肝纤维化形成过程中大鼠血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-2的动态变化

目的观察大鼠肝纤维化形成过程中胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的动态变化,探讨IGFBP-2与肝纤维化的关系。方法将36只大鼠随机分为2组:正常对照组6只(n=6),模型组30只(n=30)。除正常对照组外,给予大鼠40%CCl4皮下注射,每周2次,共计8周。正常对照组给予相同剂量的油剂皮下注射。模型组在开始注射CCl4后的第2、4、6、8周末分别处死大鼠6只。测定肝功能(ALT)、门静脉压,对肝组织进行常规HE与Masson三色染色,对血清中IGFBP-2采用酶联免疫法测定,并将其与肝纤维化程度进行相关分析。结果与正常对照组比较,2、4、6、8周模型组大鼠血清IGFBP-2水平增高(P<0.01)。模型组大鼠随着造模时间的延长,肝纤维化程度的加重,门静脉压逐渐增高,血清中IGFBP-2的水平逐渐增高,且IGFBP-2水平与肝纤维化程度呈正相关(r=0.874 2,P<0.001)。结论在肝纤维化形成过程中,血清中IGFBP-2的水平逐渐增高,提示其可能与肝纤维化有关。     

贝那普利对肝纤维化大鼠Ang-(1-7)、ACE2及Mas受体mRNA的影响

目的 观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)贝那普利抗大鼠肝纤维化的疗效,研究贝那普利对肝纤维化大鼠肝组织血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]、血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA及Mas受体mRNA的影响.方法 制备四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型,同时应用贝那普利灌胃,共8w.对肝组织进行常规HE及Masson染色,ELISA测定肝匀浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、Ang-(1-7)浓度,计算AngⅡ/Ang-(1-7)比值,实时荧光定量PCR测定肝组织ACE2mRNA和Mas受体mRNA的水平.结果 造模6、8周末,贝那普利治疗组大鼠的肝纤维化程度均较模型组减轻;肝匀浆AngⅡ的浓度较模型组降低(P<0.05),肝匀浆Ang-(1-7)的浓度较模型组增加(P<0.05),肝匀浆AngⅡ/Ang-(1-7)的比值较模型组降低(P<0.05);贝那普利治疗组肝组织ACE2及Mas受体mRNA的水平均较模型组增加(P<0.05).结论 贝那普利具有良好的抗肝纤维化作用,其机制可能与AngⅡ浓度降低,Ang-(1-7)浓度增加,AngⅡ/Ang-(1-7)比值降低有关,亦可能与ACE2和Mas受体表达增加有关.     

贝那普利对肝星状细胞IGFBP-2 mRNA表达的影响

目的：探讨血管紧张素I （Angiotensin I ,AngI ）及血管紧张素转化酶抑制剂贝那普利对体外培养的肝星状细胞胰岛素生长因子结合蛋白-2（insulin-like growth factor binding protein-2,IGFBP-2）mRNA表达的影响。方法采用肝星状细胞珠HSC-T 6作为研究模型,将培养的肝星状细胞分为对照组、AngI 组、贝那普利组和贝那普利＋AngI 组采用实时荧光定量PCR（Realtime fluores-cence quantitative PCR,RTFQ PCR）的方法检测肝星状细胞中IGFBP-2 mRNA的表达水平。结果（1）在体外培养的肝星状细胞中AngI 组高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;（2）AngI＋贝那普利组IGFBP-2 mRNA低于AngI组（P〈0.05）。结论 AngI 能促进肝星状细胞IGFBP-2 mRNA表达,贝那普利的抗肝纤维化作用,可能与IGFBP-2 mRNA表达降低有关。     

普乐可复对IgA肾病大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1表达水平的影响及其机制

目的：通过建立大鼠IgA肾病(IgAN)模型,观察普乐可复对IgAN大鼠肾组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）表达的影响,探讨普乐可复对肾小球纤维化的治疗作用及可能的机制,为临床针对性治疗IgAN提供依据。方法：取40只雄性SD大鼠,采用牛血清白蛋白（BSA）+脂多糖（LPS）+四氯化碳(CCl4)方法建立实验性IgAN大鼠模型,将造模成功大鼠分为模型组（n=8）、普乐可复组（n=8）、贝那普利组（n=8）、贝那普利+普乐可复组（n=8）,并设正常对照组（n=10）。成模后分别给予上述各组大鼠以蒸馏水、普乐可复、贝那普利、贝那普利+普乐可复和蒸馏水灌胃,测定各组大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1的灰度值及MMP-9/TIMP-1比值。结果:正常对照组大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1呈弱阳性表达,贝那普利+普乐可复组、普乐可复组、贝那普利组及模型组大鼠肾组织可见逐渐递增的棕黄色染色区,模型组大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1呈强阳性表达,贝那普利+普乐可复组、普乐可复组和贝那普利组大鼠MMP-9及TIMP-1呈阳性表达,但较模型组表达弱,较正常对照组表达强。正常对照组大鼠MMP-9/TIMP-1比值接近1,模型组大鼠MMP-9/TIMP-1比值最高,贝那普利+普乐可复组、普乐可复组、贝那普利组大鼠MMP-9/TIMP-1比值低于模型组 (P<0.05),贝那普利+普乐可复组大鼠肾组织中MMP-9/TIMP-1比值高于贝那普利组和普乐可复组 (P<0.05),普乐可复组MMP-9/TIMP-1比值高于贝那普利组(P<0.05)。结论：普乐可复可下调大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1的表达水平,纠正MMP-9/TIMP-1失衡,普乐可复可能对肾脏纤维化有一定治疗作用。     

大黄素对肝纤维化大鼠肝脏组织中Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响

目的观察大黄素对四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化大鼠肝脏组织Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响。方法 50只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(n=10)、CCl4组(n=20)和大黄素+CCl4组(n=20),共3组。采用40%CCl4橄榄油混悬液2 ml/kg皮下注射(每周2次,共12周)法制备大鼠肝纤维化模型,同时大黄素灌胃干预,12周后处死大鼠。采用实时定量PCR法检测肝脏组织Ⅰ型前胶原mRNA表达。结果与空白对照组比较,CCl4组大鼠肝脏组织Ⅰ型前胶原mRNA表达显著增加;与CCl4组比较,大黄素可显著减少肝脏组织Ⅰ型前胶原mRNA表达。结论大黄素具有下调纤维化肝脏组织Ⅰ型前胶原mRNA表达的作用。     

贝那普利在大鼠酒精性肾损伤中作用的探讨

目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂贝那普利在酒精引起的大鼠肾损伤过程中对肾组织的保护作用.方法 以酒精灌胃法制备大鼠酒精性肝肾损伤模型,同时给予贝那普利[4mg/(kg·d)]灌胃,在4、8、12周收集尿液,放免法检测尿中β2-微量球蛋白(β2-MG)含量;利用光镜和透射电镜观察其肾组织病理改变;免疫组化法检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达. 结果与对照组相比较模型组尿β2-MG值明显增高(P<0.01),贝那普利组尿β2-MG值明显低于模型组(P<0.01);电镜下模型组肾组织在相应阶段出现间质内的纤维成分增多,而贝那普利组间质结构无明显改变;在免疫组化染色中模型组肾小管上皮细胞内TGF-β1呈阳性表达,随时间的增加阳性表达增加(P<0.01);贝那普利组阳性表达与模型组相比较明显减少(P<0.01).结论 大鼠酒精性肾损伤以肾小管-间质的炎性改变及形成肾间质纤维化为主要特征;肾组织中TGF-B1的阳性表达明显增加;贝那普利在酒精引起的肾损伤的过程中对肾脏具有保护作用,其机制可能与通过阻断肾素-血管紧张素系统(RAS),下调TGF-β1的表达,抑制细胞外基质(ECM)积聚等有关.     

贝那普利抑制糖尿病大鼠心肌间质纤维化的机制探讨

目的研究血管紧张素转换酶抑制剂贝那普利（Benazepril）对糖尿病大鼠心肌间质纤维化过程的影响及保护机制。方法30只SD大鼠随机分为对照组10只，糖尿病组10只和贝那普利组10只。糖尿病组和贝那普利组采用链脲佐菌素（STZ，50mg／kg）腹腔内注射，建立糖尿病模型。贝那普利组大鼠用贝那普利（5mg／kg）治疗10周。用免疫组化法测Ⅰ、Ⅲ型胶原，转化生长因子（TGF-β1）、基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP-1）、基质金属蛋白酶（MMP-1）蛋白的表达：RT-PCR法测TIMP-1、MMP-1 mRNA的表达。结果糖尿病组大鼠心脏指数、心室指数均显著高于正常对照组，心肌间质纤维化，胶原Ⅰ、胶原Ⅲ含量增加，TGF-β1、TIMP-1蛋白及TIMP-1 mRNA的表达增高，MMP-1蛋白及MMP-1 mRNA的表达减少。贝那普利治疗后，上述指标均有所改善。结论贝那普利可能通过对TGF-β1和基质金属蛋白酶的影响明显改善糖尿病心肌间质纤维化。     

干扰素-α对CCl4诱导的大鼠肝纤维化治疗作用

目的：观察干扰素-α对CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化治疗作用,并探讨其机制。方法：SD雄性大鼠39只,随机分为正常组（n=10）,每只大鼠给予花生油0.003 mL/g皮下注射,共10周。模型组（n=15）,每只大鼠给予40%CCl4（CCl4∶花生油=2∶3）0.003 mL/g皮下注射,每周2次,共10周。干扰素-α治疗组（n=14）。每只大鼠给予40%CCl4（CCl4∶花生油=2∶3）0.003 mL/g皮下注射,每周2次,共10周。于第7周皮下注射干扰素α-2b每日10万单位/只,至第10周。于第10周末处死所有大鼠,留取肝组织行HE和Masson染色观察肝脏组织的病理变化及进行肝纤维化分期、半定量评分,采用免疫组织化学检测肝组织中Ⅰ型胶原、α平滑肌激动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、转化生长因子β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）的表达。结果：CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化的肝脏病理检查HE染色示,纤维化分期模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）;Masson染色纤维半定量评分,模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）。大鼠肝免疫组织化学染色,I型胶原免疫组化半定量评分模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）;α-SMA免疫组化半定量评分模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）;TGF-β1免疫组化表达,模型组明显高于正常组（P〈0.01）,干扰素-α治疗组明显低于模型组（P〈0.05）。结论：干扰素α-2b可降低CCl4诱导的SD大鼠肝纤维化,其机制可能与抑制肝星状细胞活化,降低TGF-β1表达有关。     

GRP94在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化过程中的动态变化

目的:观察糖调节蛋白(CRP94)在四氯化碳(CCl4)促大鼠肝纤维化过程中的动态变化,探究GRP94与肝纤维化的关系.方法:选择25只雌性SD大鼠随机分为对照组和模型组,对照组皮下注射油剂2 mL/kg,每周2次,共8周.模型组皮下注射CCl4橄榄油(1:1)2 mL/kg,每周2次,共8周,制备大鼠肝纤维化模型.同时采用RA1000全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶(ALT);Masson染色观察各组肝组织病理学变化和肝纤维化程度的变化;免疫组化染色法测定肝组织GRP94蛋白表达,通过图像分析系统定量测定GRP94,并将其与肝纤维化程度、肝功能进行相关分析.结果:随着造模时间的延长,模型组大鼠ALT升高,肝纤维化程度加重,肝组织表达GRP94增加,其表达程度与肝功能、肝纤维化程度呈正相关.结论:在肝纤维化形成过程中,GRP94表达逐渐增加,提示其在肝纤维化形成中起促进作用.     

硫化氢对大鼠肝纤维化的预防作用

目的:探讨外源性硫化氢对实验性大鼠肝纤维化的预防及其作用机制。方法:雄性大鼠24只,随机分为3组,即正常对照组(n=8)、模型组(n=8)、硫化氢预防组(n=8)。四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,硫化氢预防组除腹腔注射40%CCl4外,还给予NaHS腹腔注射,每日1次,至第8周。实验结束后,检测肝功和肝纤维化指标;观察肝组织病理学变化;应用RT-PCR和Western印迹法检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果:与模型组比较,硫化氢预防组能降低血清丙氨酸氨基转换酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、三型前胶原(PCⅢ)水平(P<0.01或P<0.05),升高白蛋白(P<0.05),改善肝功能,且TGF-β1表达明显减少,肝组织病理明显改善。结论:外源性硫化氢能有效抑制肝纤维化的发生发展,其机制可能与硫化氢降低TGF-β1的表达,减少细胞外基质在肝脏中的沉积,从而延缓肝纤维化的进程有关。     

外源性硫化氢对大鼠肝纤维化的影响

目的探讨外源性硫化氢对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的预防作用。方法将24只Wistar雄性大鼠随机分为3组,每组8只,即正常对照组、模型组、硫化氢(H2S)预防组。H2S预防组除腹腔注射40%CCl4外,还给予NaHS腹腔注射,1次/d,至第8周,所有大鼠均被处死,收集大鼠血液,检测肝纤维化指标;取肝组织检测脂质过氧化指标及观察肝脏病理变化;应用RT-PCR和Western blot方法检测肝组织NF-κB的表达。结果外源性H2S能降低血清HA、LN、PCⅢ及肝组织MDA含量(P<0.01或P<0.05),增加肝组织SOD、GSH-Px活性(P<0.01),减轻肝纤维化程度(P<0.05),而且能使NF-κB表达明显减少。结论外源性硫化氢对CCl4诱导的大鼠肝纤维化具有保护作用,其机制可能与硫化氢抑制NF-κB表达有关。     

食用白酒对实验性肝脏纤维化TGF-β1信号转导影响的研究

目的:研究食用白酒(贵州茅台酒)对实验性大鼠肝纤维化TGF-β1信号转导影响的研究,来探讨食用白酒(贵州茅台酒)对肝脏纤维化的影响。方法:79只雄性Wistar大鼠,随机分为:(1)正常对照组(n=9);(2)茅台酒四氯化碳组(n=12);(3)乙醇四氯化碳组(n=13);(4)茅台酒组(n=14);(5)乙醇组(n=16);(6)四氯化碳造模组(n=15);实验第四周和第八周末分批处死动物40只、37只,取血和肝脏,分别行血清肝功能、肝纤维化检测、HE染色评估肝纤维化程度、免疫组化法检测肝组织中TGFβ1水平。结果:乙醇四氯化碳组和茅台酒四氯化碳组间LN差别有显著性意义(P<0.05);在第八周末,茅台酒四氯化碳组的PCⅢ与四氯化碳造模组差别有显著性意义(P<0.05)。对血清LN、PCⅢ、肝脏TGF-β1表达的影响,茅台酒组和乙醇组相比较,P<0.05。结论:茅台酒没有显著增加TGF-β1的表达,对肝脏纤维化的发展有一定的抑制作用,同乙醇相比,茅台酒可以延缓四氯化碳造成的纤维化损伤。     

苦参素对实验性肝纤维化的干预作用

目的:观察苦参素对四氯化碳(CCl4)诱导的实验性肝纤维化的干预作用。方法:将SD大鼠分成正常对照组、模型组、苦参素小剂量治疗组(40mg/kg)、中剂量治疗组(80mg/kg)、大剂量治疗组(160mg/kg),造模4周后苦参素治疗至实验第10周,取血测相关血清学指标,计算肝脏指数,测定肝组织匀浆中HYP和MDA含量。结果:苦参素能降低肝纤维化大鼠血清丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆汁酸(TBA)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)和肝脏指数,同时能减少肝组织中羟脯氨酸(HYP)和MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论:苦参素具有抗CCl4诱导的实验性肝纤维化的作用。     

"益肝浓缩煎剂"对实验性大鼠肝纤维化防治作用的研究

目的 研究“益肝浓缩煎剂”对四氯化碳大鼠肝纤维化预防与治疗作用。方法 以CCl4诱导大鼠肝纤维化模型，注射CCl4前2周及造模结束后分别予“益肝浓缩煎剂”进行防治，各持续10周；测定肝组织羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp)含量，光镜、电镜观察肝脏病理形态变化。结果“益肝浓缩煎剂”预防、治疗组Hyp显著降低（P＜0．01），胶原沉积及脂肪变性明显减轻（P＜0．05），电镜显示“益肝浓缩煎剂”预防组肝细胞内脂滴明显减少，细胞器接近正常，狄氏间隙内仅见少量胶原纤维增生。结论“益肝浓缩煎剂”对大鼠肝纤维化具有明确防治作用。     

田基黄水煎液下调羟脯氨酸和丙二醛对大鼠实验性肝纤维化的保护作用

目的：为提高肝病患者对手术术中肝脏缺氧的耐受及术后肝功能的恢复,观察田基黄水煎液对四氯化碳（CCl4）诱导的实验性肝纤维化的保护作用。方法：将SD大鼠分成正常对照组、模型组、田基黄水煎液低剂量给药组（4 g/kg）和高剂量给药组（8 g/kg）,采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,造模同时给予田基黄水煎液干预,在实验第8周,测定血清肝功相关酶指标[谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）]及肝纤维化血清标志物透明质酸（HA）,层黏连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）的含量,测定肝组织匀浆中羟脯氨酸（HYP）和丙二醛（MDA）含量。结果：田基黄水煎液不同剂量均能降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST、HA、LN和Ⅳ-C含量,同时能减少肝组织中HYP和MDA含量（P〈0.05）。结论：田基黄对CCl4诱导的实验性肝纤维化具有防护作用。     

鸡骨草醇提物对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的影响

目的研究鸡骨草醇提物对四氯化碳所致大鼠肝纤维化的影响。方法复制肝纤维化大鼠模型,随机分成5组:模型组,阳性组(秋水仙碱0.2mg/kg),鸡骨草醇提物低、中、高剂量组(20、40、80mg/kg),并设立正常组。连续灌胃给药30天。检测大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平和谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)活性以及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的表达,采用Masson染色观察肝组织纤维化程度。结果与模型组比较,鸡骨草醇提物组显著降低肝纤维化大鼠血清中AST、ALT水平,提高GSH-Px活力(P<0.05),同时减少肝组织中Hyp含量(P<0.05),并减少大鼠肝脏胶原纤维。结论鸡骨草醇提物对CCl4所致的肝纤维化大鼠具有保护作用。     

外源性核酸对肝纤维化大鼠血浆中去甲肾上腺素和多巴胺的影响

目的 探讨外源性核酸对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型血浆中去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)的影响及其抗肝纤维化的可能机制.方法 将30只Wistar大鼠随机分为正常组、肝纤维化模型组、外源性核酸处理组.苏木精-伊红染色,光镜下观察肝组织病理学改变,Van Gieson(VG)染色分析肝纤维化程度,同时用高压液相色谱-电化学(HPLC-ECD)法检测大鼠血浆中NE和DA水平.结果 核酸组大鼠肝组织病理学改变较模型组有明显改善.模型组大鼠血浆DA含量[(0.39±0.19) ng/ml]显著低于正常组[(0.92±0.53) ng/ml](P<0.05),核酸组大鼠血浆DA的含量[(0.87±0.55) ng/ml]高于模型组(P<0.05).大鼠血浆NE含量模型组[(1.13±0.77) ng/ml]和核酸组[(1.38±0.71) ng/ml]低于正常组[(4.38±2.77) ng/ml] (P<0.05),核酸组与模型组NE的含量无明显差异(P>0.05).结论 外源性核酸对慢性肝损伤有一定的保护作用,可显著改善CCl4诱导的大鼠肝纤维化损伤.其可能的作用机制之一是通过调节肝纤维化大鼠血浆中NE的前体物质DA的含量,增加了交感神经的活性而起到抗纤维化的作用.     

实验性肝纤维化大鼠TGF-β_1、Smad3、Smad7、CTGF的表达及其意义

目的 :研究四氯化碳 ( CCl4 )诱导肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1( TGF-β1)、Smad3、Smad7和结缔组织生长因子 ( CTGF)的表达及定位。方法 :将 2 4只大鼠随机分为正常对照组与模型组 ,模型组大鼠予以 40 %四氯化碳皮下注射 8周后处死。免疫组化技术检测 TGF-β1、Smad3、Smad7和 CTGF在肝脏的表达及细胞内的定位 ,放射免疫方法检测透明质酸 ,并进行肝组织病理检查。结果 :与正常组大鼠比较 ,模型组大鼠肝内 TGF-β1、Smad3、CTGF表达增加 ,而 Smad7的表达降低。 TGF-β1、Smad3及 CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7主要在肝细胞浆表达 ;模型组大鼠血清 HA及肝组织Van Giseon染色、HE染色和电镜检查均支持肝纤维化改变。结论 :肝内 TGF- β1、Smad3和CTGF表达增强、Smad7表达减弱 ,提示 TGF- β1轴、CTGF参与了肝纤维的发生发展 ,可能作为防治肝纤维化发生发展的新途径之一     

Effects of spleen on inducing portal hypertension and liver cirrhosis in rats]

The role of spleen on inducing the portal hypertension and cirrhotic rat by carbon tetrachloride (CCl4) and ethyl alcohol was studied. Totally 412 male rats were divided randomly into four groups: group A (n = 42) underwent splenectomy before induction by CCl4; group B (n = 42) underwent splenectomy after induction by CCl4 and alcohol of 4 weeks; group C (n = 42) received sham-splenectomy and group D (n = 14) served as a control group. Free portal pressure (FPP), function of liver, the index of spleen (weight of spleen/weight of body) as well as the spleen and liver biopsy were evaluated at different time. The results showed that, in group C, the index of spleen and the area of splenic white pulp had significant increase. The degree of hepatic damage, the number of the infiltrating cells and the degree of hepatic fibrosis were significantly greater in sham-operated animals than in others (group A and B). These results suggested that the spleen should be an immunomodulatic organ in playing an exacerbation role of hepatic cirrhosis, and the effect of splenectomy be a preventive role against the induced rat liver cirrhosis, at least, at certain stage.