不同产量下天麻根际土壤微生物多样性分析

目的 分析不同产量下天麻根际微生物的多样性,探讨土壤微生物对天麻产量的影响。方法 该试验采用16S DNA和内转录间隔区（ITS）序列高通量测序对天麻根际土壤中高产土样（GC）和低产土样（DC）下的细菌和真菌群落多样性进行分析。结果 天麻根际土壤中细菌占主导地位的有变形杆菌门Proteobacteria、厚壁菌门Firmicutes和其他不明细菌unidentified Bacteria,真菌占主导的为子囊菌门Ascomycota、担子菌门Basidiomycota、被孢霉门Mortierellomycota;高产和低产天麻根际土壤中微生物群落丰度没有差异,仅在群落组成上存在显著差异,高产天麻根际土壤中慢生根瘤菌Bradyrhizobium、施氏乳酸杆菌属Schleiferilactobacillus、古根菌属Archaeorhizomyces等38属微生物大量聚集,低产天麻根际土壤中则镰刀菌属Fusarium、鬼伞属Coprinellus、氨氧化古菌属Nitrosotalea等30属微生物大量聚集;在属和种的水平上,发现6个差异物种,绒紫红菇Russula mariae、古根菌属Archeaeorhizomyces、土赤壳属Ilyonectria偏向集中于高产天麻根际土壤中,氨氧化古菌属Nitrosotalea、簇生鬼伞Coprinellus disserminatus、镰刀菌属Fusarium则偏向集中于低产天麻根际土壤中。结论 在不同产量下,天麻根际土壤中的真菌群落和细菌群落中均存在差异微生物,推测这些微生物与天麻产量高低有关,研究结果可为后续天麻的高产研究提供重要的理论基础。     

外源添加镰刀菌和木霉菌对农田栽参土壤真菌群落的影响

目的 探究外源添加镰刀菌和木霉菌对农田栽参土壤真菌群落多样性和碳代谢功能多样性的影响。方法 通过Illumina HiSeq 2500高通量测序和Biolog-ECO联用技术，分析不同处理农田栽参土壤真菌群落物种多样性和功能多样性。结果 高通量测序结果显示，添加外源微生物后，农田栽参土壤的微生物数量和种类显著改变，相对丰度>1%土壤真菌类型分别为被孢霉属（Mortierella sp.）、镰刀菌属（Fusarium sp.）、腐质霉属（Humicola sp.）和拟青霉属（Simplicillium sp.）真菌，其中各处理组被孢霉属均显著升高；外源添加镰刀菌可引起腐质霉属和拟青霉属等真菌增加，添加高浓度木霉菌能显著抑制镰刀菌的生长；由Biolog和主成分分析可知，外源添加高浓度木霉菌组的平均颜色变化率（AWCD）显著高于对照组和镰刀菌低浓度组，且对氨基酸、羧酸、多聚物及胺类的利用能力增强，而外源添加高浓度镰刀菌组（LG）土壤微生物代谢活性降低，且两者土壤微生物对酚酸类碳源的利用程度均无显著提高。结论 外源添加镰刀菌协同引起其他致病真菌的生长繁殖，外源添加木霉菌有利于增强农田栽参土壤真菌群落结构和代谢多样性，抑制镰刀菌增殖，改善农田栽参土壤微生物环境。     

解钾菌对滇重楼根际土壤微环境影响

目的 研究接种解钾菌对滇重楼根际土壤微环境的影响。方法 通过室温盆栽实验,研究接种不同解钾菌对滇重楼根际土壤理化性质,微生物群落结构及土壤酶活性的影响,并进行相关性分析。结果 接种不同解钾菌能显著性影响滇重楼根际土壤理化性质,其中速效氮的质量分数为24.5~90.5 mg·kg^-1、速效磷质量分数为2.53~25.9 mg·kg^-1、速效钾质量分数为132~312 mg·kg^-1。土壤pH为7.08~7.75,均符合滇重楼种植最适范围。接种不同解钾菌可不同程度影响根际土壤中细菌、放线菌和真菌数量,土壤由真菌型向细菌型转化,标志着土壤肥力得到提高。同时也会影响根际土壤酶活性,中性磷酸酶、蛋白酶和多酚氧化酶活性呈现增强的趋势。相关性分析发现,细菌数量与真菌数量呈负相关（r=-0.856,P<0.01）,与放线菌数量、速效氮、速效钾含量呈正相关,土壤pH呈负相关性。结论 接种解钾菌能有效提高滇重楼根际土壤中速效钾、速效氮、速效磷等养分含量,提高土壤肥力,对滇重楼连作障碍起到了一定的缓解作用,为滇重楼的绿色可持续发展奠定理论基础。     

林下种植滇黄精对土壤理化性状及微生物群落的影响

目的 探究林下不同生长年限滇黄精根区土壤微生物群落结构和土壤环境因子的变化,为实现滇黄精林下可持续种植提供参考。方法 对云南省禄劝彝族苗族自治县栽培1、2、3年滇黄精的林下土壤及未开发林下土壤进行土壤理化性质、酶活性检测和高通量测序。结果 滇黄精根区土壤pH、全磷和速效钾的含量随种植年限的增加而降低,有机质、全氮、速效磷的含量随种植年限的增加而增加。与原生林地比较,种植1、2、3年的滇黄精根区土壤脲酶活性显著降低,过氧化氢酶活性显著增加。此外,种植滇黄精后,土壤细菌、真菌的多样性和丰度增加,且原生林地土壤与滇黄精根区土壤细菌、真菌群落结构存在差异,不同种植年限滇黄精土壤细菌、真菌群落结构相似。pH、速效氮、脲酶、酸性磷酸酶、过氧化氢酶是引起土壤细菌、真菌群落变化的主要土壤因子。结论 种植滇黄精对林地土壤的理化性质、酶活性和微生物群落结构造成一定影响,不同土壤因子及土壤微生物的响应不同。研究结果为建立滇黄精林下可持续种植模式、提高滇黄精品质提供了参考。     

大蒜对膜侧栽培当归连作、轮作土壤环境及产量的影响

目的 研究膜侧、露地栽培模式下,连作、轮作茬口当归间作大蒜后其土壤环境变化及当归产量变化规律,探索大蒜挥发物及膜侧栽培对连作当归的影响,为当归大蒜间作模式及膜侧栽培缓解连作当归提供一定的理论依据。方法 试验通过对当归根际土壤微生物数量、土壤酶活性及当归产量的测定分析,讨论大蒜对膜侧栽培当归连、轮作土壤环境及产量的影响。结果 膜侧栽培下间作大蒜处理对当归根际土壤中细菌、放线菌数量显著增加而真菌数量明显少,其中轮作膜侧当归与大蒜间作处理下的细菌、放线菌数量较对照（连作露地单作）平均增加104%,146.89%,真菌数量较对照平均减少39.28%。当归根际土壤酶活性在膜侧栽培间作大蒜因素下显著提高,轮作膜侧当归与大蒜间作处理下的土壤脲酶、蔗糖酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶活性较对照分别提高61.60%,51.09%,203.48%,76.19%。当归产量在膜侧栽培间作大蒜因素下显著提高,轮作膜侧当归与大蒜间作处理下的当归产量较对照提高39.37%。结论 在膜侧栽培模式下,当归与大蒜间作种植,能更有效地改变当归土壤微生物数量,提高当归土壤酶活性,改善土壤理化性质,缓解当归连作障碍,保障当归健康优势生长。     

枯萎病对菊花根际土壤微生物群落结构的影响

目的 探究患枯萎病菊花与健康菊花根际土壤微生物群落的差异。方法 以患病菊花植株和健康菊花植株根际土壤为研究材料,采用高通量测序技术对患病植株和健康植株样本的细菌16S rDNA和真菌内部转录间隔区（ITS）基因进行序列测定并进行数据分析。结果 枯萎病的发生降低了菊花根际土壤中细菌种群的丰富度和多样性程度,但对根际土壤中的真菌α-多样性无明显影响。菊花健康植株根际土壤细菌微生物中酸杆菌门、芽单胞菌门、硝化螺旋菌门占比高于患病植株,而变形菌门、拟杆菌门占比低于患病植株（P<0.05）。菊花患病植株根际土壤中镰刀菌属（Fusarium）真菌占比分别为27.49%,14.53%,11.94%,而健康植株镰刀菌属真菌占比分别为0.47%,1.01%,0.67%。菊花患病植株根际土壤中会出现细菌性致病菌果胶杆菌属（Pectobacterium）和菊迪基氏菌属（Dickeya）,而健康植株根际土壤中硝化类细菌、解毒类细菌、光合细菌等丰度高于患病植株。结论 患有枯萎病地块菊花植株根际土壤微生物中细菌的物种多样性和丰富度降低,并大量富集镰刀菌属致病真菌和积累果胶杆菌属与菊迪基氏菌属致病细菌,而健康菊花植株根际土壤微生物有益菌占比明显高于患病植株。     

不同林型对林下参产量质量及土壤微生态的影响

目的 探究适宜林下参生长的林型及土壤环境。方法 以9年生林下参为研究对象，选取6种常见栽培林型，对林下参产量、质量、土壤化学性质、土壤酶活及土壤微生物代谢等指标进行分析。结果 不同林型下人参质量差异显著，蒙古栎林质量最优，皂苷总质量分数达到2.27%，较最次落叶松林高出51.89%；产量落叶松林与蒙古栎林较高，比最低的白桦林高出62.5%，达到了30 g·m^-2。蒙古栎林的有机质、Cu、Zn均低于其余林型，蔗糖酶、脲酶相较于其余林型也较低，土壤微生物对D-半乳糖醛酸的利用高于其他林型，对L-苯基丙氨酸的利用低于其余林型，白桦林土壤微生物对2-羟苯甲酸利用呈度低于其余林型。相关性分析结果显示，土壤Zn与人参皂苷Rb₁与Rc具有负相关，K与人参皂苷Rb₂、Rb₃呈负相关，Mn和Cu与大部分皂苷含量呈正相关。冗余分析结果表明，利用氨基酸类、酯类、酸类、糖类碳源的土壤微生物是造成不同林型间林下参差异的主要因素。结论 蒙古栎林下人参产量及质量均为最优，杂木林次之，而白桦林对林下参生长较为不利，该研究为林下参产量质量的提高及生态种植技术的完善提供理论支撑。     

不同栽培年限人参根区土壤养分 酶活性及微生物量的变化

目的 阐释不同栽种年限人参根区土壤养分、酶活性及微生物量的变化情况及其相互关系。方法 参照行业标准测定土壤养分含量,采用比色法测定土壤酶活性、平板稀释计数法测定土壤微生物量。结果 随栽培年限不断增加,人参（2年生除外）根区土壤真菌、细菌、放线菌量及丰富度均呈逐年降低趋势,土壤碱解氮含量和过氧化氢酶活性呈先升高后降低再升高趋势,土壤有效磷含量、纤维素酶以及蔗糖酶活性呈先升高后降低趋势,土壤脲酶活性呈先降低后升高趋势,土壤速效钾含量和酸性磷酸酶活性呈逐年升高趋势,其他土壤养分因子呈不同程度降低趋势。分析发现,相关系数（r）≥0.2的数据占全部数据的80.88%。结论 土壤微生物、矿质元素及酶活性等土壤因子具有明显的相关性,人参栽培过程中土壤微生态失衡及病原物生物量增加是人参连作障碍形成的主要原因之一。     

天麻-川芎对偏头痛模型大鼠尿液内源性物质代谢的影响

目的： 运用代谢组学方法考察不同配伍比例的天麻-川芎对偏头痛大鼠内源性物质代谢的影响,寻找潜在的生物标志物并分析其代谢途径,为传统中药药对的药理机制研究提供新方法。 方法： 将药材分成4组：天麻组（50 g）、川芎组（50 g）、天麻-川芎A组（天麻-川芎为1：4）、天麻-川芎B组（天麻-川芎为4：1）,各组药材分别用10倍量70%乙醇提取。采取注射硝酸甘油的方法建立大鼠偏头痛模型。结合PCA法与PLS-DA法分析不同配伍比例的天麻-川芎对偏头痛大鼠内源性物质影响,结合载荷图信息,寻找生物标志物。 结果： 代谢组学分析表明,与天麻-川芎B组相比,天麻-川芎A组样本点更接近正常对照组,而远离模型组;通过载荷图筛选出16个分类贡献率较大的变量,对其中的9个潜在生物标志物进行了结构鉴定和代谢途径分析。 结论： 代谢组学提供了反映机体整体状态的检测指标,天麻-川芎A组使偏头痛大鼠内源性代谢表型向正常大鼠回归,其作用机制可能涉及到氨基酸代谢及三羧酸循环等代谢过程。     

不同生长年限党参根系微生物群落结构和多样性研究

目的 探究不同生长年限党参Codonopsis pilosula根系微生物群落结构变化及其与土壤环境因子的相关性,以提高党参品质。方法 对一、二、三年生党参土壤、根际土壤和根进行高通量测序和生物信息学分析。结果 随党参生长年限的增加,土壤和根际土壤中优势细菌Arthrobacter处于动态平衡,而根内细菌Ralstonia丰度减少。真菌Mortierella在土壤和根际土壤中丰度逐年降低,病原真菌Fusarium在党参根系中丰度逐年增加。不同生长年限的党参根系微生物群落组装更多的受随机性过程影响,且根系细菌的群落功能稳定性高于真菌。蛋白酶（protease,PRO）、全氮（total nitrogen,TN）、速效钾（available potassium,AK）、水分（water content,WC）、速效磷（available phosphorus,AP）和土壤有机质（soil organic matter,SOM）是影响不同生长年限党参根系细菌群落结构和多样性的主要影响因素,TN和全钾（TK）是影响真菌群落结构和多样性的主要影响因素。结论 党参根系微生物群落组成和多样性随生长年限改变,并对不同土壤环境因子作出差异化响应,该研究为后期深入研究党参病害防治,提高党参品质提供理论基础。     

接种解有机磷细菌对滇重楼品质及土壤肥力的影响

目的 研究接种不同解有机磷细菌或复合菌对滇重楼药材品质及根际土壤肥力的影响，为滇重楼人工栽培中生物菌肥的研制和施用提供参考。方法 采用单因素室内盆栽的方式，试验设空白（CK）组、接种Bacillus mycoides（S1）组、接种B. wiedmannii（S2）组、接种B. proteolyticus（S3）组、接种B. mycoides和B. wiedmannii（S4）组、接种菌株B. mycoides和B. proteolyticus（S5）组、接种B. wiedmannii和B. proteolyticus（S6）组、接种B. mycoides、B. wiedmannii和B. proteolyticus（S7）组8个处理，分析接种解有机磷细菌对滇重楼根茎总皂苷含量及根际土壤中微生物数量、酶活性和养分含量影响。结果 接种解有机磷细菌的7个处理中，滇重楼根茎总皂苷含量与CK组比较分别增加了16.42%、3.83%、16.86%、33.69%、2.11%、13.44%、28.83%；接种解有机磷细菌均不同程度增加了土壤微生物数量，以S6和S7组的效果最为显著；接种解有机磷细菌提高了酶活性，以S7组效果最为显著，酸性磷酸酶、中性磷酸酶、碱性磷酸酶、蛋白酶、蔗糖酶和过氧化氢酶的活性分别比CK组高49.96%、104.67%、110.17%、99.61%、26.26%、11.29%；接种解有机磷细菌降低了根际土壤pH，提高了土壤速效养分含量，S7组处理下，滇重楼根际土壤碱解氮、有效磷和速效钾含量分别比CK组高181.46%、51.64%、42.62%；相关性分析表明，总皂苷与磷酸酶活性之间呈显著正相关，土壤微生物与土壤酶活性呈显著正相关，土壤各种养分之间呈极显著正相关。结论 接种不同解有机磷细菌或复合菌能提高滇重楼品质和根际土壤肥力，其中以混合接种3种解有机磷细菌效果最佳。     

不同栽培模式对粗茎秦艽根际土壤微生物多样性与次生代谢产物含量的影响

目的 探讨不同栽培模式对粗茎秦艽产量及其根际土壤微生物多样性和次生代谢产物含量的影响。方法 以不同栽培模式粗茎秦艽及其根际土壤为研究对象,采用高通量测序技术,分析根际土壤中细菌和真菌群落组成及优势菌群和差异微生物;采用高效液相色谱法测定不同栽培模式粗茎秦艽中环烯醚萜类成分含量。结果 相较于地膜种植,采取无地膜种植与间作牡丹、白芸豆、土豆和玉米等作物后,粗茎秦艽鲜品增产16.11%~17.68%、22.48%~26.34%、29.37%~32.19%、34.82%~36.57%和35.34%~39.71%,干品增产19.75%~23.17%、25.86%~29.32%、30.18%~34.94%、35.22%~39.87%和39.72%~43.73%,龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷和獐牙菜苦苷4种环烯醚萜类成分总含量分别提高10.17%~37.83%、5.93%~47.44%、9.09%~28.84%和10.71%~28.57%。根际土壤中细菌和真菌群落多样性明显增高（P<0.05）,其中粪壳菌纲（Sordariomycetes）、锤舌菌纲（Leotiomycetes）、银耳菌纲（Tremellomycetes）、散囊菌纲（Eurotiomycetes）、镰刀菌属（Fusarium）和支孢甁霉属（Cladophialophora）等致病菌群相对丰度降低,变形菌门（Proteobacteria）、酸杆菌门（Acidobacteria）和放线菌门（Actinobacteriota）等有益菌群比例增高且逐渐成为优势菌群。结论 粗茎秦艽不同栽培模式可影响其产量和根际土壤微生物群落多样性及环烯醚萜类成分的累积,无地膜种植和间作模式具有一定优势,可为粗茎秦艽种植提供理论参考。     

基于高通量测序分析建曲发酵过程中微生物多样性变化

目的 明确建曲在发酵过程中微生物种类、优势类群的组成和功能特征的变化。方法 通过高通量测序技术对建曲不同发酵时间点的细菌和真菌群落结构和功能进行分析。结果 建曲发酵过程中,真菌的优势类群为曲霉菌属（Aspergillus,36.57%）,其中溜曲霉（Aspergillus tamarii,22.30%）和小菌核曲霉（Aspergillus minisclerotigenes,21.19%）为发酵后的优势菌种。细菌由红串红球菌（Rhodococcus erythropolis,29.56%）和类肠膜魏斯菌（Weissella paramesenteroides,25.24%）先后成为优势类群。在整个发酵过程中,建曲的优势菌群均出现明显的变化,反映了建曲发酵过程中存在清晰的群落演替。功能预测分析显示,建曲中存在丰富的与代谢途径相关的真菌和细菌功能基因,且不同发酵时间点微生物发挥的功能也不同。结论 建曲发酵后的真菌主要为溜曲霉和小菌核曲霉,细菌主要为红串红球菌和类肠膜魏斯菌,不同发酵时间点其菌群相对丰度和功能有所不同,为后续建立稳定可控的建曲现代发酵工艺提供参考依据。     

基于LC-MS的干旱胁迫下党参代谢组学分析

目的 通过对采收期党参根部代谢组测定,探索党参适应干旱的生物学机制。方法 利用非靶向代谢组学液相色谱-质谱法（LC-MS）,通过多元统计分析、单变量统计分析和代谢通路富集分析,对党参干旱胁迫下差异代谢物进行筛选。结果 ①轻度干旱胁迫（LD）与正常（CK）组显著差异代谢物274个,其中142个上调,132个下调;中度干旱胁迫（MD）与CK组显著差异代谢物284个,其中157个上调,127个下调;重度干旱胁迫（SD）与CK组显著差异代谢物317个,其中133个上调,184个下调。②差异代谢物被注释到京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库得到82条差异代谢通路,其中鞘脂类代谢为极显著富集的差异代谢通路（P<0.01）,精氨酸和脯氨酸代谢、色氨酸代谢、丙氨酸代谢、半乳糖代谢、烟酸及烟酰胺代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、花生四烯酸代谢、亚麻酸代谢和甘油脂类代谢为显著富集的差异代谢物通路（P<0.05）。③对富集前后3个对比组的差异代谢物进行分类分析,发现主要集中在脂肪酰基、羧酸类及其衍生物、有机氧化物3类,其次在鞘脂类、吲哚类及其衍生物、有机氮化合物、甘油磷脂、嘧啶及其衍生物、类肽、甘油酯等类;与糖类相关的代谢物在党参干旱胁迫中表现为上调,脂类相关的代谢物脂肪酰基表现为下调,其余均表现为上调。结论 阐明了干旱胁迫下党参根中代谢物的变化,其中糖类和脂类相关代谢物是党参受干旱刺激后的主要产物,且此类物质可能是提高党参抵御干旱能力的主要原因,这为后期深入研究党参抗旱机制奠定基础。     

海洋真菌链孢粘帚菌（Gliocladium catenulatum T31）抗肿瘤活性代谢产物

 目的 阐明海洋真菌链孢粘帚菌（Gliocladium catenulatum T31）的抗肿瘤活性次级代谢产物。方法 摇床发酵培养生产菌T31,活性跟踪分离纯化T31发酵液中的活性单体化合物,并根据理化性质和光谱分析（ESI MS、UV、IR、NMR等）鉴定单体化合物结构;采用细胞形态镜检、MTT方法评价单体化合物对人类慢性髓性白血病K562细胞的抗肿瘤活性。结果 从链孢粘帚菌（Gliocladium catenulatum T31）发酵液中分离并鉴定了7个单体化合物,分别为3个甾醇类化合物ergosta-5,7,22-triene-3β-ol（1）、ergosta-6,22-diene-3β-ol（2）、ergosterol peroxide（3）和四个蒽醌类化合物emodin（4）、citreorosein（5）、isorhodoptilometrin（6）和lunatin（7）,化合物1~7对K562细胞显示不同程度的细胞增殖抑制活性,其中,化合物4~7对K562细胞的IC₅₀分别为1.09、1.24、13.6和8.92 μmol·L-1。结论 海洋真菌链孢粘帚菌（Gliocladium catenulatum T31）的主要抗肿瘤活性次级代谢物是甾醇类和蒽醌类化合物。     

基于高通量测序研究番红花不同生长期根际土壤中真菌群落结构及多样性

目的 以新疆番红花Crocus sativus L.不同生长期的根际土壤为材料,研究土壤真菌群落结构与多样性。方法 提取番红花不同生长期的根际土壤总DNA,应用Illumina NovaSeq 6000高通量测序平台进行测序分析。结果 对番红花3个生长期[生长初期（S1）、生长中期（S2）、生长后期（S3）]的3组样本进行高通量测序,共获得4252个操作分类单元（OTUs）,包含9个真菌门,并对检测到的真菌属中相对丰度前20的真菌属进行了分析。结果发现,不同生长期番红花优势真菌群落共有门属分别是子囊菌门（Ascomycota）、被孢霉门（Mortierellomycota）、链格孢属（Alternaria）、球腔菌属（Mycosphaerella）和爪甲白癣菌属（Arthrographis）。3个生长期的真菌组成有所不同,S1和S2生长期特有的属分别是平脐蠕孢属（Bipolaris）和谷菌根菌属（Archaeorhizomyces）,S3有2个特有的属和1个特有的门,分别是棘壳孢属（Setophoma）、枝孢属（Cladosporium）和油壶菌门（Olpidiomycota）。Alpha和Beta多样性分析结果表明,不同生长期番红花根际土壤真菌群落赵氏指数（Chao1）、香农指数（Shannon）和观察到的种类数（Sobs）差异有统计学意义,样本中真菌物种组成存在一定差异。结论 利用高通量测序技术可快速、全面地获得土壤真菌组成信息。番红花不同生长时期根际土壤中真菌群落结构与多样性存在差异,菌群多样性随番红花的生长呈现不断上升的趋势;在番红花不同的生长期尤其是S1土壤样本中均检测到相对丰度较高的有害菌链格孢菌属和被孢霉门。为进一步揭示新疆番红花S1易发生种球腐烂病害,以及根际真菌的多样性与番红花球茎内生真菌、病原菌相互作用机制研究提供新思路。     

天麻褐腐病与土壤微生物菌群结构的关联分析

目的:研究褐腐天麻与土壤微生物菌群的组成及变化,阐述天麻种植过程中天麻褐腐病与土壤微生物菌群之间的关系,为揭示天麻褐腐病的原因提供理论基础。方法:采用内转录间隔区(ITS)和16S rDNA高通量测序技术,分别对健康、褐腐天麻及其周际土壤中真菌和细菌的微生物多样性、群落组成结构、群落结构相似性进行分析。结果:与健康组相比,褐腐天麻及其土壤中真菌和细菌分类单元(OTUs)数目均有增加,且土壤中真菌、细菌丰富度和多样性显著增高,褐腐天麻真菌多样性显著降低,细菌多样性显著增高。在属分类水平上,健康天麻及其周际土壤中的优势真菌属为被孢霉属Mortierella,该属在褐腐天麻及其土壤中分别减少7.62%和15.75%,优势细菌属为慢生根瘤菌属Bradyrhizobium和Burkholderia-Paraburkholderia;褐腐天麻及其周际土壤中的优势真菌属为土赤壳属Ilyonectria,优势细菌属分别为沙雷氏菌属Serratia和慢生根瘤菌属Bradyrhizobium。结论:褐腐天麻与其周际土壤中真菌菌群具有极高相似度,说明土壤微生物真菌群落变化在一定程度上造成天麻褐腐病的发生,其中褐腐天麻真菌群落组成中致病真菌土赤壳属Ilyonectria成为优势菌属,推测该菌属可能含有天麻褐腐病的致病菌。     

草甘膦对党参生长 根腐病及根际土壤微生物的影响

目的 探究除草剂草甘膦对党参生长、根腐病发生和药用成分的影响及可能的土壤微生态机制。方法 调查同一地块中草甘膦处理组和对照组党参的存苗数、鲜质量和发病情况,采用高效液相色谱法（HPLC）测定党参炔苷含量、分光光度法测定多糖含量,采用扩增子技术测定根际土壤微生物群落变化。结果 施用草甘膦能够显著降低党参的存苗数（P<0.05）,对党参地上部生长有一定抑制作用;根腐病发病率及病情指数高于对照组,分别增加了34.51%和34.81%（P<0.05）;党参炔苷和多糖的含量降低。另外,草甘膦处理对党参根际土壤微生物的多样性及真菌群落结构影响较小,但细菌群落中伯克霍尔德氏菌目（Burkholderiales）和鞘脂单胞菌目（Sphingomonadales）显著增加（P<0.05）。结论 施用草甘膦对党参生长有一定抑制作用,导致根腐病加重,这可能与部分根际细菌的相对丰度变化有关。     

冬虫夏草促繁地土壤真菌种群结构的变性梯度凝胶电泳技术分析

目的 采用变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术对冬虫夏草促繁地土壤真菌多样性进行初步研究。方法 利用PCR方法选择特异性引物ITS3-GC和ITS4扩增ITS rDNA基因的ITS2片段,结合DGGE分离技术,并借助生物信息学软件进行分析。结果 所测的土壤样品中真菌ITS2基因序列与GenBank已报道的丝盖伞属Inocybe (Fr.) Fr.、口蘑属Tricholoma (Fr.) Staude、根肿黑粉菌属Entorrhiza C.A. Weber及未确定的子囊菌Ascomycota、土壤真菌等的序列相似性较高,土壤真菌种群结构相似性仅有19.4%～50.1%。结论 冬虫夏草促繁地土壤真菌多样性丰富。     

天麻破壁粉、冻干粉对戊四唑诱导癫痫大鼠海马组织Bcl-2、Bax、Caspase-3、GAT-1 mRNA及蛋白表达对比研究＊

目的 通过研究天麻（普通粉、破壁粉、冻干粉）对戊四唑诱导癫痫大鼠海马组织B细胞白血病-淋巴瘤-2基因（B-cell leukemia-iymphoma-2，Bcl-2），B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因（Bcl-2-associated X protein gene，Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和γ-氨基丁酸转运体1（GAT-1）基因和蛋白的表达影响对天麻神经保护作用机制进行初步探讨，并对三种加工方式的天麻效应差异性进行对比研究。方法 以SD大鼠为研究对象，建立戊四唑癫痫模型。随机分为12组，正常组，戊四唑组，丙戊酸钠组，天麻（普通粉、破壁粉、冻干粉）分别对应的低、中、高剂量组（0.5、1.0、2.0 g·kg^-1）连续灌胃10 d。用荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测三种加工方式的天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1基因表达的情况；用蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3和GAT-1蛋白表达情况。结果 模型组癫痫发作强度均为Ⅵ级，表明造模成功。与模型组比较，丙戊酸钠组及天麻普通粉、破壁粉、冻干粉各剂量组癫痫潜伏时间显著延长（P < 0.05），癫痫持续时间显著缩短（P < 0.05）。与丙戊酸钠组比较，天麻普通粉高剂量组、天麻破壁粉高剂量组癫痫潜伏时间无显著差异（P < 0.05），而天麻冻干粉高剂量组癫痫潜伏时间显著延长（P < 0.05），且持续时间与之无显著性差异（P < 0.05）。与正常组比较，模型组Bax、Caspase3和GAT-1mRNA及蛋白相对表达量显著升高（P < 0.05），Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量显著下降（P < 0.05）；与模型组比较，丙戊酸钠组和天麻各组可显著降低Bax、Caspase3和GAT-1 mRNA及蛋白相对表达量（P < 0.05），显著升高Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量（P < 0.05）。结论 天麻冻干粉高剂量组效果最佳，天麻破壁粉高剂量组次之，最后天麻普通粉高剂量组。天麻对神经的保护具有剂量依赖性，并与天麻不同加工方式相关，其作用机制与调节Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1mRNA及蛋白表达水平有关。