3种方法对供水系统嗜肺军团菌、阿米巴原虫及生物膜消毒效果的比较

目的评估嗜肺军团菌(LEP)在供水系统中的生长和定植,建立试水循环系统以模拟真实供水环境,比较不同消毒方法对LEP、阿米巴原虫和生物膜的清除作用。方法中试水循环系统包括4套循环管道和盲端管道系统,试验中,对3套系统分别连续施加铜/银离子(0.4/0.04 mg/L)、二氧化氯(0.5 mg/L)和热力消毒(55℃),持续75 d;第4套作为对照,采用培养、荧光原位杂交和LIVE/DEAD染色后共聚焦激光扫描显微镜观察等技术监测浮游和生物膜内菌群变化。结果干预前LEP高度污染中试系统(水∶3.4×103/ml和生物膜:2.4×104/cm2),二氧化氯和热力消毒对生物群体(包括LEP)的消毒效果明显好于铜银离子;铜银离子对HPC的影响不明显,也不能清除生物膜,二氧化氯可有效清除盲端管内生物群体,但干预终止后LEP很快恢复至干预前水平;终止干预后2个月,热力消毒组的循环水和管壁生物膜内均未检出LEP,铜银离子组则再次出现低浓度LEP。结论本研究中,连续加热处理是控制中试水循环系统中LEP最有效的方法 ,一旦LEP定植于环境,将其清除非常困难。     

捕获空调通风系统送风中嗜肺军团菌的方法

自上个世纪70年代末在美国费城爆发军团病以来，军团菌的研究发展很快。早期的流行病学调查揭示多数军团菌病均与宾馆、工厂、医院配备空调通风系统或加湿器有关，空调通风系统的军团菌检出率，据报道达80％～90％。军团菌在空调通风系统中的灰尘和冷却塔或加湿器产生的水雾中栖息、生长繁殖，直至达到一定数量通过产生含菌气溶胶在空调通风系统中传播，导致军团病的爆发。     

嗜肺性军团菌的遗传学

嗜肺性军团菌是人类呼吸道疾病一军团病的致病菌。本菌为需氧性革兰氏阴性杆菌,广泛分布于水环境中。嗜肺性军团菌对人的致病性是由于本菌能进入肺泡巨噬细胞和单核细胞内,并且可以繁殖的缘故。由于嗜肺性军团菌也可以在实验室人工培养基上生长,故将其分类为兼性细胞内致病菌。对嗜肺性军团菌和人单核吞噬细胞间的相互作用已做过十分详细的检查。嗜肺性军     

土壤中的军团菌和嗜肺军团菌PCR检测研究

目的调查土壤中军团菌的污染状况并探讨土壤中军团菌的污染来源。方法于2009年7—9月,在江苏省南京市冷却塔水军团菌培养法阳性的公共场所集中空调冷却塔0～2m处及距离冷却塔2km的居民区分别采集20件和10件土壤样品。普通聚合酶链反应(PCR)方法扩增军团菌属5SrRNA基因,巢式PCR方法扩增嗜肺军团菌种Mip基因,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。结果冷却塔旁土壤和居民区土壤中军团菌阳性率分别是80%(16/20)和70%(7/10);嗜肺军团菌阳性率分别是55%(11/20)和0。冷却塔旁土壤中军团菌的阳性率与居民区土壤比较,差异无统计学意义(χ2=0.373,P=0.542)。结论环境土壤中存在军团菌,受集中空调冷却塔水污染的土壤中可检出嗜肺军团菌。     

从致死性肺炎病人分离的嗜肺军团菌14型

有两株可疑军团菌,一株是从死后病人的肺组织分离到的;另一株从支气管抽吸物分离到。其生长、生理和遗传学的特征表明它属于嗜肺军团菌,经血清学试验证明这两株菌同属于一种新的血清型——14型。目前美国流行的嗜肺军团菌种包括13个血清型,所有的这些血清型均能引起人患肺     

嗜肺军团菌感染相关因素研究

采用微量凝集试验测定正常人群嗜肺军团菌１－１４型抗体，１－１４型抗体任何一型阳性即判为抗体阳性。分析一般项目，生活环境因素，疾病史，动物接触史等方面因素与嗜肺军团菌抗体阳性的关系，其中文化程度，半年内急性呼吸疾病史两个因素与嗜肺军团菌有显著性联系。     

南京市土壤中嗜肺军团菌污染状况调查

目的了解南京市土壤被嗜肺军团菌污染情况。方法分别从南京市冷却塔水嗜肺军团菌培养法阳性的12个公共场所中,采集冷却塔2m范围内及距离冷却塔>2km居民区土壤样品,用PCR方法检测军团菌的5srRNA和Mip基因。结果冷却塔旁土壤样品中军团菌阳性率为75.0%(36/48),居民区土壤样品军团菌阳性率为70.8%(34/48),差异无统计学意义。冷却塔旁军团菌阳性土壤样品中嗜肺军团菌阳性率为50.0%(18/36),居民区军团菌阳性土壤样品中未检出。结论冷却塔旁土壤中嗜肺军团菌阳性率较高,存在导致军团病散发流行或暴发的潜在危险。     

深圳公共场所水系统嗜肺军团菌污染研究

目的了解深圳公共场所水系统嗜肺军团菌污染现状,为卫生监督管理提供依据。方法依照《公共场所集中空调通风系统卫生规范》附录A方法,随机采集本市177家公共场所冷却水、冷凝水、淋浴水、泳池水、生活饮用水共500份水样,检测嗜肺军团菌及其菌型。结果冷却水、冷凝水、淋浴水嗜肺军团菌检出率分别为11.0%(28/255)、1.1%(2/176)、30.0%(12/40),泳池水、生活饮用水未检出嗜肺军团菌;酒店、公共浴室、候诊室、地铁站冷却水嗜肺军团菌检出率分别为18.1%(19/105)、4.0%(1/25)、31.8%(7/22)、0.1%(1/103),差异有统计学意义(χ2=11.74,P<0.05);分离出44株嗜肺军团菌,菌型以LP1型为主,占70.5%(31/44),LP3型、LP6型分别占2.3%(1/44)、27.2(12/44)。结论本市公共场所空调冷却水和冷凝水、淋浴水受嗜肺军团菌污染,存在健康隐患,应加强空调系统和淋浴-热水系统的清洗消毒。     

慢性肺心病急性发作期嗜肺军团菌感染

报告16例慢性肺心病急性发作期军团菌感染,占同期送检的21例重症肺心病的76.5%,认为慢性肺心病急性发作期军团菌感染可能与呼吸道传播有关,疑似军团菌感染病人,应及早诊断和合理治疗。     

重庆地区261例发热待查病人嗜肺军团菌感染研究

本文报告了１９９０年１１月－１９９１年１１月重庆地区２６１例发热待查病人嗜肺军团菌Ｉ型感染研究。作者采用ＥＬＩＳＡ法测定其血清抗体效价水平。结果表明，血清抗体效价阳性有９５例，占总例数的３６％。     

中央空调冷却塔水中嗜肺军团菌的调查

目的：了解医院、宾馆空调冷却塔水中军团菌污染情况。方法：于2001年8月采集W市2家宾馆和4家医院的中央空调冷却塔水样，过滤空调冷却水的滤膜经盐酸处理后其处理液接种于GVPC平板，烛缸培养后选取可疑菌落进行生化试验、血清学试验并以PCR方法鉴定。结果：W市2家医院及1家星级宾馆的中央空调冷却塔水中分离到5株军团菌，2株为嗜肺军团菌血清1型（Lp1），2株为嗜肺军团菌血清5型（Lp5）。结论：应加强对医院、宾馆空调冷却塔水中军团菌的监测。     

酒店浴室花洒头上检出嗜肺军团菌的报告

目的 了解上海市奉贤区部分公共场所环境中军团菌的污染状况,为军团菌病的预防控制提供依据.方法 采集该区使用集中式空调系统的大型酒店及超市的环境样品共80份进行军团菌检测,将聚合酶链反应(PCR)技术和常规方法结合,样品先进行PCR检测,阳性样品再进行常规分离和鉴定.结果 从某酒店的浴室花洒环节标本中检出2株嗜肺军团菌.结论 环境中有嗜肺军团菌存在,易受到感染,存在隐患.     

广东地区环境水源和临床标本嗜肺军团菌培养与基因快速鉴定

目的建立嗜肺军团菌培养与基因快速鉴定方法,探讨广东地区环境水源和非典型肺炎患者嗜肺军团菌感染状况。方法对广东地区采集的57份中央空调冷凝塔水、30份湖泊水和53份临床标本,用本室改良BCYE-α培养基作培养和PCR试验。结果57份中央空调冷凝塔水培养检出嗜肺军团菌20株(35.1%),PCR检测LP-DNA阳性38份(66.7%);30份湖泊水细菌培养均阴性,PCR阳性4份(13.3%);53例非典型肺炎患者支气管洗液和痰液细菌培养均阴性,PCR阳性5例(9.4%);本实验设计的PCR扩增引物,只和标准嗜肺军团菌和本地分离株产生反应;不与其他病原菌扩增,而显示其良好特异性;本PCR敏感性可检出检体中0.6个细菌DNA含量。结论广东地区环境水源中普遍存在嗜肺军团菌,是引起非典型肺炎的重要病源之一。     

浙江省61株嗜肺军团菌血清1型菌株的SBT序列分型

目的了解浙江省空调冷却塔/冷凝水中嗜肺军团菌血清1型(Lp1)菌株的序列分型特征。方法选取2005～2011年间浙江省10个地区空调冷却塔/冷凝水中分离的61株Lp1型嗜肺军团菌菌株,采用欧盟军团菌感染工作组(EWGLI)军团菌序列分型(SBT)方法,PCR扩增7对管家基因,对扩增产物进行测序、比对、递交,以获取等位基因号以及SBT序列型,运用DNAsp 5.0软件对测序结果进行核苷酸多态性分析,采用SplitsTree及eBURST软件对分型结果进行聚类分析。结果 61株Lp1型嗜肺军团菌可分为11种SBT序列型,其中5株(5/61)均为新发现序列型;ST-1型在10个地区(市)的冷却塔/冷凝水中均有分布,该序列型菌株占81.9%(50/61)。7个管家基因的核苷酸多态性(Pi)范围为0.01095(mip)～0.05355(pilE)。聚类分析显示,浙江省Lp1型菌株分属多个克隆系,但主要分属ST-1序列群、ST-154序列群和ST-149三大序列群,另有1株为不属于任何序列群的单体。结论聚类分析表明浙江省空调冷却塔/冷凝水中分离的Lp1型嗜肺军团菌存在遗传多样性,序列群分布与国内部分省份的结果相似,以ST-1序列型为主。     

多重PCR快速检测空调冷却塔水中军团菌

目的 传统的方法分离培养军团菌，时间长，价格贵，培养较困难，本文建立多重PCR方法，快速检测空调冷却塔水中军团菌属和嗜肺军团菌种。方法 利用军团菌属保守基因片段16SrRNA和嗜肺军团型菌巨噬细胞感染增强因子（mip）基因序列的特异性引物，对空调冷却塔水样中分离的疑似军团菌株进行特异性扩增，并且为了增强敏感性，运用递减温度PCR扩增。结果：PCR扩增的阳性结果与生化培养和血清学鉴定为军团菌的菌株结果—致。结论：与传统的分离培养方法相比，多重PCR方法检测军团菌，快速敏感，成本低，具有较好的特异性。     

2009-2012年广西南宁市公共场所中央空调冷却水

目的了解南宁市冷却水嗜肺军团菌污染情况及基因型特征,为预防和控制军团菌病提供依据。方法 2009年1月-2012年12月,采集南宁市部分公共场所中央空调冷却水进行病原分离和基因鉴定。结果冷却水中嗜肺军团菌阳性率达21.98%,阳性率呈逐年递减趋势;除1-4月外,各月份均有嗜肺军团菌检出;脉冲场凝胶电泳(PFGE)聚类分析结果显示南宁市嗜肺军团菌1型(Lp1)的遗传相似度差异有统计学意义。结论南宁市公共场所中央空调冷却水嗜肺军团菌污染严重,菌型多样,且嗜肺军团菌1型菌株呈现遗传多样性。     

泰州市116份公共场所集中空调冷却水嗜肺军团菌监测结果

目的 为了解泰州市公共场所集中空调冷却水中嗜肺军团菌污染状况,为军团病的防控提供数据。方法 于2013-2015年采集了泰州市公共场所集中空调冷却水116份,进行了嗜肺军团菌分离培养,同时进行嗜肺军团菌核酸检测。结果 116份冷却水样本中26份分离培养出嗜肺军团菌,检出率为22.4%,荧光PCR法嗜肺军团菌核酸检测结果31份核酸阳性,检出率为26.7%。宾馆(饭店)、商场(超市)冷却水样中分离培养检出率分别为19.7%、27.5%,荧光PCR法嗜肺军团菌核酸阳性检出率分别为22.3%、35.0%。结论 泰州公共场所的集中空调冷却水嗜肺军团菌污染情况严重,已对长期在此环境下工作人群健康构成潜在威胁。     

Isolation and identification of Legionella pneumophila from material reclamation facilities

Sampling points at a material reclamation facility (MRF) were monitored over three months for the presence of Legionella spp. A number of different Legionellae were isolated and typed to identify L. pneumophila serogroup 1, the serotype which is the most common human pathogen. Phenotypic methods resulted in a total of 61 presumptive isolates of Legionella spp. Using latex agglutination, 26 out of the 61 were identified as L. pneumophila serogroup 1, 23 as L. pneumophila serogroups 2–14, and the remaining 12 were Legionella spp. However, on typing using pulse field gel electrophoresis, the 26 L. pneumophila serotype 1 isolates were a diverse group of 25 PFGE types with none persisting in the environment over time. This diversity suggests that there are a number of contamination sources for this important human pathogen in the MRF environment which constitute a risk to health for operatives in these facilities.     

Genetic diversity of Legionella pneumophila in hospital water systems

It has been shown that different patients who had acquired legionellosis in a hospital setting were infected with the same strain even years apart. However, there are no longitudinal data describing the molecular epidemiology of Legionella pneumophila strains that contaminate a water system. This raised the question if there are any shifts of L. pneumophila strains over time, or after carrying out control measures. Using genotyping on a large collection of isolates, we investigated in a retrospective study the distribution of L. pneumophila serogroups and PFGE types in six different hospitals of the University of Heidelberg between 1991 and 2001. A total of 2012 water samples were drawn for routine testing and for evaluation of control measures, 747 samples were positive for L. pneumophila. Serogroups were determined by latex agglutination or by direct fluorescence assay; and 515 L. pneumophila isolates from water systems and six from patients underwent PFGE typing after SfiI-restriction. We identified seven serogroups and 19 genotypes among the water isolates. Each hospital had one to four predominating PFGE types that were stable over the investigation period. The oldest buildings in hospitals 4 and 5 (built 1876 and 1907) had more types than the newest one (built 1986). In all hospitals PFGE types were identified that could be found only sporadically. Although each hospital had its own warm water supply, we identified types that could be found in more than one hospital. However, there was no overlap of types in buildings that were fed from different wells. Infrequently occurring nosocomial legionellosis (n=3) were only caused by predominant strains. Contamination of water supplies seemed to be dominated by stable genotypes, even after various control measures. Additional genotypes could be isolated sporadically, however, their pathogenetic relevance seemed to be questionable.