加味温胆汤调控NF-κB/NLRP3通路干预炎性反应抗大鼠糖尿病动脉粥样硬化的机制

目的 通过观察加味温胆汤对糖尿病动脉粥样硬化模型大鼠核转录因子-κB（NF-κB）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）通路及其相关炎性因子表达的影响,探讨该方防治糖尿病动脉粥样硬化的机制。方法 将54只SPF级大鼠随机分为空白组、模型组、阿托伐他汀组、加味温胆汤高、中、低剂量组,除空白组外,其余各组均采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）+高糖高脂饲料喂养法建立糖尿病动脉粥样硬化大鼠模型,空白组注射等剂量的柠檬酸缓冲液并喂养普通饲料。加味温胆汤高、中、低剂量组给药剂量分别是18.2、9.1、4.55 g·kg^-1·d^-1,阿托伐他汀组给药剂量为0.9 mg·kg^-1·d^-1,连续给药4周,每隔6 d检测1次大鼠尾静脉血糖,经末次给药后,麻醉取材。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清白细胞介素-18（IL-18）、C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）含量。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测腹主动脉NF-κB p65、NLRP3、ICAM-1蛋白相对表达水平。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测腹主动脉NLRP3、白细胞介素-1β（IL-1β）mRNA表达水平。苏木素-伊红（HE）染色法观察胸主动脉病理变化。结果 与空白组比较,模型组大鼠血清IL-18、CRP、TNF-α、ICAM-1及血糖含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,主动脉NF-κB p65、NLRP3、ICAM-1蛋白表达显著升高（P<0.01）,NLRP3、IL-1β mRNA表达明显升高（P<0.05）。与模型组比较,加味温胆汤组能明显降低大鼠血清IL-18、CRP、TNF-α、ICAM-1及血糖的水平（P<0.05,P<0.01）,显著降低腹主动脉NF-κB p65、NLRP3、ICAM-1蛋白表达水平（P<0.01）,明显降低腹主动脉NLRP3、IL-1β mRNA表达水平（P<0.05,P<0.01）,明显改善大鼠胸主动脉病理损伤。结论 加味温胆汤可能通过调控NF-κB/NLRP3信号通路减少炎性因子释放和黏附,调节血糖,发挥抗糖尿病动脉粥样硬化作用。     

甘草附子汤调控NF-κB信号通路抑制胶原诱导型关节炎小鼠骨质破坏的作用

目的 探讨甘草附子汤（GCFZ）抑制胶原诱导型关节炎（CIA）小鼠模型骨质破坏的作用机制。方法 将30只雄性DBa/1J小鼠随机分为5组,分别为正常组、CIA组、甘草附子汤低剂量组（GCFZ-L,2.4 g·kg^-1）、甘草附子汤高剂量组（GCFZ-H,4.8 g·kg^-1）和甲氨蝶呤组（MTX,1 mg·kg^-1）,每组6只,二次免疫法诱导CIA模型;观察记录各组小鼠关节炎指数,苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠踝关节组织病理学变化;番红-固绿染色检测小鼠踝关节软骨破坏情况;显微计算机断层扫描（Micro-CT）扫描检测小鼠踝关节骨质破坏的情况;免疫组化法观察踝关节核转录因子-κB p65（NF-κB p65）、磷酸化核转录因子-κB p65（p-NF-κB p65）、核转录因子-κB抑制蛋白激酶α/β（IKKα/β）、磷酸化核转录因子-κB抑制蛋白激酶α/β（p-IKKα/β）的表达情况。结果 与正常组比较,CIA组关节肿胀明显,关节炎指数评分显著升高（P<0.01）;与CIA组比较,GCFZ-L组、GCFZ-H组和MTX组均能显著抑制关节肿胀,并且明显降低关节炎指数评分（P<0.05,P<0.01）。HE染色和番红-固绿染色显示,与CIA组比较,治疗组（GCFZ-L组、GCFZ-H组和MTX组）能明显抑制滑膜的侵袭,并且关节软骨破坏明显减轻。Micro-CT扫描分析显示,与CIA组比较,治疗组（GCFZ-H组和MTX组）骨破坏评分显著降低（P<0.01）。免疫组化结果显示,与正常组比较,CIA组NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα/β和p-IKKα/β积分吸光度均显著升高（P<0.01）;而与CIA组比较,治疗组（GCFZ-H组和MTX组）NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα/β和p-IKKα/β积分吸光度均明显降低（P<0.05,P<0.01）;而GCFZ-L组仅NF-κB p65积分吸光度显著降低（P<0.01）。结论 甘草附子汤可能通过调控NF-κB信号通路来抑制CIA小鼠的骨质破坏。     

基于NF-κB炎症通路探讨五味消毒饮对IgA肾病大鼠的抗炎机制

目的 观察五味消毒饮对免疫球蛋白（Ig）A肾病（IgAN）大鼠核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的影响,并探讨其治疗IgA肾病的作用机制。方法 将40只SD大鼠随机分为正常组,模型组,贝那普利组（10 mg·kg·d^-1）,五味消毒饮组（2.75 g·kg·d^-1）,每组10只。采用牛血清白蛋白（BSA）灌胃,四氯化碳（CCl₄）皮下注射以及脂多糖（LPS）尾静脉注射方法共9周建立IgAN大鼠模型,各组给予相应剂量的药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水,连续给药28 d。检测大鼠24 h尿蛋白（UTP）,血肌酐（SCr）,尿素氮（BUN）,血清白蛋白（ALB）水平,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）的含量,苏木素-伊红（HE）染色,免疫荧光及透射电镜观察肾脏病理改变,免疫组化法（IHC）,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测肾组织中IL-6,IκB激酶β（IKKβ）,磷酸化IκB激酶β（p-IKKβ）,NF-κB抑制蛋白α（IκBα）,磷酸化NF-κB抑制蛋白α（p-IκBα）,NF-κB p65,磷酸化NF-κB p65（p-p65）的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠UTP水平显著升高（P<0.01）,肾小球系膜细胞增生,系膜基质增多,系膜增厚,电子致密物沉积增多,大量IgA沉积于肾小球系膜区并呈现不规则颗粒及团块状分布;血清中TNF-α,IL-1β,IL-6水平显著升高（P<0.01）;肾组织中IL-6,IKKβ,p-IKKβ、IκBα,p-IκBα,NF-κB p65,p-p65的表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较,各给药组大鼠UTP水平显著降低（P<0.01）,肾组织损伤情况均有所减轻;血清中TNF-α,IL-1β,IL-6水平显著降低（P<0.01）;肾组织中IL-6,IKKβ,p-IKKβ,IκBα,p-IκBα,NF-κB p65,p-p65的表达显著降低（P<0.01）。各组间SCr,BUN,血清白蛋白相比无明显差异。结论 五味消毒饮可降低IgAN大鼠的蛋白尿,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路及其相关炎症因子的过度表达有关。     

风湿宁胶囊对类风湿关节炎风寒湿痹动物模型的关节保护及抗炎作用

目的:从抗炎及关节保护方面探讨风湿宁(FSN)胶囊治疗类风湿性关节炎(RA)的药物作用机制。方法:将120只雄性新西兰白兔随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组、风湿宁低、中、高剂量组,每组20只。除正常组外,其余各组建立胶原诱导性关节炎(CIA)加风寒湿刺激的风寒湿痹动物模型,造模成功以后,风湿宁低、中、高剂量组分别按剂量0.33,0.66,1.32 g·kg~(-1)给予风湿宁胶囊水溶液,甲氨蝶呤组给予1.0 mg·kg~(-1)的甲氨蝶呤片水溶液,正常组灌胃生理盐水,各组按剂量4 m L·kg~(-1)灌胃,每日1次,连续7 d。观察风湿宁胶囊对RA白兔风寒湿痹模型的一般情况、关节肿胀程度,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测各组关节滑膜组织炎症因子白细胞介素(IL)~(-1)β,IL-6,肿瘤坏死因子(TNF)-α信使核糖核酸(mRNA)的表达量及核转录因子-κB(NF-κB)受体激活剂配体(RANKL)mRNA的表达量。结果:风湿宁胶囊可明显改善RA兔生存状态,减轻RA兔后肢膝关节的肿胀,降低膝关节表面温度和关节炎积分,能够显著降低RA兔滑膜组织IL~(-1)β,IL-6,TNF-α,RANKL mRNA的表达。结论:风湿宁胶囊具有抑制关节滑膜组织中炎症因子和RANKL的表达的作用,可有效减轻RA的炎症反应和骨质破坏,从而对RA取得疗效。     

基于NF-κB信号通路探讨苓桂术甘汤对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的抗炎保护作用

目的 观察苓桂术甘汤对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）模型小鼠的疗效及相关作用机制。方法 将72只7周龄SPF级C57BL/6小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、地塞米松组（5 mg·kg^-1）、苓桂术甘汤高、中、低剂量组（9.36、4.68、2.34 g·kg^-1）,每组12只。除正常组外,其余各组采用鼻滴法予LPS（50 μg/只）构建小鼠ALI模型。给药组分别在造模前连续灌胃给药7 d。造模后12 h取小鼠肺组织,测定双肺湿/干质量比（W/D）;苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理形态学变化;支气管肺泡灌洗液（BALF）采用细胞计数仪计算总细胞数,瑞氏吉姆萨染色检测炎性细胞的分类（中性粒细胞、巨噬细胞）与数量;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测BALF中炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测核转录因子-κB（NF-κB）炎症通路中NF-κB抑制蛋白α（IκBα）、NF-κB p65及二者磷酸化蛋白的表达,并计算磷酸化蛋白/总蛋白比值。结果 与正常组比较,模型组小鼠肺组织严重损伤,肺泡完整结构被破坏,肺泡壁增厚,大量炎性细胞与红细胞浸润,肺水肿显著加重（P<0.01）。BALF中总细胞与炎性细胞数量,IL-6、TNF-α及肺组织NF-κB p65、IκBα磷酸化蛋白表达显著上调（P<0.01）;与模型组比较,苓桂术甘汤高、中、低剂量组与地塞米松组小鼠肺损伤明显缓解,肺水肿显著减轻（P<0.01）。BALF中总细胞与中性粒细胞数量,IL-6、TNF-α及肺组织NF-κB p65、IκBα磷酸化蛋白表达显著下调（P<0.01）,巨噬细胞数量明显减少（P<0.05）。结论 苓桂术甘汤对LPS-ALI小鼠具有抗炎保护作用,能有效减轻炎症、利水消肿,其机制可能与抑制NF-κB通路活化有关。     

治尪汤联合甲氨蝶呤调节RANKL/OPG通路改善胶原诱导关节炎大鼠骨破坏的作用机制

目的 探究治尪汤联合甲氨蝶呤改善胶原诱导关节炎模型（CIA）大鼠的骨破坏作用及机制。方法 SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,甲氨蝶呤组（1.5 mg·kg^-1）,甲氨蝶呤+治尪汤低（40.8 g·kg^-1）,高（102.0 g·kg^-1）剂量组。除正常组外,其余大鼠分别于第1,7天尾部注射浓度为2 g·L^-1的Ⅱ型胶原乳剂50 μL建立CIA模型;第8天开始连续给药21 d,每7 d检测1次体质量、足趾厚度,进行关节炎指数（AI）评分,酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-6（IL-6）,白细胞介素-1β（IL-1β）含量,抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测踝关节破骨细胞的数量,免疫组化（IHC）,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测踝关节核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL）,骨保护素（OPG）的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量显著降低（P<0.01）,足趾厚度显著增加（P<0.01）,踝关节AI评分显著增加（P<0.01）,血清TNF-α,IL-6,IL-1β含量显著升高（P<0.01）,踝关节破骨细胞数量显著增加（P<0.01）,踝关节RANKL mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01）,OPG mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.05）,RANKL/OPG显著升高（P<0.01）。与模型组比较,甲氨蝶呤+治尪汤低、高剂量可改善大鼠体质量,降低足趾厚度,AI评分,RANKL mRNA和蛋白表达并增加OPG mRNA和蛋白表达,使RANKL/OPG降低（P<0.05,P<0.01）,且甲氨蝶呤+治尪汤高剂量效果最好,甲氨蝶呤+治尪汤低剂量次之,甲氨蝶呤再次之。结论 治尪汤联合甲氨蝶呤能更好地改善类风湿关节炎的骨破坏,可能是通过抑制RANKL/OPG通路实现的,本研究为中西医结合方案治疗类风湿关节炎骨破坏提供了实验基础。     

秦艽不同配伍对风寒湿痹类风湿关节炎大鼠类风湿因子，C-反应蛋白及核转录因子-κB的影响

目的:观察秦艽不同配伍药对对风寒湿痹型类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠血清类风湿因子(rheumatoid factor,RF),C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及踝关节核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的影响。方法:选取80只SD大鼠并随机分为正常组,Ⅱ型胶原组,风寒湿病证模型组,雷公藤多苷组,单味秦艽组,秦威组(秦艽配伍威灵仙),秦桑组(秦艽配伍桑寄生),秦防组(秦艽配伍防己),每组10只。注射Ⅱ型胶原乳剂并施加风寒湿刺激制备风寒湿RA大鼠模型。模型建立完成后正常组,Ⅱ型胶原组,风寒湿病证模型组给予生理盐水灌胃,各给药组给予相应药液。实验过程中,每3 d测量一次大鼠左后足跖厚度,计算足跖肿胀度;实验第38天对各组大鼠进行关节炎指数(arthritis index,AI)评分;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清RF,CRP含量;蛋白免疫印迹技术检测踝关节NF-κB的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测踝关节NF-κB mRNA表达。结果:与正常组比较,Ⅱ型胶原组及风寒湿病证模型组足跖肿胀度,AI评分,血清RF,CRP水平,踝关节NF-κB蛋白表达水平及NF-κB mRNA水平显著升高(P0.01);与风寒湿病证模型组比较,各中药组足跖肿胀度,AI评分,血清RF,CRP水平,踝关节NF-κB蛋白表达水平及NF-κB mRNA水平均有所降低(P0.05,P0.01),其中秦威组降低最明显。结论:平温相配的秦威组对于风寒湿痹型类风湿关节炎的疗效优于平平相配的秦桑组、平寒相配的秦防组及单味秦艽组,实验结果与中医"疗寒以热药"的原则基本相符。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨通络蠲痹颗粒对骨关节炎炎症损伤和细胞凋亡的影响

目的 观察通络蠲痹颗粒对膝骨关节炎（KOA）兔软骨细胞凋亡及Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的影响,研究其防治KOA的作用机制。方法 30只新西兰兔按随机数字表法分为假手术组、模型组、通络蠲痹颗粒低、高剂量组（4.1、8.2 g·kg^-1·d^-1）、塞来昔布组（10.9 mg·kg^-1·d^-1）,每组6只。采用内侧半月板失稳法（DMM）建立兔KOA模型,造模6周后给药,干预8周,每日1次。用苏木素-伊红（HE）染色和番红O-固绿染色观察关节软骨病理改变;原位末端标记法（TUNEL）荧光染色检测关节软骨细胞凋亡;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测关节液中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组关节软骨退变严重,Mankin评分升高（P<0.01）,关节液IL-1β、TNF-α含量升高（P<0.01）,软骨细胞凋亡数量增加（P<0.01）,软骨组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA和蛋白表达上调（P<0.01）,而Bcl-2的mRNA及蛋白表达下调（P<0.01）;与模型组比较,通络蠲痹颗粒低、高剂量组软骨退变得到改善,Mankin评分降低（P<0.01）,IL-1β、TNF-α含量降低（P<0.01）,软骨细胞凋亡数量减少（P<0.01）,软骨组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA和蛋白表达下调（P<0.01）,Bcl-2的mRNA及蛋白表达上调（P<0.01）,且在上述观察指标中通络蠲痹颗粒高剂量组均明显优于低剂量组。结论 通络蠲痹颗粒可抑制KOA兔关节软骨细胞凋亡,改善软骨退变,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路介导的炎症反应有关。     

基于TNF/NF-κB信号通路探讨枳实薤白桂枝汤减轻心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制

目的 从肿瘤坏死因子/核转录因子-κB（TNF/NF-κB）信号通路探讨枳实薤白桂枝汤（ZXGT）对异丙肾上腺素（ISO）诱导的大鼠心肌梗死（MI）的影响。方法 将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、培哚普利组（4 mg·kg^-1）、ZXGT组（24.4 g·kg^-1）、ZXGT+抑制剂组（ZXGT,24.4 g·kg^-1;TNF-α受体抑制剂R7050,5 mg·kg^-1）、抑制剂组（R7050,5 mg·kg^-1）,每组8只;各组大鼠预防性灌胃给药7 d,且ZXGT+抑制剂组、抑制剂组在第6、第7天给予腹腔注射抑制剂R7050 5 mg·kg^-1,除空白组外其余各组腹腔注射ISO,连续2 d,诱导大鼠MI模型;于实验第7天注射ISO 30 min后麻醉大鼠,检测心电图（ECG）观察ST段抬高值;采用小动物超声心动图检测大鼠心脏整体轴向应变（GLS）和心脏同步性;腹主动脉取血测定血清心肌肌钙蛋白T（cTnT）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）水平及炎症因子TNF-α、白细胞介素-1β（IL-1β）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织病理变化;免疫组化（IHC）法检测心脏组织TNF-α、NF-κB p65、磷酸化（p）-NF-κB p65蛋白表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心脏组织肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）、肿瘤坏死因子受体相关因子2（TRAF2）、转化生长因子激酶1（TAK1）、NF-κB抑制蛋白α（IκBα）、p-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠ECG ST段显著抬高（P<0.01）,超声心动图中GLS增大及同步性显著降低（P<0.01）,病理组织学显示心肌大面积坏死,血清cTnT、CK-MB、LDH、TNF-α、IL-1β水平显著升高（P<0.01）,心肌组织中的TNF-α、TNFR1、TRAF2、TAK1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,IκBα蛋白表达水平显著降低（P<0.01）;与模型组比较,培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组大鼠的ECG ST段抬高值明显降低（P<0.05,P<0.01）,GLS和心脏同步性改善（P<0.05,P<0.01）,心肌坏死面积减小,血清cTnT、CK-MB、LDH、TNF-α、IL-1β水平均下调（P<0.01）,且ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组均下调模型大鼠升高的TNF-α、TNFR1、TRAF2、TAK1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平和上调IκBα的表达水平（P<0.05,P<0.01）;与ZXGT组比较,ZXGT+抑制剂组和抑制剂组差异无统计学意义。结论 ZXGT能保护ISO诱导的大鼠MI损伤,改善心脏功能,其作用机制可能与调控TNF/NF-κB信号通路有关。     

基于TLR2/p38 MAPK/NF-κB信号通路探讨独活寄生汤对类风湿性关节炎大鼠的抗炎作用及机制

目的 探讨独活寄生汤对胶原诱导性关节炎（CIA）模型大鼠的抗炎作用及其对Toll样受体2（TLR2）/p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的影响。方法 将48只雄性SD大鼠,随机分为以下6组（n=8）,正常组、模型组、甲氨蝶呤组、独活寄生汤低、中、高剂量组。采用胶原抗体诱导法于大鼠尾根部注射牛Ⅱ型胶原蛋白建立CIA大鼠模型,模型建立成功后进行灌胃给药。甲氨蝶呤组每次给予2.0 mg·kg^-1甲氨蝶呤,每周3次;独活寄生汤低、中、高剂量组每次给予3.8、7.6、15.2 g·kg^-1·d^-1,连续灌胃治疗28 d;正常组和模型组给予等体积生理盐水。通过记录大鼠体质量,观察大鼠足肿胀度,测定关节炎指数、免疫器官指数,微循环检测仪检测大鼠微循环指标变化,苏木素-伊红（HE）染色检测大鼠滑膜组织病理形态的改变及流式细胞术检测滑膜细胞凋亡率以明确独活寄生汤对类风湿性关节炎的治疗作用,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、IL-17A、γ干扰素（IFN-γ）水平变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测TLR2、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量显著降低（P<0.01）,足肿胀度、关节炎指数及免疫器官指数显著升高（P<0.01）,微血管综合评分及血管阻力显著提高（P<0.01）,病理切片可观察到滑膜组织增生明显、炎性细胞大量浸润,血清中TNF-α、IL-1β、IL-17A和IFN-γ表达及滑膜组织TLR2、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK的表达水平均显著升高（P<0.01）。与模型组比较,独活寄生汤低、中、高剂量组大鼠体质量显著升高（P<0.01）,足肿胀度、关节炎指数及免疫器官指数明显下降（P<0.05,P<0.01）,微血管综合评分及血管阻力明显下降（P<0.05,P<0.01）,滑膜组织病理学损伤情况明显好转,滑膜细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,血清中TNF-α、IL-1β、IL-17A和IFN-γ水平明显下降（P<0.05,P<0.01）,滑膜组织TLR2、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK的表达水平均明显下降（P<0.05,P<0.01）。结论 独活寄生汤可能通过调节TLR2/p38 MAPK/NF-κB信号通路缓解CIA大鼠体内炎症反应,从而发挥其抗类风湿性关节炎作用。     

基于网络药理学与GEO生信统计的瘀血痹抗类风湿性关节炎的活性成分及作用机制研究

目的 基于网络药理学与基因表达综合（Gene Expression Omnibus,GEO）数据库挖掘初步揭示瘀血痹胶囊发挥抗类风湿性关节炎（RA）的潜在活性成分及作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、GeneCards数据库筛选出瘀血痹胶囊活性化学成分、作用靶点及RA靶点,采用STRING 11.0数据库对其交集靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络构建,采用Bioconductor数据库进行基因本体（GO）、京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析;通过GEO数据库下载基因芯片数据（GSE55457）,经过基因探针富集分析（GSEA）筛选出差异表达基因,联用分子对接对差异基因与排名靠前的活性化合物进行虚拟验证。结果 筛选出瘀血痹胶囊128个有效成分和85个与RA的交集靶点,其中度值排名靠前的化合物有槲皮素、木犀草素和山柰酚等。GO功能富集结果显示,RA靶点参与生物过程、分子功能、细胞组分的多种调控过程。KEGG通路富集结果显示,炎性因子和受体信号通路可能为瘀血痹胶囊对RA发挥作用的主要通路。差异表达基因与交集靶点交集有白细胞介素-6（IL-6）、DNA修复酶1（PARP1）、核转录因子-κB激酶亚基β抑制剂（IKBKB）、雄激素受体（AR）、半胱氨酸蛋白酶-3（CASP3）、表皮生长因子受体（EGFR）、丝裂原活化蛋白激酶8（MAPK8）、多不饱和脂肪酸5-脂氧合酶（ALOX5）等。分子对接结果显示,β-谷甾醇、鞣花酸、7-O-甲基异鼠李糖醇、木犀草素、槲皮素、异鼠李素、山柰酚、β-胡萝卜素等与差异性基因对接活性较好。结论 瘀血痹胶囊中的β-谷甾醇、木犀草素、槲皮素等核心化合物可能是通过作用于IL-6、PARP1、IKBKB、AR、CASP3等靶点对RA起治疗作用,为瘀血痹胶囊后续深入研究及临床应用提供了数据支持。     

羟基积雪草苷对胶原关节炎大鼠肠道黏膜免疫的影响

目的:考察胶原关节炎大鼠肠道黏膜免疫的改变及羟基积雪草苷的调节作用。方法:在Wistar大鼠复制胶原关节炎模型,其后将大鼠分为正常对照组、模型组和羟基积雪草苷组,灌胃给药,连续21 d。ELISA法测定大鼠肠内容物中s Ig A含量及小肠组织中IFN-γ含量。流式细胞术检测小肠上皮内及固有层细胞中CD4+和CD8+T细胞的比例,计算CD4+/CD8+比值。实时定量PCR法检测小肠组织中CD80、CD86、IL-6、IL-12及Foxp3 mRNA的表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肠内容物中s Ig A含量及小肠组织中IFN-γ含量显著升高,小肠上皮内及固有层T细胞中CD4+/CD8+比值上升,小肠组织中CD80、CD86、IL-6和IL-12 mRNA表达显著上调,而Foxp3 mRNA的表达变化无统计学意义。羟基积雪草苷灌胃给药可降低模型大鼠肠内容物s Ig A和小肠组织IFN-γ含量、CD4+/CD8+比值及CD80、CD86、IL-6和IL-12 mRNA的表达,显著上调Foxp3 mRNA的表达。结论:关节炎状态下大鼠肠道黏膜免疫应答上调,抗原呈递细胞异常活化且免疫耐受状态遭到破坏,羟基积雪草苷可下调关节炎大鼠肠道黏膜免疫应答,促进肠道黏膜免疫耐受的形成和维持。     

芍芪多苷对大鼠胶原性关节炎的治疗作用

 目的研究芍芪多苷(SQDG)对大鼠胶原性关节炎(CIA)的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法在建立鸡Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎模型基础上,通过检测足爪容积、关节炎评分和未致炎侧大鼠的足爪压痛观察和评价关节炎症的发生情况;观察胸腺指数、脾脏指数的变化;MTT法检测T、B细胞增殖反应;小鼠淋巴细胞增殖法检测IL-1、IL-2活性;ELISA法检测血中抗Ⅱ型胶原抗体。结果大鼠免疫后第14天出现足爪红肿,继发性炎症高峰期在第22天,炎症在第26天后开始减轻。SQDG(21.25,42.5,85mg·kg^-1)、白芍总苷(TGP,50mg·kg^-1)、黄芪总皂苷(ASTs,7mg·kg^-1)ig给药能不同程度的减轻CIA大鼠的关节炎症,使增高的大鼠胸腺指数和脾脏指数降低;进一步研究表明,SQDG、TGP、ASTs能使CIA大鼠升高的ConA诱导的T细胞增殖和LPS诱导的B细胞增殖反应下降;下调升高的脾细胞IL-2水平和升高的腹腔巨噬细胞IL-1水平;并使CIA大鼠血清中升高的抗CⅡ抗体下降。结论SQDG对大鼠CIA具有较好的治疗作用,其机制与其调节异常免疫功能有关。     

葛根素衍生物4ac对胶原诱导性关节炎大鼠血液流变学的影响

目的:观察葛根素衍生物4ac对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)大鼠的治疗作用及作用机理。方法:用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠关节炎模型,观察4ac对大鼠关节积分和血液流变的影响。结果:4ac高剂量组与模型组相比,可显著改善大鼠的关节积分与血液流变指标。结论:4ac对大鼠胶原诱导性关节炎具有较好的治疗作用,其机制可能与改善大鼠的血液流变学指标有关。     

直接灸对大鼠胶原诱导性关节炎的影响

在大鼠背部正中和尾根部多点皮内注射适量牛Ⅱ型胶原,造成胶原诱导性关节炎（CAI）模型,观察不同时期直接灸督脉经穴对此模型的影响。结果显示：在关节炎发病前施灸,对大鼠CIA的发生表现出明显的抑制,平均关节炎指数和组织病理学损害指数均显著降低;在关节炎发病期间和关节炎已形成后施灸,对大鼠CIA的病理变化均未产生明显的影响。提示：直接灸对大鼠CIA具有明显的预防作用,而其治疗作用不明显。     

腹部穴位针刺对CIA大鼠模型血液流变学的影响

目的:观察腹部穴位针刺对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)大鼠模型的治疗作用及血液流变学方面的作用机制。方法:用牛Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,待造模成功后取腹部中脘、下脘、气海、关元四穴进行针刺治疗,1次/天,周期21天。于治疗前1天、治疗后第7、第14、第21天测定大鼠足趾容积、关节炎指数,治疗结束后取外周血测定血液流变学指标。结果:腹部穴位针刺组足趾容积、关节炎指数、血液黏度、红细胞聚集指数水平较模型组均有明显降低(P<0.05);血液黏度与足趾容积呈正相关。结论:腹部穴位针刺对CIA大鼠模型有治疗作用,可减轻关节肿胀度,改善关节功能;其作用机制可能是通过调节红细胞的聚集、改善血液高粘状态来控制大鼠关节炎病情。     

桂枝附子汤对CIA大鼠滑膜组织中MAPK信号通路的影响

目的:探讨桂枝附子汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜组织中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法:将SD大鼠60只随机分为正常组,模型组,桂枝附子汤组(1.5,4.5,13.5 g·kg~(-1)),甲氨喋呤组,共6组;大鼠尾根部皮下注射鸡Ⅱ型胶原(chicken typeⅡcollagen,CCⅡ)乳剂制备CIA模型;自造模后第14天开始,每周观察各给药组的关节炎指数;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测滑膜组织MAPK信号转导通路中JNK,ERK,p38蛋白及相应磷酸化蛋白p-JNK,p-ERK,p-p38的表达水平。结果:CIA大鼠的足爪肿胀度和关节炎指数第7,14,21,28,35,42天个时间点均高于正常组,在给予桂枝附子汤治疗后在第14天后CIA大鼠的足爪肿胀度和关节炎指数均明显降低。桂枝附子汤能明显改善CIA大鼠滑膜增生和炎性细胞浸润,使得炎性细胞减少。与正常组p-JNK,p-ERK,p-p38比较,CIA组中的p-JNK,p-ERK,p-p38的表达水平显著增强,两组治疗间有显著性变化(P0.01);用甲氨蝶呤治疗CIA大鼠,与模型组比较其p-JNK,p-ERK和p-p38表达水平显著降低,两组治疗间有显著性变化(P0.01);用桂枝附子汤治疗CIA大鼠,与模型组相比较其p-JNK,p-ERK,p-p38明显降低,并且呈现剂量依赖性关系。结论:桂枝附子汤可抑制CIA大鼠MAPK信号转导通路的活化,从而缓解炎症症状。     

雷公藤多甙对胶原诱导型关节炎大鼠药效学研究

目的:实验观察药物雷公藤多甙(TG)对胶原诱导型大鼠关节病理学影响及放射学改变,提示药物雷公藤多甙临床治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法:采用牛Ⅱ型胶原混合弗氏不完全佐剂于Wistar大鼠尾根部注射,足肿后随机分为造模加生理盐水组、甲氨喋呤(MTX)治疗组和雷公藤多甙治疗组,取左前肢和右后肢近端第3足趾关节,运用病理切片观察各组中性粒、淋巴细胞和浆细胞浸润、滑膜细胞增生、纤维组织增生和软骨破坏情况,并用乳腺钼靶机进行X光照片,比较各组大鼠关节破坏的差异。结果:病理切片观察到各组大鼠关节中中性粒细胞、淋巴细胞及浆细胞浸润无明显差异,而雷公藤多甙组大鼠关节滑膜组织增生、纤维组织增生及软骨破坏上与造模组相比较,各组指标明显低于造模组(P<0.05),但与MTX组比较无明显差异(P>0.05)。X光片显示,雷公藤多甙大鼠关节骨侵蚀情况明显优于造模组(P<0.01),且关节间隙与造模组相比较有明显差异(P<0.05);但与MTX组相比较,骨侵蚀与关节间隙变化均无明显差异(P>0.05)。结论:药物雷公藤多甙可通过抑制滑膜增生、拮抗软骨的破坏来减轻关节炎症和关节破坏情况,最终达到控制和改善骨关节的功能活动。本实验为临床运用药物雷公藤多甙治疗RA提供了实验依据。     

海蛇乙醇提取物对胶原诱导关节炎大鼠滑膜血管生成的抑制作用

本实验观察,海蛇乙醇提取物对CIA大鼠滑膜血管内皮细胞生长因子及其受体的抑制作用,从抑制滑膜新生血管生成角度,探讨海蛇治疗类冈湿性关节炎的作用机理,为RA发病机理及治疗提供进一步实验依据。1材料与方法1.1动物选择对CⅡ敏感的健康、雄性DA大鼠40只,在中国中医科学院中医基     

复方钩藤片对自发性高血压大鼠的降压作用及其机制

目的 初步探讨复方钩藤片对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用及机制.方法 选择16周龄雄性SHR 40只分为:模型组,复方钩藤片高、中、低剂量组,替米沙坦组,另纳入8只同龄雄性WKY大鼠为正常对照组,干预持续28d.采用无创尾动脉法观察复方钩藤片对SHR的降压作用;放免分析法测定血浆醛同酮、内皮素含量;HR染色观察肾、海马组织的形态学变化.结果 复方钩藤片高、中剂量可明显降低血压、血浆醛固酮、内皮素的含量,与模型组比较有显著差异;同时可明显减轻肾、脑的病理损害.结论 复方钩藤片对SHR有降压作用,其降压机制可能与降低SHR血浆醛固酮、内皮索的含量有关.