无菌检查法中不容忽视的几个问题

20 0 0年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)中无菌检查法有了较大的改进 ,为确保检查的准确性 ,现简述几个不容忽视的问题。1　实验室人员及设备要求无菌检查应由具有微生物学专业知识 ,较高水平无菌操作熟练人员或相应资格经过正式微生物培训合格的人员 ,取得主管单位授予的合格证后 ,方可进行无菌检查。无菌实验区域内必须经过高效微粒空气过滤器过滤处理的层流空气 ,尽可能除去微生物污染。 2 0 0 0年版《中国药典》收载的薄膜过滤法对大容量供试品采用全封闭过滤系统 ,所以凡生产大容量灭菌制剂(≥ 50ｍＬ)的药厂与医院均需用购置符合《中国药典》要求的全封闭过滤系统。2　培养基及其灵敏度试验2 .1　培养基测试　无菌检查用培养基 ,无论是市售脱水培养基或配制的培养基 ,灭菌后就澄清无沉淀 ,还须进行无菌试验 ,硫乙醇酸盐流体培养基置 30～ 35℃培养 48ｈ,真菌培养基置 2 0～2 5℃培养 3ｄ均应无菌生长 ,如有菌生长需重新配制。2 .2　灵敏度试验　 2 0 0 0年版《中国药典》要求培养基质量应通过灵敏度检查。许多制药单位忽略了此项检查 ,导致检查结果的不可靠。2 .3　培养基临用前检查　硫乙...     

不同包装材料与大输液剂的相容性

目的 :研究不同包装材料与大输液剂相容性。方法 :配制 10 %葡萄糖注射液、0 .9%氯化钠注射液及灭菌注射用水分装于 6种包装材料中 ,在 1年的不同时间观察检测各项指标 ,并与玻璃瓶为对照进行比较。结果 :在不同包装材料中注射液的含量、细菌内毒素、无菌检查、微粒检查项目 ,与玻璃瓶相比 ,差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。PVC1、PVC2这两种包装材料 ,引起 0 .9%氯化钠注射液、灭菌注射用水 pH值下降 ,引起灭菌注射用水电导率升高、易氧化物含量增加以及吸收度出现明显的升高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,而其他几种材料与玻璃瓶相比 ,无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :PVC输液袋用于大输液剂应引起注意 ,非PVC多层共挤膜输液袋与大输液剂相容性良好 ,具有较好的应用开发前景。     

120例输液瓶盖细菌污染的调查及对策

空气中所含微生物种类繁多,除了一些非致病菌外,尚有部分致病菌。医护人员在检查与治疗等侵袭性操作中,如不注意严格的消毒与无菌操作,这些机会致病菌就很容易通过这些途径进入机体而发生院内感染。本文对我院静脉点滴输液瓶盖启开后细菌污染情况进行调查。结果报告如下:1 材料和方法1．1 检测材料:(1)我院病房当日进行静脉点滴输液瓶;(2)高压灭菌9cm直径培养基和灭菌的营养琼脂培养基;(3)无菌     

2010年版《中国药典》中10种培养基灭菌参数的研究

目的:研究2010年版《中国药典》中10种微生物限度检查用培养基的高压蒸汽灭菌参数统一调整为121℃、15 min的可行性。方法:依据GB4789.28-2013标准中培养基性能测试方法和2010年版《中国药典》中培养基适用性检查方法,对采用121℃高压蒸汽灭菌15 min和按产品说明书提供的灭菌参数进行灭菌处理的包括改良马丁培养基等10种培养基进行性能测试(色泽、p H、无菌性、促生长能力、抑菌能力和指示能力),比较2种参数灭菌处理后培养基的质量差异。结果:各培养基经2种参数灭菌后培养基的质量水平相当,且均可满足2010年版《中国药典》对微生物限度检查用培养基质量控制的要求。结论:2010年版《中国药典》中10种培养基均可采用121℃、15 min参数进行高压蒸汽灭菌,且灭菌后培养基的性能保持稳定。     

透明质酸钠的无菌检查

药用透明质酸钠用于配制注射剂时 ,必须进行无菌检查 ,以保证用药安全。由于透明质酸钠的黏度大 ,不易溶解 ,结合《中国药典》无菌检查的有关规定 ,我们进行了试验摸索 ,并提出解决方法 ,供参考。1 实验仪器设备、培养基及试剂、菌液1 1　仪器设备　生化培养箱 ,1 0 0级净化工作台 ,台式恒温水浴振荡器 ,天平。1 2　培养基　需气菌、厌气菌培养基 (硫乙醇酸盐流体培养基 ) ,中国药品生物制品检定所监制 ,每个试管装 1 5ml,共需 7支。真菌培养基 ,每个试管装1 5ml,共需 5支。此两种培养基均需经 1 1 5℃ ,30min高压灭菌方可使用。1 3　试…     

对一批输液在贮存中出现少数霉菌生长的分析

我院制剂室曾生产一批10％葡萄糖注射液,共计500ml×483瓶,各项检查均符合《中国药典》1995年版规定,但贮存2个多月后,其中有21瓶出现霉点霉块,显微镜镜检可见霉菌孢子,无菌检查均为阳性。1分析1．1该批大输液的洗瓶和灌封工作均采用机械处理,药液均经密闭的管道流入瓶中,所以,若被污染,全批483瓶均污染,不可能只21瓶污染,所以应判断为灭菌不彻底造成。主要是灭菌温度、时间可能只到临界阶段,也就是说基本达到灭菌目的而没有完全杀死所有的微生物。1．2造成该批输液灭菌只到临界阶段而不彻底的因素有：（1）温度计的灵敏度较差…     

药品检验用培养基配制及灭菌后贮存有效期的研究

目的本验证通过对药品微生物限度检查用和无菌检查用培养基(选取具有代表性的7种)的配制方法以及灭菌后贮存条件和贮存效期进行验证,确保每次配制的培养基质量均满足《中国药典》2010年版要求。方法随机抽取7种脱水培养基各2瓶,按照《中国药典》2010年版培养基适用性检查中规定的方法,分别进行3次独立试验。确定培养基的配制方法、灭菌后贮存有效期。结果与结论培养基按规定的配制方法、灭菌后贮存有效期内适用性检查均符合《中国药典》2010年版要求。     

中国药典2000版无菌和微生物限度检查法中有关温度规定的商榷

中国药典 2 0 0 0年版无菌检查法中规定〔1〕:金黄色葡葡球菌、生孢梭菌培养温度为 30～ 35℃ ,白色念珠菌培养温度为 2 0～ 2 5℃ (对照用菌液 ) ;需气菌、厌气菌培养基管置 30～ 35℃ ,真菌培养基管置 2 0～2 5℃ (检查法〔1〕)。微生物限度检查法中规定〔1〕:培养温度细菌为 30～ 35℃ ,霉菌、酵母菌为 2 5～ 2 8℃ ,控制菌 (含金黄色葡萄球菌 )为 36± 1℃。无菌检查法与微生物限度检查法尽管是根据药品的性质、灭菌要求及使用途径不同而为不同标准要求制定的两种检验方法〔2〕,但两者却同是对药品卫生状况的一种监控手段 ,检测的都是细…     

药品微生物限度检查用培养基储存期限的探讨

目的对药品微生物限度检查用培养基的储存期限问题进行研究,通过实验确定最优存储方法和时限。方法分别将现配培养基为对照与2⁸℃避光冷藏15、30、60 d的培养基进行微生物限度适用性检查,用标准菌株在各培养基中生长情况通过回收率及指示能力确定在此环境中保存配制好经灭菌的培养基的适用性符合药典相关规定。结果各标准菌株大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌于各培养基在促生长能力检查时的回收率均>70%,及各培养基对相应试验菌的指示能力均符合规定。结论配制好经灭菌的培养基在28℃避光冷藏15、30、60 d的培养基进行微生物限度适用性检查,用标准菌株在各培养基中生长情况通过回收率及指示能力确定在此环境中保存配制好经灭菌的培养基的适用性符合药典相关规定。结果各标准菌株大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌于各培养基在促生长能力检查时的回收率均>70%,及各培养基对相应试验菌的指示能力均符合规定。结论配制好经灭菌的培养基在2⁸℃避光冷藏60 d可以达到要求。     

热压灭菌柜内轨推车栅栏装置设计与改进

内轨推车是供大输液热压灭菌时的一种装载工具。我们在实际操作中 ,发现在使用原内轨推车时 ,存在结构不合理、栅栏间隙大 ,装瓶 (10 0ｍｌ/瓶 )数量不多 ,且装、卸大输液操作不便的问题。特别是由于栅栏间隙大 ,当装满 10 0ｍｌ/瓶、2 5 0ｍｌ/瓶的大输液的内轨推车推入 (灭菌 )或拉出 (晾瓶 )时 ,当手推车轨道与柜内轨道接口不平行或推、拉力不平衡时 ,大输液易从间隙中掉落 ,这是热压灭菌过程中存在不安全隐患之一。因此 ,我们对内轨车结构及栅栏装置进行设计与改进。1　整车设计与焊接　　整架内轨推车均采用不锈钢材料制作。原内轨推车…     

对无菌检查法中假阳性的分析

近年来，成品原料培养基的生产越来越广泛，品种也日益增多，给检验工作带来了很大方便，但在生产、使用及贮存中，可能有染菌情况而影响检验结果。笔者在检验一批大输液的无菌检查时发现检验结果假阳性。经重新取样，分glJ依法复试2次发现，使用的流体硫乙醇酸盐培养基有污染现象。为此我们对该培养基进行了进一步实验，结果如下。1．实验材料：1．1流体硫乙醇酸盐培养基（干粉），批号：911218。生物制品检定所。1．2菌种：金黄色葡萄球菌rMCC（B）260O］，福建省药品检骏所提供。2．实验方法及结果：2．l流体硫乙醇酸盐培养基的配制方…     

大输液无菌检查法中应注意的问题

本文对《大输液无菌检查法》实验操作过程中,用具的灭菌、无菌环境、无菌操作技术及实验过程中容易忽视的一些问题进行了阐述,以期大家在工作中引起重视,减少污染。     

直立式聚丙烯输液袋装输液灭菌工艺研究

目的通过输液灭菌工艺优选、大输液水浴灭菌器性能确认,确定灭菌程序及装载方式的可靠性;通过对产品进行3个批次的热穿透、生物指示剂试验,确定灭菌工艺的灭菌效果。方法使用大输液水浴灭菌器,采用可编程自动控制系统进行灭菌全过程控制,并采用T32-32温度验证系统进行性能验证,在此基础上,使用嗜热脂肪杆菌芽孢生物指示剂实施灭菌工艺验证,确定灭菌效果。结果采用121℃灭菌12 min,F0值>12,无菌保证水平(SAL)≤10-6。袋身无破裂、无变形,可直立放置;制剂质量按标准检测符合《中国药典》2010年版第二增补本标准。结论方法实用,结果准确可靠。     

胰酪胨大豆培养基和改良马丁培养基的微生物促生长能力考察

目的：考察国产胰酪胨大豆培养基（TSB）和改良马丁培养基（MMB）对微生物的促生长能力,为〈中国药典〉无菌检查法培养基的选择提供依据.方法：采用培养基灵敏度检查法和菌数平皿计数法,以BD公司生产的TSB为对照,对微生物的促生长情况进行考察.结果：单因素方差分析结果显示,所用国产TSB和MMB培养基在两种方法中对代表性微生物促生长能力无显著性差异.结论：〈中国药典〉无菌检查用培养基应与国际先进国家药典保持一致,采用TSB替代MMB培养基用于需气菌和真菌的培养.     

含“F_0值监控仪”快速冷却灭菌器的应用

近年来 ,世界很多国家制药工业按照要保证无菌只能在微生物死亡动力学预测的基础上进行评估 ,提出无菌保证水平 (ＳＡＬ)的现代灭菌论 ,求得加热灭菌主过程死亡率的积分值Ｆ0 值。Ｆ0 值的概念 :是与 12 1℃热压灭菌时杀死容器中全部微生物的热效力所相当的时间。我院在 1999年下半年引进二台安装了“Ｆ0 值监控仪”的快速冷却灭菌器 (ＰＬＭＱ -1 2Ⅱ ) (连云港千樱医疗设备有限公司生产 )。该机器的“Ｆ0 值监控仪”相当于一部小型的计算机系统 ,故也叫“灭菌智能控制器—Ｆ0 ”。它能将灭菌进程中任一时刻的Ｆ0 值用数字显示出来 ,能自动…     

药品无菌检测中培养基灭菌控温的方法验证

用湿热灭菌方法对培养基灭菌时,加热的温度对微生物死亡和营养成分的破坏均有作用,本文通过对灭菌设备进行改造,采用仪器控温探头和培养基控温探头同时插入培养基中,对培养基灭菌温度进行控制。从而确保培养基灭菌温度的稳定性,有效性。该法与传统的控温方式比较,热穿透试验更好,培养基能达到灭菌要求的F0值。     

西林瓶容器气密性检查

目的:西林瓶容器的气密性是有效的。方法:用微生物侵入的挑战性试验对容器密封系统的完好性进行检查。在试验中,取西林瓶,灌装入培养基,在正常生产线上压塞、压盖灭菌。此后,将容器密封面浸入高浓度运动性菌液中,取出、培养并检查是否有微生物侵入,确认容器密封系统的完好性。与此同时,需作阳性对照试验,确认培养基的促菌生长能力。结果:在挑战试验开始时,挑战用菌悬液浓度(活菌数)达到1×106CFU/ml。进行的营养试验都合格,微生物侵入试样无菌生长。确认西林瓶的气密性是安全有效的。     

中国药典2000年版无菌检查法取样量与结果判定的探讨

中国药典2000年版规定:无菌检查法应用于无菌或灭菌制品、敷料、缝合线、无菌器具及其他应作无菌检查的品种,按照无菌检查范围检查结果为无菌时,由于它既受抽检样本数量的限制,又受生产和灭菌工艺的限制,所以在一定意义上讲,它表示的是最终灭菌品种达到了10~(-6)微生物存活概率的相对意义。     

医院配制大输液存在的质量问题及原因分析

我院灭菌制剂室 ,年配制大输液数万瓶。在本院临床用药中占有一定位置 ,2 0 0 0年以来 ,药检室进行抽验 ,所生产的灭菌制剂室大输液 8个品种 2 35批 ,合格率为 90 % ,其不合格率为 10 %。本文根据检验结果及检查情况对我院制剂室配制的大输液质量问题作简要分析如下 :一、出现质量问题的原因分析1 配制操作过程中易出现的质量问题。( 1)纤维和白点白块。造成纤维和白点白块主要原因有 :一是由于容器和包装材料未洗净及输液瓶洗涤不合格 ,二是薄膜及橡胶塞处理不合格 ,三是室内环境卫生不符合规定及空气净化装置达不到规定和标准 ,以及操作人…     

洁消精对大输液质量影响的初步研究

目的:验证新型消毒剂清洗剂"洁消精"对大输液质量的影响.方法:采用对比实验.将洁消精和重铬酸钾清洗后的输液瓶分装葡萄糖注射液经高压灭菌后,按中国药典2005年版进行无菌检查,热原检查,澄明度检查和不溶性微粒检查,并经统计学分析.结果:采用洁消精和重铬酸钾清洗的输液瓶制备的大输液其质量之间无显著性差异.结论:本研究为新型消毒清洗剂--"洁消精"在大输液中的应用提供了科学依据.