脱氢表雄酮抑制骨吸收的作用机制

 目的　研究脱氢表雄酮 (DHEA)治疗绝经后骨质疏松的作用机制。方法　体外分离和培养成骨细胞和破骨细胞 ,在有或无成骨细胞存在的条件下,观察10^-7mol·L^-1 的DHEA对破骨细胞骨吸收作用的影响;经DHEA作用1,2,3d后 ,半定量RT-PCR测定护骨素/核因子κB受体活化因子配基(OPG/RANKL)的mRNA水平。结果　 10^-7mol·L^-1 的DHEA能明显增加成骨细胞OPG/RANKL的mRNA比值(P<0.01) ;当成骨细胞存在时,DHEA可以减少骨吸收陷窝的数目(P<0.05)和面积 (P<0.01)。结论　DHEA只有在成骨细胞存在时可以抑制破骨细胞的骨吸收作用,该作用可能通过间接调节成骨细胞OPG/RANKL的转录而介导。     

补骨脂对成骨细胞和破骨细胞增殖分化的影响研究进展

骨质疏松症是一种以骨量减少、骨微结构破坏,导致骨脆性增加,易于发生骨折为特征的全身性骨骼疾病。骨质疏松的发病机制为骨重建动态平衡被破坏,成骨细胞与破骨细胞功能失衡,导致骨代谢失衡,骨吸收加快,骨形成减少,最终造成骨吸收远大于骨形成,净骨量丢失。骨质疏松的形成与成骨细胞和破骨细胞二者在体内的动态平衡密切相关,其中破骨细胞主要介导骨吸收,在骨骼的形成和骨密度的调节中发挥着重要作用;成骨细胞则是特殊的骨形成细胞,能合成骨基质,调节机体的骨矿化,参与骨重塑等活动。     

中医药调控氧化应激治疗骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症（OP）是一种全身代谢性骨骼疾病,随着社会老龄化加重,已成为我国中老年人群首要健康问题。衰老、铁负载及雌激素缺乏等使机体氧化与抗氧化系统平衡被打破,活性氧物种增加介导氧化应激损害DNA、脂质和蛋白质等大分子物质,从而加速细胞凋亡,还可诱导OP、肥胖症及神经退行性病变等疾病的发生。近年来研究发现,氧化应激在OP发病机制中具有重要意义,氧化应激可调控骨髓间充质干细胞、成骨细胞和破骨细胞相关信号通路、细胞因子及蛋白质表达而减弱骨髓间充质干细胞成骨分化能力、抑制成骨细胞矿化和促进破骨细胞活化、增殖和成熟,导致骨吸收和形成之间动态失衡扰乱骨重建而促进了OP的进展。目前,临床多使用抗骨吸收、促进骨合成及激素类等西药治疗为主,因其治疗周期长、可并发严重胃肠道反应,低钙血症及骨坏死等风险,导致患者依从性差,以至于OP的治疗效果不如预期。中医药治疗OP因其具有多通路、多靶点协同作用,疗效显著,和常规西药相比其价格低廉、不良反应较少,广泛应用于临床。随着中医药现代化快速发展,发现其在抗氧化应激治疗OP方面显现出独特优势,可通过调节不同信号通路而发挥作用,为OP的治疗提供了新思路、开辟了新篇章。因...     

基于OPG/RANK/RANKL信号通路防治股骨头坏死的中医药研究进展

股骨头坏死（ONFH）是由于股骨头内的供血发生损害,细胞组织等发生变性,逐渐造成骨结构被破坏,股骨头进行性塌陷引起的疼痛及功能障碍性疾病。ONFH的主要病理机制在于微循环损害细胞组织能力下降、骨的吸收与新生骨的重建之间的平衡被破坏,其生物力学发生改变,加速股骨头坏死的病理进展。早期临床表现并不明显,主要为髋部或腹股沟区疼痛或酸痛,休息后可缓解,疾病发展后期可出现疼痛加剧,肢体短缩,下肢无力,行走困难或跛行。目前临床上西医常用促骨形成药、抗凝药和人工关节置换等治疗,但也存在假体松动、感染等诸多问题。研究表明,中医药治疗ONFH从整体出发,应用多功能、多靶点、多系统的中药治疗,保障了治疗途径的安全性和有效性。骨保护素（OPG）/核转录因子-κB受体活化因子（RANK）/核转录因子-κB受体活化因子配基（RANKL）信号通路在维持骨重建的动态平衡中具有关键地位,该通路利用中医药等治疗方式促进生物体内破骨细胞凋亡,减少骨吸收,加速骨形成,对于防治ONFH具有重要作用。该文通过查阅国内外相关文献,对OPG/RANK/RANKL信号通路影响相关细胞因子表达在ONFH中的作用,中药单体、中药复方及中药复方联合物理治疗增加成骨细胞分泌,促进OPG表达,提高细胞因子等表达水平,抑制破骨细胞活性等方式以防治ONFH的研究现状进行综述,为中医药防治ONFH提供新的思路和方向。     

熟地黄的大麻素2型受体激动剂活性及对骨代谢的调控作用研究

目的 探究熟地黄的大麻素2型受体（cannabinoid receptor 2,CB2R）激动活性及其对骨代谢的调控作用。方法 采用双荧光素酶报告基因建立CB2R调节剂筛选体系;分别给予熟地黄提取物或CB2R选择性激动剂HU308或CB2R反向激动剂AM630处理,采用CCK-8法测定成骨细胞和破骨细胞的增殖活性;采用磷酸苯二钠法测定成骨细胞碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）和破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）的活性;采用流式细胞仪测定成骨细胞的细胞周期;采用ALP染色观察成骨细胞分化;采用茜素红染色观察成骨细胞骨矿化结节的形成;采用TRAP染色观察破骨细胞数目;采用罗丹明-鬼笔环肽染色镜观察破骨细胞F-肌动蛋白（F-actin）环的结构和形态;采用Western blotting检测CB2R及骨代谢相关蛋白的表达。结果 500 μg/mL熟地黄显著升高HEK293-CB2R细胞CB2R表达（P＜0.001）,抑制forskolin刺激的HEK293-CB2R细胞中环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）的产生,并且其对CB2R的激动活性可被AM630逆转（P＜0.001）。500 μg/mL熟地黄显著促进成骨细胞增殖（P＜0.001）,升高ALP活性（P＜0.001）,促进骨矿化结节形成,上调CB2R及骨形成相关蛋白的表达（P＜0.05、0.01、0.001）,抑制p38的表达（P＜0.05）;抑制破骨细胞形成分化,降低TRAP活性（P＜0.001）,抑制F-actin环的形成,下调CB2R、p-p38和骨吸收相关蛋白的表达（P＜0.05、0.001）;熟地黄对成骨细胞和破骨细胞的作用可被AM630逆转（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 熟地黄具有特异性的CB2R激动活性,并可通过CB2R调控成骨细胞和破骨细胞的功能。     

中药血清药理学在骨质疏松症实验研究中的运用进展

正骨质疏松症(OP)是一种与年龄相关、全身性的骨骼系统疾病,发病率随年龄的增加而显著增高。其主要特征是骨量减低和骨组织微结构退化,并导致骨强度减低、骨脆性增加以及骨折危险性增高[1]。OP发生的机制是骨吸收大于骨形成,在骨的重建过程中无法完全修复被吸收的骨质,使其骨量不断减少,骨质下降。因此,治疗OP的关键是促进成骨细胞(OB)的成骨过程,缓解破骨细胞(OC)的破骨过程。一些学者从细胞及分子生物学水平对中医药治疗OP的机制进行了研究。由于中药成分复杂,其粗提     

Wnt信号通路在糖尿病骨质疏松中的作用及中药干预的研究进展

糖尿病骨质疏松（DOP）是糖尿病引起的一种骨骼并发症,以骨密度降低、骨微结构改变、骨质脆性升高为主要特征。DOP的进程与高糖、胰岛素抵抗、氧化应激等机制关系密切。Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路是介导糖尿病胰岛素抵抗和骨代谢平衡的重要机制,调控Wnt信号转导促进糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）磷酸化表达水平,可改善糖脂代谢。Wnt/β-catenin信号通路是调节骨细胞重塑的重要途径,不仅在成骨细胞和破骨细胞二者平衡中发挥重要调节作用,可以改善骨代谢平衡;并且调控Wnt通路还促进骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白的表达,改善骨增殖和成骨分化。近年来中医药在DOP的防治中的研究逐渐增多,中药干预Wnt通路转导改善DOP的探索取得了一定的进展。该文搜集国内外近10年来Wnt信号通路在糖代谢、骨代谢和DOP的研究,以及关于中药复方（经典方和其他）、单味中药、中药单体基于Wnt通路干预DOP的相关文献进行整理综述,以期为临床防治DOP新药的开发提供参考和方向。     

中药血清对骨组织细胞OPG／RANKL系统的影响

骨质疏松症（osteoporosis,OP）是威胁中老年人健康的一种常见的疾病,国内外对骨质疏松症的研究都非常重视。骨质疏松症由骨代谢失衡引起,成骨细胞和破骨细胞都是骨代谢过程中的重要核心细胞,成骨细胞不仅参与骨形成,而且还参与破骨细胞性骨吸收的调节,近年来不少学者从细胞分子生物学角度开展了中医药对骨组织细胞影响的实验研究,为中医药防治骨质疏松症提供了分子生物学理论依据。其中运用体外骨组织细胞培养和中药血清干预实验是常用的方法之一,以下就有关研究综述如下。     

骨形成的生化标志物及其影响因素的研究进展

人体骨组织包括细胞和细胞间物质。细胞又包括成骨细胞、骨细胞和破骨细胞 ,它们共同完成吸收旧骨和生成新骨的过程 ,从而完成骨的生长代谢。成骨细胞常见于生长期的骨组织中 ,大都聚集在新形成的骨质表面 ,是由骨内膜和骨外膜深层的成骨性细胞分化而成的 ,其功能是促使骨骼形成、调节构成细胞外骨基质成分及骨基质的矿化 ,代表骨形成 ;破骨细胞常位于已钙化基质的骨表面 ,其功能是促进骨基质重吸收及其矿物质溶解和吸收 ,代表骨吸收。骨形成和骨吸收是一对偶联的不断更新的动态过程。骨的生长则是通过成骨细胞和破骨细胞协调作用完成的。在…     

从GH-IGFs轴探讨“肾主骨”的病理生理基础

正常骨组织的代谢 ,包括由成骨细胞调节的骨形成和破骨细胞调节的骨吸收 (即骨形成—吸收偶联〈Coupling〉)及其之间的平衡 (骨重建平衡 ,Bone Remodeling Balance)。这一偶联负责骨组织的更新 ,以维持其解剖及结构的完整性。青少年期 ,成骨作用大于破骨作用 ,骨骼才能因此而生长发育 ;成人阶段 ,与成骨破骨作用保持动态平衡 ;老年阶段 ,破骨作用大于成骨作用 ,骨的吸收超过了形成。骨的吸收超过形成的结果 ,就是造成了骨的丢失 ,这是骨质疏松 (Osteoporosis,OP)等老年性疾病的发病基本病理机制 [1 ] 。骨的重建由包括激素(如生长激素 ,…     

大血藤对破骨细胞活性及成骨细胞增殖分化作用的研究

该研究采用1α, 25-(OH)₂VitD₃诱导兔骨髓细胞法获得破骨细胞,以形态学观察、HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色来鉴定破骨细胞,用TRAP⁺细胞计数、TRAP活力测定和骨吸收陷窝的数量及面积来检测大血藤对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响。培养MC3T3-E1Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)细胞,用MTT法、碱性磷酸酶活力测定检测大血藤对其增殖和分化的影响。结果表明大血藤醇提物和水煎物低、中、高剂量组(2,20,200 mg·L^-1)对破骨细胞分化及骨吸收功能具有抑制作用,并具有剂量依赖性。大血藤醇提物和水煎物低、中剂量组具有促进MC3T3-E1Subclone 14细胞增殖分化的作用,说明大血藤对骨质疏松有一定的防治作用,这种作用可能是通过抑制破骨细胞活性和促进成骨细胞增殖分化来实现的。     

白介素6与骨质疏松及其调节

骨质疏松 (OP)是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征的 ,致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的一种全身性的代谢性骨病〔1〕。骨的代谢 ,是骨形成和骨吸收的动态平衡过程 ,通过破骨细胞的骨吸收活动和成骨细胞的骨形成活动不断进行着骨的再建。在病理情况下 ,若破骨细胞的活动增强或成骨细胞的活动减弱 ,将导致骨质丢失 ,发生骨质疏松。全身性的体液因子是骨代谢的重要调节因子 ,细胞因子作为局部调节因子的作用也不容忽视。尤其白介素 6 (IL - 6 )是近年来研究较多、被认为是病理状态下调节骨吸收的重要因子 ,本文对此作一综述。1　 IL-…     

物理疗法调控骨髓间充质干细胞成骨分化治疗骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症(osteoporosis, OP)的发生与成骨细胞介导的骨形成和破骨细胞介导的骨吸收之间的平衡被打破密切相关,而骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell, BMSC)成骨分化对维持二者平衡至关重要。物理疗法治疗OP具有疗效好、安全性高等特点,在临床上逐渐被广泛使用。多项研究表明,多种物理疗法治疗OP的作用机制与调控BMSC成骨分化密切相关。本文对运动疗法、全身振动、脉冲电磁场、体外冲击波等物理疗法调控BMSC成骨分化治疗OP的研究进展进行了综述。     

结合状态伊班膦酸盐对破骨细胞骨吸收作用的影响

 目的 观察伊班膦酸盐（ibandronate,Iba）与羟基磷灰石（hydroxyapatite,HA）结合后对破骨细胞骨吸收作用的影响。方法 将Iba与HA复合成伊班膦酸盐-羟基磷灰石（Iba-HA）作为实验组,未结合Iba的HA作为对照组。分离、培养、纯化大鼠破骨细胞,Giemsa染色和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色显示破骨细胞及其细胞核的形态和数目。用两组材料与破骨细胞复合培养,透射电镜观察细胞内结构变化,SNAFL染色测定破骨细胞内氢离子浓度,骨吸收陷窝面积测定并辅以上清液内胶原C端肽片段（CTx）的浓度测定观察破骨细胞骨吸收功能。结果 Gimsa染色标本可见多核的破骨细胞、细胞核染成蓝紫色,TRAP染色标本可见TRAP酶活性的部位被染成红色,分布于破骨细胞胞浆内。透射电镜观察发现,破骨细胞与Iba-HA复合培养后,较之与HA复合培养的破骨细胞生物活性下降。SNAFL染色显示Iba-HA组破骨细胞荧光强度小于HA组,统计学有差异（P<0.05）;骨吸收检测时面积显示,Iba-HA组小于HA组,统计学有差异（P<0.05）,上清液CTx浓度,Iba-HA组小于HA组,统计学有差异（P<0.05）。结论 与ＨＡ处于结合状态的Iba对破骨细胞的骨吸收作用仍有显著影响。     

升麻三萜皂苷对破骨细胞形成分化的影响及机制研究

目的 探究升麻三萜皂苷（Cimicifuga triterpene saponins）对破骨细胞形成分化和骨吸收功能的影响,并基于网络药理学探讨其作用机制。方法 采用CCK-8法测定升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇对骨髓巨噬细胞（bone marrow macrophages,BMMs）增殖活性的影响;抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrateresistant acid phosphatase,TRAP）染色测定破骨细胞数目;磷酸苯二钠法测定破骨细胞的TRAP活性;鬼笔环肽染色观察破骨细胞F-actin环的形成;甲苯胺蓝染色检测破骨细胞在牛皮质骨骨片上形成的骨吸收陷窝;Western blotting分析破骨细胞标志基因和蛋白的表达。采用GeneCards和DisGeNET数据库获取破骨细胞功能的靶点,应用Cytoscape 3.7.1软件,采用蛋白互作的方式,筛选升麻三萜皂苷调控破骨细胞功能的核心靶点,并采用DAVID 6.8对核心靶点进行基因本体（gene ontology,GO）功能及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。结果 升麻三萜皂苷对BMMs增殖无显著影响,升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇均可减少破骨细胞的数目,抑制破骨细胞TRAP活性和F-actin环的形成,显著抑制破骨细胞活化T细胞核因子1（nuclear factor of activated T cells 1,NFATc1）、原癌蛋白Fos（oncogene Fos,c-Fos）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP9）和组织蛋白酶（cathepsin K,CTSK）的表达（P＜0.05、0.01）,减少破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝的面积（P＜0.01）。网络药理学分析表明升麻三萜皂苷主要通过丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路调控破骨细胞的骨吸收功能。结论 升麻三萜皂苷通过MAPK通路抑制BMMs诱导的破骨细胞的形成分化和骨吸收,可为抗骨质疏松新药的研发提供先导化合物。     

中药干预mTOR信号通路防治骨质疏松症研究进展

骨质疏松症（OP）是一种老年人多见的全身性骨骼疾病，其病理特征是骨流失、骨微结构退变等，其临床上多表现为骨骼脆性增加、骨痛等症状。同时，OP会因其引起的骨骼高脆性而增加骨折风险，最终导致OP患者终身残疾或死亡，给患者及其家庭带来了沉重的经济负担和心理负担。既往研究发现，OP发病机制极其复杂，与成骨细胞增殖与分化、破骨细胞活性与功能的障碍和自噬激活的异常等众多因素相关。近年来，国内外研究发现，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）相关信号通路参与骨稳态的调节，可通过调控成骨细胞增殖与分化、破骨细胞功能、激活细胞自噬而促进骨形成、改善骨代谢和骨微结构，在OP防治中发挥着至关重要的作用。此外，中医药防治OP历史悠久、疗效明确，且具有作用靶点多、不良反应小、来源广泛的特点和优势。因此，该文通过检索和查阅国内外最新研究报道，简略阐述了mTOR相关信号通路在OP发生发展中的作用，详细总结了中药提取物及中药复方干预mTOR相关信号通路防治OP的最新研究成果，旨为mTOR相关信号通路与OP的关系、临床应用中医药防治OP等领域的深入研究提供参考和依据。     

β转化生长因子在骨质疏松症中的作用

在骨的代谢过程中 ,破骨细胞的骨吸收作用和成骨细胞的骨形成作用是一对偶联 ,当这对偶联失去平衡 ,骨吸收增高而骨形成减少时 ,机体骨骼的骨量下降 ,则导致骨质疏松的发生。目前的研究表明 ,在这个过程中有多种细胞因子参与调节 ,其中β转化生长因子 ( TGF-β)是最重要、最基本的调节因子之一。多年来的研究证实 ,β转化生长因子 ( TGF-β)是一族具有多种功能的蛋白多肽 ,是体内存在的一种极其广泛的调节物质 ,广泛存在于动物正常组织细胞以及转化细胞中 ,以骨组织和血小板中的含量最为丰富 ,在骨形成和骨重建过程中起着极其重要的作用 …     

煨脓长肉中医外治方案治疗Wagner 2~3级糖尿病足溃疡的临床疗效

目的 观察煨脓长肉中医外治方案治疗Wagner 2~3级糖尿病足溃疡的临床疗效及安全性。方法 采用随机对照试验设计，2021年5月至2021年9月上海中医药大学附属曙光医院血管外科门诊及病房的96例患者随机分为观察组和对照组，每组48例，在两组患者接受基础治疗后，分为采用煨脓长肉外治方案和常规清创换药技术联合纳米银医用抗菌敷料的治疗方案，观察治疗前后两组患者的溃疡愈合率、溃疡面积、溃疡深度、中医证候评分、VAS评分、经皮氧分压、创面血流量、炎症因子（C-反应蛋白、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α）、生长因子指标（血管内皮生长因子、转化生长因子-β₁、成纤维细胞生长因子-β）、不良事件和终点事件。结果 与本组治疗前比较，两组患者的溃疡面积、溃疡深度、中医证候评分、VAS评分、C-反应蛋白、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、转化生长因子-β₁均显著降低（P<0.01）；经皮氧分压、创面血流量、血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子-β均显著升高（P<0.01）。治疗后观察组溃疡愈合率显著升高（P<0.01）；溃疡面积、溃疡深度、VAS评分、经皮氧分压、创面血流量、C-反应蛋白、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、血管内皮生长因子、转化生长因子-β₁、成纤维细胞生长因子-β的改善程度均显著优于对照组（P<0.01）。两组不良事件与终点事件发生差异无统计学意义。结论 煨脓长肉中医外治方案治疗Wagner 2~3级糖尿病足溃疡安全有效，不仅能够极大程度减小糖尿病足溃疡的面积和深度，改善中医证候评分、提高溃疡的愈合率，同时能够显著减轻患者疼痛，提高溃疡局部的微循环血流供应，其作用机制可能与降低创面局部的炎症反应，改善成纤维细胞和血管内皮细胞的增殖功能有关。     

骨转换生化标志物的复方中药干预作用临床研究进展

人体骨骼是动态变化的组织,而在这个动态变化的代谢中包含了骨形成和骨吸收,也即成骨细胞形成新骨和破骨细胞吸收旧骨形成骨转换的过程。维持骨代谢的平衡需要骨形成和骨吸收间的动态平衡和偶联。在骨形成过程中产生的副产物和成骨细胞分泌的酶类可反映骨形成的过程;胶原代谢产物和破骨细胞分泌的酶类可反映骨吸收的过程。     

补肾法防治原发性骨质疏松症的细胞、分子作用机理研究

目的:在骨细胞及分子水平观察了补肾法防治骨质疏松作用环节。方法:以建立的成骨细胞、破骨细胞及骨髓基质细胞培养体系进行体外实验,采用MTT比色分析法及3H-胸腺嘧啶核苷渗入法测定成骨细胞增殖及分化;采用流式细胞仪观察成骨细胞的凋亡;采用原位分子杂交研究TGF-β1、MMP-9 mRNA的表达。结果:补肾法可促进成骨细胞的增殖及分化;部分保护由肿瘤坏死因子α诱导的成骨细胞凋亡,使成骨细胞转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达增强;抑制破骨细胞的骨吸收活性;降低破骨细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA的表达。结论:补肾法具有抑制骨吸收,促进骨形成的双重药效作用,其机理部分是在mRNA水平上,通过对骨细胞内的TGF-β1、MMP-9等影响骨代谢的细胞因子及蛋白酶的调控而达到的。