎汤(QD)提取物的抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。[方法]QD提取物处理乙肝病毒转染的细胞(2．2．15细胞)，用ELISA法测定HBsAg和HBeAg。[结果]QD制成的4个不同工艺提取物对HBV—DNA转染的2．2．15细胞分泌的HBsAg、HBeAg均有明显的抑制作用，并呈一定的剂量依赖关系。[结论]芪苓柴虎汤在体外对HBV有一定的抑制作用，为临床治疗慢性乙型肝炎提供了实验依据。     

复方血尿停经肝微粒体代谢后对肾小球系膜细胞的影响

目的探讨复方血尿停治疗以系膜增生为主要病理改变的肾小球疾病的作用机制。方法将复方血尿停与大鼠肝微粒体共同孵育后加入到肾小球系膜细胞(GMC)体外培养体系中,MTT法观察细胞增殖情况,放射免疫法测定白细胞介素-6(IL-6)、内皮素-1(ET-1)水平,速率法检测乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果经肝微粒体代谢后,复方血尿停2、4、8mg/mL均抑制GMC的增殖及IL-6、ET-1的产生,且呈剂量依赖方式。结论复方血尿停能抑制IL-6、ET-1的分泌和GMC的增殖,此作用可能是其治疗系膜增生性肾小球疾病的作用机制之一。     

补肾调冲方含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖、激素分泌和mRNA表达的影响

运用血清药理学方法观察补肾调冲方对大鼠卵巢颗粒细胞增殖、激素分泌功能以及抑制素B（INHB）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）mRNA表达的影响。方法 向培养的SD大鼠卵巢颗粒细胞中分别加入10%空白血清（对照组）、人转基因重组促卵泡激素（hFSH）含药血清（阳性对照组）、补肾调冲方含药血清（补肾调冲方组）,培养48 h,以闪烁计数器测定3H-TdR掺入DNA的量,流式细胞仪测定细胞周期分布,放射免疫法测定培养液中雌二醇（E2）和孕激素（P）水平,并采用RT-PCR法测定INHB、IGF-1 mRNA的表达量。结果 补肾调冲方含药血清可剂量相关地促进3H-TdR掺入颗粒细胞DNA的量。与对照组相比,补肾调冲方各含药血清组G0/G1期细胞均明显减少,而S期细胞则明显增多;E2、P的量明显升高;颗粒细胞INHB、IGF-1 mRNA表达量均明显增多,且呈剂量相关性。结论 补肾调冲方含药血清能明显促进卵巢颗粒细胞的增殖、增强甾体激素的分泌功能,该作用可能通过增强INHB、IGF-1基因的表达,从内分泌和自分泌两条途径调节卵巢功能而实现的。     

复方肝毒清对乙型肝炎病毒的体内外抑制作用

【目的】观察复方肝毒清的体内外抗乙肝病毒作用。【方法】体内实验采用先天感染鸭乙肝模型,检测用药前后鸭血清乙肝病毒脱氧核糖核酸(DHBV DNA)的动态变化;体外实验采用2.2.15细胞为模型,检测用药后复方肝毒清对细胞培养上清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)的抑制作用。【结果】体内实验:给药第10天时血清DHBVDNA滴度显著下降(与模型组比较P<0.01).而停药第3天后又有回升,但仍低于模型组(P<0.01);体外实验:复方肝毒清对细胞分泌HBsAg的治疗指数(50％毒性浓度:50％抑制浓度)为66.81,对分泌HBeAg的治疗指数为34.18。【结论】复方肝毒清在体内外均具有抗乙肝病毒作用。     

补肾健脾方体外抗乙型肝炎病毒作用的初步研究

目的：初步探讨补肾健脾方的抗乙型肝炎病毒（HBV）作用。方法：通过补肾健脾方作用于体外培养的2．2．15细胞，观察其对2．2．15细胞两抗原分泌的影响，初步评价其抗HBV作用。结果：补肾健脾方作用于2．2．15细胞10d后，药物对2．2．15细胞的半数毒性浓度为37．80g/L，对HBsAg、HBeAg的半数抑制浓度分别为19．05g/L和9．55g/L，治疗指数分别为1．98和3．96。结论：补肾健脾方在体外细胞培养中对HBeAg的分泌有较好的抑制作用。     

内消连翘丸含药血清对体外人结节性甲状腺肿细胞增殖及分泌的影响

目的探讨内消连翘丸对体外培养的人结节性甲状腺肿细胞(结甲细胞)增殖及分泌的影响。方法分离并培养人的原代结甲细胞,同时用内消连翘丸或优甲乐的含药动物血清进行干预,采用MTT法和放免法检测含药血清对结甲细胞增殖及激素分泌功能的影响。结果各组含药血清对体外培养的结甲细胞的增殖均有明显的抑制作用,并呈一定量效和时效关系,其中内消连翘丸大、中剂量组优于优甲乐组。促甲状腺素(TSH)对结甲细胞的增殖和分泌功能均有促进作用,中药各组含药血清对加TSH刺激的结甲细胞增殖仍有不同程度的抑制作用,中药作用24 h对结甲细胞的激素分泌功能无明显影响。结论在一定时间范围内,内消连翘丸合药动物血清可在不明显影响细胞分泌功能的前提下抑制结甲细胞的增殖。     

含氧化苦参碱血清的制备与抗肿瘤作用关系研究

目的研究不同给药方式，不同采血时间获得的含氧化苦参碱血清对卵巢癌细胞H08910的生长抑制作用，探讨含药血清的制备方法。方法选择SD大鼠，采用肌注、灌胃、腹腔注射等形式给予氧化苦参碱药物，分别在不同时间取血，通过TLC法判断血清的化学成分，MTT法确定这些含药血清对卵巢癌细胞H08910的生长抑制作用。荧光显微镜观察细胞的形态学的改变。结果不同的给药方式获得的含药血清均含有氧化苦参碱，每天肌注给药两次，连续给药3d，末次给药后1h采血获得的含药血清对卵巢癌细胞的抑制作用最强，荧光显微镜下观察到典型的细胞凋亡形态学变化。结论经代谢后含氧化苦参碱血清仍具有抑制肿瘤细胞生长的作用。其抑制作用与给药形式、采血时间有明显的关系。     

肺岩宁方对人肺癌细胞系增殖及肿瘤坏死因子α诱导的白细胞介素6和白细胞介素8产物的影响

目的：探讨中药肺岩宁方含药血清对人肺癌细胞系A549细胞增殖及肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor—α,TNF—α）诱导的A549细胞分泌自细胞介素6（interleukin-6,IL-6）和IL-8的影响。 方法：肺岩宁方含药血清培养A549细胞24、48和72h后,采用四唑单钠盐法检测肺岩宁方含药血清对A549细胞增殖的影响;肺岩宁方含药血清培养A549细胞48h后,酶联免疫吸附测定法检测肺岩宁方含药血清对TNF—α诱导的IL-6和IL-8分泌的影响,逆转录聚合酶链式反应检测IL-6和IL-8 mRNA表达水平的变化。 结果：肺岩宁方含药血清对A549细胞增殖具有明显的抑制作用。1μg／LTNF—α可明显提高A549细胞上清液中IL-6和IL-8的分泌水平,肺岩宁方含药血清与TNF-α共同作用后,可抑制IL-6和IL-8的分泌（P〈0．01）及IL-6、IL-8mRNA的表达（P〈0．01）。 结论：肺岩宁方含药血清对TNFα诱导A549细胞分泌IL-6和IL-8具有明显的抑制作用,这为其临床治疗肺癌提供了一定的实验依据。     

益肾胶囊对慢性肾小球肾炎患者尿蛋白及免疫功能的影响

【目的】观察益肾胶囊(由黄芪、党参、熟地、山芋、山药、仙鹤草、茯苓、泽泻、沙苑子等组成)对慢性肾小球肾炎(CGN)患者尿蛋白及免疫功能的影响。【方法】检测45例健康查体者和130例CGN患者治疗前、后红细胞C_3b受体花环率(C_3b-RCR)、红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)、自然杀伤细胞(NK细胞)活性、血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及24 h尿蛋白的含量。【结果】CGN患者经过3个月的治疗,其NK细胞活性、C_3b-RCR水平较治疗前升高,24 h尿蛋白、RB-ICR及IL-6、IL-8水平降低,与治疗前比较均有显著性差异(P<0.001)。【结论】益肾胶囊能降低CGN患者尿蛋白含量,提高机体免疫功能。     

丹皮酚增强顺铂对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用

目的探讨丹皮酚和顺铂联合应用对人肝癌细胞SMMC07721的增殖抑制作用。方法用不同浓度的丹皮酚、顺铂和两药联用处理人肝癌细胞SMMC-7721,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定药物在体外对人肝癌SMMC07721细胞的增殖抑制作用,应用两药相互作用指数（CDI）进行联合用药分析。结果丹皮酚（7．81-250mg／L）和顺铂（0．625～20mg／L）单独应用均对人肝癌SMMC-7721细胞有抑制作用,呈现剂量效应关系。丹皮酚与顺铂联合应用后对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制率明显大于单药,有显著的协同杀伤作用。结论丹皮酚与顺铂联合应用具有明显的协同抗肝癌细胞株SMMC-7721增殖的作用。