矿物药青礞石对PTZ点燃癫痫大鼠脑组织、血浆中金属元素的影响

目的 研究青礞石对戊四氮（PTZ）点燃癫痫大鼠脑组织、血浆中金属元素的影响,探讨青礞石可能的效应物质基础。方法 采用PTZ点燃法建立癫痫大鼠模型,运用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）和电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）测定空白组、模型组、卡马西平组（0.1 g·kg^-1）和青礞石组（2 g·kg^-1）大鼠脑组织、血浆中的金属元素含量,实验数据用SPSS 18.0软件进行统计学分析。结果 与空白组比较,模型组大鼠脑组织中Sr,Sb,Ba含量明显上升（P<0.05,P<0.01）;Zn,Fe,Cu,K,Li,Co,Sn,Pb含量明显下降（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,青礞石组大鼠脑组织中Zn,Fe,K,Li,Co,As,Pb含量明显上升（P<0.05,P<0.01）;Sr,Sb含量显著下降（P<0.01）。说明青礞石对大鼠脑组织中金属元素含量向正常水平的调节具有积极作用,干预效果明确,且总体效果优于卡马西平组。与空白组比较,模型组大鼠血浆中K,Sr,Cd含量明显上升（P<0.05）;Li,Al,Ti,Cr含量明显下降（P<0.05）。与模型组比较,青礞石组大鼠血浆中Ca,K,Li,Al,V含量明显上升（P<0.05,P<0.01）;Fe,Ti,Sr,Cd含量明显下降（P<0.05,P<0.01）。各组间金属元素相关性分析显示,大鼠脑组织中有17对元素存在显著正相关性,2对元素存在显著负相关性,大鼠血浆组织中有8对元素存在显著正相关性,6对元素存在显著负相关性。结论 以Zn,Fe,K,Li,Co,As,Pb,Sr,Sb,Ca,Al,V,Ti,Cd为代表的金属元素群可能是青礞石干预PTZ点燃癫痫模型大鼠的效应物质基础,作用机制可能与这些金属元素群干预影响神经递质的释放及神经元的电平衡、调节离子（Na⁺,K⁺,Ca²⁺等）通道失常诱发的异常同步放电及干预癫痫相关代谢通路等有关,使兴奋与抑制活动相互牵制,最终达到神经元、细胞电平衡等趋于正常生理状态。青礞石组的干预作用总体优于卡马西平组。     

矿物药青礞石对戊四唑点燃癫痫大鼠肠道菌群的影响

目的研究青礞石对戊四唑(pentylenetetrazol,PTZ)点燃癫痫大鼠肠道菌群的影响,从肠道微生态环境视角探讨青礞石治疗癫痫疾病可能的作用机制。方法以青礞石粉末为研究对象,用PTZ点燃法建立大鼠癫痫动物模型,实验分为对照组、模型组、卡马西平组和青礞石组(高剂量组为临床用量的20倍、低剂量组为临床用量的5倍)。给药4周后,取各组大鼠结肠内容物,通过16Sr RNA测序对各组大鼠肠道菌群的多样性进行分析,利用UPARSE、SPSS18.0等对结果进行生物信息学及统计学分析。结果α多样性分析可知,模型组大鼠肠道菌群的Chao 1、Ace丰富度指数与对照组相比没有显著性变化;与对照组、模型组相比,青礞石组尤其是高剂量组对细菌群落丰富度有显著影响(P0.05)。Shannon、Simpson群落多样性指数分析结果显示,模型组与对照组无显著性差异;青礞石组对群落多样性干预不明显。青礞石主要干预肠道菌群的丰富度、卡马西平主要干预肠道菌群的多样性。β多样性各组层级聚类均能较好地分开,其中青礞石高剂量组与低剂量组部分样本不能明显分开,2组样本可归为一类,对照组、模型组可归为一类,卡马西平组单独归为一类。3D-主成分分析(3D-principal component analysis,3D-PCA)、3D-主坐标分析(3D-principal co-ordinates analysis,3D-PCoA)结果显示,各组菌群结构轮廓均能明显分开,青礞石低剂量组介于对照组和模型组之间,菌群结构轮廓部分与模型组、对照组有重合交叉,且有偏向对照组的明显趋势。非度量多维尺度(nonmetric multidimensional scaling,NMDS)分析结果显示,对照组、模型组、青礞石组集中在一个区域,青礞石组与模型组、对照组有重合交叉,青礞石高剂量组、低剂量组对肠道菌群结构有相似的干预效果。物种组成门水平分析可知,各组大鼠的优势菌群主要有厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria),其中厚壁菌门占比最大,其次是拟杆菌门。模型组疣微菌门相对丰度较对照组显著增加(P0.01),模型组变形菌门的相对丰度最高;青礞石干预后疣微菌门相对丰度下降,变形菌门相对丰度有不同程度降低。属水平分析可知,与对照组相比,模型组中norank_f__Muribaculaceae(P0.05)、Akkermansia菌属(P0.01)相对丰度显著增加,乳杆菌属显著减少(P0.05);青礞石干预后可降低Akkermansia菌属、升高乳杆菌属Lactobacillus的相对丰度。另外,线性判别分析效应大小(linear discriminant analysis effect size,LEfSe)分析可知厚壁菌门的瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)在模型组中显著富集,给予青礞石干预后,瘤胃球菌科相对丰度显著降低。结论青礞石对PZT点燃癫痫大鼠肠道菌群物种组成的丰富度、多样性具有明显的调节作用,可有效干预肠道微生态的重建。     

矿物药青礞石对戊四氮点燃癫痫大鼠血清中IL-1β和IL-2等细胞因子水平的影响

目的 研究青礞石对戊四氮（pentylenetetrazol,PTZ）点燃癫痫大鼠血清中炎症细胞因子表达水平的影响。方法 利用PTZ腹腔注射制备慢性癫痫大鼠模型,实验分为对照组、模型组、阳性药卡马西平组、青礞石低剂量组和青礞石高剂量组。大鼠腹主动脉取血,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ-干扰素（IFN-γ）、高迁移率族蛋白B-1（HMGB-1）及超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平,并对各细胞因子之间及其与PTZ点燃癫痫大鼠结肠肠道微生物的相关性进行分析,利用SPSS 18.0对结果进行统计学分析。结果 与对照组比较,模型组大鼠血清中IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α及hs-CRP水平均显著升高（P<0.01）。与模型组比较,青礞石高、低剂量给药组大鼠血清中各细胞因子水平显著下降（P<0.05,P<0.01）。细胞因子相关性分析结果表明,IL-2与IL-6呈显著正相关（P<0.05）,IL-6与TNF-α、hs-CRP呈显著正相关（P<0.05,P<0.01）,TNF-α与hs-CRP呈显著正相关（P<0.01）,IFN-γ与HMGB-1呈显著正相关（P<0.05）。细胞因子与肠道菌群相关性分析结果表明,疣微菌门、Akkermansia菌属与炎症因子IL-6、TNF-α、hs-CRP间呈显著相关性（P<0.05）。青礞石可通过影响细胞因子（IL-6、TNF-α、hs-CRP）、Akkermansia菌属对PTZ点燃癫痫大鼠起到干预作用。结论 青礞石干预PTZ点燃癫痫可能与影响IL-1β、IL-2等细胞因子,从而降低体内炎性反应有关。     

基于代谢组学分析电针对癫痫大鼠血浆代谢物变化的影响

摘要：目的：应用代谢组学技术研究电针对癫痫模型大鼠的血浆代谢模式,初步探讨电针治疗癫痫的生物标志物,揭示电针改善癫痫的潜在代谢调节机制。方法：实验大鼠分为3组,即空白组、模型组和电针组,每组10只SD大鼠,通过戊四氮腹腔注射的方法制备癫痫模型。电针组取“百会”“大椎”穴,15 min/次,1次/d,连续28 d。评价模型组与电针组大鼠癫痫发作情况;HE染色法观察各组大鼠海马病理改变;代谢组学技术分析各组大鼠的血浆代谢轮廓,经PCA和OPLS-DA等多元统计方法分析,结合数据库筛选组间差异代谢物,差异代谢物经KEGG富集代谢通路。结果：与空白组比较,模型组大鼠癫痫发作频率升高显著(P<0.01),逃避潜伏期显著延长,60 s内穿越平台次数及平台象限停留时间减少,海马神经元损伤明显,共筛选出11个显著差异代谢物,KEGG富集分析到4条显著差异代谢通路。与模型组比较,电针组大鼠癫痫发作频率显著降低(P<0.01),逃避潜伏期显著缩短,60 s内穿越平台次数及平台象限停留时间延长,海马神经元损伤减轻,共筛选出显著差异代谢物7个,富集分析得到差异代谢通路2条,均参与了色氨酸代谢。结论：电针可降低癫痫大鼠的发作频率、改善海马结构损伤,其生物学机制涉及调节脂质代谢、氨基酸代谢和能量代谢等相关途径。     

矿物药青礞石对PTZ点燃癫痫大鼠海马差异蛋白表达的影响

目的:研究矿物药青礞石对PTZ点燃癫痫大鼠海马差异蛋白的影响。方法:采用标记定量(TMT)蛋白质组学技术分析大鼠海马中蛋白的差异表达,以模型组与正常对照组之间大鼠海马蛋白表比较筛选出差异达蛋白,以同样方法筛选了青礞石组与模型组之间差异表达蛋白。结果:本研究采用了3次生物重复,模型组和正常对照组之间共有29个差异表达蛋白,鉴定出28个差异表达蛋白。结论:通过有效的比较分析,得到青礞石治疗癫痫的差异表达蛋白,其中Mbp等蛋白有可能是其作用靶点。     

银杏叶提取物对戊四氮诱导大鼠癫痫发作和Cav3．2表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（GBE）对戊四氮（PTZ）慢性致痫大鼠模型癫痫发作的影响及脑保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组：PTZ致痫组、PTZ＋丙戊酸（VPA）组、PTZ＋VPA＋GBE组、生理盐水（NS）对照组,每组10只,观察各组大鼠的行为学、脑电图（EEG）、电迷宫正确率和颞叶海马T型ca2＋通道Car3．2表达变化。结果PTZ＋VPA组、PTZ＋VPA＋GBE组和NS组发作级别为0-Ⅱ级,EEG正常或少量棘慢波,EEG总功率差值及颞叶海马Cav3．2水平较PIE组显著降低,差别有统计学意义（P〈0．05）;相比于PTZ＋VPA组,PTZ＋VPA＋GBE组颞叶海马Cav3．2表达明显减少,差别有统计学意义（P〈0．05）。结论GBE能降低Car3．2水平,显著降低癫痫大鼠发作级别、减少脑部异常放电和改善认知功能,有辅助抗癫痫和脑保护作用。     

二陈汤对代谢综合征痰证大鼠血清代谢组学的影响

目的：利用UHPLC-QE-MS代谢组学技术筛选代谢综合征（MS）痰证可能的特征标志物,从代谢角度初步探讨二陈汤改善MS痰证的机制,为寻找化痰的靶点提供参考依据。方法：50只SPF级雄性Wistar大鼠随机分成空白组12只,造模组38只,以高糖高盐高脂饮食喂养12周复制MS痰证大鼠模型。检测大鼠的一般状况、生长、血压、糖脂代谢情况,根据模型评价标准筛选成模大鼠,将24只成模大鼠随机分为模型组和二陈汤组各12只,二陈汤组予二陈汤5.3 g/kg灌胃,模型组及空白组予0.9%氯化钠溶液10.5 mL/kg灌胃,每日1次,连续4周。收集第16周末空白组（9只）、模型组（8只）和二陈汤组（9只）大鼠血清。利用LC-MS技术进行检测,对数据进行分析以筛选差异代谢产物,并登入京都基因与基因组百科全书数据库整理出差异代谢产物映射的所有通路,通过对差异代谢物所在通路的富集和拓扑分析,寻找差异代谢通路。结果：以VIP>1且P<0.05为卡值,空白组和模型组最终鉴定出357种差异代谢产物;模型组和二陈汤组最终鉴定出109种差异代谢产物。空白组-模型组与模型组-二陈汤组,P<0.05或影响...     

柴胡加龙骨牡蛎汤对PTZ点燃型癫痫大鼠脑内氨基酸含量的影响

为了研究柴胡加龙骨牡蛎汤抗癫痫的作用机理,本实验观察戊四唑(PTZ)点燃型癫痫大鼠,服用柴胡加龙骨牡蛎汤治疗后,脑内氨基酸含量的变化。结果表明:PTZ点燃型癫痫大鼠脑内兴奋性氨基酸谷氨酸(GlU)天冬氨酸(ASP)及抑制性氨基酸甘氨酸(Gly)显著升高;而抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)、丙氨酸(Ala)显著降低。经柴胡加龙骨牡蛎汤治疗后γ-氨基丁酸(GABA)、丙氨酸(Ala)含量明显升高,而Glu、ASP、Gly降低不显著,提示癫痫的发作及柴胡加龙骨牡蛎汤抗癫痫的作用可能与脑内ASP、Gln及Gly、GABA、Ala的变化有关。     

代谢组学及肝脏代谢组学的进展

代谢组学是继基因组学、转录组学、蛋白质组学后出现的以描述机体对病理生理刺激或基因修饰下所产生的代谢变化规律为目标的新兴“组学”,用于疾病诊断、药物代谢、毒理代谢等方面,已成为国际上疾病与健康研究的一个重要焦点。而肝脏是机体代谢的重要器官,肝脏异变引起全身代谢的紊乱,但目前代谢产物的全面检测技术的缺乏,代谢组学为其提供了一个新的思路,得到了越来越广泛的运用。     

基于NMR的代谢组学体液样品制谱技术综述

核磁共振以其固有的定量性质和丰富的化学信息为代谢组学提供了一种重要的分析平台。典型的1H一维核磁共振实验得到的谱图可以有数以千计的谱峰。核磁共振分析的灵敏性也给代谢组学的分析带来了一定的挑战。本章综述了现今代谢组学中涉及体液核磁共振的主要分析技术。     

矿物药金礞石、青礞石的红外光谱分析

目的:寻找能够鉴别金礞石、青礞石的新方法.方法:利用傅立叶变换红外光谱仪测定不同来源的样品,对所获得的指纹图谱进行特征性指认.结果:不同来源的金礞石、青礞石的红外吸收光谱存在较大差异,并且有各自的特征峰.结论:运用傅立叶变换红外光谱技术可以对不同来源的金礞石、青礞石进行直接、快速、准确分析,为此类矿物药的鉴别和质量控制提供可靠的依据.     

青礞石FTIR指纹图谱研究

目的建立青礞石的傅利叶变换红外光谱指纹图谱,并分析比较青礞石炮制前后图谱变化。方法通过傅利叶变换红外光谱仪对不同产地和批次10份青礞石样品进行分析,相似度评价以计算共有峰透光率的夹角余弦值获得。结果青礞石样品的指纹图谱相似度均大于0.96;青礞石炮制后相似度和相关系数均有较大程度的降低。结论傅利叶变换红外光谱指纹图谱可用于青礞石炮制后的品质评价。     

青礞石的本草考证及现代研究

通过查阅相关本草文献,同时结合现代研究及当今市场、临床应用调研,考证矿物药青礞石的品种。查阅青礞石相关的古今文献22篇。结果表明古代本草文献中所记载的青礞石与现代商品及临床应用基本一致。临床应用的青礞石药材应来源于黑云母片岩或绿泥石化云母碳酸盐片岩。目前临床应用的多为黑云母片岩,与2010年版《中国药典》收载的青礞石来源相吻合。此外,作者对青礞石的化学成分、理化性质、光学性质等现代研究进行了总结。     

矿物类中药青礞石的XRD Fourier指纹图谱研究

目的:建立青礞石XRD Fourier指纹图谱评价方法,并比较炮制前后指纹图谱的变化.方法:采用粉末X射线衍射技术对青礞石进行分析,并作模糊聚类法分析和相似度评价.结果:建立了以10个共有峰为特征指纹信息的14批青礞石的XRD Fourier指纹图谱分析方法;所分析样品XRD Fourier指纹图谱的10个特征峰晶格间距d(A)及峰位20的均数相关系数、中位数相关系数、均数相似度(夹角余弦值)、中位数相似度(夹角余弦值)均在0.999 9以上.相对强度值Ⅰ/Ⅰo(％)的相关系数均大于0.95,均数相似度(夹角余弦值)、中位数相似度(夹角余弦值)均大于0.97;少数样品XRD Fourier图谱的峰数目和峰强有一定差异;生品与煅制品的XRD Fourier图谱有明显差异.结论:XRD Fourier指纹谱分析法可用于青礞石药材的鉴定与分析.     

矿物药青礞石的炮制考证

国家对中药的安全性越来越重视,对矿物药的炮制考证及研究尤为重要.青礞石为常用矿物药,为理清矿物药青礞石的炮制方法,增强临床疗效及减少临床用药的安全隐患,该文通过查阅古代相关本草及现代专著等,分析考证青礞石的炮制方法,表明历代本草文献中所记载的青礞石炮制方法与现代炮制方法基本一致.青礞石多煅制或火硝制,与目前炮制方法相吻合.     

大鼠心血瘀阻证心肌组织代谢组学的研究

目的寻找心血瘀阻证大鼠心肌组织代谢产物谱,以及养心通脉方干预后表型的变化,分析大鼠心血瘀阻证心肌组织的代谢途径。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支复制急性心肌梗死(AMI)心血瘀阻证模型,同时采用养心通脉方干预模型,运用GC-MS检测模型组、养心通脉方组、假手术组和空白对照组4组大鼠心肌组织代谢产物,每组8只,通过对不同组之间代谢产物含量的变化进行主成分分析、偏最小二乘法分析。结果主成分分析:四组样本主成分得分分析,模型组、养心通脉方组与正常组、假手术组分聚于椭圆形散点图的3个区域。因子载荷图显示模型组甘氨酸、延胡索酸、苹果酸、谷氨酸、葡萄糖、磷酸、吡喃半乳糖、赖氨酸发生了改变。偏最小二乘法分析:PLS回归模型显示,模型组与养心通脉方组存在明显的线性关系,证明模型建立是合理的。药物干预与甘氨酸、苹果酸、谷氨酸、葡萄糖高度正相关,与尿素、琥珀酸高度相关,与赖氨酸负相关。按照VIP值依次排列各变量与药物干预的密切度依次是苹果酸、谷氨酸、甘氨酸、葡萄糖、延胡索酸、尿素、半乳糖、酪氨酸、乳酸、丙氨酸。差异性分析:明显变化的代谢产物差异性分析表明,甘氨酸等10种代谢产物在模型组中显著下降,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。药物干预后甘氨酸、延胡索酸、苹果酸、谷氨酸、半乳糖、葡萄糖、酪氨酸、尿素、乳酸、丙氨酸等含量增加与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。其中苹果酸、谷氨酸、酪氨酸、尿素上升幅度较小,与正常组比较差异仍有统计学意义。赖氨酸经药物干预后均数显示有轻度下降,但与模型组比较差异无统计学意义。大鼠AMI心血瘀阻证与心肌组织代谢产物苹果酸、谷氨酸、甘氨酸、葡萄糖、延胡索酸、尿素、吡喃半乳糖、乳酸、丙氨酸、酪氨酸等含量的改变密切相关。结论心肌组织代谢产物谱显示AMI心血瘀阻证代谢途径与缺氧后的糖代谢紊乱密切相关,养心通脉方可以有效干预这一过程。     

康痫丸对致痫大鼠氨基酸递质的影响

目的 从脑内氨基酸类递质角度探讨康痫丸治疗原发性癫痫的作用机制.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、癫痫模型组、丙戊酸钠组、康痈丸组,每组10只.用戊四氮(PTZ)亚惊厥剂量造模.通过免疫组化观察药物处理后致痫大鼠海马CA1、CA3、齿状回和顶叶大脑皮层的γ-氨基丁酸((GABA)、谷氨酸(Glu)表达强度.结果 PTZ致痫后,大鼠海马及皮层GABA阳性细胞数及光密度减少,而Glu阳性细胞数及光密度增加,提示PTZ同时影响脑内GABA和Glu的代谢,证实了GABA及Glu与癫痫的相互关系.采用康痫丸抗癫痫,动物海马、皮层GABA阳性细胞数及光密度增加.而Glu阳性细胞数及光密度减少.结论 康痫丸降低脑内Glu,升高GABA水平可能是其发挥抗癫痫作用的机制之一.     

电针对颅脑损伤大鼠脑组织中AQP-4表达的影响

目的:对大鼠颅脑损伤后,于不同时间点开始介入电针治疗,观察其脑组织中AQP-4的表达和右侧前后肢回缩力变化与电针介入时间的关系,探索电针治疗颅脑损伤的最佳时间窗。方法:选用70只SD大鼠,随机分为空白组、模型对照组、电针治疗组(电针1组,电针2组),使用e CCI仪器在大鼠颅脑左侧开颅打击制备TBI(traumatic brain injury)模型。取大鼠"百会、关元",右侧前肢"曲池、合谷",右侧后肢"足三里、涌泉",电针1组于造模后4 h介入电针治疗,电针2组于第8天介入电针治疗,每组治疗各7 d。(1)造模后8 d、15 d和22 d分别测试并评价大鼠右侧前后肢肢体回缩力。(2)造模后8 d和15 d取大鼠创伤脑组织,一部分进行HE染色及免疫荧光染色,观察脑组织形态结构及脑组织中AQP-4蛋白的表达;一部分采用实时荧光定量PCR技术检测AQP-4mRNA的表达。结果:造模后8 d、15 d和22 d三个时间点电针1组前后肢肢体回缩力比电针2组、模型组恢复的好,比空白组稍差。光镜下,空白组脑组织形态结构正常;电针治疗组比模型组好,电针1组比电针2组好。脑组织中AQP-4蛋白的含量以及mRNA的表达,空白组、模型组、电针治疗组各组比较均有统计学差异(P0.01),其中电针1组升高最明显。结论:电针治疗TBI早期介入效果更佳,其机制可能是通过提高脑组织中AQP-4的表达,减轻脑水肿,达到保护神经元的作用。